XN-3000血液分析儀三種方法檢測低值血小板結(jié)果比較

周萍，劉娜，焦瑞寶，章文

(銅陵市人民醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，安徽 銅陵 244009)

Sysmex XN-3000全自動血液分析流水線由XN-3000血液分析儀、SP 10血涂片制備儀和流水線軌道三部分組成，血液分析儀部分有三個(gè)通道可以分析血小板(PLT)數(shù)值。PLT-I通道是以電阻抗法檢測PLT數(shù)值，PLT-O通道是以激光法對熒光染料染色后的網(wǎng)織紅細(xì)胞和PLT進(jìn)行檢測，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)數(shù)值和PLT數(shù)值，新增的PLT-F通道也是激光法檢測，但所用染料是特殊的核酸染料，單獨(dú)對PLT進(jìn)行核酸染色后檢測。本文以PLT計(jì)數(shù)的參考方法——手工法為對比的參照方法，以PLT減低程度不同分組比較，結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本來源2015年12月至2016年5月銅陵市人民醫(yī)院住院患者118例，其中男76例，女42例，年齡26～92歲。所有樣本PLT值均≤60×109·L-1。

1.2標(biāo)本采集真空靜脈采血以EDTA-K2抗凝，抗凝劑與血液比例嚴(yán)格符合標(biāo)準(zhǔn)，避免標(biāo)本有凝塊和溶血的情況。

1.3儀器和試劑血液分析儀為Sysmex公司生產(chǎn)XN-3000型全自動血液分析流水線，全部檢測試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品均為Sysmex公司產(chǎn)的儀器原裝配套試劑。顯微鏡為Olympus CX31型，手工法稀釋液按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]配制。

1.4方法每天在日常工作之前以校準(zhǔn)品校正儀器，先檢測不同水平的定值質(zhì)控物以保證儀器處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)。樣本按參考方法手工法PLT值結(jié)果的高低分為四組：PLT≤15×109·L-1組21例、15×109·L-1

表1 四組樣本PLT值比較

注：4種方法的比較為單因素重復(fù)測量方差分析

2 結(jié)果

2.1四種方法結(jié)果比較四組樣本分別以PLT-I法、PLT-O法、PLT-F法、手工法檢測的PLT值之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2PLT值相關(guān)性分析PLT-F法與手工法相關(guān)系數(shù)最高，r=0.995 7，P<0.05；較低的為PLT-I法，其與手工法相關(guān)系數(shù)：r=0.940 9，P<0.05；介于中間的為PLT-O法，其與手工法相關(guān)系數(shù)：r=0.962 3，P<0.05。

3 討論

住院患者的PLT值的結(jié)果異常中減低的表現(xiàn)明顯多見，有骨髓造血原因的增生減低和免疫性PLT減少的情況，也有治療藥物影響所造成的PLT破壞的情況等。由于PLT在止血和凝血方面的作用，低值PLT檢測的準(zhǔn)確性對判斷有無出血傾向很重要，準(zhǔn)確的結(jié)果對臨床用藥控制和補(bǔ)充PLT的輸注療法有重要價(jià)值。參考方法手工法雖然較為可靠，但操作相對繁瑣，不適合臨床多樣本和大規(guī)模體檢的需要，儀器檢測更為普遍和適合實(shí)際。Sysmex XN-3000全自動血液分析儀PLT-I法是根據(jù)PLT體積大小分析的電阻抗法，PLT-O法是熒光染料針對PLT α-顆粒染色后再以激光法檢測熒光強(qiáng)度，可以排除和PLT相同體積的小紅細(xì)胞和紅細(xì)胞碎片的檢測干擾，PLT-F法是以特殊的核酸染料針對PLT內(nèi)的含核酸豐富的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行標(biāo)記，對PLT體積的大小無選擇性，特別是在小體積PLT存在時(shí)標(biāo)記相對更為精確。我們以三種檢測方法在對低值PLT樣本的結(jié)果分組比較后發(fā)現(xiàn)，儀器三種方法的結(jié)果與手工法比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能因?yàn)樵诮^大多數(shù)的臨床樣本中，有小紅細(xì)胞和紅細(xì)胞碎片干擾的現(xiàn)象是少見的，低值PLT樣本中絕大多數(shù)病例的PLT的體積是正常的。

焦瑞寶等[2]研究中以Sysmex XT-2000i型血液分析儀為檢測儀器，將PLT值按照PLT-I法和PLT-O法結(jié)果誤差以10%為劃分線分群，再按高、中、低、極低值分組比較PLT-I法、PLT-O法、手工法結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)在誤差<10%群中，各組病例的三種方法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與我們的結(jié)果一致，而在誤差≥10%群中，極低值組和低值組的PLT-I法結(jié)果明顯低于PLT-O法和手工法，中值組和高值組的PLT-I法結(jié)果明顯高于PLT-O法和手工法。更多研究對其它型號血液分析儀與手工法PLT計(jì)數(shù)比較中也報(bào)道[3-4]：在低值PLT組，PLT-O檢測結(jié)果與顯微鏡計(jì)數(shù)法結(jié)果更接近，這與我們的研究結(jié)果一致。我們考慮在儀器上的兩種方法誤差明顯時(shí)可能因?yàn)榈椭到M存在PLT聚集引起假性減低的情況和高值組可能存在將小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片當(dāng)成PLT的假性增高的情況，PLT-I法無法防止這些誤差的發(fā)生。我們在實(shí)踐中的經(jīng)驗(yàn)證實(shí)，手工計(jì)數(shù)方法在確保檢驗(yàn)質(zhì)量的前提下，有著儀器法無法比擬的直觀性，這與一些研究報(bào)道[5]相差顯微鏡手工計(jì)數(shù)法準(zhǔn)確性、特異性、穩(wěn)定性較好的情況相符。另有研究[6]以紅細(xì)胞平均體積(MCV)大小分組觀察后不同范圍PLT值后發(fā)現(xiàn)MCV低于正常組存在小紅細(xì)胞干擾PLT-I法檢測引起的PLT假性增高的情況。

我們總結(jié)：在日常的工作中較為簡便有效的檢測模式是初始選擇以PLT-I法為常規(guī)模式進(jìn)行大批量樣本的檢測，如有PLT減低的病例，可以先觀察PLT體積分布的直方圖上有無分布曲線尾部抬高的情況，如有則說明可能存在小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片或

PLT聚集的干擾，在發(fā)現(xiàn)有PLT發(fā)布曲線異常的情況下，再結(jié)合PLT相關(guān)參數(shù)的觀察中如發(fā)現(xiàn)有PLT平均體積(MPV)低于或高于正常參考范圍或儀器未檢測出MPV值時(shí)，可以再用PLT-F法進(jìn)行復(fù)檢，以提高檢測的準(zhǔn)確度。在相關(guān)性分析中可以發(fā)現(xiàn)，PLT-F法與手工法的相關(guān)性更高，這與方法的染色特性有關(guān)，也與PLT-F法使用的單獨(dú)通道中，樣本用量提高至5倍計(jì)數(shù)，顆粒計(jì)數(shù)更為精確有關(guān)。

綜上所述，XN-3000 全自動血液分析儀的PLT-F法檢測的準(zhǔn)確性相比電阻抗法和PLT-O法更高，在低值PLT樣本中，在有小紅細(xì)胞或碎片的干擾情況和PLT體積異常減小的情況下，使用PLT-F法進(jìn)行復(fù)檢尤為必要。