致石飼料致動(dòng)物膽固醇結(jié)石模型造模要素及中醫(yī)藥防治的數(shù)據(jù)挖掘

張純 徐曉娟 王張 鄧蒂斯 李宛靜 雒芙蓉 梁小青 張淼

摘要目的：定量研究致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的造模要素，為提高造模效率及評(píng)價(jià)藥物有效性提供方法學(xué)參考。方法：選取1993—2016年期間研究致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的文獻(xiàn)，錄入動(dòng)物種別、致石飼料配方、成石率、測(cè)試指標(biāo)、受試藥物等重要信息，定量統(tǒng)計(jì)和分析造模要素。結(jié)果：常用豚鼠、小鼠、兔等動(dòng)物；致石飼料常用膽固醇、脂肪等，其中豚鼠最常用的致石飼料配方為9000%全價(jià)飼料、1%膽固醇、2%豬油、5%蔗糖和2%酪蛋白，連續(xù)喂養(yǎng)49 d，成石率平均為8740%；小鼠最常用的配方為8350%全價(jià)飼料、1%膽固醇、15%脂肪、05%膽酸，連續(xù)喂養(yǎng)45 d，成石率平均為8948%；兔最常用的配方為9880%全價(jià)飼料、12%膽固醇，連續(xù)喂養(yǎng)50 d，成石率平均為7240%；犬喂食含03%膽固醇的致石飼料，連續(xù)42 d，成石率為100%；樹鼩喂食含膽固醇20%、蔗糖20%、大油（豬油）15%、蛋黃20%、玉米粉25%的致石飼料，連續(xù)喂養(yǎng)42 d，成石率為100%；金黃地鼠喂食含葡萄糖743%、酪蛋白20%、食鹽5%、維生素05%和氯化膽堿02%的致石飼料，連續(xù)21 d，成石率為50%。常測(cè)試的指標(biāo)為，膽汁中TC、TBIL、LDL、BA、PL、HDL等，血清中TC、TG、TBIL、LDL、BA、HDL、CKK等。造模的同時(shí)給藥，常用藥物包括鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸和中藥復(fù)方，涉及甘草、大黃、白芍、金錢草、柴胡、茵陳等77種藥材。結(jié)論：致石飼料常用于制造膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型，但配方及其成石率差異大、成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，中醫(yī)藥有利于肝膽系統(tǒng)功能恢復(fù)，防止成石性膽汁的產(chǎn)生，評(píng)價(jià)指標(biāo)主要涵蓋脂質(zhì)、肝功能及膽道動(dòng)力學(xué)等。

關(guān)鍵詞致石飼料；膽固醇結(jié)石；動(dòng)物模型；造模要素；數(shù)據(jù)挖掘

Study on the Model Elements and the Data Mining of Traditional Chinese Medicine

in Animal Model of Cholesterol Gallstone Caused by Stone Feed

Zhang Chun1， Xu Xiaojuan1， Wang Zhang2， Deng Disi1， Li Wanjing1， Luo Furong1， Liang Xiaoqing1， Zhang Miao1

（1 Clinical Medicine School， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 610073， China；

2 College of Ethnomedicine， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 611137， China）

AbstractObjective：To conduct a quantitative study on the modeling factors of animal model of cholesterol gallstone induced by stone feed to provide references for improving the efficiency of modeling and evaluating the effectiveness of drugs. Methods：Literatures on animal models of cholesterol gallstone induced by stone feed published during 1993 to 2016 were collected， and the important information such as the animal species， the feed formulation， the rate of stone formation， the test indexes and the drugs were input. A quantitative statistics as well as an analysis of modeling elements were conducted. Results：The commonly used animals for test were guinea pigs， mice， rabbits and stone feed commonly adopted cholesterol and fat. One of the most commonly used feed formulation for guinea pigs was 90% complete feed， 1% cholesterol， 2% lard， 5% sucrose and 2% casein and after a 49day continuous feeding， the stone formation rate was 8740% The most commonly used formula for mice was 8350% complete feed， 1% cholesterol， 15% fat， and 05% cholic acid. After a 45day continuous feeding， the average rate of stone formation was about 8948%. The most commonly used formula for rabbits was 9880% complete feed， 12% cholesterol and after a 50day continuous feeding， the average rate of stone formation was about 7240%. Dogs fed with 03% cholesterol stone feed for 42 consecutive days showed a 100% stone formation rate. Tree shrews fed with 20% cholesterol， 20% sucrose， 15% lard （lard）， 20% egg， 25% corn flour for 42 days also showed a 100% rate of stone formation while the hamster glucose fed with 743% casein， 20%， salt 5%， vitamin 05% and 02% choline chloride lithogenic diet for 21 consecutive days showed a 50% stone formation rate. The indicators of the test included TC， TBIL， LDL， Ba， PL， HDL， etc and serum TC， TG， TBIL， LDL， Ba， HDL， CKK， etc. Drugs were given in the process of modeling and the commonly used drugs included chenodeoxycholic acid， ursodeoxycholic acid， and compound Chinese Medicine which contains 77 kinds of medicinal herbs such as Radix Glycyrrhizae， Radix et Rhizoma Rhei， Radix Paeoniae Alba， Herba Lysimachiae， Radix Bupleuri， Herba Artemisiae Scopariae and so on. Conclusion：Stone feed is generally used in the manufacture of cholesterol gallstone animal model， but the formulation and the rate of stone formation often vary with a high cost and a timeconsuming process. Traditional Chinese medicine plays a positive role in recovering the functions of hepatobiliary systems and preventing cacocholia. The evaluation indexes mainly include lipid， liver function and biliary dynamics.

