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    開菲爾粒中干酪乳桿菌的分離鑒定及發(fā)酵性能分析

    2018-08-29 07:59:18鞏小芬嚴(yán)琪鈺王雨童王江月高恩燕張恩鵬劉朋龍王亮
    中國乳品工業(yè) 2018年6期
    關(guān)鍵詞:質(zhì)量

    鞏小芬,嚴(yán)琪鈺,王雨童,王江月,高恩燕,張恩鵬,劉朋龍,王亮

    (1.江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江212013,2.新疆天潤生物科技股份有限公司,烏魯木齊830088)

    0 引 言

    干酪乳桿菌最初是由日本學(xué)者從健康人體腸道中分離,是國際上公認(rèn)的益生菌,早在2001年就被我國衛(wèi)生部列為可食用菌種[1]。研究表明干酪乳桿菌發(fā)酵乳能夠維持腸道益生菌群多樣性[4],改善便秘[5]、提高人體免疫力[6],治療遲發(fā)型超敏反應(yīng)[7]。目前我國在優(yōu)良干酪乳桿菌選育方面的文獻報道較少,市場缺乏具有自主知識產(chǎn)權(quán)干酪乳桿菌,因此開展野生干酪乳桿菌的分離鑒定及選育具有重要的意義。開菲爾粒[8]

    是由乳酸菌、酵母菌、醋酸菌等菌種組成的共生體系,干酪乳桿菌是開菲爾粒中的優(yōu)勢菌種[9,10]。本研究以新疆不同地區(qū)來源的開菲爾粒為分離源,分離鑒定干酪乳桿菌,并通過對其發(fā)酵性能的分析進行逐級篩選,以期為益生菌發(fā)酵乳的生產(chǎn)提供優(yōu)質(zhì)干酪乳桿菌。

    1 實驗

    1.1 材料與試劑

    材料:開菲爾粒,采集于新疆烏魯木齊、喀什、伊犁等地區(qū);生牛乳,本地農(nóng)戶采集。

    試劑:瓊脂糖,引物,LA酶M ix,溴化乙錠,TE緩沖液,細菌DNA提取試劑盒;鄰苯二甲醛;鄰苯二胺,亮氨酸,雙乙酰;MRS培養(yǎng)基;LC培養(yǎng)基。

    1.2 儀器與設(shè)備

    541 8R小型高速離心機,PCR儀,瓊脂糖凝膠電泳儀,N i全自動正置熒光顯微鏡,UV-1601紫外分光光度計,Syngene GeneGenius凝膠成像系統(tǒng),H-1580R高速冷凍離心機,HP6890/5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,SPMC-57328頂空固相微萃取,TA.XT plus質(zhì)構(gòu)儀。

    1.3 方法

    1.3.1 開菲爾粒的活化

    將采集的開菲爾粒濾去培養(yǎng)液,無菌生理鹽水沖洗干凈,以質(zhì)量濃度為50 g/L的接種量接種于95℃(30 min)滅菌的脫脂乳中[11],轉(zhuǎn)速為140 r/m in,28℃培養(yǎng)24 h。循環(huán)培養(yǎng)6次至pH值穩(wěn)定[12]。

    1.3.2 稀釋液的制備

    取上述pH值穩(wěn)定的開菲爾培養(yǎng)液5 m L注入45 m L滅菌生理鹽水中,同時將活化后的一粒開菲爾粒(約1cm3)經(jīng)無菌研磨后置入滅菌生理鹽水;溶液加入玻璃珠并用旋渦混勻器將充分混勻,制成初次稀釋液。取初次稀釋液1 m L注入9 m L滅菌生理鹽水中,用吸管反復(fù)吹打,使菌體分布均勻。重復(fù)上述操作步驟,直至稀釋倍數(shù)達到105~107,作為菌種接種液備用[13]。

    1.3.3 干酪乳桿菌的分離

    將上述接種液涂布于LC培養(yǎng)基,27℃厭氧培養(yǎng)72 h[14],鏡檢后挑取革蘭氏染色陽性、過氧化氫陰性的桿狀細菌菌落轉(zhuǎn)接到M RS固體培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)72 h。選擇白色圓形、表面光滑濕潤、邊緣整齊、中間凸起的菌落作為實驗?zāi)繕?biāo)菌落。

