• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    響應(yīng)面優(yōu)化南極磷蝦蝦青素的復(fù)合酶法提取工藝研究

    2018-08-01 03:29:52談俊曉趙永強李來好楊賢慶吳燕燕魏涯岑劍偉
    大連海洋大學(xué)學(xué)報 2018年4期
    關(guān)鍵詞:水料磷蝦青素

    談俊曉,趙永強,李來好,楊賢慶,吳燕燕,魏涯,岑劍偉

    (1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所,農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品加工重點實驗室,廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點開放實驗室,廣東 廣州 510300;2.上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院,上海 201306)

    南極磷蝦Euphausiasuperba是一種似蝦的無脊椎甲殼綱動物,通常是指南極大磷蝦,其形體較小,體長一般為4~6 cm,生物儲藏量巨大,據(jù)統(tǒng)計為3.4×108~5.4×108t[1-2]。南極磷蝦不僅蘊含豐富的蛋白質(zhì)、礦質(zhì)元素和多種不飽和脂肪酸,如EPA、DHA等,還含有多種活性成分,如酶類、甲殼素和蝦青素等[3],這些物質(zhì)有利于南極磷蝦高附加值產(chǎn)品的開發(fā),可極大地提高南極磷蝦資源的綜合利用率。南極磷蝦中蝦青素多為3R,3’R型,主要以酯化形式存在[4],由于中國存在大量的南極磷蝦加工廢棄物,故南極磷蝦可作為提取蝦青素的有效來源。蝦青素是一種類胡蘿卜素,易溶于丙酮、乙醇等有機溶劑,具有3種旋光異構(gòu)體:3S,3’S、3R,3’R和3S,3’R,以及2種順反異構(gòu)體,即Z 型(順式)異構(gòu)體和 E 型(反式)異構(gòu)體[5]。

    蝦青素具有多種生理學(xué)活性,包括抗氧化性、抗炎性、提高免疫力、預(yù)防心血管疾病和抗腫瘤等作用[6-10],因此,在食品飼料、醫(yī)藥、化妝品等行業(yè)具有重要作用。目前,從水產(chǎn)動物中提取蝦青素的方法主要有有機溶劑法、超臨界萃取法、酶解法,以及其他新技術(shù)輔助法,如超聲波、超高壓等[11-15]。酶解法可將與蝦青素結(jié)合的蛋白質(zhì)降解,易于蝦青素的提取,相對于其他方法,具有反應(yīng)條件溫和、設(shè)備要求簡便、用料少等優(yōu)點。由于南極磷蝦個體較小,且多數(shù)以“蝦磚”的形式貯藏,因此,以南極磷蝦為原料提取蝦青素的關(guān)鍵是蝦肉蛋白質(zhì)的脫除技術(shù)。有文獻報道,采用pH調(diào)節(jié)法對南極磷蝦蛋白質(zhì)分離時效率較低[16],目前,多采用酶解法(木瓜蛋白酶或Alcalase堿性蛋白酶)從水產(chǎn)動物中提取蝦青素[17-18],主要是由于采用木瓜蛋白酶或Alcalase堿性蛋白酶酶解后,酶解產(chǎn)物中蛋白質(zhì)和殼聚糖的回收率高[19-20],但采用2種酶復(fù)合酶解提取蝦青素的試驗還未見報道。本試驗中,以冷凍南極磷蝦為原料,經(jīng)過復(fù)合酶解處理后用無水乙醇對南極磷蝦中的蝦青素進行提取,考察提取工藝參數(shù)對蝦青素提取率的影響,并通過優(yōu)化試驗確定酶解的最優(yōu)條件,旨在為南極磷蝦的開發(fā)及利用加工提供基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 樣品及藥品 試驗用冷凍南極磷蝦由上海開創(chuàng)遠(yuǎn)洋漁業(yè)有限公司提供(2015年),-20 ℃下冷凍保存;木瓜蛋白酶(800 U/mg)、Alcalase堿性蛋白酶(Alcalase 2.4 L)、蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%),以及無水硫酸鈉、氯化鈉均購自廣州市齊云生物技術(shù)有限公司(分析純);無水乙醇、丙酮、石油醚均購自天津市富宇精細(xì)化工有限公司(分析純)。

    1.1.2 儀器與設(shè)備 JYL-C022E型料理機(山東九陽股份有限公司);GB204型電子天平(瑞士METTLER公司);SHZ-82A型水浴恒溫振蕩器(金壇市精達儀器制造有限公司);3K30型臺式高速冷凍離心機(德國Sigma公司);MMV-1000W型振搖器(廣州托普儀器有限公司);UV2550型紫外可見分光光度計(日本SHIMADZU公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 南極磷蝦基本成分及總類胡蘿卜素含量測定 采用直接干燥法(GB/T 5009.3—2016)、高溫煅燒法(GB/T 5009.4—2016)、微量凱氏定氮法(GB/T 5009.5—2010)和索氏抽提法(GB/T 5009.6—2010)分別測定水分、灰分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量。

