托西酸舒他西林明膠微球制備工藝研究

邱禮臻 陳淑云 吳立蓉 朱岳鑫 饒麗明

（1廣東省中醫(yī)院廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院大學(xué)城藥劑科 廣東 廣州 510006）（2廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院 廣東 廣州 510006）

托西酸舒他西林[1-2](sultamicillin tosilate)是由等摩爾的氨芐西林與舒巴坦成雙酯，其中氨芐西林為青霉素類抗生素，主要起到殺菌的作用，舒巴坦為半合成藥物，為β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，可不可逆性的競(jìng)爭(zhēng)性抑制金黃色葡萄球菌和多數(shù)革蘭氏陰性桿菌所產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶。托西酸舒他西林經(jīng)口服后在腸壁被腸內(nèi)酯酶水解成托西酸和舒他西林，進(jìn)而發(fā)揮藥物療效。目前臨床上托西酸舒他西林主要用來(lái)治療呼吸道感染，在兒科領(lǐng)域可用于治療化膿性耳炎、膿包瘡、咽喉炎、猩紅熱及支氣管炎等[3-4]。托西酸舒他西林制劑劑型在市場(chǎng)上有片劑、顆粒劑、膠囊、分散片、為開(kāi)發(fā)托西酸舒他西林的新劑型、去除苦味、搶占市場(chǎng)先機(jī)將托西酸舒他西林制成明膠微球，本文旨在用正交試驗(yàn)優(yōu)化托西酸舒他西林明膠微球的制備工藝，并用高效液相方法計(jì)算含量，計(jì)算微球載藥量。

1.實(shí)驗(yàn)材料

藥用明膠（淄博歐昌明膠銷售有限公司）；磁力攪拌器（常州恒隆儀器有限公司）；司盤-80（上海凱比特化工有限公司）；液體石蠟（德州潤(rùn)晰實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；甲醛（湖北新銀河醫(yī)藥化工）；異丙醇（山東省濟(jì)南世紀(jì)通達(dá)化工有限公司）；托西酸舒他西林原料藥（武漢同興生物科技有限公司）；LC-20A高效液相色譜儀（日本島津）；SB-5200DTDN超聲清洗儀（寧波新芝生物科技股份有限公司）；CP225D十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)賽多利斯）；舒他西林對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：170909，含量90%）；托西酸舒他西林明膠微球（自制）；磷酸二氫鈉（分析純，福晨）；乙腈（色譜純，OMNI）；鹽酸（分析純，北化）。

2.明膠微球制備方法

將托西酸舒他西林按一定比例分散在含有明膠的水溶液中；將分散相緩慢滴加至含有司盤-80液體石蠟中，邊滴加邊用磁力攪拌器攪拌，攪拌器溫度控制在50～60℃之間；乳化30min后，轉(zhuǎn)移至冰水浴冷卻，并用甲醛固化10～15min，然后加入異丙醇攪拌，待一定時(shí)間后抽濾、洗滌、干燥、過(guò)篩（100目），制成托西酸舒他西林明膠微球，樣品呈現(xiàn)粉末狀。

3.含量測(cè)定

3.1 色譜條件

以Kromasil C18（4.6*250mm，5um）為色譜柱，以0.01mol/L的磷酸二氫鈉溶液為流動(dòng)相A相，乙腈為流動(dòng)相B相，A相與B相比例為90∶10，流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm，柱溫為30℃，進(jìn)樣體積為20ul，溶劑為0.1mol/L的鹽酸溶劑。

3.2 含量測(cè)定

稱定10.0mg托西酸舒他西林微球，研磨，用HCl（0.1mol/L）溶液提取，濾過(guò)后定容于100mL，按照色譜條件中對(duì)照品的回歸曲線，求得微球中托西酸舒他西林含量。

4.正交試驗(yàn)

4.1 單因素考察

影響托西酸舒他西林明膠微球的制備工藝的因素有多種[5-6]有溫度、攪拌速度、乳化時(shí)間、藥物與明膠比例、明膠濃度、油水相比例、乳化劑用量等，對(duì)制備工藝影響小且易確定的實(shí)驗(yàn)條件用單因素考察，對(duì)制備工藝影響較大且不易確定的因素用正交試驗(yàn)方法確定。溫度、攪拌速度、乳化時(shí)間對(duì)制備工藝影響小且易確定采用單因素確定，主藥投藥量、明膠濃度、油水相比例、乳化劑用量用正交試驗(yàn)方法確定。經(jīng)過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，攪拌器溫度控制在50～60℃之間較好，乳化時(shí)間為30min較好，攪拌速度為100轉(zhuǎn)/min。

4.2 正交試驗(yàn)

主藥投藥量、明膠濃度、油水相比例、乳化劑用量為考察因素，每個(gè)因素選取3水平(L934)，按如下表1進(jìn)行篩選。按表2進(jìn)行正交試驗(yàn)，按項(xiàng)下測(cè)定含量，計(jì)算微球載藥量。表3為方差分析。托西酸舒他西林微球載藥量（%）=微囊中托西酸舒他西林含量/（托西酸舒他西林+輔料）×100%。

表1 因素水平表

表2 正交試驗(yàn)表

表3 托西酸舒他西林明膠微球微球載藥量方差分析表

由表2結(jié)果直觀分析可得，以托西酸舒他西林明膠微球微球載藥量為考察指標(biāo)，三個(gè)因素影響程度依次為B＞A＞C＞D，且A1＞A2＞A3，B3＞B2＞B1，C3＞C1＞ C2，D1＞D2＞D3可得出最佳工藝條件為A1B3C3D1。

由表3方差分析可得：以托西酸舒他西林明膠微球微球載藥量為考察指標(biāo)時(shí)，因素B對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著性影響，因素A、C和D對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均無(wú)顯著性影響,因此最佳制備工藝為A1B3C3D1，即油水相比例為20∶80，藥物與明膠比例為40∶60，乳化劑用量為3.0%，明膠濃度為10g/mL。

4.3 驗(yàn)證性試驗(yàn)

通過(guò)正交試驗(yàn)確定最佳制備工藝條件，并進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。按照計(jì)算出的托西酸舒他西林微球載藥量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)分析最佳公工藝條件是否穩(wěn)定。平行制備6份，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 正交驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.12%，顯示托西酸舒他西林微球的制備方案的重現(xiàn)性較好，說(shuō)明最佳制備工藝條件穩(wěn)定可行。

5.結(jié)果與討論

本文采用正交試驗(yàn)方法優(yōu)化制備工藝，采用4因素3水平，以托西酸舒他西林的微球載藥量為考察指標(biāo)，得出最佳制備工藝為A1 B3C3D1，即油水相比例為20∶80，藥物與明膠比例為40∶60，乳化劑用量為3.0%，明膠濃度為10g/mL。用高效液相色譜法[7-8]測(cè)定托西酸舒他西林明膠微球中的托西酸舒他西林含量，進(jìn)而計(jì)算明膠微球的載藥量，其方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，可操作性強(qiáng)。將托西酸舒他西林[9-10]制備成明膠微球，去除托西酸舒他西林的苦味，開(kāi)發(fā)新劑型，搶占市場(chǎng)先機(jī)。

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