不同品種嘉寶果葉片提取物的抗氧化活性

林寶妹，邱珊蓮，張少平，林巧莉，鄭開(kāi)斌

(福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究所，福建 漳州 363005)

嘉寶果(MyrciariacaulifloraBerg)又名擬愛(ài)神木、樹(shù)葡萄，為桃金娘科擬香桃木屬果樹(shù)，是一種生長(zhǎng)緩慢的熱帶、亞熱帶常綠喬木或灌木,原產(chǎn)于巴西，在玻利維亞、巴拉圭、阿根廷東北部、烏拉圭、秘魯?shù)鹊匾灿蟹植糩1-2]。嘉寶果在我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)引種較早，始于20世紀(jì)80年代末，大陸地區(qū)于2003年從臺(tái)灣嘉義引進(jìn)，目前已發(fā)展成新興的熱帶水果。嘉寶果樹(shù)枝葉繁茂，一年可4次開(kāi)花結(jié)果，花果著生于樹(shù)干或枝條上，觀賞性強(qiáng)。嘉寶果果實(shí)圓潤(rùn)小巧呈深紫色，皮厚且多纖維，果肉多汁、甘甜，其中含有多種芳香成分，如萜烯類、有機(jī)酸類、醇類等，因此果實(shí)香氣四溢[3-5]；果實(shí)低糖低脂，含有多種人體所需營(yíng)養(yǎng)元素、礦物質(zhì)及微量元素，如鈣、磷、鐵、Vc、氨基酸等，可鮮食，還可制成果醬、果酒、果醋等營(yíng)養(yǎng)保健品，價(jià)格高昂，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益[4-7]。另外，嘉寶果果實(shí)含有豐富的花青素、類黃酮、酚酸、單寧以及較少見(jiàn)的縮酚酸等酚類物質(zhì)，因此具有良好的抗氧化、抗炎、降低膽固醇水平、抗惡性腫瘤細(xì)胞增殖、降低血糖等生物活性，可用于治療慢性炎癥疾病、糖尿病、高血脂等[8-12]。綜上所述，嘉寶果是一種集觀賞、食用、經(jīng)濟(jì)、藥用等多種價(jià)值于一體的名貴優(yōu)良樹(shù)種，極具開(kāi)發(fā)研究?jī)r(jià)值。

近年來(lái)，隨著人們對(duì)自由基破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能研究的深入，抗氧化劑研究越來(lái)越受到關(guān)注?？寡趸瘎┛梢砸种谱杂苫漠a(chǎn)生及其氧化作用，保護(hù)生物大分子如DNA、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)等[13]，防止或延緩許多疾病的發(fā)生和發(fā)展，如糖尿病及其并發(fā)癥。目前常用的抗氧化劑多為人工合成，存在安全性及毒性問(wèn)題。因此，從植物中尋找安全有效的天然抗氧化劑已成為發(fā)展趨勢(shì)和研究熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果表明，嘉寶果樹(shù)的果實(shí)、果皮和種子等具有良好的抗氧化性[12,14-16]，但是對(duì)嘉寶果葉片的抗氧化作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)選取嘉寶果樹(shù)4個(gè)品種的嫩/老葉作為研究對(duì)象，分別用水和不同體積分?jǐn)?shù)乙醇進(jìn)行提取，檢測(cè)提取物的總多酚和總黃酮含量及抗氧化活性，探討總多酚、總黃酮含量與抗氧化活性的相關(guān)性，以期能篩選出具有較強(qiáng)抗氧化活性的品種和提取液，為嘉寶果樹(shù)葉的開(kāi)發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材 料

試驗(yàn)于2016-12-2017-04在福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)研究所進(jìn)行。供試嘉寶果品種有沙巴、四季早生、福岡、阿根廷，樹(shù)齡5年。2016-12-08在福建龍海市惠昌樹(shù)葡萄專業(yè)合作社采樣，各嘉寶果品種隨機(jī)選取9株，分別剪取嫩葉(枝條頂部、質(zhì)地柔嫩且葉脈不清晰者)和老葉(枝條近樹(shù)干側(cè)、質(zhì)地較硬且葉脈清晰者)，備用。1,1-苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、2,2′-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS+)、鄰二氮菲(P9375-5G)，購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；標(biāo)準(zhǔn)品沒(méi)食子酸、蘆丁，購(gòu)于日本東京化成工業(yè)株式會(huì)社；抗壞血酸(Vc)、無(wú)水乙醇、95%乙醇(體積分?jǐn)?shù)，下同)、雙氧水、硫酸亞鐵、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、碳酸鈉，購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 設(shè)備和儀器

