不同檢測(cè)方法在不同種屬及易混淆中藥飲片鑒別中的應(yīng)用研究

李杰

山東省兗礦集團(tuán)有限公司總醫(yī)院藥劑科，山東兗州 273500

隨著科技的不斷創(chuàng)新和醫(yī)療技術(shù)的快速發(fā)展，尤其是西醫(yī)在我國(guó)的迅猛發(fā)展，在一定程度上對(duì)我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)造成了沖擊[1]。雖然在檢查、治療等方面西醫(yī)優(yōu)勢(shì)突出，但是，我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)已經(jīng)流傳了幾千年，對(duì)人類(lèi)的健康做出了巨大貢獻(xiàn)，且在很多方面，尤其是疑難雜癥的治療上，其療效是西醫(yī)所不能達(dá)到的[2]。近年來(lái)，之所以出現(xiàn)中醫(yī)治療效果不顯著的狀況，在很大程度上與藥材的質(zhì)量密切相關(guān)[3]，以前的中藥飲片多為野生，且炮制講究，藥材道地，藥效自然顯著，而今，藥材多為人工養(yǎng)殖，且多不道地，更不乏一些藥商為了牟取利益，以次充好，甚至以假充真，嚴(yán)重影響了方子的治療效果[4]。因此，對(duì)中藥飲片進(jìn)行鑒別，就變得尤為急迫、重要。目前，對(duì)中藥飲片的鑒別主要在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，專(zhuān)業(yè)性強(qiáng)、操作復(fù)雜、時(shí)間漫長(zhǎng)、價(jià)格高昂，多有不便[5]。該文選取了2016年1月—2017年12月期間該院的臨床常用162種中藥飲片，旨在探索一種更為簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確有效的中藥飲片鑒別方式，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究根據(jù)《中國(guó)藥典》2010版一部規(guī)定的品種[6]，經(jīng)由相關(guān)專(zhuān)家鑒定，選取了該院的臨床常用162種中藥飲片。

1.2 設(shè)備

實(shí)驗(yàn)所用設(shè)備包括：便攜式熒光（紫外）、激光筆（紅外線激光燈、紫外光驗(yàn)鈔燈、LED日光燈四合一）（紅外線:630 nm;紫外光:365 nm/254 nm；光斑直徑:6 M≤φ10 mm；工作電壓:DC 4.5 V）[7]。

1.3 研究方法

對(duì)所有中藥應(yīng)用便攜式熒光（紫外）、激光筆（紅外線:630 nm;紫外光:365 nm/254 nm）對(duì)選取的中藥飲片的表面、剖面或溶液、提取液進(jìn)行照射，根據(jù)顏色差異對(duì)中藥飲片進(jìn)行鑒別。對(duì)兩組檢測(cè)手段的檢測(cè)準(zhǔn)確率進(jìn)行評(píng)價(jià)，準(zhǔn)確率的計(jì)算最終是依靠藥物化學(xué)成分含量進(jìn)行評(píng)定，準(zhǔn)確率=確定的中藥數(shù)量÷總藥物數(shù)量×100.00%[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

對(duì)研究中搜集到的數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 區(qū)分不同來(lái)源的中藥飲片

應(yīng)用便攜式熒光（紫外）、激光筆進(jìn)行飲片斷面照射，懷牛膝紫外燈下呈黃白色熒光，而川牛膝斷面紫外光燈下顯淺藍(lán)色熒光；在紫外光燈(365 nm)下，天然珍珠呈淺藍(lán)色，養(yǎng)殖珍珠呈亮黃色，人造珍珠則無(wú)熒光；紫外光燈下生曬參木部顯蘭色熒光，紅參顯蘭紫色熒光，白參顯亮蘭色熒光。在熒光顯微鏡下直立百部粉末呈竹黃綠色，蔓生百部根粉末呈五簪綠色，對(duì)葉百部粉末顯清水蘭色[4]。便攜式熒光（紫外）筆對(duì)不同來(lái)源中藥飲片的診斷準(zhǔn)確率為97.53%，激光筆準(zhǔn)確率98.15%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=0.392,P＞0.05），見(jiàn)表 1。

2.2 區(qū)分同科中藥飲片

對(duì)藜蘆表皮剝落處和金針菜根進(jìn)行橫切，用便攜式熒光（紫外）、激光筆對(duì)切面進(jìn)行照射，在紫外光燈下藜蘆表皮剝落處發(fā)藍(lán)色熒光，金針菜根的橫切面呈亮黃白色熒光。便攜式熒光（紫外）筆對(duì)區(qū)分同科中藥飲片的診斷準(zhǔn)確率為96.30%，激光筆準(zhǔn)確率95.68%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=0.895,P＞0.05），見(jiàn)表 1。

表1 兩組檢測(cè)手段準(zhǔn)確率統(tǒng)計(jì)[n（%）]

2.3 區(qū)分易混淆的中藥飲片

用水或乙醇分別浸泡五加皮和香加皮，在紫外光燈下觀察其水泡液或者乙醇浸出液，紫外燈下，顯紫色熒光，加稀鹽酸其顯色熒光不變，加氫氧化鈉產(chǎn)生黃綠色熒光的為香加皮，無(wú)反應(yīng)的為五加皮；再如地骨皮與大青根皮，紫外燈下，地骨皮斷面木栓層呈棕色，韌皮部呈淡藍(lán)色熒光，呈淡藍(lán)色熒光的為大青根皮。便攜式熒光（紫外）筆區(qū)分易混淆的中藥飲片準(zhǔn)確率97.53%，激光筆區(qū)分易混淆的中藥飲片準(zhǔn)確率96.30%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=0.769,P＞0.05），見(jiàn)表 2。

