酵母細(xì)胞壁多糖在鯽魚(yú)鰓出血防治中的應(yīng)用

鄧龍釗

摘 要：鯽魚(yú)，為我國(guó)大宗淡水養(yǎng)殖水產(chǎn)品，年產(chǎn)量超過(guò)260萬(wàn)噸，癌水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占據(jù)重要地位。當(dāng)前，在鯽魚(yú)養(yǎng)殖發(fā)生的諸多疾病中，出血病是一種較為嚴(yán)重的疾病，具有發(fā)病急、防治困難的特點(diǎn)，會(huì)為養(yǎng)殖戶造成很大的損失，所以必須對(duì)不同地區(qū)與不同鯽魚(yú)種類患有出血病的防治加以重視。免疫多糖作為一種重要的免疫促進(jìn)劑，具有高效、低毒、無(wú)殘留的特點(diǎn)，符合綠色飼料發(fā)展的需求。本文對(duì)免疫多糖在鯽魚(yú)鰓出血防治中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。

關(guān)鍵詞：鯽魚(yú)；鰓出血；酵母細(xì)胞壁多糖；應(yīng)用

近些年來(lái)鯽魚(yú)出血病的發(fā)病幾率較高，會(huì)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖戶的利益造成很大的損害，需要養(yǎng)殖戶十分注意。酵母細(xì)胞壁多糖作為一種環(huán)保型綠色飼料添加劑，能夠提高鯽魚(yú)自身的免疫能力，提升對(duì)病毒、真菌、寄生與細(xì)菌等的抵抗力，并且能夠降低對(duì)鯽魚(yú)早成的不良應(yīng)激反應(yīng)，從而使動(dòng)物的生產(chǎn)性能得以提高。將酵母細(xì)胞壁多糖應(yīng)用在一些水產(chǎn)動(dòng)物中，能夠起到低毒性、無(wú)殘留且高效等的作用，確保整個(gè)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)更加健康的發(fā)展。

一、 發(fā)病原因

鯽魚(yú)鰓出血病主要由CyHV-2（皰疹病毒）致使感染，鰓動(dòng)脈血管發(fā)生病變所到孩子，主要的發(fā)病原因共有6項(xiàng)，包括內(nèi)容：

1.當(dāng)水溫達(dá)到26至28℃時(shí)可使疾病爆發(fā)，若問(wèn)題>30℃、小于22℃也可導(dǎo)致該疾病發(fā)生。

2.鯽魚(yú)品種質(zhì)量的退化、免疫力下降，具有較差的抗病能力。

3.養(yǎng)殖鯽魚(yú)的水質(zhì)中的硫化氫、氨氮或亞硝酸鹽等的指標(biāo)超標(biāo)，水質(zhì)差；魚(yú)塘不及時(shí)清理、淤泥較厚，滋生病原體。

4.喂養(yǎng)鯽魚(yú)的飼料質(zhì)量差，或是未對(duì)鯽魚(yú)進(jìn)行科學(xué)、合理的投喂。

5.相關(guān)藥物的盲目使用。

6.飼養(yǎng)鯽魚(yú)的放養(yǎng)密度較大。

二、發(fā)病癥狀

鯽魚(yú)出血病屬于一種具有傳染性疾病，多因病毒、細(xì)菌侵襲所引起，其中以細(xì)菌性致病最為常見(jiàn)，鯽魚(yú)在發(fā)病后的癥狀通常表現(xiàn)為不集群、游動(dòng)無(wú)力、顏色變黑，又被稱之為黑頭，全身發(fā)紅，鯽魚(yú)的胸部、側(cè)鱗處尤為明顯，且鰓絲明顯腫脹，在魚(yú)體跳躍、鰓蓋張合的過(guò)程中鯽魚(yú)的鰓部會(huì)有鮮紅的血液流出。在鯽魚(yú)病死后其鰓蓋處的淤血癥狀明顯，并伴有組織器官出血、充血，脾腎臟腫大以及肝臟糜爛等的癥狀。

