膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中IMP3、CD164的表達(dá)及臨床意義

吳景　王婧婧　李曉潔

[摘要] 目的 探討惡性腫瘤相關(guān)基因IMP3、唾液酸黏蛋白CD164在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）組織中的表達(dá)及臨床意義。 方法 收集2011年1月～2015年7月安徽省立醫(yī)院119例GBM石蠟包埋樣本，進(jìn)行全自動(dòng)免疫組化檢測(cè)IMP3、CD164的表達(dá)，并與臨床病理因素以及患者的生存情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 IMP3、CD164的高表達(dá)率分別為69.7%（83/119）、81.5%（97/119），二者表達(dá)水平呈正相關(guān)（r = 0.252，P = 0.006）。在與臨床資料關(guān)系的分析中，IMP3表達(dá)與表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）呈正相關(guān)（r = 0.242，P = 0.008），與患者性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤部位、Ki67增殖指數(shù)均無(wú)顯著相關(guān)性（P > 0.05）。CD164表達(dá)與患者年齡（r = 0.285，P = 0.002）、EGFR（r = 0.249，P = 0.006）呈正相關(guān)，與其他不相關(guān)（P > 0.05）。CD164高表達(dá)者總生存期（OS）明顯短于低表達(dá)者（P = 0.004），單獨(dú)分析IMP3與OS無(wú)顯著相關(guān)性（P = 0.056）。年齡、CD164是GBM的獨(dú)立預(yù)后因素（P = 0.036、0.005）。 結(jié)論 GBM中CD164的表達(dá)與IMP3關(guān)系密切，CD164可作為預(yù)測(cè)GBM預(yù)后不良的獨(dú)立因素。

[關(guān)鍵詞] 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；IMP3；CD164；總生存期

[中圖分類號(hào)] R739.41 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2018）05（a）-0004-05

Expression and clinical significance of IMP3 and CD164 in glioblastomas

WU Jing1，2 WANG Jingjing2 LI Xiaojie2 HE Jie2，3

1.College of Basic Medicine， Xinxiang Medical University， He'nan Province， Xinxiang 453000， China； 2.Pathology Department， Anhui Provincial Cancer Hospital， Anhui Province， Hefei 230001， China； 3.Pathology Department， Anhui Provincial Hospital， Anhui Province， Hefei 230001， China

[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of the oncogene IMP3 and sialomucin CD164 in glioblastoma （GBM） tissues. Methods One hundred and nineteen GBM paraffin-embedded samples from January 2011 to July 2015 in Anhui Provincial Hospital were collected. The expression of IMP3 and CD164 was detected by automated immunohistochemistry. The results were analyzed with clinical and pathological factors and the survival of patients. Results The high expression rates of IMP3 and CD164 were 69.7% （83/119） and 81.5% （97/119） respectively. There was a positive correlation between the two expression levels （r = 0.252， P = 0.006）. In the connected analysis with clinical data， the expression of IMP3 was positively correlated with EGFR state （r = 0.242， P = 0.008）， and was not significantly related to the gender， age， tumor size， tumor location and Ki67 proliferation index （P > 0.05）. CD164 expression was positively correlated with age （r = 0.285，P = 0.002） and EGFR （r = 0.249，P = 0.006）， not other factors （P > 0.05）. The overall survival （OS） of patients with CD164 high expression were significantly shorter than those with low expression （P = 0.004）. There was no significant correlation between IMP3 and OS alone （P = 0.056）. Age and CD164 were independent prognostic factors of GBM （P = 0.036， 0.005）. Conclusion The expression of CD164 in GBM is closely related to IMP3， and CD164 can be used as an independent predictor of poor prognosis of GBM.

[Key words] Glioblastoma； IMP3； CD164； Overall survival

膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma，GBM）是成人顱內(nèi)惡性程度最高的原發(fā)性腫瘤，其浸潤(rùn)性生長(zhǎng)能力強(qiáng)，常侵犯鄰近腦組織，手術(shù)無(wú)法全部切除。術(shù)前病史短（半數(shù)以上<3個(gè)月），病程進(jìn)展迅速，術(shù)后即使輔以放療和化療，復(fù)發(fā)間隔期也很少超過(guò)1年，中位生存期約15個(gè)月[1]。為更深入地認(rèn)識(shí)GBM的臨床生物學(xué)行為以指導(dǎo)臨床預(yù)后，并尋求新的靶向治療分子而需要展開(kāi)更充分的研究。