    1.3.4 干酪乳桿菌的分子生物學(xué)鑒定

    將目標(biāo)菌落擴培,用Ezup柱式細菌基因組抽提試劑盒提取其總DNA。對提取的DNA進行16S rDNA PCR擴增。引物為細菌通用引物:27F(agagtttgatcctggctcag);1492R(tacggctaccttgttacgactt)。PCR反應(yīng)條件如表1所示。

    表1 PCR反應(yīng)條件

    PCR擴增產(chǎn)物用1.0%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測,選擇M arker基因1500bp位置有清晰條帶的待測菌株擴增產(chǎn)物送生物公司進行基因測序。將基因測序結(jié)果在Genbank檢索系統(tǒng),進行基因序列BLAST比對和同源性分析,軟件M EGA 5.10構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進化樹。

    1.3.5 發(fā)酵乳的制備

    生牛乳→滅菌→冷卻→添加7%蔗糖→接種3%待測菌種接種液→37℃靜置培養(yǎng)至凝乳→4℃后熟24 h→發(fā)酵性能指標(biāo)測定。

    1.3.6 干酪乳桿菌的初篩

    1.3.6.1 發(fā)酵乳酸度及活菌數(shù)測定

    參照國標(biāo)GB5413.34-2010和GB4789.35-2016規(guī)定的檢測方法,測定發(fā)酵乳酸度及活菌數(shù)。

    1.3.6.2 持水力測定

    取10 g發(fā)酵乳,4℃條件下,轉(zhuǎn)速為10 000 r/m in離心20 min,上清液稱重。發(fā)酵乳4℃貯藏0,7,14,21 d測定其持水力數(shù)值變化。持水力為

    式中;W1為上清液質(zhì)量;W2為樣品質(zhì)量。

    1.3.7 干酪乳桿菌的復(fù)篩

    實驗以發(fā)酵乳中乙醛[15]、雙乙酰[16]、氨基氮[17-18]質(zhì)量濃度作為評價指標(biāo),對初篩選定的干酪乳桿菌進行發(fā)酵性能評估,進一步篩選優(yōu)質(zhì)干酪乳桿菌菌株。

    1.3.8 干酪乳桿菌的第三次篩選

    1.3.8.1 干酪乳桿菌發(fā)酵乳質(zhì)構(gòu)特性的測定

    發(fā)酵乳質(zhì)構(gòu)特性包括硬度、稠度、凝聚性、黏性指數(shù)等指標(biāo),實驗選用質(zhì)構(gòu)儀對干酪乳桿菌發(fā)酵乳進行測定[19]。測定條件如表2所示。

    表2 發(fā)酵乳質(zhì)構(gòu)特性測定條件

    1.3.8.2 干酪乳桿菌發(fā)酵乳揮發(fā)性香氣成分測定

    實驗采用固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(SPM E-GC-M S)測定[20]。

    GC條件:程序升溫方式,由常溫升至40℃,40℃保持2.5 min,后以5℃/m in升溫速率至200℃,再以10℃/m in速率升至230℃,230℃保持5 min。進樣口溫度250℃;傳輸線溫度230℃;載氣為He氣,流速1.0m L/m in;不分流進樣。

    M S條件:電離方式EI,70 eV;離子源溫度為230℃,質(zhì)量掃描范圍35~400 am u;發(fā)射電流100μA,檢測電壓1.4 kV。

    1.3.8.3 干酪乳桿菌發(fā)酵乳感官評價

    針對不同干酪乳桿菌的發(fā)酵乳,邀請具有專業(yè)經(jīng)驗的20名人員,進行感官評定分析,評價標(biāo)準(zhǔn)[12]見表3。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    每個實驗重復(fù)3次,實驗結(jié)果取三次的平均值,數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析,Excel2010作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 干酪乳桿菌形態(tài)學(xué)鑒定

    分離得到15株乳酸菌,其菌落均為白色圓形、表面光滑濕潤、邊緣整齊、菌體形狀為短桿狀,革蘭氏染色陽性、過氧化氫酶陰性,鏡檢后初步判定為干酪乳桿菌,形態(tài)特征如圖1所示。

    圖1中,圖A為目標(biāo)菌在LC培養(yǎng)基菌落形態(tài)圖;圖B為目標(biāo)菌在M RS培養(yǎng)基形態(tài)圖;圖C為目標(biāo)菌革蘭氏染色圖400×。

