IMD、NGAL和RBP在妊娠高血壓疾病早期腎損傷檢測中的意義

朱 怡

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院，上海 200137)

妊娠高血壓疾病是產(chǎn)科的常見病和多發(fā)病，是妊娠期的特發(fā)疾病，可引起全身各系統(tǒng)各臟器灌流減少而嚴(yán)重危害母嬰安全，腎臟為受其損害的主要靶器官之一[1]。妊娠高血壓疾病早期腎功能損害的早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療是逆轉(zhuǎn)腎功能進(jìn)程的關(guān)鍵，對于母嬰安全具有重要意義。在腎功能損傷的早期，尿素氮和血清肌酐均在正常范圍，對診斷腎功能損害并不敏感[2]。中葉素(IMD)參與了高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展過程，是否參與了腎臟功能的損傷未見報告[3]；中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)是脂質(zhì)運載蛋白家族成員，在妊娠高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展中具有重要意義[4]；視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)是一類可以運載維生素A的小分子結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)視黃醇和視黃酸的轉(zhuǎn)運，與妊娠高血壓疾病有關(guān)[5]。本研究觀察了妊娠高血壓疾病早期腎功能損傷患者IMD、NGAL和RBP水平的變化，并分析其臨床意義。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇2016年1—12月在我院就診的妊娠高血壓疾病患者85例，為妊娠高血壓疾病組，均符合妊娠高血壓疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡23～45(28.37±3.64)歲，孕周36～41(38.42±1.12)周，孕次1～4(2.16±0.43)次，產(chǎn)次0～3(1.68±0.43)次；根據(jù)妊娠高血壓的嚴(yán)重程度分為妊娠高血壓組16例，輕度子癇前期組37例和重度子癇前期組32例；根據(jù)內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)將患者分為腎功能異常組(Ccr≥80 mL/min)45例和腎功能正常組(Ccr<80 mL/min)40例。選擇同期在我院體檢的正常妊娠者45例，為正常妊娠組，年齡23～45(28.42±3.18)歲，孕周36～41(38.39±1.09)周，孕次1～4(2.31±0.38)次，產(chǎn)次0～3(1.59±0.39)次。選擇在我院行健康體檢者30例，為健康對照組，年齡20～46(28.41±3.19)歲。所有納入者均知情同意，臨床資料完整。排除原發(fā)性高血壓和腎臟疾病患者，肝炎、結(jié)核和急性肺炎等急慢性感染者，心肝腎等重要臟器功能障礙者，糖尿病患者，免疫性疾病和惡性腫瘤等慢性疾病者。3組年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1尿液標(biāo)本收集與檢測 收集受試者晨尿10 mL，予以高速離心3 000 r/min，離心10 min，收集其上清液，在自動生化儀上采用免疫透射比濁法測定RBP和NGAL，試劑盒采用科華生物產(chǎn)品，NGAL的檢測范圍為1～40 μg/L。嚴(yán)格按照試劑盒配套標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制，批內(nèi)變異系數(shù)為4.6%，批間系數(shù)為9.1%。

1.2.2血液標(biāo)本的留取和指標(biāo)的檢測 取空腹肘靜脈血15 mL，放入抗凝管中，以3 000 r/min離心10 min，收集血清，置于-70 ℃冰箱中保存。采用ELISA的方法測定血清IMD水平。用人IMD抗體包裹微孔板，制成固態(tài)相，加入血清樣品，在與HRP標(biāo)記的IMD抗體結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后加底物顯色。用酶標(biāo)儀在450 nm處測定吸收光(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品的濃度。

1.3觀察指標(biāo) 觀察妊娠高血壓疾病組、正常妊娠組和健康對照組血清IMD、尿液NGAL和RBP水平的變化，分析血清IMD、尿液NGAL和RBP水平與妊娠高血壓疾病的嚴(yán)重程度和腎功能損害的關(guān)系及其指標(biāo)之間的相互關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1各組血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平比較妊娠高血壓疾病組的血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平均明顯高于正常妊娠組和健康對照組(P均<0.05)，而正常妊娠組各指標(biāo)水平均明顯高于健康對照組(P均<0.05)。見表1。

表1 各組血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平比較

注：①與健康對照組比較，P<0.05；②與正常妊娠組比較，P<0.05。

2.2血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平與妊娠高血壓疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系 血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平隨著妊娠高血壓嚴(yán)重程度的增加明顯升高(P均<0.05)。見表2。

2.3血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平與妊娠高血壓疾病腎功能損害的關(guān)系 妊娠高血壓疾病患者腎功能異常組的血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平均明顯高于腎功能正常組(P均<0.05)。見表3。

表2 不同疾病嚴(yán)重程度血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平比較

注：①與妊娠高血壓組比較，P<0.05；②與輕度子癇前期組比較，P<0.05。

表3 血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平與妊娠高血壓疾病腎功能損害的關(guān)系

注：①與腎功能正常組比較，P<0.05。

2.4妊娠高血壓疾病患者血清IMD、尿NGAL和尿RBP水平之間的相關(guān)性 妊娠高血壓疾病患者血清IMD水平與尿NGAL(r=0.754，P<0.05)和尿RBP(r=0.637，P<0.05)水平正相關(guān)，而尿NGAL水平與尿RBP水平呈正相關(guān)(r=0.578，P<0.05)。