    總類胡蘿卜素含量的測定參照Niamnuy等[21]的方法略做修改。稱取5 g左右冷凍南極磷蝦樣品,置于50 mL離心管中,加入20 mL丙酮均質(zhì)后于4 ℃下以4000 r/min離心10 min,收集上清液,重復(fù)4次萃取至上清液基本無色,合并丙酮萃取液于分液漏斗中。向分液漏斗中加入等量的石油醚,充分搖動后加入100 mL濃度為1 g/L的氯化鈉溶液,靜置分層后棄去下相,加無水硫酸鈉干燥后過濾,將濾液于40 ℃以下減壓濃縮至干,即得南極磷蝦類胡蘿卜素提取物。將提取物復(fù)溶于50 mL無水乙醇中,采用紫外分光光度計法測定提取物中類胡蘿卜素的含量。每個指標(biāo)重復(fù)測定3次,取其平均值。

    1.2.2 蝦青素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作[15]準(zhǔn)確稱取一定量的蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品,溶于乙醇配制成濃度為1~8 μg/mL的蝦青素乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液,在400~600 nm波長范圍內(nèi)掃描最大吸收波長并測定各濃度吸光值并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    根據(jù)試驗結(jié)果確定,蝦青素在乙醇中的最大吸收波長為478 nm,標(biāo)準(zhǔn)曲線的一次回歸方程為y=0.077x-0.0125,式中x為蝦青素質(zhì)量濃度(μg/mL),y為對應(yīng)吸光值OD478 nm,線性回歸相關(guān)系數(shù)R2=0.9991,說明蝦青素質(zhì)量濃度在1~8 μg/mL范圍內(nèi)具有線性關(guān)系。

    1.2.3 南極磷蝦蝦青素復(fù)合酶法提取工藝 取冷凍南極磷蝦用料理機攪碎后稱取糊狀濕蝦樣品5 g,按比例加入蒸餾水,升溫至一定溫度后,按比例加入Alcalase堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶,恒溫振蕩水浴酶解后,冰水浴冷卻,4 ℃下以10 000 r/min離心20 min,取離心沉淀物加入無水乙醇振蕩提取后于4000 r/min離心5 min,收集上清液,重復(fù)操作2次,合并所得上清液,用無水乙醇定容后,再用紫外分光光度法測定蝦青素含量。蝦青素提取率計算公式為

    蝦青素提取率=ma/(c×mf)×100%。

    其中:ma為測定條件下蝦青素的提取量(μg);c為南極磷蝦中總類胡蘿卜素的含量(μg/g);mf為南極磷蝦濕質(zhì)量(g)。

    1.2.4 復(fù)合酶法提取南極磷蝦蝦青素的單因素試驗 由于蝦青素在酸堿環(huán)境中均不穩(wěn)定[22],因此,單因素試驗均在自然pH條件(pH 7.1)下進行。以下單因素確定試驗中,每組試驗均設(shè)3個平行,除要考察的因素重新設(shè)定外,其他因素均設(shè)定一致,即酶底比為0.5%,水料比(mL∶g)為2∶1、酶解時間為2 h,酶解溫度為55 ℃,無水乙醇料液比(g∶mL)為1∶5,振蕩時間為5 min,Alcalase堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶比例為3∶2。

    這根長發(fā)絲到底是誰的呢?思雨接觸的妻子之外的女人,只有欣竹身上算是能發(fā)生點聯(lián)想的人。再沒有別的什么女人可以聯(lián)想了。

    (1) 復(fù)合酶比例的確定。在其他因素不變的條件下,分別考察Alcalase堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶單一添加,以及二者的比例為4∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶4時對蝦青素提取率的影響。

    (2) 酶底比的確定。在其他因素不變的條件下,考察酶底比為0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%時對蝦青素提取率的影響。

    (3) 水料比的確定。在其他因素不變的條件下,考察水料比(mL∶g)為2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1時對蝦青素提取率的影響。

    (4) 酶解時間的確定。在其他因素不變的條件下,考察酶解時間為1、2、3、4、5、6 h時對蝦青素提取率的影響。

    (5) 酶解溫度的確定。在其他因素不變的條件下,考察酶解溫度為35、40、45、50、55、60 ℃時對蝦青素提取率的影響。

    (6) 無水乙醇料液比的確定。在其他因素不變的條件下,考察無水乙醇料液比(g∶mL)為1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7時對蝦青素提取率的影響。

