干擾素聯(lián)合光動(dòng)力療法對(duì)尖銳濕疣患者皮損朗格漢斯細(xì)胞的影響

葉艷芬

廣東省佛山市南海區(qū)人民醫(yī)院皮膚科，廣東佛山 528200

尖銳濕疣（CA）是由人乳頭瘤病毒感染引起的性傳播疾病，常發(fā)生在肛門(mén)及外生殖器等部位，好發(fā)于中青年女性，臨床表現(xiàn)為異物感、痛、癢感或性交痛、便血等癥狀，嚴(yán)重影響了患者的正常生活[1]。目前，針對(duì)CA 主要通過(guò)光動(dòng)力療法（PDT）治療，用于治療多種腫瘤及良性皮膚病變，具有良好的臨床效果[2]，有研究表明，CA 患者皮損朗格漢斯細(xì)胞（LC）數(shù)量減少，導(dǎo)致表皮內(nèi)的免疫細(xì)胞失去活性，影響治療療效[3]。而干擾素是具有多種功能的活性蛋白質(zhì)( 主要是糖蛋白)，也是一種廣譜抗病毒劑，已被廣泛應(yīng)用于多種感染性疾病治療中[4]，但兩者聯(lián)合治療LC 效果還有待考究，對(duì)此，本研究通過(guò)干擾素聯(lián)合PDT 治療CA，探討其對(duì)LC 的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013 年12 月～ 2016 年12 月本院收治的 CA 患者 100 例，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室、影像學(xué)或 MRI 等檢查證實(shí)為 CA[5]；（2）無(wú)精神病病史；（3）無(wú)體質(zhì)過(guò)敏者；（4）患者或其家屬簽署知情同意書(shū)；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠及哺乳特殊人群；（2）院前1 個(gè)月有糖皮質(zhì)激素、免疫、抗炎、抗凝等治療史；（3）有心、肝、腎等嚴(yán)重性疾?。唬?）拒絕或終止本研究者；隨機(jī)分為干光組和單光組，每組50 例，干光組男21 例，女29例，年齡 28 ～ 70 歲，平均（49.2±20.6）歲，病程15 ～ 45d、平均（30.54±15.25）d，疣體直徑 2 ～13mm、平均（6.45±0.81）mm，數(shù)量 3 ～ 8 個(gè)、平均（5.72±0.70）個(gè)，單光組男 21 例，女 29 例，年齡28 ～ 70 歲，平均（49.2±20.6）歲，病程 14 ～ 44d、平均（30.33±15.22）d，疣體直徑 2 ～ 12mm、平均（6.45±0.67）mm，數(shù)量 2 ～ 7 個(gè)、平均（5.61±0.72）個(gè)，本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批且通過(guò)，兩組在性別、年齡、病程、疣體直徑、數(shù)量等比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患者在治療前應(yīng)保持充足的睡眠時(shí)間和良好的睡眠質(zhì)量，同時(shí)謹(jǐn)遵醫(yī)囑適當(dāng)攝入部分營(yíng)養(yǎng)，單光組給予PDT 治療，即通過(guò)0.4% 的氯己定溶液對(duì)疣體及周邊黏膜消毒，在疣體部位放置適當(dāng)大小的滴有20% 的5- 氨基酮戊酸（上海復(fù)旦張江生物醫(yī)藥股份有限公司，118g/ 瓶）溶液的脫脂棉球，范圍為覆蓋至皮損周邊外約2cm，封包3h 后，采用光動(dòng)力半導(dǎo)體激光治療儀（武漢博激世紀(jì)科技有限公司，輸出波長(zhǎng)（635±5）nm，連續(xù)可調(diào)輸出功率0～ 300mw）局部給予照射能量100mW 的100J/cm2的半導(dǎo)體激光垂直照射，20 ～ 30min/ 次，每次間隔7 ～ 10d，以患者耐受為宜，共3 個(gè)月；干光組在此基礎(chǔ)上給予干擾素治療，即皮損內(nèi)注射50 萬(wàn)U 的重組人干擾素a-2b 干擾素，隔日1 次，療程為8 周。

1.3 指標(biāo)觀察和標(biāo)準(zhǔn)[6-7]

所有患者于治療前后在皮損局部取材，10% 福爾馬林固定、制片后，依照CD1a 免疫組化試劑盒（購(gòu)自英國(guó)Novocastra Laboratiories 有限公司）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色后，鏡下見(jiàn)細(xì)胞膜或胞質(zhì)呈黃褐色樹(shù)枝狀突起的細(xì)胞即CD1a 染色陽(yáng)性的LC 取5 個(gè)LC分布最為密集的高倍視野，計(jì)數(shù)LC 數(shù)量和計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞密度=5 個(gè)視野陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)/5 個(gè)視野總細(xì)胞數(shù)，計(jì)3 次，取平均值；統(tǒng)計(jì)分析所有患者治療前后的LC 數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度、治療療效、復(fù)發(fā)率和不良反應(yīng)，其中療效標(biāo)準(zhǔn)[5]：HPV 免疫法和5% 醋酸白實(shí)驗(yàn)等臨床檢查陽(yáng)性、疣體消退＜ 30%、皮膚黏膜無(wú)改善為無(wú)效，臨床檢查陰性、疣體消退30%～ 70%、皮膚黏膜恢復(fù)為有效，臨床檢查陰性、疣體消退＞ 70%、皮膚黏膜基本恢復(fù)正常為顯效，臨床檢查陰性、疣體完全消失、皮膚黏膜正常、3 個(gè)月內(nèi)無(wú)復(fù)發(fā)為基本治愈，治療有效率=（基本治愈數(shù)+顯效數(shù)+ 有效數(shù)）/ 總例數(shù)×100%，治療3 個(gè)月后出現(xiàn)新疣體、HPV 免疫法和5% 醋酸白實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性為復(fù)發(fā)，干擾素的不良反應(yīng)：惡心、嘔吐、嗜睡等癥狀，光動(dòng)力療法的不良反應(yīng)：皮膚紅腫、水泡等癥狀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理