Key WordsStone feed； Cholesterol calculus； Animal model； Modeling elements； Data mining

中圖分類號(hào)：R282文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.05.058

膽囊結(jié)石是消化系統(tǒng)常見疾病，近年來(lái)發(fā)病率逐步增加[1]，其中約75%為膽固醇結(jié)石，其余主要為膽色素結(jié)石[2]。目前認(rèn)為其形成的基礎(chǔ)為總膽固醇（TC）、膽汁酸（BA）及卵磷脂（LC）等成分比例失調(diào)，導(dǎo)致膽固醇從膽汁中析出凝結(jié)成晶發(fā)病。膽固醇結(jié)石的治療以手術(shù)為主，尤其是腹腔鏡膽囊切除術(shù)，是治療膽囊結(jié)石患者的首要選擇。在藥物治療上，最常用熊去氧膽酸（UDCA），能增加膽汁酸鹽在膽汁中的濃度，導(dǎo)致膽汁酸成分變化，促進(jìn)膽固醇型結(jié)石逐漸溶解。與西藥比較，中藥能從多方面、多層次作用于肝細(xì)胞及膽道系統(tǒng)，常用柴胡、甘草、芍藥、金錢草、延胡索、香附等，通過(guò)疏肝解郁，清熱祛濕，利尿通淋等功效防治膽固醇結(jié)石的產(chǎn)生。

目前常用的膽固醇結(jié)石造模方法為致石飼料誘導(dǎo)法，成分為動(dòng)物全價(jià)飼料加上不同百分比的TC、脂肪及BA等，其原理為模仿人體內(nèi)膽固醇型膽結(jié)石生成機(jī)制。研究表明通過(guò)喂飼致石飼料形成膽固醇結(jié)石的過(guò)程與人類膽固醇結(jié)石發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程接近，具有操作簡(jiǎn)便、無(wú)手術(shù)創(chuàng)傷、便于觀察等優(yōu)點(diǎn)[3]，但是各文獻(xiàn)報(bào)道的致石飼料配方多樣、成功率參差不齊，又因該模型的造模成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，故我們對(duì)國(guó)內(nèi)20多年來(lái)利用致石飼料制造膽固醇結(jié)石模型的造模要素及其中醫(yī)藥防治的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘和分析，為提高造模效率及評(píng)價(jià)中醫(yī)藥防治膽固醇結(jié)石的療效提供定量的方法學(xué)參考。

1資料與方法

11文獻(xiàn)來(lái)源在中國(guó)知網(wǎng)（CNKI）中，收集1993—2016年期間（24年）研究致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的文獻(xiàn)。

12檢索策略通過(guò)CNKI進(jìn)行高級(jí)論文檢索，輸入文章題目致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的造模，檢索1993—2016年相關(guān)文獻(xiàn)檢索。

13納入標(biāo)準(zhǔn)收集研究致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的文章納入本研究，最后篩選出符合研究所需的文獻(xiàn)57篇。

14排除標(biāo)準(zhǔn)臨床膽結(jié)石研究、動(dòng)物膽色素結(jié)石實(shí)驗(yàn)研究、植入結(jié)石研究等文章不納入本研究。

15數(shù)據(jù)的規(guī)范與數(shù)據(jù)庫(kù)的建立

151數(shù)據(jù)庫(kù)的建立制作《致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型的造模要素挖掘數(shù)據(jù)表》。

152數(shù)據(jù)庫(kù)的規(guī)范應(yīng)用Excel軟件，錄入每篇文章題目，雜志名稱，出版年度，第一作者、通信作者及其所在地區(qū)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種別、性別、購(gòu)置時(shí)體重，致石飼料配方、給予量、造模天數(shù)、成石率，受試藥物名稱、藥物組成、陽(yáng)性藥、給藥天數(shù)，成石率、結(jié)石位置和概況，測(cè)試指標(biāo)等信息。

16數(shù)據(jù)分析對(duì)錄入的每項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，定量歸納造模要素。

2結(jié)果

本研究涉及全國(guó)20個(gè)省市的研究單位，其中研究單位最多的是北京、上海、廣州，分別為2031%、1406%、938%?？赡芘c當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)水平發(fā)達(dá)，飲食結(jié)構(gòu)中脂肪的攝入比例較高，繼而膽固醇結(jié)石發(fā)病率較高有關(guān)，另外亦與這些地區(qū)的科研單位較多有關(guān)。

