利用不親和野生種培育抗青枯病高油酸高產(chǎn)食用型花生新品種

王傳堂 唐月異 王秀貞 吳琪 孫全喜 王志偉 葉萬余 吳昌湛 王強 宋國生 徐建志

摘要：利用抗青枯病不親和野生種種間雜種06I8B4為母本、以自育高油酸親本CTWE為父本雜交，后代選擇用分子標記輔助與近紅外模型進行，青枯病抗性實施自然病地鑒定，由此育成抗青枯病、高油酸、高產(chǎn)、食用型品種花育963和花育668。其適應性廣，產(chǎn)量水平不遜于普通油酸高產(chǎn)品種；油酸含量超過80%，油亞比均在24以上；口感佳，適合食品加工；青枯病抗性分別達抗病和中抗水平。

關鍵詞：食用型花生；不親和野生種；花育963和花育668；青枯病；高油酸

中圖分類號：S565.203.51文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2018）06-0057-04

Abstract A crossbreeding was made between 06I8B4 （female parent）， an incompatible Arachis species hybrid derivative with bacterial wilt （BW） resistance， and CTWE （male parent）， a high-oleic peanut line bred by our research group. Through screening with molecular marker technology and near infrared spectroscopy model， along with resistance scoring at natural disease nursery， two high-oleic and high-yielding peanut cultivars for food uses with BW resistance， Huayu 963 and Huayu 668， were developed. Both cultivars were found to have wide adaptability； their yields were comparable to or even higher than that of normal-oleic and high-yielding varieties； the oleic acid content was over 80%， and the ratio of oleic acid to linoleic acid was more than 24. Huayu 963 and Huayu 668 had good eating quality， which were suitable for food processing， and were resistant and moderately resistant to BW， respectively.

Keywords Edible peanut； Wild incompatible species； Huayu 963 and Huayu 668； Bacterial wilt；High oleic acid

油酸氧化酸敗的速度約為亞油酸的十分之一。高油酸花生其脂肪酸中的油酸含量由普通油酸花生的40%～55%左右提升至72%以上，亞油酸含量則由約40%降低到7.7%以下，因而表現(xiàn)出較高的氧化穩(wěn)定性，由其加工而成的花生油和花生食品貨架期顯著延長，能夠保持花生良好的風味經(jīng)久不衰[1]。經(jīng)常食用高油酸花生還可降低低密度脂蛋白膽固醇，有助于控制體重、增強胰島素敏感性、穩(wěn)定血糖、改善炎癥，有增強腦認知能力之功效[1]。高油酸花生制品因此受到加工企業(yè)和健康意識日益增強的消費者的歡迎[1]。高油酸已成為當前和今后一段時期花生品質(zhì)改良的重要目標之一。

包括F435和F78-1339在內(nèi)的最初一批國外高油酸花生種質(zhì)，其農(nóng)藝性狀多不理想，存在低產(chǎn)、莢果開裂和感病等缺陷[2，3]，難以直接應用，為此國外常采取回交措施將高油酸特性導入到商品性好、抗性強的花生品種中；國內(nèi)則基本采取雜交育種策略，近年來回交手段也有應用[1]。青枯病是花生土傳毀滅性病害，缺乏有效的化學防治措施，水旱輪作雖有效果但比較繁瑣，培育抗性品種是經(jīng)濟有效的方法。國內(nèi)外現(xiàn)已育成多個抗青枯病普通油酸花生品種[4]，但抗青枯病高油酸花生品種選育鮮有報道[1，5]?；ㄉ挥H和野生種抗性強、遺傳多樣性豐富，但長期以來難以在育種中加以利用。為此本項目組建立了花生原位胚拯救技術[6]，并據(jù)此進行利用抗逆性強的不親和野生種與自育高油酸新種質(zhì)雜交培育抗逆優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種研究，以期選出抗青枯病高油酸花生新品種。

1 材料與方法

1.1 雜交組合配制

2008年以通過原位胚拯救技術獲得的花生栽培種與不親和野生種Arachis rigonii種間雜種高世代抗青枯病優(yōu)質(zhì)品系06I8B4為母本、以項目組自育高油酸親本CTWE為父本，配制雜交組合。

1.2 雜交后代選擇

采用項目組構(gòu)建的花生高油酸分子標記輔助選擇技術和近紅外模型進行[1]。

1.3 特征特性表述

按《中國花生品種及其系譜》所述方法進行[7]。

1.4 產(chǎn)量鑒定

品比試驗產(chǎn)量鑒定主要在山東省花生研究所萊西試驗基地進行。多點產(chǎn)量鑒定送安徽省種子協(xié)會或國家花生產(chǎn)業(yè)技術體系試驗站進行，按當?shù)胤N植模式種植。大花生和小花生分別以普通油酸高產(chǎn)品種花育33號和花育20號作對照，個別情況下以高油酸品種花育951和花育32號為對照。收獲適期，日曬干燥后根據(jù)出米率換算出子仁產(chǎn)量。