    表3 感官評定細則

    圖1 目標(biāo)菌形態(tài)特征

    2.2 干酪乳桿菌分子生物學(xué)鑒定

    15株乳酸菌DNA PCR擴增,擴增產(chǎn)物1.0%瓊脂糖凝膠電泳,如圖2所示,目標(biāo)菌DNA擴增條帶均在1400~1600bp之間,與干酪乳桿菌DNA通用引物PCR擴增結(jié)果相同,說明15株乳酸菌擴增成功,可用于序列測定。

    圖2 16S rDNA片段PCR擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

    圖3 15株干酪乳桿菌系統(tǒng)發(fā)育樹

    將15株乳酸菌測序結(jié)果與GenBank中已知序列進行基因BLAST比對,15株菌與Lactobacillus casei strain HS4(KU 587808.1)的親緣關(guān)系較近,基因序列同源性均達到100%,因此15株菌確定為干酪乳桿菌。系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建如圖3所示。

    2.3 優(yōu)良干酪乳桿菌菌株的篩選

    2.3.1 優(yōu)良干酪乳桿菌的初篩

    2.3.1.1 發(fā)酵乳酸度及活菌數(shù)測定

    酸度是影響發(fā)酵乳品質(zhì)的最重要因素,酸度70~110°T為最佳。發(fā)酵乳的酸度及活菌數(shù)測定結(jié)果如表4所示。由表4可以看出,干酪乳桿菌菌株M LC 2,YLC 1,TLC 1,F(xiàn)LC 1的發(fā)酵乳;其酸度均超過110°T,嚴(yán)重影響了發(fā)酵乳的品質(zhì)。其余11株干酪乳桿菌發(fā)酵乳的酸度范圍均在最佳酸度范圍之內(nèi),實際酸度測定結(jié)果為82.01~101.17°T。15種干酪乳桿菌發(fā)酵乳的活菌數(shù)均達到了108m L-1,均符合國標(biāo)對發(fā)酵乳中最低活菌數(shù)的規(guī)定(106m L-1)。

    2.3.1.2 發(fā)酵乳持水力的測定

    持水力同樣也是發(fā)酵乳品質(zhì)的一個重要評價指標(biāo)。持水力與發(fā)酵乳的粘度成正比,胞外多糖產(chǎn)量高的菌株粘度高,持水力強;發(fā)酵乳持水力過低或貯藏期間持水力下降會導(dǎo)致乳清析出,從而直接影響發(fā)酵乳的組織狀態(tài)與口感[21]。圖4顯示,除M LC 2,XLC 1,TLC 1,TLC 2,F(xiàn)LC 1外,剩余10株菌的發(fā)酵乳在21天貯藏期內(nèi)持水力均無顯著性降低且保持在50%以上,優(yōu)于高微娟[22]、張睿[23]的文獻報道,說明持水力較好,可用于發(fā)酵乳制品的生產(chǎn)[22]。

    圖4中,a,b,c,d字母不同表示差異顯著(P<0.05)。綜合發(fā)酵乳酸度、活菌數(shù)以及貯藏期間持水力變化三個指標(biāo),9株干酪乳桿菌發(fā)酵乳酸度在最佳酸度范圍內(nèi),活菌數(shù)符合國標(biāo)要求,持水力較高且貯藏期間穩(wěn)定,因此選擇這9株干酪乳桿菌SLC 1,SLC 2,M LC 1,XLC 2,YLC 2,KLC 1,KLC 2,N LC 1,F(xiàn)LC 2用于后續(xù)發(fā)酵性能的研究。