21動(dòng)物情況

211動(dòng)物種別及其使用頻率依次為豚鼠（4098%）、小鼠（2787%）、兔（2622%）、犬（164%）、金黃地鼠（164%）和樹鼩（164%）。早期用豚鼠和兔比較多，近年來(lái)小鼠使用頻率增多，可能與小鼠的飼養(yǎng)成本較低有關(guān)。

212人類雌性患膽固醇結(jié)石的概率高于雄性[4]，因雌激素可升高TC水平，進(jìn)而使膽固醇過(guò)飽和析出結(jié)晶引起結(jié)石。但文獻(xiàn)中多使用雄性，可能是為了排除雌性動(dòng)物體內(nèi)雌激素對(duì)膽固醇結(jié)石形成的促進(jìn)作用。

213雄性豚鼠的體重為180～300 g，雌性為200～320 g；小鼠的體重為18～22 g；兔的體重為18～30 kg；雄性犬的體重多為2～3 kg；雄性金黃地鼠的體重為80～130 g；樹鼩的體重為180～200 g。

22造模結(jié)果

221豚鼠1）致石飼料配方24篇文獻(xiàn)共記載了15種致石飼料配方（表1）其中成分按照使用頻率由高到低依次為豚鼠全價(jià)飼料、膽固醇、脂肪、蔗糖、酪蛋白、膽酸、纖維素及其他（如甲基硫氧嘧啶等）。常用配方為豚鼠全價(jià)飼料（9000%）、膽固醇（1%）、豬油（2%）、蔗糖（5%）和酪蛋白（2%），給予豚鼠49 d后，平均成石率高達(dá)8740%。膽固醇為必需成分，其在致石飼料中的比例按照使用頻率由高到低依次為1%、15%、12%、2%、05%、005%、01%、125%。2）給藥周期平均52 d（標(biāo)準(zhǔn)差為1627 d），僅有8篇文獻(xiàn)記載了給予量，多為每只40 g/d只和每只100 g/d，亦有每只30 g/d和50 g/d。3）成石率及結(jié)石外觀模型組的平均成石率為8559%（標(biāo)準(zhǔn)差為111%）。膽結(jié)石主要位于膽囊內(nèi)，為黃褐色不規(guī)則的顆粒狀或?yàn)槟懯嗌盎驗(yàn)槟懝檀尖}鹽結(jié)晶。

222小鼠1）15篇文獻(xiàn)共記載了5種致石飼料配方（表2），其成分按照使用頻率依次為小鼠全價(jià)飼料、膽固醇、脂肪、膽酸、蔗糖、酪蛋白、纖維素及其他（如復(fù)方鹽）。常用配方為小鼠全價(jià)飼料（8350%）、膽固醇（1%）、脂肪（15%）、膽酸（或膽汁酸、豬膽鹽）（05%）。膽固醇（或雙氫膽固醇）、脂肪、膽酸（或膽汁酸、豬膽鹽）為必需成分；其中，膽固醇使用頻率由高到低依次為1%、2%、125%、05%。2）致石飼料給予周期和致石率給予周期平均為51 d（標(biāo)準(zhǔn)差為9 d），模型組的成石率平均為929%（標(biāo)準(zhǔn)差為714%）。

223兔1）16篇文獻(xiàn)共記載了5種致石飼料配方（表3），其成分按照使用頻率依次為兔全價(jià)飼料、膽固醇、豬油、膽酸及其他（如蛋黃）。常用配方為兔全價(jià)飼料（9880%）、膽固醇（12%），膽固醇為必需成分，其在致石飼料中的比例按照使用頻率由高到低依次為12%、1%、15%、2%。2）致石飼料給予周期和成石率給予周期平均為31 d（標(biāo)準(zhǔn)差為714 d）；模型組的成石率平均為8583%（標(biāo)準(zhǔn)差為1639%）。

224犬李秋榮等[58]喂食犬含03%膽固醇致石飼料，喂食42 d的成石率為100%，膽囊內(nèi)可見色澤呈黃白和黑褐色的多發(fā)性結(jié)石。

225樹鼩魏克強(qiáng)等[59]喂食致石飼料，其中含膽固醇20%、蔗糖20%、大油（豬油）15%、蛋黃20%、玉米粉25%，連續(xù)喂養(yǎng)42 d，成石率為100%。

226金黃地鼠傅德良等[64]喂食致石飼料，其中含葡萄糖743%、酪蛋白20%、食鹽5%、維生素05%和氯化膽堿02%。26只動(dòng)物第3周起有結(jié)石形成，其中13只的膽囊內(nèi)有明顯的結(jié)石形成。

23評(píng)價(jià)指標(biāo)

