鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄對生化改良的光合與生理響應(yīng)

王延秀,李飛鴻,武云龍,郭愛霞,胡 亞,朱燕芳,賈旭梅

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,甘肅 蘭州 730070)

葡萄(VitisviniferaLinn.)是世界落葉果樹中栽培面積最大、產(chǎn)量最高的樹種之一，我國西北地區(qū)具有發(fā)展葡萄得天獨(dú)厚的氣候條件[1]。然而，該區(qū)強(qiáng)烈的地表蒸發(fā)及不合理灌溉使得土壤次生鹽漬化發(fā)展迅速，鹽堿地面積日益擴(kuò)大，嚴(yán)重制約葡萄與葡萄酒產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[2]。

目前，鹽堿地主要通過物理、化學(xué)和生物措施進(jìn)行改良[5-9]?？屯粮牧?、深松土壤、秸稈覆蓋、水旱輪作、上農(nóng)下漁等物理措施能不同程度地減輕土壤鹽害。利用酸堿中和的原理，用磷石膏、脫硫石膏、過磷酸鈣、土壤綜合改良劑等化學(xué)藥劑進(jìn)行鹽堿地改良也取得了良好效果[3]。趙秋等用草炭、牛糞堆肥、腐殖酸鈉、綠肥、蚯蚓糞和生物與無機(jī)物質(zhì)制成不同有機(jī)、無機(jī)土壤改良劑改良苜蓿種植地，顯著提高了苜蓿產(chǎn)量，且土壤pH值降低[4]。有研究顯示，生物措施是改良鹽堿地的有效途徑，植物的根、莖、葉返回土壤后既能改善土壤結(jié)構(gòu)，增加有機(jī)質(zhì)，又可提高肥力[5]。

植物在鹽漬環(huán)境中的存活以減小生長量為代價(jià)，抑制生長是鹽、堿脅迫對植物最明顯的效應(yīng)[6]。目前對植物的耐鹽性鑒定有兩種方法，一種以形態(tài)觀察、生長測定為主的直接鑒定方法；另一種是利用生理生化指標(biāo)為主的間接鑒定法[7]。葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)技術(shù)由于其快速和非破壞性的優(yōu)點(diǎn)，成為研究植物光合結(jié)構(gòu)功能和逆境脅迫響應(yīng)的主要工具。葉綠素?zé)晒獾淖兓梢栽谝欢ǔ潭壬戏从衬婢趁{迫對植物的影響[3]。Hatami等[8]認(rèn)為高鹽脅迫下葡萄葉面積、光合色素和氣孔導(dǎo)度明顯降低。黃立華等的研究結(jié)果表明蘇打鹽堿脅迫抑制了羔羊草的光合作用[9]。有關(guān)葡萄尤其是砧木耐單鹽和單堿方面的研究較多[10]，但對于改良劑對栽培品種葡萄鹽堿脅迫的影響及改良效果卻鮮見報(bào)道。

本試驗(yàn)以‘紅地球’葡萄為材料，在盆栽條件下研究不同生物、化學(xué)改良劑對其生長、光合與葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)的影響，探討鹽堿脅迫下葡萄的生理響應(yīng)，以期為鹽漬土地改良和本品種的推廣提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)塑料溫室中進(jìn)行。2013年11月采集‘紅地球’葡萄冬剪時(shí)的枝條，在地面50 cm以下埋土處理。2014年3月20日將枝條取出，選擇健壯枝條剪成15～20 cm長的插穗，并摳芽(只保留頂部一個(gè)芽)，在100 mg·L-1IBA中浸泡10 h，扦插在盛裝有250 g基質(zhì)和牛糞(20%蛭石，20%珍珠巖，60%泥炭)的育苗盆(內(nèi)徑10 cm，深18 cm)中育苗，每盆1株，統(tǒng)一管理。植株具10片真葉時(shí)，選擇長勢一致的幼苗70盆，進(jìn)行鹽堿脅迫處理。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：10盆‘紅地球’葡萄苗為一個(gè)處理，處理組每隔3天澆灌鹽堿土淋溶液(表1)150 ml 1次，共3次，之后每7 d向各盆中澆灌鹽堿土淋溶液和改良劑一次，各處理改良劑為：處理1(GG)2.5 g碾碎的新鮮牧草，處理2(DG)2.5g碾碎的枯草，處理3(PS)硫酸鉀1.74 g，處理4(CS)過磷酸鈣2.52 g，處理5(FS)硫酸亞鐵1.52 g；對照組(CK1)各盆相應(yīng)澆灌150 ml清水，對照組(CK2)各盆相應(yīng)澆灌150 ml鹽堿土淋溶液，在改良處理后7、14、21、28、35 d進(jìn)行采樣測定各項(xiàng)指標(biāo)，各處理重復(fù)3次。