    表4 發(fā)酵乳的酸度及活菌數(shù)測定結(jié)果

    圖4 發(fā)酵乳貯藏期間持水力變化

    2.3.2 優(yōu)良干酪乳桿菌的復(fù)篩

    2.3.2.1 乙醛、雙乙酰質(zhì)量濃度測定

    乙醛、雙乙酰是發(fā)酵乳香氣成分兩個最重要的評價指標(biāo),研究表明[24]發(fā)酵乳中乙醛和雙乙酰質(zhì)量濃度分別達到5 m g·L-1和1 m g·L-1時,發(fā)酵乳呈現(xiàn)出特有的香味。乙醛質(zhì)量濃度在5~21 m g·L-1范圍內(nèi),質(zhì)量濃度越高發(fā)酵乳風(fēng)味越好[25];然而當(dāng)發(fā)酵乳中乙醛質(zhì)量濃度超過30 m g·L-1時會產(chǎn)生令人不愉的氣味,同時雙乙酰質(zhì)量濃度過高也會使發(fā)酵乳風(fēng)味不佳[24]。乙醛、雙乙酰質(zhì)量濃度在最佳濃度范圍內(nèi),乙醛與雙乙酰比例大于3:1時,比例越大發(fā)酵乳風(fēng)味越優(yōu)[26]。圖5表明,除N LC 1外,有8株發(fā)酵菌發(fā)酵乳乙醛與雙乙酰的質(zhì)量濃度比例均大于3:1,其中4株干酪乳桿菌SLC 1、XLC 2、KLC 1、KLC 2發(fā)酵乳乙醛質(zhì)量濃度均在5~21 m g·L-1范圍內(nèi),說明這4株菌具有較好的產(chǎn)香能力。

    圖5 乙醛、雙乙酰質(zhì)量濃度

    2.3.2.2 氨基氮質(zhì)量濃度測定

    氨基氮質(zhì)量濃度是衡量發(fā)酵乳營養(yǎng)成分重要指標(biāo),直接反映了發(fā)酵乳中小分子肽和游離氨基酸的質(zhì)量濃度,質(zhì)量濃度越高,表明發(fā)酵乳營養(yǎng)成分越易于被人體吸收,同時也間接影響發(fā)酵乳的口感和風(fēng)味[27]。由圖6可以看出,9株干酪乳桿菌中,4株菌SLC 1,XLC 2,KLC 1,KLC 2發(fā)酵乳的氨基氮質(zhì)量濃度為621.40~684.90 mg/L,遠優(yōu)于傳統(tǒng)乳酸菌發(fā)酵乳的氨基氮質(zhì)量濃度409.50 m g·L-1[27],也優(yōu)于藥璐等人將傳統(tǒng)乳酸菌發(fā)酵劑與干酪乳桿菌混合發(fā)酵的發(fā)酵乳氨基氮質(zhì)量濃度500.88 mg/L[28],表明上述4株干酪乳桿菌具有較強的乳蛋白分解能力。而其余5株干酪乳桿菌SLC 2,M LC 1,YLC 2,N LC 1,F(xiàn)LC 2發(fā)酵乳氨基氮質(zhì)量濃度為390.40~497.40 m g/L,蛋白質(zhì)分解能力雖與文獻報道[27-28]的菌株相近,但低于最優(yōu)的4株干酪乳桿菌分離菌株,這種蛋白質(zhì)分解能力的差異,可能源于菌株的來源、生長環(huán)境不同,從而菌株產(chǎn)生的蛋白酶活力或濃度不同造成的。

    圖6 氨基氮質(zhì)量濃度

    4株干酪乳桿菌SLC 1,XLC 2,KLC 1,KLC 2發(fā)酵乳在主要風(fēng)味成分乙醛、雙乙酰質(zhì)量濃度以及氨基氮質(zhì)量濃度方面指標(biāo)較好,因此選取以上4株干酪乳桿菌進行發(fā)酵乳質(zhì)構(gòu)測定及揮發(fā)性香氣成分分析。

    2.3.3 優(yōu)質(zhì)干酪乳桿菌第三次篩選

    2.3.3.1 發(fā)酵乳質(zhì)構(gòu)特性測定

    利用質(zhì)構(gòu)儀可以對發(fā)酵乳的硬度、稠度、凝聚性及黏性指數(shù)等指標(biāo)進行量化性的測定,測定結(jié)果具有較高的靈敏度、客觀性及可比性。四種發(fā)酵乳的質(zhì)構(gòu)特性如表5所示,可以看出,4種發(fā)酵乳的硬度無顯著差異(P>0.05),均處于發(fā)酵乳較佳的硬度范圍[29]33.9~39.9 g,這個范圍的發(fā)酵乳硬度最容易為消費者所接受。KLC 2的稠度顯著高于另外三種,說明該菌株發(fā)酵過程中產(chǎn)胞外多糖少,發(fā)酵乳爽滑性和細膩度較差[30-31]。菌株SLC 1和KLC 1發(fā)酵乳的凝聚性與黏性指數(shù)均高于XLC 2與KLC 2,差異顯著(P<0.05),表明SLC 1與KLC 1產(chǎn)胞外多糖較多、凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)較好[29],從而判定這兩株菌的發(fā)酵乳在質(zhì)構(gòu)方面優(yōu)于XLC 2與KLC 2。