231數(shù)據(jù)挖掘發(fā)現(xiàn)（表4），動(dòng)物長(zhǎng)期喂食膽固醇致石飼料后，膽汁中的TC、CSI、Ca、TBIL、MCP、DBIL、IBIL、BS、LDL、TP均上升，BA、PL、TBA、HDL、CG、LC均下降。膽汁中的膽鹽是重要的表面活性劑，與TC及PL以簡(jiǎn)單膠團(tuán)或復(fù)合膠團(tuán)形式存在于膽汁中[60]，是膽結(jié)石形成的重要基礎(chǔ)之一，膽紅素與鈣形成膽紅素鹽，在膽汁環(huán)境中，肝臟分泌的蛋白質(zhì)與膽囊分泌的MCP失去活性，通過(guò)化學(xué)鍵或靜電作用，與膽紅素鹽及膠體形成網(wǎng)架基質(zhì)，從而形成膽結(jié)石。在膽汁環(huán)境中，LC與BA分別形成微膠粒，能夠使脂肪和TC乳化成對(duì)人體無(wú)害的微膠粒，一定比例的PL、BA、TC能夠在水中均勻分散，防止膽結(jié)石形成[61]。HDL及LDL主要在肝臟中分泌，主要承擔(dān)TC的轉(zhuǎn)運(yùn)及TC的清除，因而防止膽結(jié)石發(fā)生，LDL的功能是將肝臟中的TC運(yùn)輸?shù)礁鱾€(gè)組織，當(dāng)TC在細(xì)胞內(nèi)聚集時(shí)，LDL的表達(dá)和激動(dòng)將會(huì)被抑制，進(jìn)而促進(jìn)TC的堆積[62]。

232數(shù)據(jù)挖掘發(fā)現(xiàn)（表5），動(dòng)物長(zhǎng)期喂食膽固醇致石飼料后，血清中的TC、TG、TBIL、ALT、AST、TL、LDL、non HDL C、IL2、MDA、APN activity、APN Mrna、TBA、HDL2、HDL3、ApoCⅡ、P、VLDL、IL1β、TP、βLp、MUC1、MUC2、MUC3、GCA、GLU、SBIL、BUN均上升，HDL、SOD、ApoAⅠ、CKK、GIR、TCA、BA均下降。血脂代謝水平異常是膽囊膽固醇結(jié)石形成的重要因素[63]。血清中高密度脂蛋白（HDL）的降低和低密度脂蛋白（LDL）的升高是膽汁膽固醇的重要來(lái)源，攝入過(guò)多的TC會(huì)導(dǎo)致血清中TC增高，而膽汁中的TC又與血清中TC密切相關(guān)[64]。從數(shù)據(jù)挖掘結(jié)果可知，血清中TG、TC的濃度過(guò)高更易發(fā)生膽結(jié)石，其機(jī)制可能與上述一致。膽汁主要由肝臟分泌，肝臟的損傷會(huì)導(dǎo)致蛋白分泌失調(diào)，促使結(jié)石發(fā)生，ALT、AST是肝臟功能的重要檢測(cè)指標(biāo)，其上升提示肝臟功能損傷。IL6、ILβ1表達(dá)升高是由膽汁細(xì)菌感染導(dǎo)致的炎性遞質(zhì)釋放過(guò)量，提示細(xì)菌感染也是導(dǎo)致膽結(jié)石發(fā)生的原因之一，CKK的下降則會(huì)導(dǎo)致膽汁的淤積從而引發(fā)膽結(jié)石。

表4致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型膽汁中測(cè)指標(biāo)測(cè)試指標(biāo)模型組指標(biāo)變化篇數(shù)用藥組指標(biāo)變化篇數(shù)總膽固醇（TC）↑32↓21膽汁酸（BA）↓10↑8磷脂（PL）↓9↑8膽固醇飽和指數(shù)（CSI）↑8↓6鈣（Ca）↑6↓5總膽紅素（TBIL）↑6↓5黏蛋白（MCP）↑6↓4總膽汁酸（TBA）↓5↑6直接膽紅素（DBIL）↑4↓4間接膽紅素（IBIL）↑2↓2膽鹽（BS）↑2↓2高密度脂蛋白（HDL）↓2↑2低密度脂蛋白（LDL）↑2↓2肝膽酸（CG）↓1↑1卵磷脂（LC）↓1↑1總蛋白（TP）↑1↓1

233其他指標(biāo)在促成石成分中，除黏蛋白由膽囊上皮分泌外，其余大部分均來(lái)源于肝臟。肝臟是膽汁的主要來(lái)源，膽汁的分泌和形成主要由肝細(xì)胞完成，肝臟是TC合成及向BA轉(zhuǎn)化的重要器官。喂食高膽固醇致石飼料后測(cè)得肝Scp2、肝臟質(zhì)量、膽囊長(zhǎng)徑、膽囊體積、膽汁容積、膽固醇膽鹽比等升高，肝膽汁磷脂比值、肝膽汁總膽汁鹽、CCK受體mRNA、BUGT等均下降，促進(jìn)膽固醇結(jié)石形成。

24藥物防治

241采用預(yù)防性給藥的方式，即在造模的同時(shí)給藥，有利于減少實(shí)驗(yàn)周期，提高研究效率。給藥周期平均為49 d（標(biāo)準(zhǔn)差為15 d），與臨床長(zhǎng)期給藥的情況類似。