RNA結(jié)合蛋白（RNA-binding proteins，RBPs）介導(dǎo)的基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄控制對(duì)于確定腫瘤細(xì)胞命運(yùn)至關(guān)重要，是癌癥發(fā)生的主要決定因素之一。胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3（insulin-like growth factor-Ⅱ mRNA-binding protein 3，IMP3，又稱IGF2BP3），最初在胰腺癌組織中高水平表達(dá)而被鑒定，后逐漸發(fā)現(xiàn)在許多癌癥中被重新合成并顯著上調(diào)，大量文獻(xiàn)報(bào)道IMP3參與多種組織細(xì)胞的增殖、黏附及遷移，被認(rèn)為與腫瘤整體預(yù)后差有關(guān)[2]。CD164糖蛋白（the cluster of differentiation 164，CD164，又稱MGC-24/endolyn）是唾液酸黏蛋白家族的成員。研究發(fā)現(xiàn)，CD164涉及人類多種惡性腫瘤的維持和進(jìn)展[3-6]，然而CD164在GBM中的研究甚少報(bào)道。CD164與GBM腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系，仍未可知。本研究利用全自動(dòng)免疫組化法檢測(cè)IMP3和CD164在119例GBM組織中的表達(dá)，分析其與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，結(jié)合文獻(xiàn)探討其在GBM中的生物學(xué)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年1月～2015年7月安徽省立醫(yī)院病理科存檔的GBM石蠟組織標(biāo)本119例（男79例，女40例，中位年齡55歲）及因腦血管畸形手術(shù)切除的非瘤腦組織20例。所有組織均經(jīng)10%中性甲醛固定，石蠟包埋。所有患者術(shù)前均未行放療、化療等抗腫瘤治療。GBM標(biāo)本的入選依據(jù)世界衛(wèi)生組織（2016）中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分類標(biāo)準(zhǔn)[7]，由兩位病理醫(yī)師經(jīng)雙盲法重新復(fù)診切片。采用電話聯(lián)系方式進(jìn)行定期隨訪，隨訪截止日期是2017年8月31日。隨訪內(nèi)容包括：①一般情況；②是否復(fù)發(fā)及復(fù)發(fā)后是否繼續(xù)治療；③是否存活，若死亡，具體死亡原因及時(shí)間。從患者第1次手術(shù)到GBM死亡日期或隨訪截止日期的時(shí)間間隔計(jì)為總生存期（OS）。全部患者的OS為22～1987 d，平均463 d，中位生存期372 d。本研究中使用的組織標(biāo)本經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 主要試劑

一抗：兔抗人多克隆抗體IMP3及CD164（工作濃度分別為1∶50和1∶100）購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)公司；二抗試劑盒及脫蠟液、抗原修復(fù)液、清洗緩沖液均購(gòu)自Ventana公司；蒸餾水、無(wú)水乙醇、二甲苯、0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）、中性樹(shù)膠均為國(guó)產(chǎn)試劑。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

采用全自動(dòng)免疫組化檢測(cè)。石蠟包埋樣本3 μm厚度連續(xù)切片，60℃恒溫箱烤片2 h，Ventana Bench Maker XT全自動(dòng)免疫組化儀進(jìn)行染色。用已知陽(yáng)性對(duì)照片作為陽(yáng)性對(duì)照，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

由兩位病理醫(yī)師對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行判讀。IMP3染色定位于細(xì)胞質(zhì)，CD164定位于細(xì)胞核。每張切片選取10個(gè)高倍視野，以最高得分納入統(tǒng)計(jì)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)包括：按比例評(píng)分（每個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例）：≤10%，計(jì)1分；>10%～50%，計(jì)2分；>50%～75%，計(jì)3分；>75%，計(jì)4分。按染色強(qiáng)度評(píng)分：無(wú)染色、淺黃色、棕黃色、棕褐色分別計(jì)0、1、2、3分。將兩項(xiàng)分值相加得到最終得分：0～3分為低表達(dá)，4～7分為高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分比表示，不同組間差異性比較采用χ2檢驗(yàn)及Fisher精確檢驗(yàn)法。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。采用Kaplan-Meier法估計(jì)生存曲線，并使用Log-rank檢驗(yàn)比較生存曲線是否有差異。采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行單因素和多因素預(yù)后分析，并計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)比（HR）。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IMP3、CD164在GBM組織中的表達(dá)