    (7) 振蕩時間的確定。在其他因素不變的條件下,考察振蕩時間為5、10、15、20、25、30 min時對蝦青素提取率的影響。

    1.2.5 響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計 綜合各單因素試驗結(jié)果,根據(jù)Box-Behnken中心組合設(shè)計原理,選擇對蝦青素提取效果有顯著影響的3個因素:酶底比(A)、酶解時間(B)、酶解溫度(C)為自變量,以蝦青素提取率(Y)為響應(yīng)值,利用Design-Expert 8.0.6軟件進行3因素3水平的響應(yīng)面試驗優(yōu)化,試驗因素和水平設(shè)置見表1。

    表1 響應(yīng)面試驗因素水平

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    2 結(jié)果與分析

    2.1 南極磷蝦基本成分含量及總類胡蘿卜素含量

    經(jīng)測定,南極磷蝦基本營養(yǎng)成分(以濕質(zhì)量計)分別為水分79.81%±0.08%、灰分3.06%±0.01%、粗蛋白質(zhì)12.31%±0.13%、粗脂肪3.41%±0.13%,總類胡蘿卜素含量為(69.59±3.72)μg/g濕質(zhì)量。各成分含量與宋翔[23]報道的結(jié)果差別不大。其中粗脂肪含量略高,粗蛋白質(zhì)含量略低,這是由于南極磷蝦的生長容易受時間和地域的影響,不同季節(jié)南極磷蝦體內(nèi)脂肪和蛋白質(zhì)含量往往不同,且兩者呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系[24]。

    2.2 復(fù)合酶法提取南極磷蝦蝦青素單因素試驗結(jié)果

    2.2.1 酶種類和復(fù)合酶比例對蝦青素提取率的影響 從表2可見:與空白組相比,分別使用Alcalase堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶對南極磷蝦進行酶解處理后,均可提高蝦青素的提取率,但用木瓜蛋白酶提取時對蝦青素的提取率較對照組無顯著性差異(P>0.05),而用Alcalase堿性蛋白酶提取時蝦青素提取率顯著高于對照組(P<0.05),說明Alcalase堿性蛋白酶的酶解效果優(yōu)于木瓜蛋白酶;進一步進行復(fù)合酶酶解試驗發(fā)現(xiàn),加酶量一定時,蝦青素提取率在Alcalase堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶比例為3∶2時達到最大且顯著高于該兩種酶單獨作用的結(jié)果(P<0.05),這可能是由于一定比例的兩種酶復(fù)合具有協(xié)同酶解的作用,從而提高了酶解效果。因此,后續(xù)試驗均以Alcalase堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶比例為3∶2進行。

    表2 不同酶種類和復(fù)合比例下蝦青素提取率

    注:同列中標(biāo)有不同小寫字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05),標(biāo)有相同字母者表示組間無顯著性差異(P>0.05)

    Note:The means with different letters within the same column are significant differences at the 0.05 probability level, and the means with the same letters within the same column are not significant differences

    2.2.2 酶底比對蝦青素提取率的影響 從圖1可見:不同酶底比對蝦青素提取率影響較大,南極磷蝦蝦青素提取率隨酶底比的增大呈現(xiàn)先上升后緩慢下降的趨勢;當(dāng)酶底比為1.5%時,蝦青素提取率達到最高且顯著高于其他各組(P<0.05),繼續(xù)增加酶底比時,蝦青素提取率顯著下降(P<0.05)。這可能是由于當(dāng)?shù)孜餄舛纫欢〞r,隨著酶用量的增加,酶解反應(yīng)速度加快,蝦青素提取率呈明顯上升趨勢;而當(dāng)酶用量超出了一定范圍后,由于酶的競爭性抑制作用特點,加大酶底比反而會抑制酶解作用[25],從而導(dǎo)致蝦青素提取率下降。因此,使用1.5%的酶底比為較適添加量。

    注:標(biāo)有不同小寫字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05),標(biāo)有相同字母者表示組間無顯著性差異(P>0.05),下同Note:The means with different letters are significant differences at the 0.05 probability level, and the means with the same letters are not significant differences, et sequentia圖1 酶底比對蝦青素提取率的影響Fig.1 Effect of enzyme-substrate ratio on the extraction rate of astaxanthin

    2.2.3 水料比對蝦青素提取率的影響 從圖2可見:南極磷蝦蝦青素提取率隨水料比的增大呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢;當(dāng)水料比(mL∶g)為4∶1時,蝦青素提取率達到最高,當(dāng)水料比(mL∶g)為4∶1、5∶1、6∶1時,蝦青素提取率之間無顯著性差異(P>0.05),但繼續(xù)增大水料比,蝦青素提取率顯著降低(P<0.05)。這是因為當(dāng)水料比太小時,樣品流動性較差,酶解作用時復(fù)合酶與樣品不能充分接觸,從而使反應(yīng)不易進行,但當(dāng)水料比過大時,雖然樣品流動性更好,但復(fù)合酶和底物的濃度都下降,從而使酶解效果減弱。因此,選擇水料比(mL∶g)為4∶1時為較適工藝參數(shù)。