表5致石飼料致膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型血清中的測(cè)試指標(biāo)測(cè)試指標(biāo)模型組指標(biāo)變化篇數(shù)用藥組指標(biāo)變化篇數(shù)總膽固醇（TC）↑43↓30三酰甘油（TG）↑15↓12高密度脂蛋白（HDL）↓6↑4總膽紅素（TBIL）↑5↓2谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）↑3↓3谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）↑3↓2總脂（TL）↑3↓3低密度脂蛋白（LDL）↑2↓2非高密度脂蛋白膽固醇

（non HDLC）↑2↓2白細(xì)胞介素2（IL2）↑2↓2丙二醛（MDA）↑2↓2超氧化物歧化酶（SOD）↓2↑2脂聯(lián)素（APN activity）↑2↓2脂聯(lián)素Mrna（APN Mrna）↑2↓2總膽汁酸（TBA）↑2↓2高密度脂蛋白2（HDL2）↑2--高密度脂蛋白3（HDL3）↑2--載脂蛋白C Ⅱ（ApoCⅡ）↑1--磷脂（P）↑1↓1極低密度脂蛋白（VLDL）↑1↓1白細(xì)胞介素1β（IL1β）↑1↓1血清總蛋白（TP）↑1↓1β脂蛋白（βLp）↑1↓1（MUC1）黏蛋白基因（MUC2）↑1↓1（MUC3）甘氨膽酸（GCA）↑1↓1載脂蛋白A Ⅰ（ApoA Ⅰ）↓1--血漿膽囊收縮素（CKK）↓1↑1胰島素抵抗（GIR）↓1↑1?；悄懰幔═CA）↓1↑1血糖（GLU）↑1↓1血清（SBIL）↑1↓1血漿尿素氮（BUN）↑1↓1膽汁酸（BA）↓1↑1

242陽(yáng)性對(duì)照藥組的成石率平均為1927%（標(biāo)準(zhǔn)差為174%），能明顯預(yù)防結(jié)石的形成。常用鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸，通過(guò)降低膽汁膽固醇的分泌使膽汁去飽和，不飽和膽汁則具有溶解膽固醇的作用，使膽石表面的膽醇分子不斷地被溶解，膽石體積逐漸縮小以至完全溶解。

243能減輕膽囊炎性反應(yīng)，提高膽囊的收縮功能，降低膽囊結(jié)石的成石率。藥物組的平均成石率為2437%（標(biāo)準(zhǔn)差為1564%），57篇文章中使用中藥復(fù)方23個(gè)，即大柴胡湯[13]、膽石六號(hào)湯劑[27]、利膽排石湯[33]、消炎利膽湯[11]、疏肝利膽湯[46]、膽囊Ⅲ號(hào)方[26]、中藥排石方[56]、含28種中藥的復(fù)方[9]、消石散[61]、茵陳合劑[57]、金錢對(duì)唑合劑[24]、養(yǎng)肝利膽顆粒[6]、益膽顆粒[55]、膽病顆粒[4]、舒膽通顆粒[18]、利膽排石沖劑[16]、膽寧片[15]、防石膠囊[25]、大黃靈仙膠囊[37]、膽石消膠囊[38]、肝膽寧[15]、舒肝順氣丸[23]、小檗堿[53]。

24477種，即（括號(hào)內(nèi)為使用頻率）甘草（3889%），大黃（3611%），白芍（3333%），金錢草（3333%），柴胡（3056%），郁金（2778%），延胡索（2222%），茵陳（1944%），香附（1944%），枳實(shí)（1944%），雞內(nèi)金（1667%），木香（1667%），黃芩（833%），芒硝（833%）等?，F(xiàn)代藥理研究表明，甘草具有降脂、保肝的作用；大黃可促進(jìn)膽汁分泌，并使膽紅素和膽汁酸含量增加；金錢草可以促進(jìn)膽汁的分泌。中藥配伍具有利尿通淋，解毒消腫，祛瘀止痛，利膽退黃的功效從而防治膽固醇結(jié)石，常見的藥對(duì)如：1）柔肝緩急止痛用白芍、甘草；2）利尿通淋利石用金錢草、大黃；3）和解表里用白芍、柴胡；4）清泄肝膽之熱用柴胡、黃芩；5）理氣解郁用郁金、枳實(shí)；6）醒脾開胃用雞內(nèi)金、木香；7）瀉下通便用大黃、芒硝。

245有效性評(píng)價(jià)指標(biāo)膽汁中指標(biāo)BA、LC、PL、TBA、HDL等均升高，TC、CSI、TBIL、LDL等均下降，血清中BA、HDL、CKK等均升高，TC、TG、ALT、AST、LDL等均下降，其他指標(biāo)膽囊收縮頻率、CKK、BUGT等表達(dá)升高，肝Scp2、肝臟質(zhì)量、膽囊體積等下降，均有利于防治膽固醇結(jié)石的形成。