三、酵母細(xì)胞壁多糖在鯽魚(yú)鰓出血防治中的應(yīng)用研究

1.材料

（1）研究用魚(yú)。選擇兩個(gè)魚(yú)塘中的魚(yú)作為研究對(duì)象，要求兩個(gè)魚(yú)塘中魚(yú)苗品種、養(yǎng)殖規(guī)格、養(yǎng)殖飼料均完全相同，沒(méi)有顯著差異。對(duì)兩個(gè)魚(yú)塘中的魚(yú)進(jìn)行血清免疫指標(biāo)檢驗(yàn)。

（2）菌株。以患病鯽魚(yú)為菌株獲取對(duì)象，在病魚(yú)體內(nèi)分離攻毒的嗜水氣單胞菌，明確鑒定后保存于-20℃環(huán)境中，備用。

2.方法

（1）投喂飼料。一口養(yǎng)魚(yú)塘，在投放商品飼料前混入酵母細(xì)胞壁多糖，飼料與酵母細(xì)胞壁多糖比例為10：4，另一口魚(yú)塘投喂與第一口魚(yú)塘等量正常飼料。4月上旬、8月下旬各4個(gè)星期。

（2）培養(yǎng)菌液。取出保存的嗜水氣單胞菌菌種，予以活化培養(yǎng)，置于固體培養(yǎng)基上，于37℃持續(xù)培養(yǎng)18h。采集單菌落，將其加入到200mL液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，150rpm條件下持續(xù)培養(yǎng)12h，并擴(kuò)大培養(yǎng)。

（3）獲取研究對(duì)象。

分別于兩口魚(yú)塘隨機(jī)選取20尾鯽魚(yú)作為嗜水氣單胞菌攻毒試驗(yàn)對(duì)象。

死亡率（%）=[（初期魚(yú)體尾數(shù)-末期魚(yú)體尾數(shù)）/初期魚(yú)體尾數(shù)]×100

免疫保護(hù)率（%）=（1-試驗(yàn)組病死率/對(duì)照組病死率）×100。

（4）測(cè)定免疫指標(biāo)。在投喂前1星期，投喂后第1星期、第2星期、第3星期、第4星期各時(shí)間段選取5條鯽魚(yú)用于實(shí)驗(yàn)，對(duì)各個(gè)時(shí)間段兩組魚(yú)塘中的魚(yú)予以抽血測(cè)定堿性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶 。

3.結(jié)果

（1）攻毒感染結(jié)果分析。

攻毒感染結(jié)果如表1，研究發(fā)現(xiàn)鯽魚(yú)出血病癥狀為主要表現(xiàn)。

（2）免疫指標(biāo)的測(cè)定。

免疫后檢測(cè)結(jié)果顯示：投喂后血清AKP、SOD活性明顯下降，停止停喂則有所升高，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，AKP水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），SOD差異顯著（P<0.05）。投喂后，AKP、SOD在第2星期達(dá)到峰值，后下降至基礎(chǔ)水平。

（3）鰓出血發(fā)病率、發(fā)病程度。

分析表2，整體自養(yǎng)養(yǎng)殖塘口數(shù)相差不大的情況下，鯽魚(yú)精養(yǎng)、混養(yǎng)模式，公司2017年度鯽魚(yú)鰓出血發(fā)病率、發(fā)病程度均遠(yuǎn)低于2016年。橫向?qū)Ρ纫矁?yōu)于周邊養(yǎng)殖戶鯽魚(yú)鰓出血防治效果，（P<0.05）。

四、討論

免疫多糖，用于魚(yú)苗投喂中，具有增強(qiáng)魚(yú)體免疫反應(yīng)作用，能夠提升魚(yú)對(duì)各種病毒的抵抗能力，因此可以有效降低各種疾病的發(fā)生，在魚(yú)類病防治當(dāng)中應(yīng)用效果良好。馬淑芳曾以當(dāng)歸多糖喂點(diǎn)帶石斑魚(yú)，分析當(dāng)歸多糖的影響作用，予以當(dāng)歸多糖可提高點(diǎn)帶石斑魚(yú)自身免疫力，降低發(fā)病率、死亡率。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示酵母細(xì)胞壁多糖喂養(yǎng)組鯽魚(yú)感染率、發(fā)病程度均較低，應(yīng)用價(jià)值理想，這符合馬淑芳的分析，證實(shí)了本次研究的科學(xué)性。另外，擴(kuò)大酵母細(xì)胞壁多糖的使用范圍，更能夠優(yōu)化使用效果。由此判斷在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中，能夠以投喂酵母細(xì)胞壁多糖方式提升水產(chǎn)動(dòng)物的抗病能力，可有效提升水產(chǎn)養(yǎng)殖效益。

