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    HILICB柱—HPLC法測定注射用門冬氨酸鳥氨酸的有關物質(zhì)

    2018-09-10 07:53:57胡兵單曉蕓陳蔚江
    中國藥房 2018年19期

    胡兵 單曉蕓 陳蔚江

    中圖分類號 R927.2 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408(2018)19-2626-05

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.19.08

    摘 要 目的:建立測定注射用門冬氨酸鳥氨酸中有關物質(zhì)的方法。方法:采用親水作用色譜B柱-高效液相色譜(HILIC B柱-HPLC)法測定3批注射用門冬氨酸鳥氨酸的有關物質(zhì)。色譜柱為ACE HILIC B,流動相為0.02 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液(pH 5.0)-乙腈(40 ∶ 60,V/V),檢測波長為205 nm,流速為1.3 mL/min,柱溫為30 ℃。對樣品進行酸、堿、光、熱、氧化破壞性試驗,并將建立的方法與2015年版《中國藥典》方法比較。結果:除光照破壞樣品外,其余各條件破壞后樣品與未破壞樣品比較主峰面積均有所下降、雜質(zhì)增多,各雜質(zhì)間及與主成分峰間分離度均大于1.5;5個雜質(zhì)馬來酸、精氨酸、富馬酸、門冬氨酸縮合物、3-氨基-2-哌啶酮及主成分門冬氨酸鳥氨酸的檢測質(zhì)量濃度線性范圍分別為0.077 2~7.72、0.464~9.28、0.087 6~8.76、0.403~10.075、0.082 4~8.24、 1.613~80.7 μg/mL(r=0.999 7~0.999 9),檢測限分別為0.058、19、2.5、17、0.35、24 ng,定量限分別為0.19、63、8.3、56、1.2、80 ng。5個雜質(zhì)的平均加樣回收率為96.3%~102.1%(RSD=0.4%~2.0%,n=9)。3批樣品中上述5個雜質(zhì)的平均含量分別為0(未檢出)、0、0.026%、0.011%、0.019% ,與《中國藥典》方法比較,測定結果相似,但后者進行2次系統(tǒng)適用性試驗時各峰出峰順序不一致。結論:建立的HILIC B柱-HPLC法簡便、準確,耐用性和重現(xiàn)性優(yōu)于《中國藥典》方法,可以用于控制注射用門冬氨酸鳥氨酸的有關物質(zhì)。

    關鍵詞 HILIC B柱-HPLC法;注射用門冬氨酸鳥氨酸;有關物質(zhì);破壞性試驗

    ABSTRACT OBJECTIVE: To establish the method for the determination of related substances in Ornithine aspartate for injection. METHODS: A HILIC B column-HPLC method was used for the determination of related substances in 3 batches of Ornithine aspartate for injection. The determination was performed on ACE HILIC B column with mobile phase consisted of 0.02 mol/L monopotassium phosphate buffer solution (pH 5.0)-acetonitrile (40 ∶ 60, V/V) at the flow rate of 1.3 mL/min. The detection wavelength was set at 205 nm, and column temperature was 30 ℃. Acid, alkali, light, heat, oxidation forced degradation tests were carried out; established method was compared with the method stated in Chinese Pharmacopeia of 2015 edition. RESULTS: Except for light-destroyed samples, compared with undestroyed samples, main peak area of samples destroyed by other conditions was decreased certainly; the impurity was increased; the separation of impurities with main component peaks was higher than 1.5. The linear range of 5 impurities that maleic acid, arginine, fumaric acid, aspartic acid condensate, 3-mino-2-piperidone and main component ornithine aspartate were 0.077 2-7.72, 0.464-9.28,0.087 6-8.76,0.403- 10.075,0.082 4-8.24, 1.613-80.7 μg/mL (r=0.999 7-0.999 9), respectively. The limits of detection were 0.058, 19, 2.5, 17, 0.35 and 24 ng, respectively; the limits of quantitation were 0.19, 63, 8.3, 56, 1.2, 80 ng, respectively. The average recoveries of 5 impurities were 96.3%-102.1% (RSD=0.4%-2.0%,n=9). Average contents of 5 impurities in 3 batches of samples were 0 (not detected), 0, 0.026%, 0.011%, 0.019%, respectively. Compared with the method of Chinese Pharmacopeia, established method obtained similar results, but the peak order of each peak was not consistent in 2 times of system suitability tests. CONCLUSIONS: Established HILIC B column- HPLC method is simple and accurate. It is better than the method stated in Chinese Pharmacopeia in durability and reproducibility. It can be used for controlling relevant substance in Ornithine aspartate for injection.