3討論

膽結(jié)石屬于中醫(yī)學(xué)“肝脹”“膽脹”“脅痛”的范疇。肝性剛強(qiáng)，性喜調(diào)達(dá)惡抑郁，因此肝氣、肝陽(yáng)常為有余，肝陰、肝血常為不足。元代李杲提出脅痛的主要病機(jī)是肝木妄行，肝與脾均位于中焦，肝主疏泄影響脾胃的運(yùn)化，故肝膽患病易傳于脾，致脾之運(yùn)化水谷及水濕功能異常，脾虛不能升清，水谷停滯于中焦，生熱蘊(yùn)濕，氣機(jī)阻滯，造成肝膽的疏泄失常，膽汁淤積而形成結(jié)石[66]。因此中醫(yī)治療該病從肝論治，治法疏肝利膽，清熱祛濕，排石通淋。中醫(yī)用藥，主要目的不是將結(jié)石溶解或者排除，而是減少致石因素、減輕炎性反應(yīng)和疼痛等。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，肝臟分泌異常引起膽汁成分變化，使膽固醇的過(guò)飽和結(jié)晶析出，是導(dǎo)致膽固醇結(jié)石形成的一個(gè)重要條件[65]。評(píng)價(jià)指標(biāo)主要涵蓋脂質(zhì)、肝功能及膽道動(dòng)力學(xué)等方面，因此，治療膽固醇結(jié)石的關(guān)鍵是恢復(fù)肝膽系統(tǒng)的正常功能，防止成石性膽汁的產(chǎn)生。

致石飼料制造膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型，雖然十分常用，成石率也較高，但是文獻(xiàn)報(bào)道的致石飼料配方差異大、成功率參差不齊，再加上成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，導(dǎo)致開展相關(guān)研究的效率不高。故我們收集歸納總結(jié)國(guó)內(nèi)近24年有關(guān)動(dòng)物膽固醇結(jié)石造模與中醫(yī)藥防治的文獻(xiàn)，開展膽固醇結(jié)石動(dòng)物模型造模要素挖掘研究，可精準(zhǔn)把握造模要素，提高造模的成功率，對(duì)膽固醇結(jié)石的有效性評(píng)價(jià)具有一定的參考和指導(dǎo)價(jià)值。

但是，本研究存在不足之處，如文獻(xiàn)的研究質(zhì)量未加區(qū)分，有的作者在造模方面未透露造模飼料具體配方，在治療上未羅列復(fù)方中中藥的組成及劑量，甚至存在真實(shí)性問(wèn)題等問(wèn)題，進(jìn)而導(dǎo)致數(shù)據(jù)結(jié)果的科學(xué)性稍顯不足。

參考文獻(xiàn)

[1]Zeng Q，He Y，Qiang DC，et al.Prevalence and epidemiological pattern of gallstones in urban residents in China[J].Eur J Gastroenterol Hepato，2012，24（12）：14591460.

[2]Qiao T，Ma RH，Luo XB，et al.The systematic classification of gallbladder stones[J].PLoS One，2013，8（10）：e74887.

[3]梁曉強(qiáng)，朱培庭，張靜喆.膽石病實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷难芯窟M(jìn)展[J].上海醫(yī)藥，2014，35（18）：89.

[4]鄧甜甜.齊刺膽的下合穴對(duì)豚鼠急性膽囊炎模型血漿βEP和CCK8影響的研究[D].沈陽(yáng)：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，2014.

[5]鄧漾，韓天權(quán)，商俊，等.膽汁酸代謝經(jīng)典途徑酶基因表達(dá)與豚鼠膽石病關(guān)系的研究[J].外科理論與實(shí)踐，2001，6（3）：149153.

[6]方邦江，周爽，裴新軍，等.養(yǎng)肝利膽顆粒對(duì)膽囊膽固醇結(jié)石豚鼠胰島素抵抗的干預(yù)作用[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2009，7（12）：11591163.

[7]陳玲，涂春香，施文榮.鬼針草對(duì)實(shí)驗(yàn)性豚鼠膽囊結(jié)石的影響[J].福建中醫(yī)藥，2009，40（3）：4041.

[8]侯曉明，羅燕燕，董瑩，等.排石飲液對(duì)實(shí)驗(yàn)性膽結(jié)石的拮抗作用研究[J].北京中醫(yī)，2004，23（3）：179183.

[9]張靜哲，袁作彪，高炬，等.養(yǎng)肝柔肝法逆轉(zhuǎn)豚鼠成石膽汁致石性的實(shí)驗(yàn)研究[J].結(jié)合醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)：英文版，2003，1（4）：289292.

[10]朱東晨，黃大鶴，高方，等.綠茶預(yù)防膽固醇結(jié)石動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J].白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，19（3）：258259.

[11]張棟梁，齊清會(huì)，李毅，等.通里攻下法防治豚鼠結(jié)石性膽囊炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].江蘇中醫(yī)藥，2012，44（3）：6869.

[12]周文江，楊萍，楊幼明，等.魚肝油對(duì)豚鼠膽囊膽固醇結(jié)石生成的影響[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2001，13（10）：507508.

