GeneXpertMTB/RIF檢測(cè)對(duì)于不典型肺結(jié)核患者診斷的臨床價(jià)值

陸小玲　朱建清　張莉華

【摘要】 目的 評(píng)價(jià)Xpert MTB/RIF在診斷不典型肺結(jié)核中的潛在經(jīng)濟(jì)價(jià)值和臨床價(jià)值。方法 217例疑似結(jié)核病患者， 取痰樣本作為實(shí)驗(yàn)材料分別進(jìn)行肺結(jié)核檢測(cè)?；颊呤紫纫M(jìn)行胸部CT掃描， 進(jìn)行第一輪初診。將痰樣本分別進(jìn)行對(duì)應(yīng)的處理進(jìn)行痰涂片抗酸染色檢測(cè)和Xpert MTB/RIF檢測(cè)， 按性別分別統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 通過(guò)胸部CT初診的結(jié)果為151例活動(dòng)性肺結(jié)核患者， 誤診38例

肺結(jié)核， 誤診率為18.9%。在CT檢測(cè)結(jié)果與活動(dòng)性肺結(jié)核影像學(xué)表現(xiàn)一致的男性患者中， 涂片結(jié)果和Xpert結(jié)果具有高度一致性（陰性和陽(yáng)性）， 敏感性和特異性都為100.0%。但是影像學(xué)表現(xiàn)不一致的男性患者中， 敏感性和特異性分別為85.7%和92.1%。女性患者中， 在影像學(xué)特征一致的研究組中， 敏感性為92.9%， 特異性為90.0%， 而在影像學(xué)表現(xiàn)不一致的組中， 敏感性和特異性分別為66.7%和80.0%。

結(jié)論 Xpert MTB/RIF與其他傳統(tǒng)的診斷方法相比具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)， 可作為一種準(zhǔn)確可靠的手段來(lái)檢測(cè)不典型肺結(jié)核， 尤其是對(duì)于女性患者的診斷可提供有價(jià)值的輔助判斷。

【關(guān)鍵詞】 不典型肺結(jié)核；痰涂片抗酸染色；GeneXpert MTB/RIF；診斷準(zhǔn)確性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.15.025

Xpert MTB/RIF是一種快速的結(jié)核分枝桿菌診斷系統(tǒng)， 同時(shí)可以檢測(cè)利福平抗藥性[1]。并且這種自動(dòng)的檢測(cè)方法不需要專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)或設(shè)備先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室。用Xpert來(lái)檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌和利福平的抗藥性， 其敏感性和特異性已經(jīng)在大量患有疑似肺結(jié)核抗生素敏感或耐多藥的檢測(cè)中得到有效證

實(shí) [2-4]。本研究致力于評(píng)價(jià)Xpert MTB/RIF在診斷不典型肺結(jié)核中的潛在經(jīng)濟(jì)價(jià)值和臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2012年3月～2015年12月本院收治的217例疑似結(jié)核病患者， 年齡16～78歲， 平均年齡46.5歲， 男157例， 女61例， 均無(wú)法確診為活動(dòng)性肺結(jié)核。取每個(gè)不典型肺結(jié)核患者早上第一口痰， 先用清水漱口， 用力咳出深部的痰， 置于無(wú)菌管中作為痰樣本， 每一個(gè)痰樣本分別置于2個(gè)小無(wú)菌管中作為不同實(shí)驗(yàn)方法的實(shí)驗(yàn)樣本， 每個(gè)樣本含量要大于1 ml。這些患者出現(xiàn)排痰性咳嗽（>2周）， 夜間盜汗、持續(xù)低燒等臨床癥狀， 成為疑似肺結(jié)核患者納入研究。最終所有患者通過(guò)B超或CT引導(dǎo)下經(jīng)皮肺穿刺或者病理學(xué)檢測(cè)確診是否為肺結(jié)核。

1. 2 實(shí)驗(yàn)方法

1. 2. 1 影像學(xué)檢測(cè) 所有患者均進(jìn)行胸部CT掃描， 通過(guò)掃描圖像來(lái)判定是否患有肺結(jié)核。

1. 2. 2 痰涂片抗酸染色檢測(cè) 將痰樣本高壓滅菌后， 自然冷卻。在痰樣本中加入與標(biāo)本等量的氫氧化鈉-N乙酰半胱氨酸溶液（NaOH-NALC）， 采用振蕩器混勻10 min后， 加入pH=6.8的磷酸鹽緩沖液（PBS）至50 ml， 倒入潔凈的離心試管中， 以3000 r/min 離心10 min， 棄上清液后用pH=6.8的PBS