堿性磷酸酶（AKP）為各種動(dòng)物體內(nèi)普遍存在的一種酶，參與免疫反應(yīng)。超氧化物歧化酶，可幫助魚(yú)類有效清除體內(nèi)的自由基（SOD），而SOD是影響生物免疫功能的重要指標(biāo)。劉暢認(rèn)為黃芪多糖（APS）有助于提升鯽魚(yú)血清中AKP、超氧化物歧化酶活性，因此能夠提升鯽魚(yú)的自身免疫力。陳昌福認(rèn)為免疫多糖（酵母細(xì)胞壁）可有效提升銀鯽自身免疫應(yīng)答能力，其中超氧化物歧化酶活性有明顯上升表現(xiàn)。本次研究中超氧化物歧化酶活性的變化情況與上述研究相吻合，但AKP變化差異較大，這可能與不同魚(yú)類免疫特性、免疫多糖來(lái)源有所差異有關(guān)。總之，實(shí)際養(yǎng)殖中應(yīng)分析病因，應(yīng)該“防治結(jié)合、預(yù)防為主”。

（1）清塘消毒：①生石灰清塘：完成池塘修整后，應(yīng)在進(jìn)行苗種選擇前的3個(gè)星期內(nèi)，在晴天使用生石灰對(duì)清塘進(jìn)行消毒，使用量為75kg/畝，若池塘的淤泥較少，則可使用50kg/畝。②使用生石灰?guī)M(jìn)行清塘：對(duì)于并不靠近湖或河的池塘，在清塘前若池水無(wú)法向池外排出、排出后難以補(bǔ)入的，使用鄰池進(jìn)行蓄水進(jìn)行交相灌注，以此增加了病原傳播的可能性，這樣便失去了進(jìn)行清塘、疾病防治的目的。所以可使用生石灰?guī)逄?，生石灰的使用量?25至150kg/畝，平均水深為1米。③使用漂白粉清塘：漂白粉中通常含有約30%左右的氯，具有較強(qiáng)的殺菌、漂白作用，使用量為13.5kg/畝，平均水深為1米，20g/m2。清塘后>5d再將鯽魚(yú)放入池塘中，以保證魚(yú)的安全。

（2）嚴(yán)格的苗種把關(guān)：水產(chǎn)養(yǎng)殖戶必須對(duì)鯽魚(yú)苗種進(jìn)行檢疫，千萬(wàn)不可將帶有病毒的苗種帶入到養(yǎng)殖池塘中。

（3）無(wú)污染水源：在進(jìn)水前，養(yǎng)殖戶要對(duì)水源水質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，以減少鯽魚(yú)病毒感染的幾率。

（4）投喂合理性：在越冬后，鯽魚(yú)的體質(zhì)會(huì)逐漸變?nèi)酢⒚庖吡σ矔?huì)變差，很容易受到病毒和細(xì)菌的侵襲，所有養(yǎng)殖戶應(yīng)在開(kāi)春后對(duì)鯽魚(yú)進(jìn)行飼料投喂，以便更好的增加鯽魚(yú)的免疫力、體質(zhì)。

（5）預(yù)防性用藥：養(yǎng)殖戶應(yīng)對(duì)水體實(shí)施經(jīng)常性消毒，并且應(yīng)在養(yǎng)殖高峰期內(nèi)投喂一些具有抗病毒、肝膽保護(hù)的中藥材。

五、結(jié)語(yǔ)

綜上所述，本文通過(guò)在飼料中添加酵母細(xì)胞壁多糖對(duì)鯽魚(yú)進(jìn)行免疫投喂的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：投喂酵母細(xì)胞壁多糖餌料后鯽魚(yú)血清AKP與SOD活力明顯升高，非特異性免疫力得到改善與提高。同時(shí)，免疫投喂的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酵母細(xì)胞壁多糖可以增強(qiáng)鯽魚(yú)對(duì)嗜水氣單胞菌的抵抗能力，提高自身免疫力，增強(qiáng)抗病毒能力。

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