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，L5S型，上海儀電分析儀器有限公司；超純水機(jī)，UPW-20N型，北京歷元電子儀器有限公司；分析天平，BS110S型，德國(guó)Sartorius集團(tuán)；水浴鍋，HH·S21-8-S型，上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司；臺(tái)式冷凍恒溫振蕩器，THZ-C-1型，蘇州培英實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；粉碎機(jī)，WBL2521H型，佛山美的集團(tuán)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，RE-52AA型，上海亞榮生化儀器廠；電熱鼓風(fēng)干燥箱，GZX-9246MBE，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 嘉寶果葉片提取液的制備 將采集的嘉寶果新鮮葉片用粉碎機(jī)粉碎1 min(28 000 r/min)，取適量粉碎樣品與不同溶劑(水、體積分?jǐn)?shù)50%和70%乙醇、無(wú)水乙醇)按1∶10的質(zhì)量(g)體積(mL)比混合，在搖床(30 ℃，180 r/min)中振蕩提取16 h，再以6 000 r/min離心15 min，取上清，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至冷凝管中無(wú)溶劑滴出為止。濃縮液用水溶解定容至10 mL，未見(jiàn)沉淀，4 ℃保存，待測(cè)。另取一部分葉片，稱其鮮質(zhì)量后，烘干至恒質(zhì)量，計(jì)算干物質(zhì)占比。樣品質(zhì)量濃度以每毫升水溶液含有的新鮮葉片質(zhì)量計(jì)，單位為mg/mL。

1.3.2 總多酚含量的測(cè)定 參照劉禹等[17]的方法并作適當(dāng)修改進(jìn)行試驗(yàn)。取0.1 mL樣品液，加入0.1 mL 1.0 mol/L Folin-Ciocalteu試劑和2.8 mL水，混勻，靜置8 min后加入2 mL 75 g/L碳酸鈉溶液，搖勻，室溫下密封避光2 h，于765 nm處測(cè)其吸光度(D765 nm)，平行測(cè)定3次。以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，建立方程：y=0.002x+0.061(R2=0.995 2)；式中：y為D765 nm值，x為沒(méi)食子酸質(zhì)量濃度(0～300 μg/mL)。不同提取液中多酚含量用每克干燥葉片中所含的相當(dāng)于沒(méi)食子酸(GAE)的量進(jìn)行計(jì)算，單位為mg/g。試驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3.3 總黃酮含量的測(cè)定 參照劉禹等[17]的方法并作適當(dāng)修改進(jìn)行試驗(yàn)。取1 mL樣品液，加入0.5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液，混勻，靜置6 min后加入0.5 mL 100 g/L硝酸鋁溶液，搖勻靜置6 min，然后加入4 mL 40 g/L氫氧化鈉溶液，最后加入水定容至10 mL，靜置15 min，于510 nm處測(cè)其吸光度(D510 nm)，平行測(cè)定3次。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，建立方程：y=1.250x-0.001(R2=0.999 9)；式中：y為D510 nm值，x為蘆丁質(zhì)量濃度(0～60 μg/mL)。不同提取液中總黃酮含量用每克干燥葉片中所含的相當(dāng)于蘆丁(RE)的量進(jìn)行計(jì)算，單位為 mg/g。試驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3.4 抗氧化活性的測(cè)定 DPPH·自由基清除能力的測(cè)定參照Li等[18]的方法并稍作改動(dòng)進(jìn)行試驗(yàn)。DPPH·溶劑為體積分?jǐn)?shù)95%乙醇，以抗壞血酸為對(duì)照品，建立方程：y=948.763x+1.626 (R2=0.996 6),式中：y為DPPH·自由基清除率，x為抗壞血酸質(zhì)量濃度(20～100 μg/mL)。羥自由基(·OH)清除能力的測(cè)定參照Caillet等[19]的鄰二氮菲法，以抗壞血酸為對(duì)照品，建立方程：y=31.298x-33.209(R2=0.996 8),式中：y為·OH自由基清除率，x為抗壞血酸質(zhì)量濃度(1.800～3.600 mg/mL)。ABTS+自由基清除能力的測(cè)定采用Hu等[20]的方法，以抗壞血酸為對(duì)照品，建立方程：y=596.050x+3.274(R2=0.999 5),式中：y為ABTS+自由基清除率，x為抗壞血酸質(zhì)量濃度(20～100 μg/mL)。自由基清除試驗(yàn)中樣品均設(shè)5個(gè)濃度梯度，最高濃度設(shè)定為使自由基清除率達(dá)50%～100%的濃度，最低濃度設(shè)定為使自由基清除率達(dá)0～20%的濃度。以樣品質(zhì)量濃度為自變量，自由基清除率為因變量，繪制回歸曲線，求回歸方程，計(jì)算自由基清除率為50%時(shí)的樣品濃度，最終以樣品干質(zhì)量濃度表示半數(shù)清除濃度(EC50)，每組試驗(yàn)重復(fù)3次。自由基清除率的計(jì)算公式如下：