3 討 論

妊娠高血壓疾病是多因素引起的一種疾病，發(fā)病時全身小血管痙攣和收縮，引起周圍血管阻力增大，全身器官灌注減少，引起器官臟器損傷。其中以腎臟受損最為明顯，表現(xiàn)為腎小球痙攣，腎血流動力學(xué)異常，造成腎小管損害，血漿蛋白漏出較多，引起腎功能降低，進(jìn)一步發(fā)展可以引起孕婦腎臟損害，甚至發(fā)生腎衰竭，影響母嬰安全[6]。因此，妊娠高血壓疾病孕婦的腎損害早期診斷，早期干預(yù)，改善母嬰結(jié)局對保障母嬰安全具有重要的意義[7]。目前監(jiān)測腎功能損害主要通過血清肌酐和尿素氮，但這兩個指標(biāo)只能間接地反映腎小球濾過功能的損傷程度，并且受到肌肉量和蛋白質(zhì)攝入量的影響，與腎小球的實際濾過功能具有一定的誤差[8-9]。當(dāng)尿素氮和血清肌酐輕度升高時，腎功能儲備已基本喪失，失去了對腎損傷早期診斷與治療的時機，故尋找妊娠高血壓患者腎功能損害早期診斷的指標(biāo)成為研究的熱點。

IMD是2004年發(fā)現(xiàn)的降鈣素基因相關(guān)肽超家族成員，為循環(huán)系統(tǒng)的重要調(diào)節(jié)因子，參與高血壓、細(xì)胞凋亡、缺血再灌注損傷和氧化應(yīng)激等的病理生理過程。有研究表明外周靜脈注射IMD后，引起腸系膜、腎臟血管和尾動脈血管舒張，血壓出現(xiàn)明顯下降，其降壓的機制可能與循環(huán)系統(tǒng)中的cAMP和 NO水平升高，抑制血管平滑肌過度增殖有關(guān)[10]。Chauhan等[3]報道認(rèn)為，原發(fā)性高血壓患者的IMD水平升高與高血壓嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，其參與高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展過程。IMD升高是一種自我防衛(wèi)機體的反應(yīng)，對機體的血壓升高具有拮抗作用，并認(rèn)為IMD既是一種循環(huán)激素，又是一種局部激素，與多種縮血管物質(zhì)形成一種動態(tài)平衡。李靜等[11]報道，高血壓合并腎功能損傷患者血清IMD水平明顯高于腎無損傷患者。本研究發(fā)現(xiàn)妊娠高血壓疾病組血清IMD水平明顯高于正常妊娠組和健康對照組，且隨著妊娠高血壓疾病嚴(yán)重程度升高血清IMD明顯升高；妊娠高血壓疾病腎功能異常組患者血清IMD水平明顯高于腎功能正常組患者。說明IMD參與了妊娠高血壓疾病發(fā)生發(fā)展過程，且IMD與妊娠高血壓疾病的嚴(yán)重程度具有明顯的相關(guān)性，IMD水平能夠反映機體腎臟功能，提示IMD是評估妊娠高血壓疾病早期腎損傷的重要指標(biāo)。

NGAL是載脂蛋白家族的新成員，是一種小分子分泌性蛋白，在人體廣泛分布，不僅在中性粒細(xì)胞中，也會出現(xiàn)在特定的上皮細(xì)胞中。在泌尿系統(tǒng)分布也非常局限，主要分布在近曲小管上皮，而腎小球及腎單位的其他部分未見明顯表達(dá)。在腎臟缺血和急性腎損傷時，尿液中的NGAL水平出現(xiàn)明顯增加。有研究顯示NGAL水平與腎臟的損傷具有明顯的相關(guān)性，并且不受其他因素的影響，對高血壓性損傷的診斷較血清肌酐更具有優(yōu)勢[12]。本研究結(jié)果表明妊娠高血壓疾病患者尿液NGAL水平明顯高于正常妊娠和健康體檢者，其水平與妊娠高血壓疾病的嚴(yán)重程度呈明顯相關(guān)性，妊娠高血壓疾病合并腎損傷患者尿液中的NGAL水平明顯高于腎功能正常的患者。說明尿液NGAL水平參與了妊娠高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展過程，其水平能夠反映妊娠高血壓疾病的嚴(yán)重程度，是反映腎臟功能的重要指標(biāo)，與文獻(xiàn)[13]報道一致。

RBP是由肝臟合成的低分子量蛋白，主要功能是轉(zhuǎn)運視黃醇到上皮細(xì)胞，正常情況下血液中90%的RBP與甲狀腺結(jié)合蛋白結(jié)合，無法被腎小球濾出，而游離的RBP在近曲小管幾乎完全被從吸收，故正常尿液中RBP含量極少，而腎臟損傷時，可以導(dǎo)致尿液中的RBP水平明顯升高，說明RBP可以敏感地反映腎小管的重吸收功能，是腎早期損傷的重要指標(biāo)[14]。本研究發(fā)現(xiàn)妊娠高血壓疾病患者尿液中RBP水平明顯高于正常妊娠和健康對照組，且尿液RBP水平與妊娠高血壓疾病的嚴(yán)重程度具有明顯相關(guān)性，妊娠高血壓疾病腎損傷者尿液RBP水平明顯高于腎功能正常者，說明RBP參與了妊娠高血壓疾病發(fā)生發(fā)展過程，是妊娠高血壓疾病合并腎損傷的早期診斷指標(biāo)，這與文獻(xiàn)[15]結(jié)果一致。

本研究還發(fā)現(xiàn)妊娠高血壓疾病患者血清IMD水平與尿NGAL和尿RBP水平正相關(guān)，而尿NGAL水平與尿RBP水平呈正相關(guān)，說明妊娠高血壓疾病患者IMD、NGAL和RBP水平存在著某種關(guān)系，其確切關(guān)系需要進(jìn)一步研究。

總之，IMD、NGAL和RBP參與了妊娠高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展過程，對于妊娠高血壓疾病早期腎損傷的早期診斷具有重要臨床價值。