    KEYWORDS HILIC B column-HPLC method; Ornithine aspartate for injection; Related substance; Destructive test

    門冬氨酸鳥氨酸是國內(nèi)首個用于臨床的具有護肝、解毒、能量補充的三效合一的新藥,于2006年8月在國內(nèi)上市,上市制劑名稱為注射用門冬氨酸鳥氨酸,其他劑型還有顆粒、干混懸劑,臨床用于急、慢性肝病的治療,包括肝硬化、脂肪肝及肝炎引起的血氨升高,對肝性腦病也有一定療效[1-3]。

    目前,測定門冬氨酸鳥氨酸及其制劑的含量和有關物質(zhì)的檢測方法,文獻報道多為高效液相色譜(HPLC)法,采用的色譜柱主要為碳十八柱和氨基柱。其中,含量測定時主要采用碳十八柱(直接分離測定主成分[4-6]或衍生化后分離測定主成分[7-9]),進行有關物質(zhì)檢查時則采用氨基柱[10-13](同時也可測定含量)。在2015年版《中國藥典》(二部)中,門冬氨酸鳥氨酸原料藥有關物質(zhì)檢查方法[14]是由我所(武漢藥品醫(yī)療器械檢驗所)制訂的,而注射用門冬氨酸鳥氨酸有關物質(zhì)檢查方法也由我所制訂,與原料藥檢查方法一致,但后者尚未收入《中國藥典》中。在此方法中,采用氨基柱分離測定5個已知雜質(zhì)和其他未知雜質(zhì),但是筆者及廠家質(zhì)檢人員在試驗中均發(fā)現(xiàn)采用氨基柱時存在耐用性和重現(xiàn)性不好的缺點:每次制備流動相時必須保持各條件和操作高度一致,否則在不同時間、由不同檢驗人員試驗得到的圖譜中,各峰的保留時間相差較大,甚至可致富馬酸峰、精氨酸峰與主峰之間的分離度達不到要求,富馬酸和精氨酸的出峰順序也會發(fā)生變化。為此,筆者采用親水作用色譜(HILIC)B柱為分析柱分離測定各雜質(zhì),以克服氨基柱耐用性和重現(xiàn)性差的缺點,以改進門冬氨酸鳥氨酸原料藥及制劑中有關物質(zhì)的檢測方法?,F(xiàn)將試驗內(nèi)容報道如下。

    1 材料

    1.1 儀器

    UltiMate 3000、Agilent1100 HPLC儀(美國戴安公司、美國Agilent公司);ACE HILIC B柱(英國ACE公司,多點氨丙基鍵合的堿性基質(zhì)親水作用色譜柱,200 mm×4.6 mm,5 μm);AEL-200電子天平(瑞士Mettler- Toledo公司)。

    1.2 藥品與試劑

    注射用門冬氨酸鳥氨酸(武漢啟瑞藥業(yè)有限公司,批號:B171136、B171137、B171138,規(guī)格:2.5 g/支);門冬氨酸鳥氨酸對照品(批號:A150401,純度:99.8%)、門冬氨酸縮合物對照品(批號:170201,純度:98.2%)、3-氨基-2-哌啶酮對照品(批號:D004-16001,純度:99.8%)均由武漢某藥廠提供;馬來酸對照品(批號:1910015-201302,純度:99.7%)、富馬酸對照品(批號:111541-201101,純度:99.4%)、精氨酸對照品(批號:140685-201506,純度:99.9%)均購自中國食品藥品檢定研究院;乙腈為色譜純,磷酸二氫鉀、磷酸均為分析純,水為純化水。

    2 方法與結果

    2.1 色譜條件

    色譜柱:ACE HILIC B;流動相:0.02 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液(取磷酸二氫鉀2.72 g,加水500 mL溶解后,加入濃氨溶液5 mL,用水稀釋至1 000 mL,混合后用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.0±0.05)-乙腈(40 ∶ 60,V/V);檢測波長:205 nm;流速:1.3 mL/min;柱溫:30 ℃;進樣量:50 μL。