1.5 青枯病抗性鑒定

該病抗性鑒定試驗在廣西壯族自治區(qū)賀州市農(nóng)業(yè)科學研究所自然病地進行，重復3次，以中花6號為抗病對照、中花12為感病對照。2017年3月27日每份材料每重復播50粒種子，4月17日調(diào)查出苗數(shù)，7月25日統(tǒng)計收獲株數(shù)。

以田間存活率（收獲株數(shù)/出苗數(shù)×100%）表示抗病水平高低。其中，高抗：存活率≥90%；抗?。?0%>存活率≥80%；中抗：80%>存活率≥65%；感?。?5%>存活率≥50%；高感：存活率<50%。

1.6 品質(zhì)分析

花育963和花育668子仁樣品送農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（武漢）或青島捷安信檢驗技術服務有限公司測定。

2 結(jié)果與分析

2.1 選育過程

花生高油酸性狀在高油酸與普通油酸不同雜交組合里受控于一對或兩對基因，其F2代高油酸分離子比例分別為1/4或1/16，鑒于此，單純根據(jù)高油酸表型選擇后代可能會造成其它優(yōu)異基因丟失，影響育成高油酸花生的產(chǎn)量和抗性。為此，我們在2008年收獲雜交果并于干燥后通過分子標記技術進行雜種鑒定，保留真雜種；F2種子進行近紅外掃描，選留高油酸種子，之后對中油酸種子進行分子標記分析，選留FAD2A/FAD2B雙突變基因型種子，后代再進行近紅外掃描選擇，以增加獲得高油酸高產(chǎn)抗逆后代的機會?；旌蠝y產(chǎn)前除調(diào)查外觀性狀是否一致外，每株均進行近紅外掃描，確保高油酸特性穩(wěn)定，并排除混雜的可能。選出的品系除在萊西正常種植外，2010—2012年又在海南進行兩年的加代擴繁。至此花育963經(jīng)系譜法選擇育成，于2012年（F6）開始進行產(chǎn)量鑒定；花育668經(jīng)混合系譜法育成，于2014年（F8）開始進行產(chǎn)量鑒定。

2.2 品種特征特性

2.2.1 花育963 株型直立，葉片橢圓形，結(jié)果集中。莢果普通形，子仁長橢圓形（圖1左），內(nèi)種皮金黃色。

山東萊西春播生育期120 d。主莖高24 cm，側(cè)枝長28 cm，分枝數(shù)8條。百果重247 g，百仁重105 g。出米率74%。

安徽夏播生育期116 d。主莖高32 cm，結(jié)果枝數(shù)7條，單株莢果重20 g，單株子仁重15 g。百果重210 g，百仁重81 g。出米率73%。

2.2.2 花育668 山東萊西春播生育期約115 d。株型直立（圖1右），連續(xù)開花。莢果繭形，子仁桃圓形。主莖高24 cm，側(cè)枝長26 cm，分枝數(shù)9條。百果重170 g，百仁重70 g。出米率75%。

2.3 產(chǎn)量鑒定

2.3.1 花育963 山東省花生研究所品比試驗，2012年子仁產(chǎn)量3 152.85 kg/hm2，較對照花育33號增產(chǎn)8.24%；2014年子仁產(chǎn)量3 545.70 kg/hm2，較對照花育33號增產(chǎn)5.79%；2015年春播雨養(yǎng)條件下試驗，子仁產(chǎn)量3 641.85 kg/hm2，比對照花育25號增產(chǎn)2.59%。2016年山東萊西花生生長季遭遇嚴重干旱，在一水未澆的情況下，1 800 m2旱薄地取得6 300.00 kg/hm2的莢果產(chǎn)量。

2015年，新疆農(nóng)墾科學院在兩塊施肥量減半的重茬地進行花生單粒種植試驗，平均莢果產(chǎn)量6 173.85 kg/hm2。同年參加安徽夏播花生區(qū)試，平均莢果產(chǎn)量3 625.05 kg/hm2、子仁產(chǎn)量2 656.35 kg/hm2，分別比高油酸對照品種花育951增產(chǎn)10.69%、12.75%。2016年，山東臨沂試驗，子仁產(chǎn)量3 922.60 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)16.54%；安徽合肥夏播試驗，子仁產(chǎn)量3 521.84 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)14.71%；湖北襄陽試驗，子仁產(chǎn)量3 399.43 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)35.63%；在河南駐馬店、江蘇徐州、河北保定、湖北黃岡等地種植亦比對照花育33號增產(chǎn)。2017年，遼寧錦州試驗，子仁產(chǎn)量4 087.48 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)8.56%；山東臨沂試驗，子仁產(chǎn)量5 579.89 kg/hm2；山西汾陽試驗，子仁產(chǎn)量5 504.55 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)18.59%；安徽合肥夏播試驗，子仁產(chǎn)量3 306.66 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)14.97%；湖北襄陽試驗，子仁產(chǎn)量4 378.94 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)9.86%；四川南充試驗，子仁產(chǎn)量4 058.80 kg/hm2，比對照花育33號增產(chǎn)8.60%。