    圖2 水料比對蝦青素提取率的影響Fig.2 Effect of water-substrate ratio on the extraction rate of astaxanthin

    2.2.4 酶解時間對蝦青素提取率的影響 從圖3可知見:蝦青素提取率隨酶解時間的延長呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢;當(dāng)酶解時間為1、3、4、5 h時,蝦青素提取率間無顯著性差異(P>0.05),當(dāng)酶解時間為2 h時,蝦青素提取率顯著提升至最高(P<0.05),當(dāng)酶解時間為6 h時,蝦青素提取率降低至最低(P<0.05)。這種變化趨勢可能是由于在一定的時間范圍內(nèi),酶解時間越長,酶解反應(yīng)越完全;超出一定范圍后,酶解時間的延長反而會抑制酶活力的發(fā)揮,加上蝦青素在提取液中不穩(wěn)定而引起分解,從而導(dǎo)致了蝦青素提取率下降。因此,選擇酶解時間為2 h較佳。

    圖3 酶解時間對蝦青素提取率的影響Fig.3 Effect of enzymolysis time on the extraction rate of astaxanthin

    2.2.5 酶解溫度對蝦青素提取率的影響 不同酶解溫度對蝦青素提取率的影響較大,Vieira等[26]關(guān)于利用蛋白酶水解蝦廢物生產(chǎn)具有清除自由基活性的肽和回收總類胡蘿卜素的研究中也表示,溫度對不溶性部分中總類胡蘿卜素的回收有顯著影響。從圖4可見,蝦青素提取率隨酶解溫度的升高呈先升高后下降的趨勢,并在50 ℃時達到最高。這是由于在一定溫度范圍內(nèi),隨著溫度的升高酶活性增強,酶解效果好,蝦青素提取率也隨之增高;但超過50 ℃后,高溫會使酶變性失活,導(dǎo)致酶解作用減弱,因此,選擇酶解溫度為50 ℃左右較好。

    圖4 酶解溫度對蝦青素提取率的影響Fig.4 Effect of enzymolysis temperature on the extraction rate of astaxanthin

    2.2.6 料液比對蝦青素提取率的影響 從圖5可見:蝦青素提取率隨提取劑用量的增加呈現(xiàn)先上升后趨于平緩的趨勢,可能是由于在一定范圍內(nèi)隨著提取劑的增加,蝦青素溶解越來越充分;蝦青素提取率在料液比(g∶mL)為1∶7時達到最高,為72.56%±1.17%,但與料液比(g∶mL)為1∶4、1∶5、1∶6時相比,蝦青素提取率無顯著性差異(P>0.05),此結(jié)果與宋素梅[27]分析料液比對蝦青素提取效果的結(jié)果基本一致。據(jù)此,從經(jīng)濟實際出發(fā),選擇料液比(g∶mL)1∶4為適宜工藝參數(shù)。

    圖5 料液比對蝦青素提取率的影響Fig.5 Effect of substrate-ethanol ratio on the extraction rate of astaxanthin

    2.2.7 振蕩時間對蝦青素提取率的影響 采用機械震蕩提取,可有效促進提取物質(zhì)與提取劑的充分接觸,大大縮短提取時間,且不需要進行加熱[28]。從圖6可見:蝦青素提取率隨振蕩時間的延長呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢;當(dāng)振蕩時間為10、15、20、25 min時,蝦青素提取率無顯著性差異(P>0.05),當(dāng)振蕩時間延長至30 min時,蝦青素提取率較10、20 min時顯著降低(P<0.05)??赡苁怯捎跁r間過短時,提取劑與樣品接觸不充分,蝦青素不能充分溶解在提取劑中,但時間過長時,蝦青素易降解導(dǎo)致提取效果降低。因此,選擇振蕩時間為10 min較佳。

    圖6 振蕩時間對蝦青素提取率的影響Fig.6 Effect of oscillation time on the extraction rate of astaxanthin

    2.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗結(jié)果

    2.3.1 模型建立及方差分析 由單因素試驗可知,不同因素對蝦青素提取率影響程度不同,根據(jù)單因素試驗結(jié)果,選擇出影響較大的3個因素:酶底比(A)、酶解時間(B)、酶解溫度(C),作為自變量,并固定水料比(mL∶g)為4∶1、料液比(g∶mL)為1∶4、振蕩時間10 min,以蝦青素提取率為響應(yīng)值,自變量因素和水平設(shè)置如表1所示,根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計方案進行試驗,各因素的試驗組合及試驗結(jié)果見表3。

    表3 響應(yīng)面設(shè)計方案與試驗結(jié)果

    經(jīng)多元回歸擬合,得到蝦青素提取率的二次多項回歸方程為Y=90.83+0.93A+0.40B+2.03C-0.19AB+0.37AC+0.42BC-2.51A2-1.72B2-5.83C2。