采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后LC數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度比較

兩組治療前LC 數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度基本相同，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；干光組和單光組治療后LC 數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度明顯高于治療前，干光組治療后LC 數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度明顯高于單光組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組治療前后LC數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度比較（± s）

組別 n LC數(shù)量（個(gè)） 陽(yáng)性細(xì)胞密度（%）治療前 治療后 治療前 治療后單光組 50 5.62±0.58 8.12±0.91 2.42±0.52 3.01±0.62干光組 50 5.60±0.57 10.85±1.21 2.44±0.55 4.84±0.73 t 0.174 12.750 0.187 13.511 P 0.894 ＜0.05 0.882 ＜0.05

2.2 兩組患者治療有效率比較。

干光組治療有效率明顯高于單光組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表 2。

2.3 兩組患者復(fù)發(fā)率比較。

隨訪(fǎng)12 個(gè)月后，干光組復(fù)發(fā)率為6.25%（3/48），明顯低于單光組的 23.81%（10/42），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.589，P＜ 0.05），見(jiàn)圖 1。

2.4 兩組不良反應(yīng)比較

干光組無(wú)惡心、嘔吐、嗜睡等不良反應(yīng)，單光組無(wú)皮膚紅腫、水泡等不良反應(yīng)。

圖1 兩組復(fù)發(fā)率比較

3 討論

CA 是臨床常見(jiàn)的性傳播疾病之一，主要表現(xiàn)為肛門(mén)生殖器增生性損害，隨著近年來(lái)生活節(jié)奏的改變，該發(fā)病率有明顯上升的趨勢(shì)，由患者全身免疫功能下降或局部免疫功能紊亂引起，表現(xiàn)為生殖器、肛周等部位出現(xiàn)丘疹、肉質(zhì)贅生物等癥狀，嚴(yán)重影響患者的身心健康[8-9]。

PDT 是一種聯(lián)合應(yīng)用5- 氨基酮戊酸及相應(yīng)光源，通過(guò)光動(dòng)力學(xué)反應(yīng)選擇性破壞病變組織的全新技術(shù)，已被廣泛應(yīng)用于各類(lèi)皮膚病的治療中，能夠有效的治療CA，但可能由于療效單一，仍有部分患者病情頑固或出現(xiàn)復(fù)發(fā)[10-11]。而干擾素是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的多功能活性蛋白質(zhì)，在細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng)，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性[12-13]。

此外，LC 是位于表皮內(nèi)的樹(shù)突狀細(xì)胞，向T 淋巴細(xì)胞提呈抗原的同時(shí)，激活T 淋巴細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答，具有較強(qiáng)的抗原提呈作用，提示其水平可作為局部皮膚免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)[14-15]。

本研究通過(guò)給予CA 患者PDT 治療及在此基礎(chǔ)上給予干擾素治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干光組治療后LC數(shù)量、陽(yáng)性細(xì)胞密度明顯高于單光組，干光組治療有效率96.00% 明顯高于單光組84.00%，干擾素聯(lián)合PDT 有效改善了患者LC 水平，提高了患者的治療療效。這有可能由于PDT 能夠刺激多種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、補(bǔ)體分子等從而產(chǎn)生或增強(qiáng)機(jī)體的免疫反應(yīng)而提高抗HPV 活性[16-17]。而在本研究聯(lián)合干擾素的治療下，可能由于其能夠有效均勻地散布至病灶部位并與宿主細(xì)胞表面上的干擾素受體相結(jié)合[18]，進(jìn)而干擾病毒復(fù)制、轉(zhuǎn)錄所需蛋白的合成，增強(qiáng)病灶部位多種免疫細(xì)胞（如淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等）的細(xì)胞毒性、吞噬殺傷能力，進(jìn)而提升LC 的生存環(huán)境，使LC 得以分化，這與俞鶯等的研究結(jié)果部分一致[12-13]，進(jìn)一步提示干擾素可有效抑制細(xì)胞毒性，阻止其繁衍分化，從而激活正常細(xì)胞，促使其能夠正常分解和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，從而達(dá)治療的療效。

同時(shí)，本研究對(duì)患者隨訪(fǎng)12 個(gè)月后，干光組復(fù)發(fā)率明顯低于單光組。這可能是由于兩者聯(lián)合更能提升機(jī)體的免疫功能，調(diào)節(jié)免疫機(jī)制，LC 的微環(huán)境得到改善，使機(jī)體可長(zhǎng)期有效抑制HPV 的病毒的復(fù)制，從而降低了CA 復(fù)發(fā)的發(fā)生。此外，本研究中干光組和單光組均無(wú)惡心、嘔吐、嗜睡、皮膚紅腫、水泡等不良反應(yīng)，表明干擾素聯(lián)合PDT 治療CA具有良好的安全性。

綜上所述，干擾素聯(lián)合PDT 可有效改善CA 患者LC 水平，有利于提高患者的治療療效和減少?gòu)?fù)發(fā)，且具有良好的安全性，值得臨床作進(jìn)一步推廣。