2種降脂藥物對高脂飲食金黃地鼠肝臟組織病理學影響比較研究

曹曉東，常福厚

（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學新藥安全評價研究中心 內(nèi)蒙古自治區(qū)新藥篩選工程研究中心，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010059）

隨著人們生活水平的不斷提高，由高脂飲食引起的高脂血癥和脂肪肝的發(fā)病率日益升高。肝臟蓄積大量脂肪后，可引起局灶性肝細胞壞死、肝臟炎細胞浸潤以及肝纖維化，嚴重時可導致肝硬化，給人們的健康帶來隱患。辛伐他汀與依折麥布是目前常用的調(diào)脂藥，辛伐他汀的作用原理是作為羥甲基戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶抑制劑，可干擾膽固醇體內(nèi)合成的前體物質(zhì)甲基二羥戊酸，從而抑制內(nèi)源性膽固醇的合成[1]。辛伐他汀可由藥物代謝酶CYP3A4代謝，主要代謝場所為肝臟，代謝產(chǎn)物主要經(jīng)膽道和腎臟排出。依折麥布作為選擇性膽固醇吸收抑制劑，可以附著于空腸絨毛刷狀緣轉(zhuǎn)運蛋白Niemann-Pick C1-like1，選擇性地抑制外源性膽固醇的吸收，對飲食性高膽固醇血癥治療效果很好[2]。藥物代謝試驗發(fā)現(xiàn)，依折麥布幾乎不通過主要藥物代謝酶 （細胞色素P450）代謝，故幾乎不與其他藥物發(fā)生相互作用，也不會影響脂肪酸和脂溶性維生素的吸收。

近年來，金黃地鼠由于脂代謝方式與人類較為相似，對脂質(zhì)和膽固醇更加敏感，具有造模時間短以及成本低的特點，逐漸取代了小鼠、大鼠和兔等實驗動物作為新的研究脂質(zhì)代謝的實驗動物[3-4]。該研究旨在通過比較辛伐他汀和依折麥布對高脂飲食模型金黃地鼠肝臟組織病理學的影響，為2種藥物的降脂作用臨床評價提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

90～110 g雄性敘利亞金黃地鼠，適應性飼養(yǎng)1周，選取健康狀況良好的40只隨機分為4組，分別為空白對照組、高脂模型組、辛伐他汀組和依折麥布組。各組金黃地鼠自由飲水與進食，光照周期為12 h，飼養(yǎng)溫度18～25℃。

1.2 飼料配方

高脂飼料配方為在基礎(chǔ)飼料的基礎(chǔ)上，添加15%動物脂肪、0.2%膽固醇和0.2%膽酸鈉。

1.3 試驗設(shè)計

對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，其他3組飼喂高脂飼料。給予高脂飼料2周后，辛伐他汀組每天灌胃給藥3 mg/（kg·BW），依折麥布組每天灌胃給藥2.5 mg/（kg·BW）。空白對照組和高脂模型組分別灌胃等體積蒸餾水。連續(xù)給藥9周，禁食8 h后稱量各組金黃地鼠體重，麻醉放血致死，摘取肝臟稱重，放入固定液中，制備組織學切片，HE染色后用顯微鏡觀察并拍照。

表1 各組金黃地鼠體重、肝臟重量及肝體比測定結(jié)果

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗結(jié)果用平均值±標準差表示。利用SPSS 21.0軟件對各組金黃地鼠的體重、肝臟重量及肝體比數(shù)據(jù)進行Dunnett t檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 2種降脂藥物對高脂飲食金黃地鼠體重及肝臟重量的影響

由表1可知，高脂模型組、辛伐他汀組和依折麥布組體重與空白對照組相比差異均不顯著 （P＞0.05）。與空白對照組相比，高脂模型組肝臟重量顯著增加（P＜0.05），辛伐他汀組肝臟重量極顯著增加（P＜0.01），依折麥布組肝臟重量變化不顯著（P＞0.05）。高脂模型組和辛伐他汀組的肝體比極顯著高于空白對照組（P＜0.01），依折麥布組的肝體比顯著低于空白對照組（P＜0.05）。

2.2 2種降脂藥物對高脂飲食金黃地鼠肝臟組織病理學的影響

空白對照組肝臟剖檢后眼觀呈暗褐色，質(zhì)地柔軟，邊緣銳利；高脂模型組肝臟顏色偏黃，表面有顆粒感，邊緣鈍圓；辛伐他汀組肝臟顏色呈土黃色，表面有顆粒感，邊緣銳利；依折麥布組肝臟呈暗褐色，質(zhì)地柔軟，邊緣銳利。

空白對照組肝臟組織學檢查可見肝細胞胞質(zhì)豐富，嗜酸性，以中央靜脈為中心，單行排列成肝細胞索，肝細胞索之間為肝血竇（見圖1A）。高脂模型組肝臟鏡檢觀察可見彌漫性肝細胞脂肪變性，肝細胞變大、排列混亂，肝血竇被擠壓，肝細胞內(nèi)淺染的大小不一的空泡將細胞核擠向一邊，伴隨局灶性空泡變性和炎細胞浸潤（見圖1B）。辛伐他汀組肝臟鏡檢觀察可見肝周邊緣部肝細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大脂肪空泡，將細胞核擠向一邊，可見空泡變性和炎性細胞浸潤（見圖1C）。依折麥布組肝臟組織學檢查可見肝細胞均質(zhì)紅染，胞質(zhì)豐富，肝索排列整齊（見圖1D）。

圖1 各組金黃地鼠肝臟組織病理學觀察結(jié)果（HE染色）

3 討論

長期的高脂飲食可導致嚴重的肝臟脂肪蓄積，而大量的脂肪蓄積會導致肝細胞的變性壞死，嚴重者可導致肝臟的纖維化，給機體健康帶來不良影響[5-6]。該研究結(jié)果表明，與空白對照組相比，高脂模型組、辛伐他汀組和依折麥布組的體重變化差異不顯著，高脂模型組與辛伐他汀組的肝體比與空白對照組相比顯著增大，而依折麥布組顯著減小，結(jié)合各組組織學檢查結(jié)果可知，與辛伐他汀相比，依折麥布可以更好地降低高脂飼喂的金黃地鼠肝臟的脂肪蓄積，降脂效果更好。

肝臟的大量脂質(zhì)蓄積可導致肝臟顏色變黃、邊緣變鈍圓以及肝臟重量增加。由組織學觀察結(jié)果可知，肝臟的脂質(zhì)蓄積多在中央小靜脈和肝葉的邊緣區(qū)域。辛伐他汀可以降低長期高脂飲食導致的肝組織損傷，但對肝臟脂質(zhì)蓄積的逆轉(zhuǎn)較依折麥布效果不明顯。依折麥布從體重、肝臟重量、肝體比以及組織學變化4個方面均可以很好地逆轉(zhuǎn)長期高脂飲食造成的肝臟脂質(zhì)蓄積以及肝臟組織損傷。這可能是由于辛伐他汀主要抑制內(nèi)源性的膽固醇合成，而依折麥布主要抑制膽固醇在小腸的吸收。對于由高脂飲食引起的脂質(zhì)蓄積，臨床上應該選用能夠選擇性抑制外源性膽固醇吸收的依折麥布[7]。