氣相色譜檢測茶青有機(jī)磷農(nóng)殘假陽性峰的判定

李惠林

摘 要：利用氣相色譜檢測茶青有機(jī)磷農(nóng)殘時(shí)，出峰時(shí)間為11～15 min的一峰，響應(yīng)值非常高。在試驗(yàn)條件不足、無法滿足氣相質(zhì)譜等條件下，很難準(zhǔn)確判斷此峰的性質(zhì)。本試驗(yàn)以質(zhì)譜條件下未檢出茶葉中禁限用農(nóng)藥的當(dāng)季春茶茶青為材料，隨機(jī)抽取一份茶青樣品進(jìn)行試驗(yàn)。通過比對不同極性的色譜條件、不同前處理提取方法，分析5種常見的有機(jī)磷類農(nóng)殘氣相色譜檢測假陽性峰出峰情況。試驗(yàn)結(jié)果表明，此峰不是茶葉必檢的5種有機(jī)磷類農(nóng)藥，可視為假陽性峰。

關(guān)鍵詞：茶青；有機(jī)磷；氣相色譜檢測；假陽性峰

文章編號： 1005-2690（2018）06-0111-03 中圖分類號： TS255.7；O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： B

有機(jī)磷是目前我國各地區(qū)應(yīng)用最廣泛的農(nóng)藥之一。近年來，對茶葉檢定要求不斷提高，農(nóng)藥殘留最低限量標(biāo)準(zhǔn)不斷降低，有機(jī)磷類部分農(nóng)藥勢必成為茶葉中不得檢出的重要指標(biāo)。而茶葉中的內(nèi)含物質(zhì)非常豐富，是茶葉營養(yǎng)豐富的保證。但同時(shí)內(nèi)含物質(zhì)的多樣，會對某些檢測結(jié)果造成影響，勢必成為茶葉農(nóng)藥殘留檢測的難點(diǎn)。加上現(xiàn)今我國農(nóng)業(yè)檢測還未能全面普及質(zhì)譜儀等高等分析儀器，使得大部分能夠第一時(shí)間接觸到茶青的檢測機(jī)構(gòu)，在檢測茶青中有機(jī)磷的農(nóng)藥殘留時(shí)，常常會受到內(nèi)含物的干擾，用單一方法的氣相色譜檢測造成誤判的情況難免發(fā)生，從而錯(cuò)過了在第一階段就進(jìn)行茶青農(nóng)殘控制的先機(jī)。因此，在單一氣相色譜檢測條件下對茶青有機(jī)磷農(nóng)殘假陽性峰進(jìn)行測定的試驗(yàn)值得探究。

本文就前處理方法不同、色譜柱極性不同的兩個(gè)變量，對茶青在有機(jī)磷檢測中常常出現(xiàn)的假陽性峰進(jìn)行對比分析，并展開探討。

1 材料與方法

1.1 儀器

儀器采用日本島津GC-2014氣相色譜儀，附FPD檢測器，Labsolution色譜工作站，毛細(xì)管色譜柱有Rtx-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm）、Rtx-50（30 m×0.53 mm×1.0 μm）和Rtx-1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）3種規(guī)格，均質(zhì)機(jī)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，附水浴加熱鍋，氮吹儀。

1.2 試劑

丙酮（色譜純）、乙腈（色譜純）、乙酸乙酯（分析純）、磷酸（85%）、氯化銨（分析純）、氯化鈉（分析純）、無水硫酸鈉（分析純）、助濾劑Celite545、二氯甲烷（分析純）、弗洛里矽柱。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液有殺螟硫磷、倍硫磷、對硫磷、甲基對硫磷、毒死蜱（購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所，濃度均為100 μg/mL）。

1.3 試驗(yàn)方法

根據(jù)前處理方法不同和色譜柱不同兩個(gè)變量進(jìn)行對比分析。

1.3.1 前處理方法

1.3.1.1 方法一

按NY/T 761—2008蔬菜水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定方法執(zhí)行。本方法以乙腈為浸提液，丙酮為最終溶劑[1]。

1.3.1.2 方法二

按GB/T 14553—2003糧食、水果和蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥測定的氣相色譜法的方法執(zhí)行。本方法以丙酮和二氯甲烷為雙溶劑提取待測物[2]。

1.3.2 色譜柱選擇

依小到大分別選擇弱極性色譜柱Rtx-5、中等極性色譜柱Rtx-50、Rtx-1701這3種色譜柱。

1.3.3 色譜條件

進(jìn)樣口溫度220 ℃；檢測器溫度250 ℃；柱溫150 ℃（保持2 min），以8 ℃/min的升溫速率升溫至250 ℃（保持12 min）；載氣為氮?dú)猓?9.999%），流速10 mL/min；燃?xì)鉃闅錃猓?9.999%），流速75 mL/min；助燃?xì)鉃榭諝?，流?00 mL/min；不分流進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

在常用的農(nóng)藥中，在11～15 min時(shí)間段內(nèi)出現(xiàn)的農(nóng)藥峰有甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷等，其中殺螟硫磷為茶葉必檢[3，4]。在單柱檢測環(huán)境下此峰的出現(xiàn)，使得殺螟硫磷是否檢出常常難以判定。因此，如何判定此峰的性質(zhì)，成為茶葉有機(jī)磷檢測的重點(diǎn)和難點(diǎn)（圖1～圖4）。