DPPH·清除率=[1-(Ai-Aj)/A0]×100%。

式中：A0為對(duì)照管D517 nm值，Ai為樣品管D517 nm值，Aj為樣品本底D517 nm值。

·OH清除率=[(A2-A1)/(A0-A1)]×100%。

式中：A0為未損傷管D510 nm值，A2為樣品管D510 nm值，A1為損傷管D510 nm；

ABTS+清除率=[1-(Ai-Aj)/A0]×100%。

式中：A0為對(duì)照管D734 nm值，Ai為樣品管D734 nm，Aj為樣品本底D734 nm值。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行提取物總多酚、總黃酮含量與抗氧化活性相關(guān)性分析和單因素方差分析。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種嘉寶果葉片提取物中的總多酚含量

不同品種嘉寶果葉片的干物質(zhì)百分比見(jiàn)表1。根據(jù)表1 數(shù)據(jù)計(jì)算樣品總多酚含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 不同品種嘉寶果葉片干物質(zhì)的百分比Table 1 Dry weight ratios of leaves from different cultivars of Jaboticaba %

表2結(jié)果表明，無(wú)論用哪種溶劑提取，各嘉寶果品種嫩葉的總多酚含量均高于同品種老葉，最高的為沙巴嫩葉(273.70 mg/g)；各嘉寶果品種嫩葉總多酚含量為0.12～273.70 mg/g，老葉為6.82～151.55 mg/g，4個(gè)品種老葉水提取物中均未檢測(cè)到總多酚。由表2可見(jiàn)，各嘉寶果品種葉片提取物中的總多酚含量均表現(xiàn)為醇提取物極顯著高于水提取物(P<0.01)，總多酚含量高低依次表現(xiàn)為 70%乙醇提取物>50%乙醇提取物>無(wú)水乙醇提取物>水提取物。4個(gè)嘉寶果品種，70%和50%乙醇提取物總多酚含量的變化規(guī)律一致，由高到低依次表現(xiàn)為沙巴嫩葉>四季早生嫩葉>阿根廷嫩葉>四季早生老葉>福岡嫩葉>阿根廷老葉>沙巴老葉>福岡老葉；無(wú)水乙醇提取物中總多酚含量以沙巴嫩葉最高，沙巴老葉最低；水提取物總多酚含量以沙巴嫩葉最高，阿根廷嫩葉最低。

表2 4個(gè)品種嘉寶果葉片不同溶劑提取物中的總多酚含量比較 Table 2 Comparison of total polyphenols (TP) contents of leaf extracts of different solvents from 4 Jaboticaba cultivars mg/g

注：-表示未測(cè)到。同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。
Note:-Means not detected.Different small letters in the same column indicate significant different at 0.05 level (P<0.05) and different capital letters in the same column indicate significant different at 0.01 level (P<0.01).The same below.