    2.3.2 響應(yīng)面交互作用分析與優(yōu)化結(jié)果的確定 響應(yīng)面是響應(yīng)值對各試驗因素所構(gòu)成的三維空間曲面圖,因素對響應(yīng)值影響越大,曲面坡度越大。而等高線的形狀則可以反映兩兩因素間交互作用的顯著程度。橢圓形表示兩因素交互作用顯著,近似圓形則表明交互項的影響不顯著[29]。各因素交互作用對蝦青素提取率的影響如圖7~圖9所示,可以看出,酶解溫度對蝦青素提取率的影響最大,其次為酶底比和酶解時間;酶底比與酶解時間交互作用對蝦青素提取率影響不顯著(P>0.05),酶底比與酶解溫度、酶解時間與酶解溫度交互作用對蝦青素提取率影響顯著(P<0.05),且酶解時間與酶解溫度的交互作用影響大于酶底比與酶解溫度的交互作用,與方差分析結(jié)果一致。

    通過響應(yīng)面軟件分析,得出復(fù)合酶解南極磷蝦提取蝦青素的最優(yōu)工藝條件:A=1.60,B=2.13,C=50.93,即酶底比為1.60%、酶解時間為2.13 h、酶解溫度為50.93 ℃、水料比(mL∶g)為4∶1、料液比(g∶mL)為1∶4、振蕩時間為10 min,在此條件下,蝦青素提取率的理論值為91.13%。

    圖7 酶底比與酶解時間交互作用對蝦青素提取率影響的響應(yīng)面與等高線圖Fig.7 Response surface and contour plots of the interactive effect of enzyme-substrate ratio and enzymolysis time on the extraction rate of astaxanthin

    圖8 酶底比與酶解溫度交互作用對蝦青素提取率影響的響應(yīng)面與等高線圖Fig.8 Response surface and contour plots of the interactive effect of enzyme-substrate ratio and enzymolysis temperature on the extraction rate of astaxanthin

    圖9 酶解時間與酶解溫度交互作用對蝦青素提取率影響的響應(yīng)面與等高線圖Fig.9 Response surface and contour plots of the interactive effect of enzymolysis time and temperature on the extraction rate of astaxanthin

    表4 響應(yīng)面二次模型方差分析Tab.4 ANOVA for response surface quadratic model

    注:*表示有顯著性影響(P<0.05),**表示有極顯著影響(P<0.01)

    Note: *means significant effect(P<0.05),** means very significant effect(P<0.01)

    2.3.3 驗證性試驗 為驗證該模型對蝦青素最大粗提取率的預(yù)測是否準(zhǔn)確,結(jié)合實際操作情況,將最佳工藝條件修正為酶底比為1.6%、酶解時間為2.1 h、酶解溫度為51 ℃、水料比(mL∶g)為4∶1、料液比(g∶mL)為1∶4、振蕩時間為10 min,在此條件下進行3次重復(fù)試驗,蝦青素提取率平均為90.42%±0.39%,與理論值相對誤差約為0.79%,說明模型是準(zhǔn)確有效的。與宋素梅[27]對酶解后的蝦殼殘渣和沉淀分別提取蝦青素的研究相比,本研究中蝦青素提取率與宋素梅分別采用丙酮提取酶解后的蝦殼殘渣(15.6%)與乙醇提取酶解后的沉淀(73.7%)之和相當(dāng),但是大大簡化了提取工藝,縮短了酶解時間和提取時間,一定程度上提高了提取效率,并且通過對Alcalase堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶兩者復(fù)配,酶解溫度也得到了下降,有利于保證蝦青素不被熱降解并節(jié)約能源;與翁婷等[30]采用超臨界CO2萃取法提取南極磷蝦中蝦青素的研究中蝦青素提取率(84.4%)相比,本研究中最終提取率略高,但同時相比于超臨界CO2萃取技術(shù),酶解法提取產(chǎn)物的純度可能會略低,因此,本研究中所得產(chǎn)物為蝦青素粗提物,還需對其進行進一步的分離純化研究。

    3 結(jié)論

    本研究中通過采用復(fù)合酶酶解的方法,將Alcalase堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶進行復(fù)配,對南極磷蝦進行酶解處理后,有效提高了南極磷蝦蝦青素的提取效率。以蝦青素提取率為指標(biāo),通過單因素試驗和Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化試驗確定復(fù)合酶法提取蝦青素的最佳工藝條件為酶底比為1.6%、酶解時間為2.1 h、酶解溫度為51 ℃、水料比(mL∶g)為4∶1、料液比(g∶mL)為1∶4、振蕩時間為10 min,在此條件下蝦青素提取率為90.42%±0.39%,與預(yù)測值接近,說明響應(yīng)面法對復(fù)合酶酶解南極磷蝦提取蝦青素工藝條件的優(yōu)化是可行的。