表1 試驗(yàn)所用鹽堿土壤的化學(xué)性質(zhì)Table 1 Chemical properties of saline-alkaline soil in the test

1.2 測定方法

1.2.1 株高生長量的測定 分別調(diào)查加入改良劑前后幼苗的株高H0和H1，計(jì)算不同處理的株高絕對生長量ΔH=H1-H0，用鋼卷尺和游標(biāo)卡尺各測定1次，精確到0.1 cm。

1.2.2 光合作用氣體交換參數(shù)的測定 選取枝條中部5片成熟葉片(做標(biāo)記)為測定對象，從脅迫處理當(dāng)天開始，以后每隔7 d上午8∶00進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)測定。用Li-6400光合儀(LI-COR公司，美國)測定Pn、Gs、Tr、Ci，設(shè)定CO2濃度為400 μmol·mol-1，環(huán)境溫度25℃，光強(qiáng)為800 μmol·m-2·s-1。

1.2.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測定 將葉片充分暗適應(yīng)30 min后，在同一葉片上用Li-6400光合儀(LI-COR公司，美國)測定熒光參數(shù)[11]，記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算Fv/Fm、Fv/Fo、qN、qP；測定重復(fù)3次。

1.2.4 生理生化指標(biāo)的測定 SOD、POD、CAT活性采用李合生[12]的方法測定；REC采用電導(dǎo)率法測定[13]。Pro含量采用酸性茚三酮法測定[14]。葉綠素含量采用分光光度計(jì)法測定，提取液為95%乙醇，在黑暗避光處提取24 h后進(jìn)行測定。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用Microsoft Excel 2010進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)整理，用軟件origin 8.0作圖，用R語言進(jìn)行相關(guān)性分析，運(yùn)用SPSS 22.0進(jìn)行顯著性及主成分分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同改良劑對‘紅地球’葡萄株高生長量的影響

如圖1所示，改良劑處理的株高生長量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，對照CK1的生長量在整個(gè)處理周期無顯著差異，CK2顯著下降，到第35天其生長量僅為0.07 cm，顯著低于其他處理。DG、CS、FS處理的株高生長量總體上增加，其中CS處理的增加幅度為151 .11%，高于DG和FS處理。第35天，F(xiàn)S處理與CK1無顯著差異，與其它處理差異顯著。

注：數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值與標(biāo)準(zhǔn)誤，不同的字母表示在P<0.05水平上差異顯著，下同。Note: The column means the average of the parameters in each line, and the error bars show the standard error of three replicates. Bars superscripted with different letters are significantly different at P<0.05 as determined by Duncan method. The same as below.圖1 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄株高生長量的影響Fig.1 Effect of different treatments on plant height increment under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

2.2 不同改良劑對‘紅地球’葡萄葉片光合作用參數(shù)的影響

圖2A所示，CK1處理的Pn呈上升趨勢，上升幅度為50.32%，GG處理的Pn沒有明顯變化。CK2、DG、PS、CS和FS處理均呈下降趨勢，下降幅度分別為63.00%、6.80%、18.90%、5.68%、26.62%。在整個(gè)處理時(shí)間段內(nèi)，CS下降幅度小于其它處理。