2.1 前處理方法不同對不同茶葉出峰結(jié)果的影響

由圖1可知，NY/T 761—2008和GB/T 14553—2003兩種前處理方法，通過不同溶劑的浸提，都檢出疑似峰。

圖1從上往下，第1、2個(gè)峰為Rtx-1701柱條件下兩種前處理方法的峰，第3、4峰為Rtx-5柱條件下兩種前處理方法的峰，第5、6峰為Rtx-50柱條件下兩種前處理方法的峰。

由圖可知，在相同柱條件下，不同的兩種前處理方法出峰時(shí)間無法區(qū)分，各自的兩峰之間并沒有太大的差別，并且與上述提到的甲基對硫磷等5種物質(zhì)出峰時(shí)間都非常接近。若無氣相質(zhì)譜檢測等條件，此茶青通過前處理方法的不同，根本無法區(qū)分是否含有甲基對硫磷等5種常見農(nóng)藥殘留；在相同的柱極性下，此峰的性質(zhì)既無法確定，也無法區(qū)分，說明從處理方法上無法進(jìn)一步排查此峰。在檢驗(yàn)過程中，暫時(shí)不能通過前處理方法的不同將此物質(zhì)與有機(jī)磷類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分離，可能需要在后期數(shù)據(jù)處理上進(jìn)一步加以區(qū)分。

2.2 色譜柱極性不同對不同標(biāo)品出峰時(shí)間的影響

由圖2可知，在Rtx-5色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1（通過NY/T 761—2008方法處理的茶青，下同）的峰。由圖可看出，倍硫磷、毒死蜱的分離程度較弱，2種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)在此柱上幾乎無法明顯區(qū)分。而在此條件下，可以看到茶青1與甲基對硫磷較為相近。

由圖3可知，在Rtx-50色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1的峰。由圖可看出，殺螟硫磷、毒死蜱、對硫磷的分離程度較弱，待測農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)本身在此柱上都無法區(qū)分，茶青樣與5個(gè)峰都較為相近，單柱條件下，根本無法區(qū)分疑似峰的性質(zhì)，在這5種標(biāo)準(zhǔn)品比對下，較容易被判定為殺螟硫磷。

由圖4可知，在Rtx-1701色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1的峰。由圖可看出，甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱4種峰分離程度較弱，茶青1與毒死蜱的峰幾乎重合，單柱條件下，很容易被判定為毒死蜱農(nóng)藥殘留。

綜上所述，不同有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同的色譜條件下分離情況不同，出峰時(shí)間與峰大小都有相應(yīng)的差別。因?yàn)镽tx-1701色譜柱極性較大，在此柱中，5種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分離情況較好，而在Rtx-5和Rtx-50柱條件下，部分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)會出現(xiàn)重疊。通過調(diào)整分析方法的認(rèn)定范圍，在不同的色譜柱極性條件下，茶青中檢出的疑似峰分別被判定為不同物質(zhì)。

2.3 茶葉假陽性峰判定結(jié)果

通過兩種變量前處理方法不同、色譜柱極性不同的交叉試驗(yàn)，驗(yàn)證出在此條件下性質(zhì)較接近的5種標(biāo)準(zhǔn)品及茶青樣品的出峰情況，得出峰時(shí)間及峰面積，見表1。

此茶青通過Rtx-5柱檢出峰出峰時(shí)間判定被認(rèn)定為甲基對硫磷；通過Rtx-50柱檢出被認(rèn)定為殺螟硫磷；通過Rtx-1701柱檢出被認(rèn)定為毒死蜱。通過不同極性色譜柱的分離比對得出不同結(jié)論可看出，此峰不是5種有機(jī)磷類任何一種，可視為假陽性峰。

綜上所述，在檢測條件不足的情況下，通過前處理方法的不同，無法排查茶青有機(jī)磷試驗(yàn)中疑似峰的性質(zhì)。但可以通過不同極性色譜柱進(jìn)樣得出不同判定結(jié)果的方法證明是否為假陽性峰。

3 結(jié)論

通過不同極性的色譜柱比對結(jié)果，可以證明茶葉中出現(xiàn)的該類物質(zhì)不是上述茶葉必檢的5類有機(jī)磷類物質(zhì)中的任何一種。由試驗(yàn)可得出結(jié)論，以GB 2763—2016 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》國家標(biāo)準(zhǔn)中推薦的茶葉中有機(jī)磷類前處理方法GB/T 14553—2003 和NY/T 761—2008對茶青進(jìn)行處理，對疑似峰的排除沒有明顯的效果，但是可以通過雙柱或三柱氣相色譜檢測法等對此類疑似的陽性峰進(jìn)行逐一排查。此類方法對于設(shè)備和人員操作要求都不是很高，可以用作判斷茶葉檢出峰是否為假陽性峰的參考，以提高茶葉農(nóng)藥殘留檢測的準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] 周爽，趙偉軍.有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥在蔬菜中的多種殘留組分的分析[J].吉林林業(yè)科技，2011（05）：1-3.

[ 2 ] 熊英，楊俊英，康月瓊，等.蔬菜中13種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的雙柱法氣相色譜測定[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009（02）：528-531.

[ 3 ] 陳智東，陳浩.一種快速測定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的氣相色譜前處理方法[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2008（10）：20-22.

[ 4 ] 蔣迎，魯成迎，汪慶華，等.茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留雙柱氣相色譜檢測技術(shù)初探[J].中國茶葉加工，2005（03）：41-42，44.

（收稿日期：2018-05-10）