0.7 ml制備成懸浮液。取底部沉淀物放入載玻片中央， 涂抹成1 cm×2 cm的卵圓形痰膜， 自然干燥， 火焰固定后置于染色架上， 加染色劑浸滿痰膜后， 微火加溫染液染色5～10 min水洗加脫色劑脫色3～5 min至無(wú)紅色， 然后水洗自然涼干進(jìn)行鏡檢。

1. 2. 3 GeneXpert MTB/RIF 檢測(cè)[5] 本實(shí)驗(yàn)過(guò)程采取雙盲試驗(yàn)方式。取新鮮的未加工的痰樣本1 ml加入2 ml GeneXpert專(zhuān)用消化液， 震蕩15～30 s， 室溫放置15 min， 用專(zhuān)用無(wú)菌吸管吸取2 ml， 處理液轉(zhuǎn)移至樣本反應(yīng)盒中， 將反應(yīng)盒放入GeneXpert儀器的反應(yīng)艙中進(jìn)行DNA提取， 聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增和結(jié)果檢測(cè)， 2 h后自動(dòng)判讀結(jié)果。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示。計(jì)算GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)的敏感性和特異性， 定義分別為：敏感性=[真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰

性）]×100%；特異性=[真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）]×100%。

2 結(jié)果

217例疑似肺結(jié)核患者中， 通過(guò)B超或CT引導(dǎo)下經(jīng)皮肺穿刺或者病理學(xué)檢測(cè)確診共有176例活動(dòng)性肺結(jié)核患者。

2. 1 157例男性疑似肺結(jié)核病例實(shí)驗(yàn)結(jié)果 在CT檢測(cè)結(jié)果與活動(dòng)性肺結(jié)核影像學(xué)表現(xiàn)一致的男性患者中， 涂片結(jié)果和Xpert結(jié)果具有高度一致性（陰性和陽(yáng)性）， 敏感性和特異性都達(dá)到了100.0%。但是在CT檢測(cè)結(jié)果與活動(dòng)性肺結(jié)核影像學(xué)表現(xiàn)不一致的男性患者中， 涂片結(jié)果和Xpert檢測(cè)結(jié)果略有差異， 敏感性和特異性分別為85.7%和92.1%。見(jiàn)表1。

2. 2 60例女性疑似肺結(jié)核病例實(shí)驗(yàn)結(jié)果 女性患者中， 由于樣本量較小， 尤其是在影像學(xué)表現(xiàn)不一致的組中， 敏感性和特異性的結(jié)果都不太理想， 分別為66.7%和80.0%。而在影像學(xué)特征一致的研究組中， 敏感性為92.9%， 特異性為90.0%。見(jiàn)表1。

3 討論

Xpert MTB/RIF檢測(cè)法是世界衛(wèi)生組織（WHO）為遏制結(jié)核病推行的檢驗(yàn)方法， 是以半巢式實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)， 以rpob基因?yàn)榘谢颍?自動(dòng)提取DNA后擴(kuò)增rpob基因的192bp片段進(jìn)行檢測(cè)， 實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌及利福平耐藥， 該系統(tǒng)封閉性及自動(dòng)化程度高， 技術(shù)人員僅需將處理好樣本加入反應(yīng)孔內(nèi)， 系統(tǒng)可自動(dòng)完成標(biāo)本純化、離心、DNA提取、DNA特異序列檢測(cè)， 自動(dòng)讀出結(jié)果， 且敏感度、特異度高， 為WHO推薦的結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法[5]。并對(duì)鑒別診斷肺結(jié)核和非結(jié)核分枝桿菌肺病有較高的準(zhǔn)確性[6]。從數(shù)據(jù)中可以看出Xpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)果與肺結(jié)核確診結(jié)果一致性很高。同時(shí)不論是痰涂片染色檢測(cè)還是Xpert檢測(cè)， 對(duì)于男性的診斷正確性都高于女性， 并且男性患者要多于女性患者， 因此， 對(duì)于女性患者的診斷就更應(yīng)當(dāng)引起足夠的重視， 應(yīng)盡量避免由于漏診或誤診造成的肺結(jié)核病變或死亡的發(fā)生。有大量文獻(xiàn)證明痰Xpert MTB/RIF檢查在涂陰肺結(jié)核診斷中具有快速、敏感性及特異性高的優(yōu)點(diǎn)。WHO建議加快Xpert MTB/RIF檢測(cè)技術(shù)作為一種全新的結(jié)核病快速診斷新工具的使用， 有助于結(jié)核病患者較早的得到準(zhǔn)確地診斷、充分的治療和患者管理。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2018-01-09]