由圖2B可以看出，除CK2外，各處理的Tr先下降后上升，整體呈現(xiàn)下降趨勢，其中FS降幅最小，為48.18%；CK2降幅最大，CS次之，分別為90.55%和84.45%。第21天，處理GG、DG、PS、CS、FS的Tr達(dá)最低值，顯著低于CK1。隨后各處理的Tr稍有增加，第35天，CK1的Tr值最高，其次為FS，顯著高于其他各處理。

如圖2C，CK2處理的Ci先降低后升高，呈下降趨勢。處理CK1、GG、DG、PS、CS和FS先上升后下降，在第21天時(shí)達(dá)到峰值，整體呈上升趨勢，上升幅度分別為71.01%、129.55%、110.10%、169.39%、473.29%和32.66%,CS增幅顯著高于其他各處理，F(xiàn)S最低。

由圖2D可知，各處理Gs呈下降趨勢，下降幅度分別為：18.60%、84.62%、65.75%、45.50%、57.26%、15.13%、42.20%，CK2下降幅度最大，CS下降幅度最小。第35天，CS顯著高于CK2，顯著低于其他處理。

圖2 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄光合特性的影響Fig.2 Effect of different treatments on photosynthetic characteristic under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

2.3 不同改良劑對‘紅地球’葡萄葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

從圖3A可以看出，各處理下，F(xiàn)v/Fm逐漸降低，PS處理下降最快，CK1下降最慢，第35天時(shí)，PS處理顯著低于其它各處理，與CK2差異不顯著。

由圖3B可以看出，各處理的Fv/Fo隨改良處理后時(shí)間的推移呈下降趨勢，CS處理下降幅度最小，F(xiàn)S次之。第21天時(shí)，除CS、DG以外的其他各處理與CK1差異達(dá)顯著水平，均低于CK1；第35天，CS顯著高于CK2、DG和PS。

如圖3C，隨著改良處理時(shí)間的延長，兩對照的qN逐漸增加，各改良處理的qN先降低后升高，整體呈升高趨勢，其中CS處理較其他處理上升幅度大，其次為DG和FS處理。

由圖3D可知，各處理qP隨著處理時(shí)間的延長呈下降趨勢，其中DG、GG和CK1下降幅度為41.83%、48.00%和49.33%,較其他處理小，其次為CS，下降幅度為57.7%。

2.4 不同改良劑對‘紅地球’葡萄葉片抗氧化酶活性的影響

由圖4A可知，隨著處理時(shí)間的延長，兩個(gè)對照的SOD呈上升趨勢，而不同改良劑處理的SOD逐漸下降，其中FS下降幅度最大，DG和CS次之。在第35天時(shí)，F(xiàn)S的SOD顯著低于其他改良處理。

如圖4B，CK1和CK2的POD隨著處理時(shí)間的持續(xù)逐漸上升，其它處理逐漸下降，其中PS下降幅度最大，F(xiàn)S次之。第35天，PS和FS處理值達(dá)到最低，顯著低于DG和CS。

如圖4C，各處理CAT均呈上升趨勢，上升幅度分別為34.88%、202.33%、50.00%、57.14%、67.44%、56.82%、42.22% ，除CK外FS上升幅度最小。

2.5 不同改良劑對‘紅地球’葡萄葉片滲透脅迫物質(zhì)的影響

由圖5A可得，隨著改良處理時(shí)間的延長，脯氨酸含量CK1基本不變，CK2逐漸增大，改良劑處理呈現(xiàn)先升高后降低，在第14天出現(xiàn)峰值，整體呈下降趨勢，其中FS處理的Pro降幅最大，達(dá)30.63%，第35天時(shí)，F(xiàn)S顯著低于其他處理。

