乙肝表面抗原/梅毒聯(lián)合檢測試紙條在血液篩查中的應(yīng)用研究

范錫嶺

(河南省輝縣中醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453600)

2010年全球乙型肝炎(簡稱“乙肝”)表面抗原陽性人數(shù)約有2.48億，已成為全球性重大公共衛(wèi)生問題，其中我國所占比例為45%[1]。我國梅毒疫情在甲乙類傳染病發(fā)病中排序僅次于乙肝[2]。血液傳播是乙肝與梅毒最常見的傳播途徑，因此在獻(xiàn)血前對血液進(jìn)行嚴(yán)格有效的篩查可以降低乙肝與梅毒的感染率。筆者通過采用乙肝表面抗原(HBsAg)/梅毒聯(lián)合檢測試紙條對血液樣本的檢測，發(fā)現(xiàn)可有效提高HBsAg、梅毒的檢出率，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

選取2015年7月至2016年12月新鄉(xiāng)市符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2011)規(guī)定及獻(xiàn)血前采用HBsAg試紙條篩查合格的血標(biāo)本20 000例。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室HBsAg-ELISA和TP-ELISA法檢測HBsAg或梅毒陽性血標(biāo)本176份為研究對象(TP-ELISA和HBsAg-ELISA檢測結(jié)果OD≥0.8×Cutoff為陽性)，通過HBsAg-ELISA檢測出HBsAg陽性為62例，TP-ELISA檢測出HBsAg陽性者114例。

2 方法

2.1 試劑與儀器 ①試劑：(TP)ELISA試劑盒(海雅吉生物科技有限公司)，梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(膠體金法)(廣州健侖生物科技有限公司)；HBsAg診斷試劑盒(法國生物梅里埃和廈門英科新創(chuàng))；HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條(英科新創(chuàng)科技有限公司)。②儀器Hamilton STAR全自動(dòng)加樣器及FAME2430酶聯(lián)后處理系統(tǒng)(瑞士費(fèi)米公司)，移液器(法國吉爾森公司)，RaytoRT-6100酶標(biāo)分析儀(深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司)。

2.2 檢測方法 ①采用抗TP酶聯(lián)免疫診斷試劑盒與HBsAg酶聯(lián)診斷試劑盒分別檢測血標(biāo)本中抗TP和HBsAg。②采用HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)，對實(shí)驗(yàn)室抗TP-ELISA法結(jié)果陽性血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。③采用HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條和HBsAg金標(biāo)試劑檢測實(shí)驗(yàn)室ELISA法HBsAg陽性的血漿標(biāo)本。④TP-ELISA與HBsAg-ELISA檢測結(jié)果為陽性血漿標(biāo)本，各取20份并按1∶1混合，分別采用HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條與HBsAg試紙條對其進(jìn)行檢測。以上實(shí)驗(yàn)條件為：加樣量60 μL，觀察時(shí)間10 min，反應(yīng)溫度15℃。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

(1)HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)結(jié)果比較 TPPA陽性率為90.35%(103/114)，HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條陽性率為87.72%(100/114)，兩者陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 114例患者HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)結(jié)果比較(例)

(2)HBsAg金標(biāo)試劑檢測和HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條檢測結(jié)果比較 HBsAg金標(biāo)試劑檢測陽性率為82.25%(51/62)，HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條陽性率80.65%(50/62)，兩者陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 62例患者HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條和HBsAg金標(biāo)試劑檢測結(jié)果比較(例)

(3)HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條對混合血液樣本檢測結(jié)果比較 采用HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試紙條對20份單一抗-TP陽性與單一HBsAg陽性兩者的混合血液樣本進(jìn)行檢測，試紙條上出現(xiàn)2條相應(yīng)檢測線的陽性反應(yīng)；采用HBsAg金標(biāo)試紙條對混合血樣標(biāo)本進(jìn)行檢測，試紙條上僅出現(xiàn)1條相應(yīng)檢測線的陽性反應(yīng)。

4 討論

乙肝是我國最常見的傳染性疾病之一，我國HBsAg陽性患者占全國人口的10%以上。在乙肝患者體液中均可以檢出HBsAg，尤其血液檢出率較高[3]。乙肝不僅具有較強(qiáng)的傳染性，并且可能發(fā)展成肝硬化、肝癌，嚴(yán)重威脅人們的生命安全。梅毒是由蒼白密螺旋體蒼白亞種感染人體后引起的系統(tǒng)性、慢性傳染性疾病，可以引起機(jī)體多系統(tǒng)、多臟器的損害，威脅生命[4]。近年來，我國梅毒感染率逐年上升，與乙肝并列成為血液及性傳播的主要疾病。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，血液制品在臨床中應(yīng)用逐漸廣泛，成為重要的醫(yī)療手段之一，同時(shí)用血安全問題也越來越受到人們的關(guān)注[5]，尤其是經(jīng)血液傳播的傳染性疾病。在采集血液前進(jìn)行嚴(yán)格的篩查是降低、阻斷乙肝和梅毒傳播的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

江素君等[6]采用單一HBsAg試紙條在獻(xiàn)血前進(jìn)行初篩，不合格率為0.49%；對于TP初篩不合格獻(xiàn)血者采取隱私保密措施，動(dòng)員其采集樣本。TPPA是目前檢驗(yàn)科進(jìn)行梅毒檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[7]，HBsAg金標(biāo)試劑檢測是檢驗(yàn)科檢測HBsAg的主要手段，但由于TPPA與HBsAg金標(biāo)試劑操作流程繁瑣復(fù)雜，僅用于實(shí)驗(yàn)室檢測。本研究中收集的20 000例血液標(biāo)本均符合獻(xiàn)血者健康要求及獻(xiàn)血前采用HBsAg試紙條篩查合格，通過HBsAg-ELISA檢測出HBsAg陽性為62例，TP-ELISA檢測出HBsAg陽性者114例。筆者通過對176份ELISA陽性血液樣本進(jìn)行HBsAg/TP聯(lián)合檢測試劑條、TPPA、HBsAg金標(biāo)試劑平行檢測分析，發(fā)現(xiàn)HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試劑條對HBsAg、梅毒的檢出陽性率分別與HBsAg金標(biāo)試劑檢測結(jié)果相同。同時(shí)，HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試劑條能夠準(zhǔn)確檢測出混合血液中的陽性反應(yīng)。因此，HBsAg/梅毒聯(lián)合檢測試劑條不僅可以準(zhǔn)確有效地檢出梅毒陽性、HBsAg血液標(biāo)本，并且操作方便簡單，可用于獻(xiàn)血前的血液篩查。