IMP3免疫組化染色定位于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)，CD164染色定位于腫瘤細(xì)胞核。見(jiàn)圖1（封三）。119例GBM組織中，IMP3的高表達(dá)率為69.7%（83/119），CD164的高表達(dá)率為81.5%（97/119），IMP3和CD164均高表達(dá)的比率為61.3%（73/119），兩者的表達(dá)呈正相關(guān)（P = 0.006）。見(jiàn)表1。20例因腦血管畸形手術(shù)切除的非瘤腦組織中，IMP3和CD164均不染色或局灶微弱染色，高表達(dá)率均為0（0/20）。

2.2 IMP3、CD164與GBM臨床病理因素的相關(guān)性

為闡明GBM中IMP3和CD164的臨床意義，分析119例GBM組織中IMP3、CD164的表達(dá)與患者臨床病理因素的相關(guān)性。見(jiàn)表2。結(jié)果顯示IMP3與EGFR呈正相關(guān)（r = 0.242，P = 0.008），與患者性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤部位、Ki67增殖指數(shù)均無(wú)明顯相關(guān)性（P > 0.05）。CD164表達(dá)與患者年齡（r = 0.285， P = 0.002）、表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）（r = 0.249，P = 0.006）呈正相關(guān)，與其他指標(biāo)無(wú)明顯相關(guān)性（P > 0.05）。

2.3 IMP3及CD164表達(dá)與GBM預(yù)后的關(guān)系

為進(jìn)一步確定IMP3和CD164與預(yù)后的關(guān)系，采用Kaplan-Meier法和Log-rank檢驗(yàn)分析119例GBM患者IMP3、CD164表達(dá)水平與OS的關(guān)系。分析結(jié)果顯示IMP3與GBM患者OS無(wú)明顯相關(guān)性（P = 0.056）； CD164高表達(dá)患者，OS明顯短于CD164低表達(dá)者（P = 0.004）。見(jiàn)圖2。

2.4 GBM生存

對(duì)OS有顯著影響的因素為患者年齡（P = 0.038）、CD164（P = 0.005），而患者性別、腫瘤直徑、腫瘤部位、EGFR、Ki67及IMP3表達(dá)情況對(duì)患者OS均無(wú)顯著影響。將單因素分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素以及可能的影響因素IMP3納入多因素Cox回歸模型中，發(fā)現(xiàn)患者年齡（P = 0.036）、CD164（P = 0.005）是GBM預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見(jiàn)表3。

3 討論

GBM的侵襲性、高復(fù)發(fā)率及普遍耐藥性是其預(yù)后不良的主要原因，與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞（glioblastoma stem-like cells，GSC）的生物特性有關(guān)。GSC是GBM亞群，以高遷移潛能和治療耐藥性而著稱[8]，對(duì)GBM的生長(zhǎng)、放化療的敏感性和腫瘤復(fù)發(fā)的可能性具有重要作用[9]。研究證明CD164參與調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞的增殖、黏附和遷移，并維持祖細(xì)胞的未分化狀態(tài)[10]，且增加人臍血CD133+細(xì)胞遷移[11]，而CD133+也是GSC特異性分子標(biāo)志物。另?yè)?jù)報(bào)道，CD164過(guò)表達(dá)顯著增加肺上皮細(xì)胞的致瘤性及干細(xì)胞性質(zhì)，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和增強(qiáng)藥物抵抗性[12]。我們檢測(cè)CD164在GBM組織中高水平表達(dá)，因而猜測(cè)CD164可能與GSC的自我更新、遷移及耐藥機(jī)制相關(guān)，從而導(dǎo)致GBM的不良預(yù)后。

另外，CD164已被證明參與多種實(shí)體癌癥的增殖和侵襲，包括肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌和前列腺癌。Huang等[4]評(píng)估了CD164在97例患者卵巢表面上皮細(xì)胞中的作用，發(fā)現(xiàn)高表達(dá)CD164與高級(jí)別卵巢腫瘤、晚期疾病和腫瘤轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。他們提出通過(guò)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α/趨化因子受體4型（SDF-1α/CXCR4）軸參與卵巢癌進(jìn)展，CD164表達(dá)增加，促進(jìn)腫瘤發(fā)生。CD164在人卵巢上皮細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)促進(jìn)了細(xì)胞增殖和抑制凋亡，并在小鼠異種移植模型中證實(shí)了CD164的致瘤性效應(yīng)。Tang等[5]揭示在人結(jié)腸癌細(xì)胞系中CD164表達(dá)的降低顯著抑制了細(xì)胞增殖，遷移和轉(zhuǎn)移。Havens等[6]分析了CD164在前列腺癌細(xì)胞系中的作用，阻斷CD164削弱了前列腺癌細(xì)胞黏附到骨髓內(nèi)皮細(xì)胞并侵入細(xì)胞外基質(zhì)的能力。此外，最近報(bào)道，在膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87的研究中發(fā)現(xiàn)，CD164 mRNA和蛋白質(zhì)水平均顯著增加，敲低CD164抑制U87細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡[13]。這些研究表明CD164可能作為調(diào)節(jié)腫瘤進(jìn)展的關(guān)鍵分子。雖然CD164的具體作用機(jī)制還不清楚，本研究中CD164作為GBM預(yù)后不良的獨(dú)立因子，提示CD164與GBM的進(jìn)展密切相關(guān)。