從圖5B中可以看出，CK1和CK2處理的REC逐漸增大，改良劑處理的REC先增大后降低，在第14天達(dá)到峰值。 其中FS降低了7.57%。第35天時(shí)，F(xiàn)S處理的REC降到最低，僅比對照CK1高2.75%，與CK1無顯著差異，與其他處理差異顯著。而其他改良處理整體呈上升趨勢，CS上升了17.95%，較其他處理小。

圖3 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響Fig.3 Effect of different treatments on chlorophyll fluorescence parameter under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

圖4 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄抗氧化酶活性的影響Fig.4 Effect of different treatments on antioxidant enzymes activity under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

圖5 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄滲透脅迫物質(zhì)的影響Fig.5 Effect of different treatments on osmotic stress substance under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

2.6 不同改良劑對‘紅地球’葡萄葉片葉綠素含量的影響

從圖6中可以看出，CK1處理的葉綠素含量逐漸增加，CK2逐漸下降，改良劑處理的葉綠素含量呈先降低后升高的趨勢，從第14天開始升高，其中FS處理的葉綠素含量升高幅度最大，到35 d時(shí)，F(xiàn)S處理值高于其它處理，且差異顯著。而CS的葉綠素含量變化不明顯。

圖6 不同處理對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄葉綠素含量的影響Fig.6 Effect of different treatments on chlorophyll content under saline-alkaline stress in ‘Red Globe’ grape

2.7 不同改良劑處理鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄的各生理指標(biāo)相關(guān)性分析

從圖7可知，株高生長量與Pn、Tr、Gs、Fv/Fm、Fv/F0呈顯著正相關(guān)，與葉綠素含量呈極顯著相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：0.803*、0.795*、0.793*、0.766*、0.773*、0.876**，與SOD、CAT、Pro、REC呈極顯著負(fù)相關(guān)，與POD呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.908**、-0.897**、-0.910**、-0.932**、-0.862*；Pn與葉綠素含量、Fv/Fm、qP呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.755*、0.758*、0.851*，與SOD、POD、CAT、Pro呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.819*、-0.788*、-0.859*、-0.759*；Tr與Gs呈極顯著正相關(guān)，與Pro呈極顯著負(fù)相關(guān)，與REC呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.905**、-0.957**、-0.790*；Gs與Pro呈極顯著負(fù)相關(guān)，與qN、REC呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.902**、-0.759*、-0.873*；Fv/Fm與Fv/Fo呈極顯著正相關(guān)、與qP顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.975**、0.819*。

注：F1～F15分別代表株高生長量、凈光合速率、蒸騰速率、胞間CO2濃度、氣孔導(dǎo)度、最大光化學(xué)效率、潛在光化學(xué)活性、非光化學(xué)淬滅系數(shù)、光化學(xué)淬滅系數(shù)、超氧化物歧化酶活性、過氧化物酶活性、過氧化氫酶活性、脯氨酸含量、相對電導(dǎo)率和葉綠素含量。Note: F1～F15 represent height growth, Pn, Tr, Ci, Gs,Fv/Fm, Fv/F0, qN, qP, SOD, POD, CAT, Pro, REC and chlorophyll content respectively.圖7 各指標(biāo)間的相關(guān)系數(shù)Fig.7 The correlation coefficient between the indices

2.8 不同改良劑對鹽堿脅迫下‘紅地球’葡萄的改良效果綜合評價(jià)

單個(gè)指標(biāo)之間差異較大，以不同的指標(biāo)作為評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)其結(jié)果不同，植物對土壤的改良是一個(gè)復(fù)雜的數(shù)量性狀，僅憑一個(gè)性狀或一項(xiàng)指標(biāo)的測定結(jié)果難以反映改良效果，因此應(yīng)用較多的指標(biāo)進(jìn)行綜合評定，才能得到相對準(zhǔn)確的結(jié)果[15]。

