助劑對(duì)異菌脲防治煙草灰霉病的增效作用研究

石 妍 ，梁頒捷 ，張珊珊，張紹升 ，劉國(guó)坤 ，顧 鋼 ，肖 順 *

（1.福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，福州 350002；2.福建省煙草公司三明市公司，福建三明 365000；3.福建省煙草公司 煙草科學(xué)研究所，福州 350003）

煙草灰霉病是由半知菌絲孢目真菌灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）引起的病害，煙株的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期均可發(fā)生，在我國(guó)黑龍江、陜西、福建、云南等煙區(qū)普遍發(fā)生且較為頻繁[1-3]。其病原菌主要侵染葉片和莖部，造成煙葉組織壞死、腐爛，對(duì)煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)造成一定影響[1,4]。

目前有關(guān)異菌脲與助劑的協(xié)同增效研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)選用5種有機(jī)硅助劑和1種植物油助劑，研究其對(duì)異菌脲防治煙草灰霉病的增效作用及其增效機(jī)理，以期篩選出對(duì)異菌脲增效顯著的助劑，用于生產(chǎn)實(shí)踐。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試藥劑及助劑

供試藥劑：50%異菌脲可濕性粉劑，江蘇快達(dá)農(nóng)化股份有限公司。

有機(jī)硅助劑：杰效利、絲潤(rùn)，邁圖高新材料（南通）有限公司；久農(nóng)豐，石家莊久農(nóng)豐化工科技有限公司；要友，青島海利諾生物科技有限公司；百士威增效王，山東百士威農(nóng)藥有限公司。

植物油助劑：松樹油，福建省泉州德盛農(nóng)藥有限公司。

1.1.2 供試菌株和培養(yǎng)基

煙草灰霉病菌由福建農(nóng)林大學(xué)植物病原實(shí)驗(yàn)室從福建省泰寧縣煙區(qū)發(fā)病田中分離得到并保存。

2.2.4 處理階段（A）。筆者持續(xù)多年，一直從事新員工培訓(xùn)的授課，每一年的處理階段，都與新的一年的計(jì)劃階段緊密相連，這樣的思考和PDCA的進(jìn)程，形成螺旋形的思路從過(guò)去向未來(lái)延續(xù)。

培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基。

1.1.3 供試煙草

煙草于2017年4月采自福建省三明市煙區(qū)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 助劑對(duì)異菌脲抑制煙草灰霉病菌的增效作用

參照農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則（殺菌劑），采用平皿法[8]。

藥劑處理：將50%異菌脲可濕性粉劑按使用要求用無(wú)菌水稀釋1 250倍，使藥劑質(zhì)量濃度為0.80 mg/L。按1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的用量將6種助劑分別添加到上述異菌脲稀釋液中，充分混勻，以不添加助劑的同等質(zhì)量濃度異菌脲藥液為對(duì)照處理（CK1）。在無(wú)菌操作條件下，將含有不同助劑的異菌脲藥液分別加入到PDA培養(yǎng)基中（兩者質(zhì)量比1∶9），充分搖勻，然后等量倒入3個(gè)直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，制成一定濃度的含藥和助劑的平板。以不含藥劑的處理作為空白對(duì)照（CK2），每處理3次重復(fù)。

接種：將培養(yǎng)好的病原菌，在無(wú)菌條件下用直徑5 mm的滅菌打孔器，自菌落邊緣切取菌餅，將菌餅接種于平板中央，菌絲面朝上，蓋上皿蓋，置于28℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)5 d。

調(diào)查：采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，根據(jù)公式（1）計(jì)算含助劑的藥劑對(duì)病原菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率。

1.2.2 助劑對(duì)異菌脲藥液表面張力的影響

1.2.1 中配制的含助劑藥液作為待測(cè)液，采用表面張力儀測(cè)定其表面張力，每處理重復(fù)3次，取其平均值。

1.2.3 助劑對(duì)異菌脲藥液擴(kuò)展直徑的影響

參照劉永強(qiáng)等[9]的方法。將1.2.1中配制的含助劑藥液作為待測(cè)液，用微量移液槍移取10 μL待測(cè)液滴于培養(yǎng)皿底部中央，30 s后，用記號(hào)筆標(biāo)注擴(kuò)展區(qū)域，測(cè)量液滴擴(kuò)展的最大和最小直徑，取其平均值（即為藥液擴(kuò)展直徑），每處理重復(fù)3次。

1.2.4 助劑對(duì)異菌脲藥液在煙草葉片上最大持留量的影響

參考張忠亮等[10]的方法。剪取煙草葉片，測(cè)量葉片面積（S），用精密電子天平稱量葉片質(zhì)量（m0），然后放入各處理藥液中浸泡10 s取出，垂直懸置，待無(wú)液滴下落時(shí)稱其質(zhì)量（m1）。根據(jù)公式（2）計(jì)算藥液最大持留量Rm。每處理重復(fù)5次，取平均值。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel和DPS軟件進(jìn)行分析處理，采用Duncan氏新復(fù)極差檢驗(yàn)差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 助劑對(duì)異菌脲抑制煙草灰霉病菌的增效作用