2.2 不同品種嘉寶果葉片提取物中的總黃酮含量

表3結(jié)果表明，無(wú)論用哪種溶劑提取，各嘉寶果品種嫩葉的總黃酮含量均高于同品種老葉，總黃酮含量最高為阿根廷嫩葉(213.45 mg/g)；嫩葉總黃酮含量為23.12～213.45 mg/g，老葉為6.28～130.65 mg/g。

由表3可見(jiàn)，各嘉寶果品種均表現(xiàn)為醇提取物中總黃酮含量高于水提取物，醇提取物中總黃酮含量以阿根廷嫩葉最高，其次為四季早生嫩葉；水提取物中總黃酮含量以沙巴嫩葉最高，其次為四季早生嫩葉。除沙巴嫩葉、四季早生嫩葉和福岡老葉外，其他葉片各溶劑提取物總黃酮含量均表現(xiàn)為：70%乙醇提取物>50%乙醇提取物>無(wú)水乙醇提取物>水提取物。

表3 4個(gè)品種嘉寶果葉片不同溶劑提取物中的總黃酮含量比較Table 3 Comparison of total flavonoid (TF) contents of leaf extracts of different solvents from 4 Jaboticaba cultivars mg/g

2.3 不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力

不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)DPPH·自由基的清除效果見(jiàn)表4。表4表明，4個(gè)品種葉片不同溶劑提取物均對(duì)DPPH·自由基有一定的清除效果，同品種嫩葉提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力均高于老葉，線性相關(guān)系數(shù)0.960 450%乙醇提取物>無(wú)水乙醇提取物>水提取物。對(duì)同一種溶劑提取所獲的8種樣品進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，4種溶劑中均以沙巴嫩葉提取物抗氧化活性最高，其70%乙醇提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力(EC50=0.093 g/L)最強(qiáng)，50%乙醇提取物(EC50=0.100 g/L)次之，與現(xiàn)在普遍接受的抗氧化劑抗壞血酸(EC50=0.051 g/L)相比，沙巴嫩葉70%和50%乙醇提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力約是其50%，說(shuō)明沙巴嫩葉70%和50%乙醇提取物具有較強(qiáng)的抗氧化活性。在醇提取物中，以沙巴老葉無(wú)水乙醇提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力最弱(EC50=1.409 g/L)；在所有提取物中，四季早生老葉水提取物對(duì)DPPH·自由基的清除能力最弱(EC50=19.289 g/L)。

表4 4種嘉寶果葉片不同溶劑提取物清除DPPH·自由基效果的比較Table 4 Comparison of scavenging effects on DPPH·radical of leaf extracts of different solvents from 4 Jaboticaba cultivars

注：回歸方程中，x表示樣品質(zhì)量濃度，y表示自由基清除率。下表同。
Note:In the regression equation,xrepresents the concentration of sample andyrepresents the scavenging rate of free radical.The same below.

2.4 不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)·OH自由基的清除能力

不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)·OH自由基的清除效果見(jiàn)表5。由表5可見(jiàn)，除沙巴老葉、四季早生嫩葉外，其余葉片不同溶劑提取物清除·OH自由基的能力大小依次表現(xiàn)為：50%乙醇提取物>70%乙醇提取物>無(wú)水乙醇提取物>水提取物。沙巴嫩葉50%和70%醇提取物清除·OH自由基的能力最強(qiáng)，EC50均為0.128 g/L，遠(yuǎn)超現(xiàn)在普遍接受的抗氧化劑抗壞血酸對(duì)·OH自由基的清除能力(EC50=2.659 g/L)。此外，沙巴嫩葉、四季早生嫩葉、福岡嫩葉水提取物對(duì)·OH自由基的清除能力也都高于抗壞血酸。

表5 4種嘉寶果葉片不同溶劑提取物清除·OH自由基效果的比較Table 5 Comparison of scavenging effects on ·OH radical of leaf extracts of different solvents from 4 Jaboticaba cultivars

2.5 不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)ABTS+自由基的清除能力

不同品種嘉寶果葉片提取物對(duì)ABTS+自由基的清除效果見(jiàn)表6。由表6可見(jiàn)，與·OH自由基的清除能力結(jié)果相似，4個(gè)品種葉片不同溶劑提取物對(duì)ABTS+自由基的清除能力由大到小依次表現(xiàn)為：50%乙醇提取物>70%乙醇提取物>無(wú)水乙醇提取物>水提取物。所有樣品中，以沙巴嫩葉50%乙醇提取物效果最佳(EC50=0.142 g/L)，沙巴嫩葉70%乙醇提取物次之(EC50=0.150 g/L)，四季早生老葉水提取物效果最差(EC50=16.943 g/L)。