    猜你喜歡
    水料磷蝦青素
    磷蝦真是“蝦無敵”
    南極磷蝦粉在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用
    湖南飼料(2021年4期)2021-10-13 07:32:46
    一種豉香型白酒高效發(fā)酵工藝的研究
    6000倍抗氧化能力,“完爆”維C!昶科將天然蝦青素研發(fā)到極致
    蝦青素在設(shè)施草莓上的應(yīng)用效果
    落葉果樹(2021年6期)2021-02-12 01:29:04
    “美味”的磷蝦
    水料比對鋼筋灌漿套筒連接技術(shù)影響研究★
    山西建筑(2018年25期)2018-10-09 04:54:04
    “美味”的磷蝦
    水料飼喂對新斷奶仔豬采食量的影響
    天然蝦青素在鹵蟲體內(nèi)的代謝積累研究
    国产免费又黄又爽又色| 插阴视频在线观看视频| 欧美精品一区二区大全| 国产日韩欧美视频二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久久久视频综合| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 少妇的逼好多水| 人体艺术视频欧美日本| 久久久午夜欧美精品| 亚洲成人一二三区av| 国产高清有码在线观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 少妇人妻久久综合中文| 国产av码专区亚洲av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲av免费高清在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 美女大奶头黄色视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 曰老女人黄片| 青春草亚洲视频在线观看| 日本wwww免费看| 日韩av不卡免费在线播放| 青春草视频在线免费观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 99九九在线精品视频 | av在线观看视频网站免费| 91成人精品电影| 久久人人爽人人片av| 久久人人爽人人爽人人片va| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 99久久精品一区二区三区| 国产日韩欧美视频二区| 久久97久久精品| 美女国产视频在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 久久精品国产亚洲网站| 观看美女的网站| freevideosex欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 婷婷色综合大香蕉| 欧美日韩综合久久久久久| 日本黄色片子视频| 男女国产视频网站| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产在线一区二区三区精| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 欧美性感艳星| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一区二区三区乱码不卡18| 国产男人的电影天堂91| 国产精品国产三级专区第一集| 国产一区有黄有色的免费视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 极品人妻少妇av视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 久久这里有精品视频免费| 国产乱来视频区| 久久6这里有精品| 成人黄色视频免费在线看| 成人亚洲欧美一区二区av| 午夜影院在线不卡| 精品一区二区三区视频在线| 在线观看国产h片| 精华霜和精华液先用哪个| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 成年人免费黄色播放视频 | av线在线观看网站| 97精品久久久久久久久久精品| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 两个人的视频大全免费| 岛国毛片在线播放| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产免费一区二区三区四区乱码| 各种免费的搞黄视频| 国产精品成人在线| 亚洲av中文av极速乱| 久久久久国产网址| 另类亚洲欧美激情| 97在线人人人人妻| 国产一级毛片在线| av女优亚洲男人天堂| 99九九在线精品视频 | 午夜影院在线不卡| 久久久久久久大尺度免费视频| 热99国产精品久久久久久7| 在线观看美女被高潮喷水网站| 精品一区二区免费观看| av播播在线观看一区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 在线观看免费视频网站a站| 自线自在国产av| 极品教师在线视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久 成人 亚洲| 黄色怎么调成土黄色| 少妇的逼好多水| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲av日韩在线播放| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产欧美日韩精品一区二区| 乱人伦中国视频| 免费在线观看成人毛片| 欧美丝袜亚洲另类| 99久久人妻综合| 国产精品熟女久久久久浪| 91在线精品国自产拍蜜月| 色哟哟·www| 99热国产这里只有精品6| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 精品国产露脸久久av麻豆| 在线精品无人区一区二区三| av线在线观看网站| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲人成网站在线播| a 毛片基地| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产在视频线精品| a级毛片免费高清观看在线播放| 日韩三级伦理在线观看| 久久精品国产自在天天线| 日本与韩国留学比较| 老司机影院毛片| av有码第一页| 久久鲁丝午夜福利片| 99国产精品免费福利视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲第一av免费看| 亚洲精品一区蜜桃| 国产爽快片一区二区三区| 麻豆乱淫一区二区| 久久久久精品性色| 我要看黄色一级片免费的| 99久久综合免费| 热re99久久国产66热| 久久久久久久久久久丰满| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久青草综合色| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 精品午夜福利在线看| 精品一区二区免费观看| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美精品国产亚洲| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲精品色激情综合| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 日韩av免费高清视频| 国产精品三级大全| 久久人人爽人人爽人人片va| 欧美精品国产亚洲| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲av男天堂| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 久久久午夜欧美精品| 国产乱来视频区| 国产精品一区二区在线不卡| 2018国产大陆天天弄谢| 国产极品天堂在线| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲成色77777| 少妇高潮的动态图| 国产伦理片在线播放av一区| 免费在线观看成人毛片| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| av网站免费在线观看视频| 人人妻人人看人人澡| 精品人妻一区二区三区麻豆| 老司机亚洲免费影院| 中国国产av一级| 在线观看三级黄色| 国产精品成人在线| 午夜福利网站1000一区二区三区| h日本视频在线播放| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 一级爰片在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | av卡一久久| 99热网站在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看 | 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 男的添女的下面高潮视频| 在线天堂最新版资源| av.