[13]陳小菁，胡曉晴，許亞超，等.大柴胡湯對(duì)豚鼠膽囊黏蛋白分泌及其基因表達(dá)的影響[J].江西中醫(yī)藥，2015，46（10）：3436.

[14]葛少祥，彭代銀，劉金旗，等.連錢草治療膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥材，2007，30（7）：842845.

[15]鐘潔，昊萬(wàn)垠.肝膽寧抑制豚鼠膽固醇結(jié)石形成的實(shí)驗(yàn)研究[J].新消化病學(xué)雜志，1995，3（2）：6971.

[16]崔海蘭，尉中民.利膽排石沖劑防治膽石病的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2004，22（7）：12081210.

[17]葛少祥，彭代銀，劉金旗，等.連錢草治療膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥材，2007，30（7）：842845.

[18]陸紅，張信岳，劉芳芳，等.舒膽通顆粒防治膽石癥的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2009，14（9）：10281031.

[19]康國(guó)治，潘曉明，李彪，等.復(fù)方熊膽粉防治膽石病的藥效學(xué)研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，1996，3（5）：20，2126.

[20]劉皓，王平，冷秀梅，等.中藥膽寧片治療膽囊膽固醇結(jié)石作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2014，22（11）：658661.

[21]劉皓，范堯夫，王平，等.膽寧片對(duì)膽固醇結(jié)石模型豚鼠膽囊運(yùn)動(dòng)功能及血漿CCK水平的影響[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，30（5）：773776.

[22]李均樂(lè)，田立新.絞股藍(lán)預(yù)防豚鼠膽囊膽固醇結(jié)石形成[J].中華肝膽外科雜志，2002，8（10）：609610.

[23]陳犁，呂姍姍，譙志文，等.舒肝順氣丸利膽藥效學(xué)研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，9（12）：12811284.

[24]周大興，將志炕，阮葉萍，等.金錢對(duì)唑合劑防治膽石癥的實(shí)驗(yàn)研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，30（5）：530532.

[25]劉禹翔，李健，黃彬，等.中藥預(yù)防膽囊膽固醇結(jié)石實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中醫(yī)急癥，2008，17（5）：666667.

[26]董米連，薛之祥.膽囊Ⅲ號(hào)方預(yù)防膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，1997，3（1）：68.

[27]沈平，方邦江，朱培庭，等.養(yǎng)肝柔肝中藥對(duì)膽囊膽固醇結(jié)石豚鼠膽囊細(xì)胞鈣離子濃度的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2007，5（2）：179182.

[28]皮儒先，伍強(qiáng)，謝斌，等.辣椒堿影響高脂餐小鼠膽囊結(jié)石形成及其機(jī)制研究[J].免疫學(xué)雜志，2016，32（5）：369375.

[29]李勇男，吳碩東，田雨.姜黃素在預(yù)防高脂飲食小鼠膽囊膽固醇性結(jié)石中的作用[J].肝膽胰外科雜志，2015，27（6）：506511.

[30]李勇男，吳碩東，田雨.姜黃素聯(lián)合胡椒堿在預(yù)防小鼠膽囊膽固醇性結(jié)石中的作用[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2015，22（12）：14531459.

[31]徐霜，胡金鳳，楚世峰，等.蓽拔油非皂化物預(yù)防膽固醇結(jié)石的形成[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2013，48（7）：11781182.

[32]孫陽(yáng)，梁穎，徐少娜，等.利膽排石湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性膽結(jié)石小鼠肝臟形態(tài)學(xué)影響[J].中醫(yī)藥信息，2010，27（2）：4143.

[33]梁穎，孫陽(yáng)，畢克濱，等.利膽排石湯對(duì)膽結(jié)石小鼠脂類代謝及肝組織BUGtr活性的影響[J].中醫(yī)藥信息，2008，25（6）：7779.

[34]安國(guó)順，王海梅，巴圖烏拉，等.蓽拔油不皂化物抑制C57BL/6小鼠膽囊結(jié)石的形成[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2008，14（3）：235238.

[35]呂震，俞淵，王兵，等.大黃靈仙膠囊對(duì)小鼠膽結(jié)石形成及肝病理和血液生化指標(biāo)的影響[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2016，29（6）：577581.

[36]張靜喆，梁曉強(qiáng)，顧宏剛，等.養(yǎng)肝利膽顆粒對(duì)膽固醇結(jié)石小鼠肝臟基因表達(dá)的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2011，19（4）：234238.

[37]唐乾利，呂震，俞淵，等.大黃靈仙膠囊調(diào)控膽結(jié)石小鼠肝細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)及膽汁代謝譜的機(jī)制研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，36（8）：953959.

[38]張俊威，許慶瑞，姚琳，等.膽石消膠囊消石利膽作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2012，20（8）：359361.

[39]王海梅，巴圖烏拉，王俊峰，等.蓽拔油不皂化物抑制C57BL/6小鼠膽囊結(jié)石的形成[J].北京中醫(yī)藥雜志，2006，25（10）：630632.