    表5 不同發(fā)酵乳的質(zhì)構(gòu)特性

    2.3.3.2 發(fā)酵乳揮發(fā)性香氣成分分析

    揮發(fā)性香氣成分是影響發(fā)酵乳風(fēng)味重要因素之一,香氣成分豐富[32]與否在一定程度上決定發(fā)酵乳的風(fēng)味優(yōu)劣。王偉君[33]等人報道發(fā)酵乳中主要的揮發(fā)性成分有酸類、酮類、醛類、酯類、醇類五種。干酪乳桿菌發(fā)酵乳的揮發(fā)性香氣成分測定結(jié)果如表6所示,4種發(fā)酵乳揮發(fā)性香氣成分除常見的5種物質(zhì)成分外,還有烯烴類。

    揮發(fā)性酸的種類影響發(fā)酵乳的爽口感,干酪乳桿菌SLC 1、XLC 2的發(fā)酵乳均含有四種酸,比KLC 1、KLC 2豐富。酮類賦予發(fā)酵乳濃郁的奶香味和黃油味,使發(fā)酵乳整體風(fēng)味豐滿。4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳中,SLC 1酮類物質(zhì)相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)高、種類多,共檢測出七種酮類物質(zhì),其余3株干酪乳桿菌發(fā)酵乳最多檢測出4種(XLC 2、KLC 2四種,KLC 1三種),說明菌株SLC 1比其他3株干酪乳桿菌發(fā)酵乳酮類物質(zhì)種類更豐富。醛類物質(zhì)是發(fā)酵乳中非常重要的風(fēng)味物質(zhì),其感知閾值較低。由表6可以看出,4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳中醛類物質(zhì)相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)都達到了10%以上,其中干酪乳桿菌SLC 1、KLC 1發(fā)酵乳中醛類物質(zhì)種類較豐富,均含有乙醛、2-甲基丁醛、苯甲醛三種醛類,優(yōu)于XLC 2與KLC 2。酯類物質(zhì)感知閾值較低,大都表現(xiàn)出果香味。由表6可知,4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳中所含酯類的種類差別很大,SLC 1發(fā)酵乳所含酯類種類較多,相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高,優(yōu)于XLC 2、KLC 1、KLC 2。發(fā)酵乳中的醇類主要來源于糖類、氨基酸以及醛類的還原反應(yīng)。干酪乳桿菌體內(nèi)含有的乙醛脫氫酶能將乙醛轉(zhuǎn)化為乙醇,乙醇具有特殊的、令人愉快的酒香味。3-甲基丁醇檢測閾值較低,具有白蘭地的味道,是國標(biāo)GB2760-86中規(guī)定的可以食用的香料。由表6可知,SLC 1發(fā)酵乳中檢測到了乙醇、3-甲基丁醇、三乙二醇和2-乙烯氧基乙醇四種醇類物質(zhì),在4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳中所含醇類物質(zhì)種類最豐富,而菌株KLC 1發(fā)酵乳中僅檢測到了乙醇和戊乙二醇,菌株KLC 2只檢測到了乙醇,菌株XLC 2發(fā)酵乳未檢測到醇類物質(zhì)。烯烴類物質(zhì)α柏木烯和α-蒎烯可用作香料成分,菌株XLC 2發(fā)酵乳僅含有α柏木烯,其余3株干酪乳桿菌發(fā)酵乳均檢測到了α柏木烯和α-蒎烯,其中菌株SLC 1發(fā)酵乳烯烴類物質(zhì)相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高。

    表6 發(fā)酵乳中揮發(fā)性成分的GC-MS分析結(jié)果

    綜上所述揮發(fā)性香味成分對比分析中,SLC 1發(fā)酵乳所含揮發(fā)性香味成分(酸類、酮類、醛類、酯類、醇類、烯烴類物質(zhì))的種類最為豐富。

    2.3.3.3 發(fā)酵乳感官評價

    感官評價主要從顏色、組織狀態(tài)、口感、風(fēng)味4個方面對發(fā)酵乳的品質(zhì)進行綜合評價,4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳感官評價結(jié)果如表7所示。