對測定指標(biāo)用SPSS 22.0進(jìn)行主成分分析，提取特征根大于1的兩個(gè)主成分，由表3可知，第一、第二、第三主成分的方差貢獻(xiàn)率分別為63.783%、13.676%和11.684%，累積方差貢獻(xiàn)率達(dá)到89.144%(大于85%)，表明前3個(gè)成分包含了測定指標(biāo)的大部分信息，可反映鹽堿脅迫下不同改良劑對‘紅地球’葡萄的改良效果。

第一主成分反映的信息量占總信息量的68.657%，株高生長量對它有較大的正向載荷(表3)，F(xiàn)S綜合得分最高(表4)，CS次之。

3 討 論

鹽堿脅迫會(huì)對植物造成損傷，抑制植物的營養(yǎng)生長與生殖生長，使植株生長量下降，甚至?xí)?dǎo)致植株死亡[16]。J. Y. Yang[17]等認(rèn)為，隨著鹽堿度的增加，枝條和根的相對生長速率呈現(xiàn)下降的趨勢。劉倩[18]等對鹽堿脅迫的研究認(rèn)為，鹽堿脅迫下，植物株高、葉片數(shù)、莖長等均有所下降。本試驗(yàn)中改良初期株高生長量下降，改良后脅迫減輕，后期植株生長量升高，表明改良劑具有逐漸緩解鹽堿脅迫的效應(yīng)。這與李學(xué)孚等的研究結(jié)果一致[19]。

表2 主成分列表及方差貢獻(xiàn)率Table 2 List of principle components, percentage of variance,cumulative percentage

表3 因子負(fù)荷矩陣和得分系數(shù)矩陣Table 3 Component matrix and score coefficient matrix

表4 不同改良劑改良效果綜合分析Table 4 Comprehensive analysis of effect of different ameliorants

Pn是光合系統(tǒng)功能的直接體現(xiàn)，也是植株光合系統(tǒng)正常與否的重要指標(biāo)[20]。鹽脅迫導(dǎo)致植物葉片Pn降低的主要因素有氣孔限制和非氣孔限制兩類。若Pn的降低伴隨著Ci的提高，則光合作用的主要限制因素是非氣孔因素；若Ci和Gs同時(shí)下降，則主要限制因子為氣孔因素[20]。王素平[21]等認(rèn)為，鹽脅迫下，黃瓜(CucumissativusLinn.)葉片光合速率的下降，短期鹽脅迫以氣孔限制因素為主，隨著脅迫時(shí)間延長逐漸轉(zhuǎn)為以非氣孔因素為主。氣孔導(dǎo)度的大小與植物的光合速率密切相關(guān)。在大多數(shù)情況下，氣孔導(dǎo)度的下降會(huì)造成CO2供應(yīng)受阻進(jìn)而造成光合速率的下降[22]。J. Y. Yang[17]等對苜蓿的研究表明，凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和細(xì)胞間CO2濃度隨著鹽度和pH值的增加而降低。本試驗(yàn)結(jié)果表明 ，Pn、Tr和Gs均隨著脅迫時(shí)間的推移而逐漸降低，Ci先增大后降低，所以試驗(yàn)前期為非氣孔因素，后期為氣孔因素。這與房玉林對8804品系葡萄鹽脅迫的研究結(jié)果一致，即隨脅迫加劇，葡萄光合的影響逐漸從非氣孔限制轉(zhuǎn)變?yōu)闅饪紫拗芠23]。