IMP3是進(jìn)化上保守的mRNA結(jié)合蛋白家族的成員，其調(diào)節(jié)mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)、翻譯和轉(zhuǎn)化。越來(lái)越多的研究證實(shí)，RBP在調(diào)節(jié)RNA剪接、穩(wěn)定性、定位、修飾和翻譯中的作用[14]。IMP3是一種腫瘤胚胎性RBP，與腫瘤遷移、侵襲、血管生成、癌癥干細(xì)胞樣細(xì)胞（cancer stem-like cells，CSCs）維持有關(guān)，并與腫瘤惡性程度和復(fù)發(fā)性有關(guān)[15-16]。已報(bào)道IMP3在多種人類惡性腫瘤中過(guò)表達(dá)，包括卵巢癌[17]、結(jié)直腸癌[18]、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌[19]、肺癌[20]、食管癌[21]、胃癌[22]等。一項(xiàng)對(duì)8877個(gè)人類癌癥組織的微陣列研究結(jié)果顯示，IMP3表達(dá)是大多數(shù)人類實(shí)體癌類型的共同特征[23]。另一項(xiàng)關(guān)于腫瘤預(yù)后的薈萃分析顯示，IMP3高表達(dá)與大多數(shù)實(shí)體瘤預(yù)后不良有關(guān)[24]。最新的研究，在膠質(zhì)瘤中，IMP3與p65（轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的異二聚體亞基）mRNA的3′非編碼區(qū)（UTR）結(jié)合并增強(qiáng)其翻譯，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移[25]。IMP3作為一種RBP，可以和多種目標(biāo)mRNA結(jié)合[26]。在這里，筆者發(fā)現(xiàn)GBM中IMP3與CD164具有顯著相關(guān)性，筆者懷疑在GBM中，IMP3除了和p65 mRNA結(jié)合以外，有可能同時(shí)與CD164的mRNA結(jié)合，在翻譯層面的調(diào)控促進(jìn)GBM的腫瘤進(jìn)展。

總結(jié)本研究，IMP3和CD164在GBM組織中高表達(dá)，且CD164與GBM患者OS顯著相關(guān)，CD164可作為GBM預(yù)后不良的預(yù)測(cè)因素。此外，CD164與IMP3表達(dá)顯著正相關(guān)，提示GBM中CD164的表達(dá)與IMP3密切相關(guān)，推測(cè)可能由IMP3作為轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控因子，介導(dǎo)了CD164在GBM中的表達(dá)。然而，這只是一個(gè)初步現(xiàn)象學(xué)研究，并沒(méi)有具體的分子機(jī)制的研究，需要進(jìn)一步探索在GBM中IMP3與CD164轉(zhuǎn)錄物的相互作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Lwin Z，MacFadden D，Al-Zahrani A，et al. Glioblastoma management in the temozolomide era：have we improved outcome？ [J]. J Neurooncol，2013，115（2）：303-310.

[2] Findeis-Hosey JJ，Xu H. Insulin-like growth factor Ⅱ-messenger RNA-binding protein-3 and lung cancer [J]. Biotech Histochem，2012，87（1）：24-29.

[3] Lin J，Xu K，Wei J，et al. MicroRNA-124 suppresses tumor cell proliferation and invasion by targeting CD164 signaling pathway in non-small cell lung cancer [J]. Gene Ther，2016，2（1）. Pii：6.

[4] Huang AF，Chen MW，Huang SM，et al. CD164 regulates the tumorigenesis of ovarian surface epithelial cells through the SDF-1alpha/CXCR4 axis [J]. Mol Cancer，2013，12（1）：115.

[5] Tang J，Zhang L，She X，et al. Inhibiting CD164 expression in colon cancer cell line HCT116 leads to reduced cancer cell proliferation，mobility，and metastasis in vitro and in vivo [J]. Cancer Invest，2012，30（5）：380-389.

[6] Havens AM，Jung Y，Sun YX，et al. The role of sialomucin CD164（MGC-24v or endolyn）in prostate cancer metastasis [J]. BMC Cancer，2006，6：195.