表6 4種嘉寶果葉片不同溶劑提取物清除ABTS+自由基效果的比較Table 6 Comparison of scavenging effects on ABTS+ radical of leaf extracts of different solvents from 4 Jaboticaba cultivars

表6(續(xù)) Contined table 6

2.6 總多酚、總黃酮含量與抗氧化活性的相關(guān)性

4個(gè)品種嘉寶果葉片提取物總多酚、總黃酮含量與其抗氧化活性的相關(guān)性見(jiàn)表7。表7表明，所有葉片醇提取物總多酚含量與DPPH·、·OH、ABTS+自由基清除能力均呈極顯著正相關(guān)性(P<0.01)；水提取物總多酚含量?jī)H與ABTS+自由基清除能力呈極顯著正相關(guān)性(P<0.01)。無(wú)水乙醇提取物總黃酮含量與ABTS+、DPPH·自由基清除能力極顯著正相關(guān)(P<0.01)，與·OH自由基清除能力顯著正相關(guān)(P<0.05)；50%乙醇提取物總黃酮含量?jī)H與ABTS+自由基清除能力顯著正相關(guān)(P<0.05)；水提取物總黃酮含量?jī)H與ABTS+、DPPH·自由基清除能力顯著正相關(guān)(P<0.05)。

表7 嘉寶果葉片提取物中總多酚和總黃酮含量與抗氧化活性的相關(guān)性分析Table 7 Correlation between total polyphenols and total flavonoids and the antioxidant activities of extracts of Jaboticabal leaves

注：*表示相關(guān)性顯著(P<0.05)； **表示相關(guān)性極顯著(P<0.01)。
Note: * Means significant correlation at 0.05 level (P<0.05);** Means significant correlation at 0.01 level (P<0.01).

3 討論與結(jié)論

本研究對(duì)采自同一農(nóng)場(chǎng)的4個(gè)品種嘉寶果嫩/老葉分別用無(wú)水乙醇、70%乙醇、50%乙醇和水提取，共獲得32個(gè)提取液樣品，比較其總多酚、總黃酮含量和抗氧化活性。結(jié)果表明，同一品種嫩葉的總多酚、總黃酮含量均高于老葉。潘劍用等[21]在研究桑葉抗氧化活性時(shí)發(fā)現(xiàn)，桑樹(shù)上部葉的功能成分含量如多酚、黃酮和多糖等均比中部葉和下部葉高。陳明等[22]檢測(cè)了6個(gè)品種費(fèi)約果葉片甲醇提取物的多酚含量時(shí)，也得出嫩葉的多酚含量均較成熟葉高的結(jié)論，但總黃酮含量在成熟葉中較高，這與本研究稍有不同。植物在幼嫩期具有更高總多酚含量的特征在藍(lán)莓[23]、沙棗[24]、草莓[25]等植物中也有發(fā)現(xiàn)。值得一提的是，Alezandro等[26]按照嘉寶果的果皮顏色將果實(shí)分為綠色期、淡粉期、紅色期、深紅期、黑紫期等5個(gè)成熟期，測(cè)定5個(gè)成熟期果實(shí)的總多酚含量、DPPH·自由基清除能力和亞鐵還原能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠色期的果實(shí)總多酚含量、DPPH·自由基清除能力和亞鐵還原能力最高，黑紫期的果實(shí)最低，結(jié)合本研究結(jié)果可知，嘉寶果葉片和果實(shí)成熟度對(duì)多酚含量都有明顯影響，幼嫩時(shí)期的果實(shí)和葉片多酚含量較高。羅婭等[27]研究發(fā)現(xiàn)，植物的基因型顯著影響不同品種費(fèi)約果葉片的總多酚和原花青素含量；不同品種的油橄欖葉總多酚含量存在差異[28]。因此筆者推測(cè)，嘉寶果不同品種間總多酚與總黃酮的含量差異，可能是受遺傳因素影響所致。