葉綠體在正常情況下吸收的光能主要通過光合電子傳遞、葉綠素?zé)晒夂蜔岷纳⑷N途徑來消耗，這三種途徑間存在著此消彼長的關(guān)系[24]。在葡萄逆境方面的研究中，鄭秋玲認(rèn)為，高溫脅迫主要傷害類囊體上的光化學(xué)反應(yīng)中心，使得光系統(tǒng)PSⅡ功能下降甚至完全喪失[25]。范苓研究表明，高溫脅迫能夠顯著降低葡萄光適應(yīng)PSⅡ最大光化學(xué)效率、光合電子傳遞量子效率PSⅡ和光化學(xué)猝滅系數(shù)qP，并使非光化學(xué)猝滅系數(shù)qN升高[22]。光合速率下降，必然會(huì)影響植物對光能的吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化，最主要的表現(xiàn)是光化學(xué)活性下降[26]。本研究結(jié)果表明，各處理的潛在光化學(xué)活性Fv/Fo、最大光化學(xué)效率Fv/Fm和光化學(xué)猝滅系數(shù)qP均下降，說明葡萄葉片發(fā)生了光抑制，鹽堿脅迫會(huì)改變葡萄葉片PSⅡ的激發(fā)能分配方式，通過提高熱耗散消耗過多激發(fā)能來適應(yīng)鹽堿脅迫環(huán)境。

鹽堿脅迫使土壤滲透勢下降，植物根系吸收水分能力下降，而植物體通過增加滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來平衡滲透勢以緩解脅迫傷害，脯氨酸是植物應(yīng)對脅迫時(shí)有效的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)[29]，脯氨酸含量越高意味著滲透調(diào)節(jié)能力越強(qiáng)，對逆境有更強(qiáng)的抵抗性[30]。雷成軍等研究表明葉片中的游離脯氨酸含量隨著脅迫濃度的增大而升高[31]。Butt,Madiha1[32]等對辣椒耐鹽性的研究表明鹽堿脅迫下，葉片施用Pro刺激莖和根的生長，可提高植物的干鮮重、光合速率和抗氧化酶活性，以此適應(yīng)逆境脅迫。Gao Z W[33]等對鹽堿脅迫的研究認(rèn)為，燕麥的脯氨酸含量隨著鹽堿度的增加而增加。本試驗(yàn)中，改良劑處理的脯氨酸呈現(xiàn)先增大后降低的趨勢，說明不同的改良劑均可以減少植物組織中的Pro含量，從而能提高植物的滲透調(diào)節(jié)能力，減輕脅迫傷害，其中FS處理的Pro降幅最大，改良作用最顯著。結(jié)果與前人研究一致。在鹽堿脅迫條件下，植物組織細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)和功能易遭到破壞，導(dǎo)致細(xì)胞膜透性增大，增加了離子外滲，使得細(xì)胞外滲透液的電導(dǎo)值增大，因而可以通過測定外滲液電導(dǎo)值的大小來判斷細(xì)胞膜的破壞程度，進(jìn)而判斷鹽堿脅迫對植物的傷害大小[31]。本試驗(yàn)結(jié)果表明改良劑處理的REC在初期逐漸增大，改良后期逐漸降低，F(xiàn)S處理的REC降到最低，與其它處理差異顯著。說明各改良劑對鹽堿脅迫下REC的穩(wěn)定具有顯著效果，且FS效果最佳。這與雷成軍在‘紅地球’葡萄‘貝達(dá)’嫁接苗上的研究結(jié)果一致[31]。

Mg2+是葉綠素合成的必需元素，鹽堿脅迫使Mg2+沉淀，葉綠素合成受阻[34]；朱新廣等認(rèn)為鹽脅迫使葉片葉綠素含量降低[35]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，CK1的葉綠素含量逐漸增加，CK2逐漸降低，改良劑處理下葉綠素含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，說明植物葉綠素含量在鹽堿脅迫下降低，施加改良劑后，葉綠素含量開始上升，說明改良劑減輕了脅迫危害，植株功能逐漸恢復(fù)。

4 結(jié) 論

綜上所述，各改良劑處理均可對葡萄葉片光合、生理產(chǎn)生顯著影響，但不同改良劑在各個(gè)指標(biāo)上的反映效果不同，通過主成分分析綜合比較得出硫酸亞鐵改良效果最佳。