[40]邱玉華，王海梅，吳京濤，等.胡椒堿抑制C57BL/6小鼠膽囊結(jié)石形成的研究[J].北京中醫(yī)，2007，26（9）：617619.

[41]張紅軍，祝學(xué)光，陳祥柏.藥物誘導(dǎo)膽紅素葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的基因表達(dá)對(duì)小鼠膽結(jié)石形成的抑制作用[J].中華普通外科雜志，1999，14（5）：344347.

[42]錢英，胡姍姍，陳澤慧，等.膽石六號(hào)湯對(duì)小鼠膽固醇結(jié)石的影響[J].中藥藥理與臨床，2013，29（3）：147149.

[43]王羊，張成，馮金鴿.大黃素影響膽固醇結(jié)石形成的實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2016，45（6）：656658.

[44]劉惠武，嚴(yán)紅梅，余首德，等.疏肝利膽湯抑制兔膽結(jié)石形成的作用及機(jī)制研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2016，24（1）：1516.

[45]趙紀(jì)春，朱紅，程南生.兔膽囊結(jié)石形成過(guò)程中脂代謝和載脂蛋白變化研究[J].華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，28（4）：1720.

[46]趙紀(jì)春，舒曄，程南生，等.膽囊結(jié)石中膽固醇代謝變化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)普通外科雜志，2000，9（2）：124128.

[47]張繼紅，楊可禎，韓本立.紅霉素預(yù)防家兔膽囊結(jié)石形成的實(shí)驗(yàn)研究[J].廣東醫(yī)學(xué)，1996，17（1）：4648.

[48]別平，黃志強(qiáng)，王敖川，等.膽囊巨噬細(xì)胞與膽囊炎癥和結(jié)石形成關(guān)系的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床研究[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1994，16（6）：425428.

[49]李月廷，祝學(xué)光.胡椒堿抑制兔膽結(jié)石形成的作用和機(jī)制[J].中華肝膽外科雜志，2003（9）：426428.

[50]李月廷，祝學(xué)光，陳祥柏，等.熊去氧膽酸抑制兔膽結(jié)石形成的作用及機(jī)制[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，33（3）：469471.

[51]張繼紅，韓本立.消炎痛、紅霉素預(yù)防膽囊結(jié)石形成的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)普通外科雜志，1998，7（3）：58.

[52]蘇敬東，李士駿，趙浩亮.咖啡因預(yù)防家兔膽囊結(jié)石形成的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，1994，11（1）：2728.

[53]王江華，陳先祥，蔡慶和，等.小檗堿抑制兔膽固醇結(jié)石形成的作用和機(jī)制[J].肝膽胰外科雜志，2007，19（5）：288290.

[54]黃大鶴，王農(nóng)，陳云波，等.飲酒對(duì)膽固醇結(jié)石的預(yù)防作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].肝膽胰外科雜志，1994（3）：14.

[55]梁穎.利膽排石湯抗實(shí)驗(yàn)性膽固醇結(jié)石作用及作用機(jī)理的研究[D].哈爾濱：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2007.

[56]于福文，康慶偉.中藥排石方抑制膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生，2009，10（5）：107108.

[57]閻姝，崔乃強(qiáng)，方步武，等.茵陳合劑對(duì)家兔膽固醇結(jié)石成石性膽汁分泌的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2008，14（1）：5055.

[58]李秋榮，拱玉華，周建萍，等.高膽固醇飲食對(duì)膽結(jié)石形成的研究[J].臨床肝膽病雜志，2002，18（5）：320封3.

[59]魏克強(qiáng)，許淑琴.消石散對(duì)中國(guó)樹鼠句膽結(jié)石形成的影響[J].甘肅科學(xué)學(xué)報(bào)，2002，14（4）：7880.

[60]孫穎，楊展瀾，申國(guó)榮，等.膽結(jié)石組成和形成機(jī)理的研究進(jìn)展[J].中國(guó)科學(xué)B輯，2001，31（5）：385393.

[61]陳軼昀，陳深，吳科能.膽結(jié)石的化學(xué)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2014，30（18）：78.

[62]孫泓，蒲小平.膽石病動(dòng)物模型及藥物靶點(diǎn)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2007，16（22）：18441848.

[63]Klass DM，Bührmann K，Sauter G，et al.Biliary lipids，cholesterol and bile synthesis：different adaptive mechanisms to dietary cholesterol in lean and obese subjects[J].Aliment Pharmacol Ther，2006，23（7）：895905.

[64]靖俊，丁寧，丁曉萌，等.高脂飲食對(duì)雄性小鼠生殖功能和睪丸內(nèi)氧化低密度脂蛋白變化的影響[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2016，29（2）：133137.

[65]vanBergeHenegouwen GP1，Venneman NG，Portincasa P，Kosters A，et al.Relevance of hereditary defects in lipid transport proteins for the pathogenesis of cholesterolgallstone disease[J].Scand J Gastroenterol Suppl，2004（241）：6069.