    2.2 溶液的制備

    2.2.1 供試品溶液 取注射用門冬氨酸鳥氨酸(約相當于門冬氨酸鳥氨酸400 mg)適量,精密稱定,置于100 mL量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

    2.2.2 混合對照品溶液(系統(tǒng)適用性溶液) 取馬來酸、精氨酸、富馬酸、門冬氨酸縮合物、3-氨基-2-哌啶酮對照品各10 mg,精密稱定,置于同一100 mL量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為雜質(zhì)對照品貯備溶液;精密稱取門冬氨酸鳥氨酸對照品200 mg,置于50 mL量瓶中,精密加入雜質(zhì)對照品貯備溶液2 mL,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為混合對照品溶液。

    2.2.3 自身對照溶液 精密量取供試品溶液適量,用流動相定量稀釋,制成每1 mL中約含4 μg門冬氨酸鳥氨酸的溶液,作為自身對照溶液。

    2.3 系統(tǒng)適用性和專屬性試驗

    2.3.1 系統(tǒng)適用性試驗 精密量取“2.2.2”項下混合對照品溶液,按“2.1”項下色譜條件進樣測定,記錄色譜圖。結果表明,主成分峰與各雜質(zhì)峰之間分離良好(因本品中沒有輔料,僅凍干前用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值,故未進行輔料干擾試驗)。系統(tǒng)適用性色譜圖見圖1。

    2.3.2 專屬性試驗 取本品(批號:B171136)適量,約相當于門冬氨酸鳥氨酸40 mg,置于10 mL量瓶中,共6份,1份為未破壞樣品,另5份按以下條件進行破壞。(1)高溫破壞:加流動相5 mL,振搖使溶解,水浴加熱30 min,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為高溫破壞樣品。(2)酸破壞:加6 mol/L鹽酸溶液1 mL,振搖使溶解,放置1 h,加1 mol/L氫氧化鈉溶液6 mL,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為酸破壞樣品。(3)堿破壞:加1 mol/L氫氧化鈉溶液1 mL,振搖使溶解,放置2 h,加6 mol/L鹽酸溶液0.16 mL,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為堿破壞樣品。(4)光破壞:置于4 000 Lx燈管下放置24 h,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為光破壞樣品。(5)氧化破壞:加30%雙氧水1 mL,振搖使溶解,放置1 h,水浴加熱10 min,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,作為氧化破壞樣品。取上述6種樣品各50 μL,注入色譜儀,按“2.1”項下色譜條件進樣測定,記錄色譜圖。結果,各破壞后的樣品與未破壞樣品比較,除光照破壞樣品外(對光照較穩(wěn)定),其他破壞條件下主峰面積均有所下降,雜質(zhì)峰有所增加,主成分峰與各雜質(zhì)峰之間的分離度均大于1.5,表明本方法專屬性良好。專屬性試驗高效液相色譜圖見圖2。

    2.4 線性關系考察

    取“2.2.2”項下混合對照品溶液,加流動相稀釋制成馬來酸質(zhì)量濃度分別為0.077 2、0.154、0.386、0.772、1.54、3.86、5.79、7.72 μg/mL的溶液;精氨酸質(zhì)量濃度分別為0.464、0.928、1.86、4.64、6.96、9.28 μg/mL的溶液;富馬酸質(zhì)量濃度分別為0.087 6、0.175、0.438、0.876、1.75、4.38、6.57、8.76 μg/mL的溶液;門冬氨酸縮合物質(zhì)量濃度分別為0.403、0.806、1.61、4.03、6.04、10.0 μg/mL的溶液;3-氨基-2-哌啶酮質(zhì)量濃度分別為0.082 4、0.165、0.412、0.824、1.65、4.12、6.18、8.24 μg/mL的溶液,分別進樣測定,記錄峰面積。

    另取門冬氨鳥氨酸對照品約10 mg,精密稱定,置于100 mL量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻;分別精密量取溶液適量,用流動相稀釋制成質(zhì)量濃度為1.61、4.03、8.07、20.2、40.3、80.7 μg/mL的系列對照品溶液,進樣測定,記錄峰面積(2個主成分峰面積總和)。以各成分峰面積為縱坐標(A)、質(zhì)量濃度為橫坐標(c, μg/mL)進行線性回歸,結果見表1。