試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。添加6種助劑的異菌脲藥液對(duì)煙草灰霉病菌的活性高于未添加助劑的藥液，但不同的助劑對(duì)異菌脲的增效作用不同。有機(jī)硅助劑杰效利、絲潤(rùn)、久農(nóng)豐、要友對(duì)異菌脲抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)具有較明顯的增效作用。異菌脲對(duì)灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)抑制率為66.39%，添加有機(jī)硅助劑杰效利、絲潤(rùn)、久農(nóng)豐和要友后，藥劑對(duì)菌絲的生長(zhǎng)抑制率分別為88.89%、87.78%、86.94%和83.33%；有機(jī)硅助劑百士威對(duì)異菌脲抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)的增效作用較低，菌絲生長(zhǎng)抑制率為76.67%。而植物油助劑松樹油對(duì)異菌脲抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)的增效作用不明顯，菌絲生長(zhǎng)抑制率為74.72%。

圖1 助劑對(duì)異菌脲抑制煙草灰霉病的增效作用

2.2 助劑對(duì)異菌脲藥液表面張力、擴(kuò)展直徑及持留量的影響

6種助劑對(duì)異菌脲藥液表面張力、擴(kuò)展直徑及在煙草葉片上最大持留量的影響見(jiàn)表1。

由表1可以看出，6種助劑均可以降低異菌脲藥液的表面張力。添加有機(jī)硅助劑藥劑的表面張力小于添加植物油助劑藥劑的表面張力。不同有機(jī)硅助劑對(duì)藥液表面張力的降低也存在差異。其中，有機(jī)硅助劑杰效利的作用最強(qiáng)，表面張力下降42.83%；添加有機(jī)硅助劑要友、絲潤(rùn)、百士威、久農(nóng)豐的異菌脲藥液表面張力分別下降38.37%、32.81%、27.72%和25.73%。添加植物油助劑松樹油后藥液的表面張力下降11.41%。

藥液的擴(kuò)展直徑反映藥液在作物葉片表面的鋪展能力。試驗(yàn)結(jié)果表明：供試的6種助劑均可增加異菌脲藥液的擴(kuò)展直徑。其中，添加有機(jī)硅助劑要友和杰效利的異菌脲藥液的擴(kuò)展直徑增幅較大，增幅分別為310.00%和290.91%；有機(jī)硅助劑絲潤(rùn)、久農(nóng)豐、百士威效果居中；植物油助劑松樹油效果較差，增幅僅為16.36%。

表1 助劑對(duì)藥液表面張力、擴(kuò)展直徑及葉片最大持留量的影響

供試6種助劑均能增加異菌脲藥液在煙草葉片上的持留量。其中，植物油助劑松樹油效果較好，最大持留量增加61.22%；5種有機(jī)硅助劑對(duì)藥液持留量的增幅較小，增幅依次為杰效利＞絲潤(rùn)、要友＞久農(nóng)豐＞百士威。

3 結(jié)論與討論

助劑對(duì)異菌脲抑制煙草灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)具有較明顯的增效作用，不同助劑與異菌脲混配使用效果有差異。供試6種助劑的增效作用依次為：杰效利＞絲潤(rùn)＞久農(nóng)豐＞要友＞百士威＞松樹油。有機(jī)硅助劑的增效作用大于植物油助劑。其增效機(jī)制可能是有機(jī)硅助劑顯著降低異菌脲藥液的表面張力，增大藥液的擴(kuò)展直徑，促進(jìn)藥液在介質(zhì)中的滲透，充分發(fā)揮藥效。助劑對(duì)藥液物理性狀的改變可能與其增效作用有關(guān)[11]。

本試驗(yàn)中，添加有機(jī)硅助劑的異菌脲藥液與添加植物油助劑的藥液相比，表面張力更低，擴(kuò)展直徑更大，但藥液持留量較低，這可能是因?yàn)樗幰禾砑佑袡C(jī)硅助劑后表面張力過(guò)低，使其在煙草葉片表面形成一層極薄的“液膜”，而導(dǎo)致藥液流失[11]。此外，不同有機(jī)硅助劑的增效作用也存在差異，這可能是由于不同有機(jī)硅助劑的結(jié)構(gòu)及質(zhì)量不同，對(duì)藥劑的分散作用也不同[10]。

介質(zhì)不同，助劑對(duì)藥劑的分散作用也不同。劉鵬飛等[6]采用菌絲生長(zhǎng)速率法、菌絲干重法和離體葉片法測(cè)定助劑對(duì)啶菌唑的增效作用，結(jié)果顯示，3種測(cè)定方法篩選出的助劑種類也有差異。本試驗(yàn)僅在室內(nèi)條件下初步探討助劑對(duì)異菌脲藥液的增效作用，此結(jié)果需進(jìn)一步通過(guò)活體植株試驗(yàn)、田間藥效試驗(yàn)明確，并確定其安全有效的使用劑量。