    表7 發(fā)酵乳感官評價結(jié)果

    4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳的顏色均呈乳白色且無乳清析出和氣泡產(chǎn)生,因此顏色、組織狀態(tài)差異不顯著,均達到國標(biāo)對發(fā)酵乳品質(zhì)感官評價的要求??诟蟹矫?,針對爽口、酸甜兩個指標(biāo),SLC1、KLC1具有較好的爽口感,酸甜適宜,口感表現(xiàn)最優(yōu),XLC 2、KLC 2則與之差異顯著,口感表現(xiàn)不突出。4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳口感表現(xiàn)為SLC 1>KLC1>XLC 2>KLC 2,SLC 1口感最好。香氣成分方面,SLC 1發(fā)酵乳香氣成分層次最為豐富,與其他3株干酪乳桿菌發(fā)酵乳相比,具有顯著性差異,SLC 1發(fā)酵乳風(fēng)味表現(xiàn)最優(yōu),與GC-M S測定結(jié)果相吻合,表明發(fā)酵乳中揮發(fā)性香氣成分種類越豐富,發(fā)酵乳的風(fēng)味越好。綜合上述結(jié)果,菌株SLC 1發(fā)酵乳在顏色、組織狀態(tài)、風(fēng)味、口感等方面總體表現(xiàn)最佳。

    2.4 4種發(fā)酵乳主成分分析及評價

    以發(fā)酵乳的香氣成分(乙醛、雙乙酰、酸類、酮類、醛類、酯類、烯烴)和口感(酸度、持水力、氨基氮、硬度、稠度、凝聚性、黏性指數(shù))為指標(biāo)進行主成分分析。提取前3個主成分的特征值和貢獻率(如表8所示),累計貢獻率可達到100%。前3個主成分代替原有14個指標(biāo)可充分評價發(fā)酵乳的綜合品質(zhì)[34],每個主成分占3個主成分總貢獻率的多少(%)作為權(quán)數(shù),按照公式

    計算主成分綜合得分,F(xiàn)=0.4626F1+0.2889F2+0.2184F3;其中 F1,F(xiàn)2,F(xiàn)3分別為前3個主成分得分值。發(fā)酵乳綜合得分如表9所示,4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳的綜合得分由高到低依次為SLC 1>KLC 1>XLC 2>KLC 2,與感官評價結(jié)果一致,說明該綜合評價模型可靠,表明SLC 1綜合指標(biāo)最優(yōu)。

    表8 提取主成分的特征值及貢獻率

    表9 發(fā)酵乳綜合評價得分

    3 結(jié) 論

    來源于新疆不同地區(qū)的8種開菲爾粒,從中分離鑒定出15株干酪乳桿菌。針對15株菌進行了發(fā)酵乳的酸度、活菌數(shù)、持水力、乙醛、雙乙酰、氨基氮等指標(biāo)的分析,初步篩選出4株發(fā)酵性能較好的干酪乳桿菌,分別為SLC 1,XLC 2,KLC 1,KLC 2;4株菌各項發(fā)酵性能指標(biāo)均符合國標(biāo)要求,蛋白質(zhì)分解能力尤其突出,遠優(yōu)于現(xiàn)有文獻報道的干酪乳桿菌[28]。而后針對4株干酪乳桿菌進行了發(fā)酵乳的硬度、稠度、凝聚性、黏性指數(shù)等質(zhì)構(gòu)特性測定,發(fā)現(xiàn)菌株SLC 1和KLC 1發(fā)酵乳的的質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)較為突出;揮發(fā)性香氣成分分析、SLC 1香氣成分最為豐富。最后通過主成分分析建立了發(fā)酵乳香氣成分與口感指標(biāo)的綜合評價模型F=0.6128F1+0.2764F2+0.1109F3,4株干酪乳桿菌發(fā)酵乳綜合得分從高到低依次為SLC 1>KLC 1>XLC 2>KLC 2,與感官評價結(jié)果一致,從而表明15株干酪乳桿菌中菌株SLC 1綜合發(fā)酵性能最優(yōu),可用于發(fā)酵乳制品工業(yè)化生產(chǎn),或作為益生乳制品復(fù)合發(fā)酵劑的配伍菌種用于工業(yè)化生產(chǎn)。

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