    2.5 穩(wěn)定性試驗

    取供試品溶液(批號:B171136),分別于室溫下放置0、2、4、6、8 h后進樣測定,記錄峰面積。結果,各雜質(zhì)峰面積均未見顯著變化,2個主成分峰峰面積的RSD分別為0.5%和0.4%(n=5)。表明供試品溶液室溫下放置8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.6 精密度試驗

    取混合對照品溶液,連續(xù)進樣6次,計算峰面積的RSD值。結果,馬來酸、精氨酸、富馬酸、門冬氨酸縮合物、3-氨基-2-哌啶酮峰面積的RSD分別為0.22%、0.34%、0.21%、0.64%、0.21%(n=6)。6次進樣保留時間的RSD分別為0.3%、0.1%、0.1%、0.1%、 0.1%(n=6)。表明儀器精密度良好。

    2.7 檢測限與定量限試驗

    取混合對照品溶液和門冬氨酸鳥氨酸對照品溶液,逐步稀釋,分別進行檢測,以3倍信噪比計算檢測限,以10倍信噪比計算定量限。結果馬來酸、精氨酸、富馬酸、門冬氨酸縮合物、3-氨基-2-哌啶酮、門冬氨酸鳥氨酸(以后面一個峰即鳥氨酸的峰計算,下同)的檢測限分別為0.058、19、2.5、17、0.35、24 ng;定量限分別為0.19、63、8.3、56、1.2、80 ng。

    2.8 加樣回收試驗

    取本品(批號:B171136)適量,9份,每份各相當于門冬氨酸鳥氨酸約0.4 g,精密稱定,分別置于100 mL量瓶中,3份為1組,按各雜質(zhì)限度濃度(0.1%)的50%、100%、150%分別精密加入雜質(zhì)對照品貯備溶液2、4、6 mL,用流動相稀釋至刻度,搖勻,進樣測定并計算,回收率試驗結果見表2。

    2.9 3批樣品中有關物質(zhì)測定結果

    取3批樣品,按上述建立的方法測定有關物質(zhì)。供試品溶液的色譜中如有與馬來酸、富馬酸、精氨酸、鳥氨酰胺、門冬氨酸縮合物等與對照品保留時間一致的色譜峰,按外標法計算;如顯未知雜質(zhì)峰,按自身對照法計算。供試品溶液(批號:B171136)和空白溶劑(流動相)的色譜圖見圖3,測定結果見表3。

    2.10 與《中國藥典》方法比較

    采用《中國藥典》方法[14]檢查3批樣品,結果精氨酸和馬來酸均未檢出,富馬酸含量均為0.03%,3-氨基-2-哌啶酮含量為0.03%~0.04%,門冬氨酸縮合物含量均為0.04%。2種方法比較結果相似,批號為 B171136的樣品的色譜圖見圖4A。但采用《中國藥典》方法進行2次系統(tǒng)適用性試驗時,出現(xiàn)各峰出峰順序不一致的情況,見圖4B與圖4C。

    3 討論

    3.1 HILIC柱的特點

    傳統(tǒng)氨基柱是具有正相、反相、弱陰離子交換與親水作用等多種分離作用模式的色譜柱,分離作用模式多而復雜,但因其作用主要集中于表面固定相,重現(xiàn)性較差。HILIC柱的分離模式為單一的親水作用模式,原理是硅膠上鍵合極性基團后在硅膠表面形成水膜,待分離測定的分子或離子在水膜中可與固定相的氨丙基發(fā)生極性分配及離子交換作用,此原理決定了其具備較好的穩(wěn)定性。HILIC柱種類較多,各生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的HILIC柱有相似之處也有一些不同。其中,本文采用的ACE HILIC B柱,其固定相上鍵合有堿性(B)基團,對中性分子或酸性物質(zhì)具有良好的分離性能。HILIC柱產(chǎn)品上市已10多年了,其在食品、藥品、化學品領域,對大極性物質(zhì)的分離測定已有較廣泛的應用和報道[15],推廣性較好。在試驗中應注意,因HILIC柱特殊的填料性質(zhì),平衡時間較一般的碳十八色譜柱長,建議在平衡3 h后再進行試驗。