2.4 區(qū)分正品與替代品

便攜式熒光（紫外）、激光筆還可以區(qū)分正品與替代品，如：麥冬與代用品山麥冬、大麥冬的鑒別。將其切片置紫外光燈365 nm下觀察，正品麥冬顯淺藍(lán)色熒光，大麥冬顯藍(lán)色熒光，山麥冬無(wú)熒光現(xiàn)象。便攜式熒光（紫外）筆區(qū)分正品與替代品準(zhǔn)確率94.44%，激光筆區(qū)分正品與替代品準(zhǔn)確率95.06%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.614,P＞0.05），見(jiàn)表 2。

表2 兩組檢測(cè)手段準(zhǔn)確率統(tǒng)計(jì)表[n（%）]

2.5 根據(jù)飲片的提取液或浸泡液進(jìn)行鑒別

有的飲片需要經(jīng)過(guò)特定溶劑提取后，將提取液滴于濾紙上才能進(jìn)行熒光觀察[9]。如真假大黃，分別將真大黃和假大黃的粉末用乙醇進(jìn)行浸泡，浸泡液滴在濾紙上，紫外燈下，顯棕色至棕紅色熒光的為真大黃，顯亮藍(lán)紫色熒光的假大黃；香加皮的水或乙醇浸出液在紫外燈下顯紫色熒光，加稀鹽酸熒光不變；加氫氧化鈉試液產(chǎn)生黃綠色熒光[10]；而地骨皮70%乙醇浸出液則顯淡藍(lán)色熒光；用乙醇回流的方式提取皺皮木瓜粉末和光皮木瓜粉末，將其提取液滴在濾紙上[11]，干后，紫外燈下，顯藍(lán)色熒光的為皺皮木瓜，顯鮮黃色熒光的為光皮木瓜；用乙醇浸泡紫苑和山紫苑，將浸泡液滴在濾紙上，熒光燈下，顯藍(lán)色熒光斑點(diǎn)的為紫苑，顯黃色或淡黃色熒光斑點(diǎn)的山紫苑[12]。

3 討論

隨著醫(yī)學(xué)，尤其是中醫(yī)學(xué)的發(fā)展，藥品市場(chǎng)上參差不齊，良莠并存的中藥飲片，嚴(yán)重影響了中醫(yī)中藥的臨床治療效果，中藥飲片需要更為簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的鑒別方式對(duì)偽品、替代品、不道地品等進(jìn)行區(qū)分篩選，這也是中藥質(zhì)控科學(xué)發(fā)展的需要[13]。在此背景下，該文提出了這一課題，并進(jìn)行了這一研究。

臨床上中藥種類(lèi)之多，常常難于鑒別，甚至混淆。原植物鑒定、經(jīng)驗(yàn)性狀鑒別、顯微鑒定等是真?zhèn)舞b別最常用方法，但需要一定的儀器，對(duì)于基層中草藥工作者存在一定的難度[14]，該研究應(yīng)用便攜式熒光（紫外）、激光筆對(duì)飲片斷面、剖面或提取液、浸泡液進(jìn)行照射，通過(guò)不同的熒光色對(duì)飲片進(jìn)行鑒別方法簡(jiǎn)便、快捷、環(huán)保[15]。但是也應(yīng)看到，熒光鑒別的結(jié)果也受多方面因素的影響，如飲片本身特性、實(shí)驗(yàn)方法、標(biāo)定熒光的依據(jù)以及人視覺(jué)的差異等，各個(gè)環(huán)節(jié)也難免摻雜主觀因素[16]，所以此方法需要進(jìn)一步規(guī)范細(xì)節(jié)，制定統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

同本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，便攜式熒光（紫外）筆對(duì)不同來(lái)源中藥飲片的診斷準(zhǔn)確率為97.53%，激光筆準(zhǔn)確率98.15%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.392,P＞0.05）；便攜式熒光（紫外）筆對(duì)區(qū)分同科中藥飲片的診斷準(zhǔn)確率為96.30%，激光筆準(zhǔn)確率95.68%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.895,P＞0.05）；便攜式熒光（紫外）筆區(qū)分易混淆的中藥飲片準(zhǔn)確率97.53%，激光筆區(qū)分易混淆的中藥飲片準(zhǔn)確率96.30%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.769,P＞0.05）；便攜式熒光（紫外）筆區(qū)分正品與替代品準(zhǔn)確率94.44%，激光筆區(qū)分正品與替代品準(zhǔn)確率95.06%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.614,P＞0.05）。 由此可見(jiàn)，便攜式熒光(紫外)、激光筆均可以快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、環(huán)保地鑒別不同種屬及易混淆的中藥飲片，兩種檢查筆臨床效果相當(dāng)。學(xué)者李莉等[17]探討了便攜式熒光(紫外)、激光筆在不同種屬及易混淆中藥飲片中鑒別應(yīng)用，經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，兩種檢測(cè)筆臨床準(zhǔn)確率達(dá)98.59%，臨床診斷價(jià)值較大，與該研究結(jié)果一致。

綜上所述，便攜式熒光（紫外）、激光筆可以快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、環(huán)保地鑒別不同種屬及易混淆的中藥飲片，適用于藥監(jiān)、醫(yī)院、藥企等，具有廣泛的應(yīng)用前景。