制霉素搽劑質(zhì)量控制與穩(wěn)定性研究

肖蒙蒙

摘 要：本實驗研究制霉素搽劑質(zhì)量控制與穩(wěn)定性。方法：采用安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60），檢測波長為306nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。制霉素在50～250μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。制霉素平均回收率為99.3%。結(jié)論：本測定方法簡便、準確。30℃的恒溫箱內(nèi)制霉素搽劑在第二個月就開始分解。冷處保存放置3個月后，制霉素搽劑未發(fā)生明顯變化，表明制霉素搽劑可以冷處保存3個月。

關(guān)鍵詞：制霉素；質(zhì)量；穩(wěn)定性

制霉素為黃色或棕黃色粉末；有類似谷物氣味，有引濕性，對光，空氣，酸和堿均不穩(wěn)定。制霉素主要用于內(nèi)服治療消化道真菌感染或外用于表面皮膚真菌感染，如新型隱球菌、曲菌、毛霉菌、小孢子菌、莢膜組織漿胞菌、皮炎芽生菌及皮膚癬菌等[1-5]。搽劑最早出現(xiàn)于我國現(xiàn)存最早的出土于馬王堆漢墓的古醫(yī)方《五十二病方》，在我國有著悠久的歷史。本實驗研究制霉素搽劑質(zhì)量控制與穩(wěn)定性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：長城獅鼎SHB-III型臺式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；XH-2008DE智能溫控雙頻超聲波萃取儀（北京祥鵠科技發(fā)展有限公司）；600220液相保護柱（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；GX-2050高溫循環(huán)器（上海市百典儀器廠）；JY-M-800S恒溫恒濕試驗箱價格（上海巨怡環(huán)境試驗設備有限公司）；電子分析天平（上海魅宇儀器設備有限公司）；GI-3000-12二元高壓梯度液相色譜儀（通用（深圳）儀器有限公司）；GENESYS180紫外可見分光光度計（上海力晶科學儀器有限公司）；蘭博OV3000大容量柱溫箱（天津市蘭博實驗儀器設備有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：制霉素 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：甲醇（北京天安聯(lián)合科技有限公司）、冰醋酸（上海玻爾化學試劑有限公司）磷酸氫二鈉（北京天安聯(lián)合科技有限公司）、磷酸（北京天安聯(lián)合科技有限公司）、醋酸鈉（北京天安聯(lián)合科技有限公司）、乙腈（北京天安聯(lián)合科技有限公司）。

2 穩(wěn)定性考察方法

將本品置于30℃的恒溫箱內(nèi)，分別于第1、2、3、4、5、6個月末取樣并測定，考察外觀、生物限度、含量的測定結(jié)果做比較。另取樣品在冷處保存，分別于第1、2、3、4、5、6個月末取樣并測定，考察外觀、生物限度、含量的測定結(jié)果做比較。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為黃色或淡棕色黏稠性混懸液。符合《中國藥典》2015年版對搽劑的要求。

3.2 含量測定

3.2.1 流動相的選擇。分別考察0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20）；醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-甲醇（40∶60）；醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60）；醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（50∶50）；乙腈-0.2%（質(zhì)量分數(shù)）磷酸（體積比25：75）；醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60）不同比例的流動相，結(jié)果以醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60）；為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60）為流動相。依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[6]。流動相：醋酸鈉緩沖液（PH4.4）-乙腈（40∶60），檢測波長：306nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按制霉素峰計算應不得低于2000。

3.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取制霉素對照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取適量供試品精密稱定，置具小燒杯中，精密加入甲醇10mL，用甲醇轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中并稀釋定容，超聲處理5分鐘，放冷，濾過。取續(xù)濾液，即得。

3.2.4 專屬性試驗

依照處方取除制霉素，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照3.2.4項下供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結(jié)果在制霉素出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.2.5 精密度試驗

精密稱取制霉素對照品適量，加甲醇使溶解，制成濃度為100μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.73%，表明本方法精密度良好。

3.2.6 對照品的線性考察

精密稱取制霉素對照品50mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照3.2.2項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結(jié)果表明，制霉素在50～250μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2.7 重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的制霉素搽劑樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.81%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

3.2.8 準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的制霉素對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.5%，RSD=0.76%，結(jié)果表明樣品加樣回收率良好。

3.3 微生物限度檢查

按照《中國藥典》2015年版附錄所載方法測定，結(jié)果符合規(guī)定。

4 討論

此測定方法可用于制霉素搽劑中制霉素的含量測定。制霉素有引濕性，對光，空氣，酸和堿均不穩(wěn)定。所以本實驗對制霉素搽劑質(zhì)量控制與穩(wěn)定性進行考察。30℃的恒溫箱內(nèi)制霉素搽劑在第二個月就開始分解。冷處保存放置3個月后，制霉素搽劑未發(fā)生明顯變化。經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)，外觀、微生物限度、含量均穩(wěn)定，表明制霉素搽劑可以冷處保存3個月。

參考文獻

[1]項薇薇，馬小彬，劉彩雙.行為干預、乳酸桿菌結(jié)合硝呋太爾制霉素治療外陰陰道假絲酵母菌病的效果研究[J].中國美容醫(yī)學，2012（18）.

[2]吳熊軍.克霉唑與制霉菌素栓治療妊娠期外陰陰道假絲酵母菌病療效及安全性比較[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2013（06）.

[3]董雪翠，張淑玲，劉慧敏.黃苦洗液結(jié)合三維制霉素栓治療霉菌性陰道炎療效的臨床觀察[J].中國醫(yī)藥指南，2010（32）.

[4]張麗華.硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊治療復發(fā)性念珠菌性外陰陰道病的療效觀察[J].海峽藥學，2017（02）.

[5]謝冬艷.硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊治療妊娠期細菌性陰道病的療效觀察[J].中國衛(wèi)生標準管理，2017（01）.

[6]汪素巖，王健，孟錚.制霉素中制霉菌素A1、A3和多真菌素B含量比例的研究[J].中國藥事，1996（01）.