    3.2 關于未知雜質(zhì)檢測限的計算

    門冬氨酸鳥氨酸是由門冬氨酸和鳥氨酸合成的,在水溶液中可分解為門冬氨酸和鳥氨酸,所以在色譜圖中顯示為2個峰,出峰順序依次為門冬氨酸和鳥氨酸(經(jīng)前期試驗確定)。由于鳥氨酸峰面積較小,故本試驗在計算未知雜質(zhì)的檢測限時以鳥氨酸峰計算。

    綜上,本文采用HILIC柱為分析柱建立HPLC法,采用此法檢查注射用門冬氨酸鳥氨酸的有關物質(zhì)時,重現(xiàn)性及耐用性好,克服了采用氨基柱為分析柱時耐用性和重現(xiàn)性差的缺點,且方法準確可靠,可以較好地分離門冬氨酸鳥氨酸原料藥或制劑中各種雜質(zhì)進而控制產(chǎn)品質(zhì)量。

    目前,尚未見有文獻報道采用HILIC柱分離門冬氨酸鳥氨酸的方法,因此,本文內(nèi)容為首次報道。

    參考文獻

    [ 1 ] 成軍.門冬氨酸鳥氨酸的肝病臨床應用與研究進展[J].中國肝臟病雜志,2016,7(3):49-51.

    [ 2 ] 王宏麗.門冬氨酸鳥氨酸聯(lián)合復方甘草酸苷治療藥物性肝病的療效分析[J].中國醫(yī)刊,2014,49(12):60-62.

    [ 3 ] 王瑩,段雪峰,王敏琴.門冬氨酸鳥氨酸治療藥物性肝病的臨床療效[J].中國傷殘醫(yī)學,2012,21(3):97-98.

    [ 4 ] 高培平,張世嬌,姜志平.注射用門冬氨酸鳥氨酸和復方氨基酸注射液(3AA)配伍穩(wěn)定性考察[J].中國醫(yī)院藥學雜志,2017,37(10):984-987.

    [ 5 ] 黃震,諸林俏,蘇素紅,等.注射用門冬氨酸鳥氨酸與果糖注射液配伍的穩(wěn)定性考察[J].海峽藥學,2009,21(5):68-69.

    [ 6 ] 繆寧梅,馬捷.高效液相色譜法測定門冬氨酸鳥氨酸注射液的含量[J].中國生化藥物雜志,2003,24(6):296-297.

    [ 7 ] 張莉,黃哲蘇,李海生.異硫氰酸苯酯柱前衍生法測定門冬氨酸鳥氨酸注射液含量[J].藥物分析雜志,2008,28(7):1174-1176.

    [ 8 ] 賈婷婷,韓曉捷,黃哲甦.柱后衍生化高效液相色譜法測定門冬氨酸鳥氨酸顆粒劑的有關物質(zhì)和含量[J].天津藥學,2011,23(5):4-7.

    [ 9 ] 段姍姍,董志. HPLC測定門冬氨酸鳥氨酸注射液的含量 [J].華西藥學雜志,2014,29(4):480-481.

    [10] 任連杰,張偉,武晗燕,等. HPLC法測定注射用門冬氨酸鳥氨酸的含量和摩爾比[J].中國藥房,2016,27(3):383-385.

    [11] 王璐璐,鄭穩(wěn)生,陳少華,等.高效液相色譜法測定門冬氨酸鳥氨酸注射液的含量[J].醫(yī)藥導報,2012,31(12):1621-1623.

    [12] 俞瑜,袁浩宇,曾建鵬. HPLC法測定門冬氨酸鳥氨酸的含量[J].藥物資訊,2016,5(4):62-66.

    [13] 鄧麗平.高效液相色譜(HPLC)法測定門冬氨酸鳥氨酸注射液的有關物質(zhì)[J].醫(yī)學信息,2015,28(45):374-375.

    [14] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部[S]. 2015年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:43-44.

    [15] ALAN PM. A simple,generally applicable HILIC method development platform based upon selectivity[J]. Chromatography Today,2015,8(4):8-12.

    (收稿日期:2018-03-14 修回日期:2018-06-21)

    (編輯:劉 萍)

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