液相色譜法測定大米中芐嘧磺隆不確定度的評定

◎ 李 璟，申 瑤

（江蘇省無錫市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院，江蘇 無錫 214101）

芐嘧磺隆是一種選擇性內(nèi)吸傳導型除草劑，對小麥、水稻等作物安全性好。在麥田使用，能有效防除豬殃殃、繁縷、碎米薺、播娘蒿、薺菜、大巢菜、藜和稻槎菜等闊葉雜草。對眼睛、皮膚和黏膜有刺激作用，沒有專門的解毒藥，需用水沖洗皮膚和黏膜，如攝入需催吐。

本文參照行業(yè)標準SN/T 2212-2008《進出口糧谷中芐嘧磺隆殘留量檢測方法 液相色譜法》[1]測定大米中芐嘧磺隆，并參照JJF1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》[2]對其測定進行了不確定度評定。對于檢測結果達到標準要求，給出定量的分析，檢測的最終結果有效、可靠，作為化驗室芐嘧磺隆檢測結果準確性評價的一個重要指標。本實驗對進一步完善大米中芐嘧磺隆的質(zhì)量控制體系和實驗室管理具重要意義。

1 試驗部分

1.1 儀器及試劑

美國Agilent 1200液相色譜儀，配置DAD檢測器。芐嘧磺隆標準品：由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所提供，具有溯源性，其濃度為100 μg/mL，不確定度為 ±0.11 μg/mL。

乙腈（色譜純）；甲醇（分析純）；二氯甲烷（分析純）；正己烷（分析純）；4%氯化鈉水溶液（分析純）；氟羅里硅土固相萃取柱（6 mL）；C18固相萃取柱（3 mL）。

芐嘧磺隆標準工作液：取適量芐嘧磺隆標準溶液，用乙腈配制成1 μg/mL。

1.2 測量條件

流動相：乙腈+水（40+60）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；進樣量：10 μL；檢測器：DAD檢測器；色譜柱：Agilent XDB-C18，4.6 mm×150 mm，5 μm；檢測波長：238 nm。

1.3 樣品處理

在規(guī)定的環(huán)境條件下，取10 g（精確到0.01 g）大米置于錐形瓶中，加入二氯甲烷溶液振蕩提取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用4%氯化鈉水溶液溶解提取物，再用正己烷溶液萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用水溶解，過C18固相萃取和氟羅里硅土固相萃取柱凈化，用甲醇洗脫，氮吹，加1.0 mL流動相溶解提取物過0.45μm膜，上液相色譜測定。

1.4 數(shù)學模型

大米中芐嘧磺隆檢測是用液相色譜外標法確定，其數(shù)學模型為：

其中：X為樣品中芐嘧磺隆殘留量，單位為mg/kg；C為基準標準溶液中待測物的濃度，單位為μg/mL；V為樣品溶液最終定容體積，單位為mL；m為樣品溶液所代表的樣品質(zhì)量，單位為g；Ai為樣液中待測物的峰面積；AS為基準標液中待測物的峰面積。

1.5 方差和傳播系數(shù)

為不確定度合成的計算方便，用相對不確定度表示各分量的標準不確定度，合成后再換算成絕對不確定度。

2 確定度主要來源

本測量結果不確定度主要來源于以下分量：①測量結果的重復性urel(X)。②由標準使用液濃度引入的不確定度ucrel(C)。③樣品稱量引入的不確定度ucrel(m)。④樣品定容不確定度ucrel(V)。

3 逐項評定標準不確定度

3.1 A類不確定度評定

測量結果的重復性分量評定。在相同條件下，同一試樣重復測量8次，結果見表1。

表1 樣品測定結果表

測量結果重復性引入的不確定度為：

代入數(shù)據(jù)得：

3.2 B類不確定度評定

3.2.1 標準基準使用液產(chǎn)生的不確定度

標準基準使用液產(chǎn)生的不確定度包含了標準品不確定度和配制標準基準使用液產(chǎn)生不確定度。

3.2.1.1 標準物質(zhì)的不確定度

芐嘧磺隆標準品由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所提供，具有溯源性，其濃度為100 μg/mL，不確定度為±0.11 μg/mL。因此，標準物質(zhì)的相對標準不確定度為：

3.2.1.2 標準基準使用液的不確定度

按JJG l96-2006《常用玻璃量器》[3]規(guī)定，配制儲備液及標準基準使用液中各容器引入的不確定度如表

2， 20 ℃時取均勻分布。

表2 各容器產(chǎn)生的不確定度表

配制儲備液及標準基準使用液產(chǎn)生不確定度：

實驗室溫度變化介于18～22 ℃，由溫度的變動引入的標準溶液的濃度的相對標準不確定度完全可以忽略不計。

故標準基準使用液產(chǎn)生的不確定度為：

3.2.2 由樣品質(zhì)量（m）引入的不確定度

用精確至0.01 g天平準確稱取大米樣品10.00 g，所用天平最大允許誤差為±0.05 g，屬均勻分布，即：

3.2.3 樣品定容體積（V）不確定度

本方法最終樣液體積為1.0 mL，依據(jù)JJG 196-2006《常用玻璃量器檢定規(guī)程》[3]規(guī)定，標稱容量為1 mL、分離量為0.01 mL的移液管的允差為±0.008 mL，正態(tài)分布，以99%概率計，樣品定容不確定度為：

3.3 合成相對標準不確定度的計算

3.4 擴展不確定度的計算

大米中芐嘧磺隆殘留量測定測量結果擴展不確定度計算結果如下，

3.5 含量結果表示

X=0.011 3 mg/kg±0.000 5 mg/kg，則大米中芐嘧磺隆殘留測量結果為（0.011 3±0.000 5）mg/kg。

4 結果與討論

從各不確定度分量值可以看出，液相色譜儀測量結果重復性urel(x)占總不確定度比例最大，其次是標準溶液引入的不確定度和定容體積的不確定度，樣品稱樣量的不確定度所占比例小，幾乎可以忽略。由此可以看出，在做大米中芐嘧磺隆分析測定時，對其分析檢測結果準確性影響最大的是液相色譜DAD檢測器的準確性（包括色譜條件、色譜柱、檢測器的靈敏度等）、檢驗人員對其前處理過程平行性的熟練的控制。該法的擴展相對不確定度能控制在比較低即4.06%，完全滿足檢測要求。本文為本實驗室今后在該類項目檢測過程控制提供了參照，同時也指出了保證檢測結果準確的關鍵點，為以后的檢測工作提供一定的技術基礎。