不同溶劑對(duì)提取物化學(xué)組成及含量有很大影響[29-31]，如鹿銜草的甲醇提取物總多酚含量高于氯仿和石油醚提取物[32]，連翹葉乙醇提取物總多酚含量高于乙酸乙酯和水提取物[33]。有報(bào)道指出，75%乙醇具有較強(qiáng)的破壁能力，可以有效穿透植物細(xì)胞壁，有助于充分提取植物有效成分[34]。本研究中，各樣品70%乙醇提取物中總多酚含量均高于其他溶劑提取物。本研究發(fā)現(xiàn)，4個(gè)品種嘉寶果葉片不同溶劑提取物對(duì)DPPH·、ABTS+清除能力低于抗壞血酸，而對(duì)·OH的清除能力則遠(yuǎn)高于抗壞血酸，其中以50%和70%乙醇提取物的抗氧化性最佳，水提取物最差；50%和70%乙醇提取物總多酚、總黃酮含量明顯高于無(wú)水乙醇和水提取物，表明50%～70%乙醇溶液能更好地溶出嘉寶果葉片中的多酚和黃酮類物質(zhì)。

本研究相關(guān)性分析結(jié)果表明，各嘉寶果品種醇提取物對(duì)DPPH·、ABTS+、·OH 等3種自由基的清除能力與總多酚含量均呈極顯著相關(guān)性，總多酚含量高則對(duì)自由基的半數(shù)清除濃度低，顯示出更高的抗氧化能力。有關(guān)紅薯葉的研究表明，不同溶劑紅薯葉提取物以乙酸乙酯層總多酚含量最高，其對(duì)DPPH·、ABTS+自由基的清除能力以及對(duì)ORAC氧自由基的吸收能力均大于其他溶劑提取物[35]；藍(lán)莓各部位對(duì)·OH自由基的清除能力和鐵還原能力隨總多酚質(zhì)量濃度的提高而升高，表現(xiàn)出正相關(guān)性[23]；馬利華等[36]研究顯示，相比水、三氯甲烷及乙酸乙酯3種溶劑，70%乙醇牛蒡皮提取液中總多酚含量最高，對(duì)DPPH·、·OH自由基的清除能力也最強(qiáng)。上述研究結(jié)果均與本研究類似。本研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)水乙醇提取物對(duì)DPPH·、ABTS+和·OH 3種自由基的清除能力與總黃酮含量顯著相關(guān)；50%乙醇提取物僅對(duì)ABTS+自由基清除能力與總黃酮含量顯著相關(guān)；水提取物對(duì)DPPH·、ABTS+2種自由基的清除能力與總黃酮含量顯著相關(guān)；而70%乙醇提取物的自由基清除能力與總黃酮含量無(wú)明顯相關(guān)性。有研究發(fā)現(xiàn)，薄荷不同溶劑提取物清除DPPH·、ABTS+和鐵離子還原能力與黃酮含量相關(guān)性較小[37]，這與本研究結(jié)果類似。鐵皮石斛提取物對(duì)DPPH·、ABTS+的清除能力與總黃酮含量相關(guān)性較強(qiáng)，對(duì)·OH的清除能力則與總多酚含量顯著相關(guān)[38]。說(shuō)明總多酚和總黃酮含量均能夠影響提取物的抗氧化活性，而嘉寶果葉片提取物抗氧化活性的差異主要來(lái)源于各提取物中總多酚含量的差異，總黃酮含量對(duì)抗氧化活性影響較小。

本研究中，沙巴嫩葉4種溶劑提取液的抗氧化活性以及總多酚含量均優(yōu)于其他品種，總多酚含量高達(dá)273.70 mg/g，約占已報(bào)道的嘉寶果果皮總多酚含量(556.3 g/kg)的50%[12]，與青茶中的盛華茗茶茶總多酚含量相當(dāng)(277.47 g/kg)，而高于其他10種茶葉茶總多酚含量，如金駿眉、鐵觀音、大紅袍等[39]。

綜上，本研究不同品種嘉寶果葉片總多酚和總黃酮含量存在明顯差異；同一品種嫩葉的抗氧化性以及總多酚、總黃酮含量高于老葉；50%和70%乙醇提取物的總多酚、總黃酮含量及抗氧化活性優(yōu)于無(wú)水乙醇和水提取物；醇提取物抗氧化性與總多酚含量極顯著正相關(guān)；所有樣品中，沙巴嫩葉的總多酚含量和抗氧化能力最優(yōu)。但提取物中發(fā)揮抗氧化活性的主要成分以及不同成分之間是否存在協(xié)同作用，有待進(jìn)一步研究。