2.3.2 花育668 山東省花生研究所品比試驗，2014年子仁產(chǎn)量4 112.85 kg/hm2，比花育33號增產(chǎn)12.07%，比花育25號增產(chǎn)22.03%；2015年子仁產(chǎn)量3 883.50 kg/hm2，比花育20號增產(chǎn)3.57%；2016年后期耐旱試驗，子仁產(chǎn)量3 035.55 kg/hm2，比花育20號子仁增產(chǎn)1.60%，比高油酸對照種花育32號子仁增產(chǎn)62.95%。

2016年全國20個試驗點中，白城、四平、阜新、錦州、煙臺、濰坊、臨沂、汾陽、徐州、駐馬店（夏播）、濮陽、唐山、保定、合肥（夏播）、黃岡、襄陽、貴州、泉州（秋植）、賀州（秋植）、贛州（秋植）試驗，平均子仁產(chǎn)量2 861.08 kg/hm2，比對照花育20號增產(chǎn)5.26%。2017年全國17點試驗，在阜新、錦州、煙臺、濰坊、汾陽、徐州、濮陽、唐山、保定、合肥、南京、黃岡、襄陽、泉州、賀州、贛州、南充試驗，平均子仁產(chǎn)量3 298.35 kg/hm2，比對照花育20號增產(chǎn)3.71%。

2.4 青枯病抗性鑒定

2017年在廣西賀州青枯病自然病地種植，抗病對照中花6號出苗率90.67%，田間存活率68.35%，青枯病抗性鑒定結(jié)果為中抗；感病對照中花12號出苗率73.33%，田間存活率6.43%，表現(xiàn)為高感；花育33號出苗率86.67%，田間存活率6.47%，表現(xiàn)為高感；花育20號出苗率95.33%，田間存活率23.20%，表現(xiàn)為高感。上述品種均于4月下旬出現(xiàn)青枯病。

本研究選育的兩個品種則對青枯病表現(xiàn)出較好的抗性?；ㄓ?63出苗率88.00%，5月上旬出現(xiàn)青枯病，田間存活率達87.41%，表現(xiàn)為抗?。换ㄓ?68出苗率92.67%，5月上旬出現(xiàn)青枯病，田間存活率67.15%，表現(xiàn)為中抗。

2.5 品質(zhì)分析

2016年農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（武漢）測定結(jié)果，花育963子仁油酸含量80.1%，亞油酸含量3.2%，油亞比25.0?；ㄓ?68油酸含量80.7%，亞油酸含量2.8%，油亞比28.8，含油量53.6%。2017年經(jīng)青島捷安信檢驗技術服務有限公司檢測，其油酸含量81.1%，亞油酸含量3.37%，油亞比24.1，含油量51.8%，粗蛋白含量21.3%。

3 討論與結(jié)論

花育963于2015年通過安徽省鑒定（皖品鑒登字第1505029）。其子仁符合出口要求。2017年由7人感官評價小組對31個品種烤花生仁按總體喜歡度打分（1—5級，1為最喜歡，5為最不喜歡），花育963為2.15分，位列第二，說明其口感佳，適合加工食品之用。需要引起重視的是，該品種雖抗青枯病，但易爛果，種植時應注意避開澇洼地塊[8]。

在2016年果柄強度試驗中，花育668與對照品種花育20號、花育32號果柄強度相當，果柄自莖枝處脫落的百分率為零，即全部脫落于莢果與果柄連接處[9]，說明該品種不易落果，摘果后可省去“去果柄”工序，是一個適合機械化收獲的花生品種?；ㄓ?68是一個典型的珍珠豆型品種，適應性廣，子仁大小適中，莢果和子仁均符合“旭日型”出口要求，口感好，且抗青枯病，是替代花育20號等小白沙類型品種的理想選擇。

本研究選育的兩個高油酸花生品種花育963、花育668油酸含量均在80%以上，油亞比在24以上，產(chǎn)量不遜于普通油酸高產(chǎn)品種，且抗青枯病，口感好，適合加工食用，推廣應用前景廣闊。

參 考 文 獻：

[1] 王傳堂，朱立貴主編. 高油酸花生[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，2017.

[2] Knauft D A，Moore K M，Gorbet D W. Further studies on the inheritance of fatty acid composition in peanut 1[J]. Peanut Science， 1993， 20（2）：74-76.

[3] Gangadhara K，Nadaf H L. Identification of high oleate peanut lines with foliar disease resistance[J]. Advances in Life Sciences，2016，5（6）：2427-2431.

[4] 王傳堂，張建成. 花生遺傳改良[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，2013.

[5] 韓柱強，鐘瑞春，賀梁瓊，等. 高油酸花生新品種桂花37的選育[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報， 2017，48（7）：1161-1166.

[6] 祁雪，王傳堂，王秀貞，等. 原位胚拯救技術獲得花生屬區(qū)組間雜種的研究[J]. 花生學報，2017，46（1）：21-25.

[7] 禹山林. 中國花生品種及其系譜[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，2008.

[8] 王傳堂，唐月異，王秀貞等. 7個高油酸花生新品種的豐產(chǎn)性和脂肪酸成分評價[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學，2016，48（5）：31-34.

[9] 王傳堂，祁雪，劉婷，等. 花生果柄脫落特性的研究[J]. 花生學報，2017，46（1）：64-68.