在线天堂| 欧美三级亚洲精品| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产色爽女视频免费观看| 大香蕉97超碰在线| 美女内射精品一级片tv| av国产精品久久久久影院| 精品久久久久久久久av| 午夜久久久在线观看| av免费在线看不卡| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 日本vs欧美在线观看视频 | 一区二区三区四区激情视频| 国产精品三级大全| 丰满人妻一区二区三区视频av| 精品国产乱码久久久久久小说| 观看av在线不卡| 伊人亚洲综合成人网| 国产成人精品无人区| 天堂中文最新版在线下载| 日韩一区二区视频免费看| 赤兔流量卡办理| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲性久久影院| 十八禁网站网址无遮挡 | 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 国产一级毛片在线| 日本av手机在线免费观看| 街头女战士在线观看网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产免费一级a男人的天堂| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久av网站| 另类亚洲欧美激情| 日韩电影二区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产精品一二三区在线看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩av免费高清视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av中文av极速乱| 久久99精品国语久久久| 黑丝袜美女国产一区| 日韩成人伦理影院| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲成人av在线免费| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 九草在线视频观看| 男女免费视频国产| 我的老师免费观看完整版| 亚洲电影在线观看av| 国产成人精品无人区| 亚洲精品,欧美精品| 国产熟女欧美一区二区| 男女啪啪激烈高潮av片| 我的老师免费观看完整版| 日韩,欧美,国产一区二区三区| .国产精品久久| 国产高清不卡午夜福利| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 亚洲国产日韩一区二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品一二三| 黄色欧美视频在线观看| 日韩电影二区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 内射极品少妇av片p| 午夜福利,免费看| 久久久久久久久久成人| 女性生殖器流出的白浆| 两个人的视频大全免费| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 在线观看免费日韩欧美大片 | 午夜91福利影院| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品少妇内射三级| 五月天丁香电影| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 免费看av在线观看网站| 国产爽快片一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久欧美国产精品| 国产免费福利视频在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲美女黄色视频免费看| 69精品国产乱码久久久| 精品一区二区免费观看| 少妇的逼好多水| 99九九线精品视频在线观看视频| 日日爽夜夜爽网站| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲国产色片| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲国产成人一精品久久久| 又爽又黄a免费视频| av专区在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产成人精品无人区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | a级一级毛片免费在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 日韩欧美一区视频在线观看 | 五月开心婷婷网| 亚洲经典国产精华液单| 国产成人精品久久久久久| 蜜臀久久99精品久久宅男| 最新中文字幕久久久久| 黑人高潮一二区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 校园人妻丝袜中文字幕| 黄色毛片三级朝国网站 | 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲成人一二三区av| 午夜日本视频在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 2022亚洲国产成人精品| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲精品乱久久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| av一本久久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 视频中文字幕在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲欧美精品专区久久| 日本午夜av视频| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美少妇被猛烈插入视频| 热re99久久国产66热| 乱系列少妇在线播放| 一级av片app| 日日啪夜夜爽| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲国产日韩一区二区| av.在线天堂| 国产精品无大码| 精品一区二区免费观看| 多毛熟女@视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 国产91av在线免费观看| 老女人水多毛片| 91成人精品电影| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| www.av在线官网国产| 中文字幕人妻丝袜制服| 美女主播在线视频| 在线观看三级黄色| 精品少妇内射三级| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产日韩欧美亚洲二区| 中文资源天堂在线| 少妇高潮的动态图| 久久久午夜欧美精品| 色哟哟·www| 日本爱情动作片www.在线观看| 女性被躁到高潮视频| 亚洲av不卡在线观看| 丝袜在线中文字幕| kizo精华| 成人免费观看视频高清| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 最黄视频免费看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 日本av手机在线免费观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲无线观看免费| 女人久久www免费人成看片| 美女大奶头黄色视频| 成人国产麻豆网| 777米奇影视久久| 毛片一级片免费看久久久久| 婷婷色av中文字幕| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产黄片美女视频| 边亲边吃奶的免费视频| 日本vs欧美在线观看视频 | 性色av一级| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 高清视频免费观看一区二区| 精品熟女少妇av免费看| 亚洲美女黄色视频免费看| 久久久精品94久久精品| 春色校园在线视频观看| 国产精品久久久久久久久免| 国产av一区二区精品久久| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 嫩草影院新地址| a级毛色黄片| 午夜免费观看性视频| 日本黄大片高清| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 久久人妻熟女aⅴ| 最黄视频免费看| 