[7] Neuropathology Group of Pathology Branch of the Chinese Medical A. World Health Organization classification of tumours of the central nervous system：a summary [J]. Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi，2016，45（11）：745-747.

[8] Wang Z，Xue Y，Wang P，et al. MiR-608 inhibits the migration and invasion of glioma stem cells by targeting macrophage migration inhibitory factor [J]. Oncol Rep，2016，35（5）：2733-2742.

[9] Codrici E，Enciu AM，Popescu ID，et al. Glioma Stem Cells and Their Microenvironments： Providers of Challenging Therapeutic Targets [J]. Stem Cells Int，2016，2016：5728438.

[10] Watt SM，Buhring HJ，Rappold I，et al. CD164，a novel sialomucin on CD34（+）and erythroid subsets，is located on human chromosome 6q21 [J]. Blood，1998，92（3）：849-866.

[11] Forde S，Tye BJ，Newey SE，et al. Endolyn（CD164）modulates the CXCL12-mediated migration of umbilical cord blood CD133+ cells [J]. Blood，2007，109（5）：1825-1833.

[12] Chen WL，Huang AF，Huang SM，et al. CD164 promotes lung tumor-initiating cells with stem cell activity and determines tumor growth and drug resistance via Akt/mTOR signaling [J]. Oncotarget，2017，8（33）：54115-54135.

[13] Tu M，Cai L，Zheng W，et al. CD164 regulates proliferation and apoptosis by targeting PTEN in human glioma [J]. Mol Med Rep，2017，15（4）：1713-1721.

[14] Brinegar AE，Cooper TA. Roles for RNA-binding proteins in development and disease [J]. Brain Res，2016，1647：1-8.

[15] Samanta S，Sun H，Goel HL，et al. IMP3 promotes stem-like properties in triple-negative breast cancer by regulating SLUG [J]. Oncogene，2016，35（9）：1111-1121.

[16] Palanichamy JK，Tran TM，Howard JM，et al. RNA-binding protein IGF2BP3 targeting of oncogenic transcripts promotes hematopoietic progenitor proliferation [J]. J Clin Invest，2016，126（4）：1495-1511.

[17] Zhu Q，Qu Y，Zhang Q，et al. IMP3 is upregulated in primary ovarian mucinous carcinoma and promotes tumor progression [J]. Am J Transl Res，2017，9（7）：3387-3398.

[18] Huang X，Wei Q，Liu J，et al. Analysis of IMP3 expression in primary tumor and stromal cells in patients with colorectal cancer [J]. Oncol Lett，2017，14（6）：7304-7310.

[19] Riener MO，Hoegel J，Iro H，et al. IMP3 and p16 expression in squamous cell carcinoma of the head and neck：A comparative immunohistochemical analysis [J]. Oncol Lett，2017，14（2）：1665-1670.

[20] Zhao W，Lu D，Liu L，et al. Insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 3（IGF2BP3）promotes lung tumorigenesis via attenuating p53 stability [J]. Oncotarget，2017，8（55）：93672-93687.

[21] Zhang J，Ji Q，Jiao C，et al. IGF2BP3 as a potential tissue marker for the diagnosis of esophageal high-grade intraepithelial neoplasia [J]. Onco Targets Ther，2017，10：3861-3866.

[22] Zhou Y，Huang T，Siu HL，et al. IGF2BP3 functions as a potential oncogene and is a crucial target of miR-34a in gastric carcinogenesis [J]. Mol Cancer，2017，16（1）：77.

[23] Burdelski C，Jakani-Karimi N，Jacobsen F，et al. IMP3 overexpression occurs in various important cancer types and is linked to aggressive tumor features： A tissue microarray study on 8，877 human cancers and normal tissues [J]. Oncol Rep，2018，39（1）：3-12.

[24] Chen L，Xie Y，Li X，et al. Prognostic value of high IMP3 expression in solid tumors：a meta-analysis [J]. Onco Targets Ther，2017，10：2849-2863.

[25] Bhargava S，Visvanathan A，Patil V，et al. IGF2 mRNA binding protein 3（IMP3）promotes glioma cell migration by enhancing the translation of RELA/p65 [J]. Oncotarget，2017，8（25）：40469-40485.

[26] Taniuchi K，F(xiàn)urihata M，Hanazaki K，et al. IGF2BP3-mediated translation in cell protrusions promotes cell invasiveness and metastasis of pancreatic cancer [J]. Oncotarget，2014，5（16）：6832-6845.

（收稿日期：2018-02-02 本文編輯：張瑜杰）