天美传媒精品一区二区| 2021少妇久久久久久久久久久| 中文在线观看免费www的网站| 内射极品少妇av片p| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品福利在线免费观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产精品女同一区二区软件| 精品人妻熟女av久视频| 91成人精品电影| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲精品自拍成人| 大片电影免费在线观看免费| 18禁在线播放成人免费| 国产精品99久久99久久久不卡 | 综合色丁香网| 久久99一区二区三区| 草草在线视频免费看| 日本av手机在线免费观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 午夜老司机福利剧场| 伦理电影免费视频| 国产精品三级大全| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲人成网站在线播| 中文在线观看免费www的网站| 婷婷色av中文字幕| 美女福利国产在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| av国产精品久久久久影院| 亚洲成人一二三区av| 人人妻人人看人人澡| 日韩一本色道免费dvd| 午夜久久久在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲国产日韩一区二区| 两个人免费观看高清视频 | 精品人妻偷拍中文字幕| 午夜激情久久久久久久| 99久国产av精品国产电影| 免费黄频网站在线观看国产| 黄色日韩在线| 精品久久久久久电影网| 国产精品一区二区在线不卡| 麻豆乱淫一区二区| 熟女av电影| 22中文网久久字幕| 国产成人精品婷婷| 国产精品一区www在线观看| 免费人成在线观看视频色| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 男女边吃奶边做爰视频| 熟女人妻精品中文字幕| 久久av网站| 国产真实伦视频高清在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜精品国产一区二区电影| 成年人免费黄色播放视频 | 日本免费在线观看一区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产免费福利视频在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久久国产欧美日韩av| 免费看光身美女| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲欧美一区二区三区国产| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品无大码| 日韩成人av中文字幕在线观看| 韩国av在线不卡| 久久久欧美国产精品| 在线看a的网站| 欧美精品国产亚洲| 亚洲av综合色区一区| 久久久久国产网址| 亚洲av成人精品一二三区| 一级毛片我不卡| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲精品一二三| 又大又黄又爽视频免费| 久久久久国产精品人妻一区二区| 女性生殖器流出的白浆| av天堂久久9| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 最近的中文字幕免费完整| 色94色欧美一区二区| 欧美性感艳星| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲第一av免费看| 日本与韩国留学比较| 男男h啪啪无遮挡| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产一区二区三区av在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 新久久久久国产一级毛片| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 9色porny在线观看| 97在线人人人人妻| 22中文网久久字幕| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 午夜影院在线不卡| 日韩欧美 国产精品| 精品久久国产蜜桃| 嘟嘟电影网在线观看| 成人免费观看视频高清| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 婷婷色综合www| 中文在线观看免费www的网站| 国产免费福利视频在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美成人午夜免费资源| 永久网站在线| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲成色77777| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 欧美3d第一页| 国产av精品麻豆| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 午夜激情福利司机影院| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品久久久久成人av| 18+在线观看网站| 人人妻人人澡人人看| 亚洲国产色片| 欧美高清成人免费视频www| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲四区av| 国产探花极品一区二区| 久久久久久伊人网av| 国内精品宾馆在线| 日本黄色日本黄色录像| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产色片| 国产一区二区三区综合在线观看 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 精品午夜福利在线看| 色视频www国产| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 多毛熟女@视频| 国产精品一区www在线观看| 人妻 亚洲 视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲国产色片| 久久久久久久久久成人| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产在线免费精品| 亚洲av福利一区| 免费看av在线观看网站| 在线天堂最新版资源| 国产综合精华液| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品偷伦视频观看了| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 91精品一卡2卡3卡4卡| 97超视频在线观看视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久人妻熟女aⅴ| 黄色怎么调成土黄色| 午夜影院在线不卡| 免费观看a级毛片全部| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 尾随美女入室| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 另类精品久久| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久97久久精品| 午夜视频国产福利| 日本wwww免费看| 一级黄片播放器| 久久久久久久久久久免费av| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 乱人伦中国视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 五月开心婷婷网| 国产免费视频播放在线视频| 色94色欧美一区二区| 男女国产视频网站| 又爽又黄a免费视频| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲av免费高清在线观看| 国产在线免费精品| 天美传媒精品一区二区| 国产一区有黄有色的免费视频| a级毛片在线看网站| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产成人精品福利久久| 一级二级三级毛片免费看| 精品一区二区三卡| 草草在线视频免费看| 亚洲精品456在线播放app| 免费高清在线观看视频在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | tube8黄色片| 久久久久精品久久久久真实原创| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费观看在线日韩|