• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    超高效合相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定口含煙中對(duì)羥基苯甲酸酯

    2018-07-27 03:25:54邊照陽(yáng)鄧惠敏劉珊珊李中皓范子彥唐綱嶺
    質(zhì)譜學(xué)報(bào) 2018年4期
    關(guān)鍵詞:含煙柱溫異丙醇

    王 穎,邊照陽(yáng),鄧惠敏,楊 飛,劉珊珊,李中皓,范子彥,唐綱嶺

    (國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心,河南 鄭州 450001)

    對(duì)羥基苯甲酸酯又稱(chēng)為尼泊爾金酯,包括甲酯、乙酯、丙酯等,是一種廣譜、高效的防腐劑,廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、藥品等領(lǐng)域[1-4],甚至在嬰兒用品(如咬咬膠)中也有檢出[5]。對(duì)羥基苯甲酸酯具有酚羥基結(jié)構(gòu),抑菌活性主要來(lái)自其分子態(tài),在pH 3~8范圍內(nèi)有較好的抑菌作用[6],實(shí)際中多為幾種酯的混合使用。尼泊爾金酯進(jìn)入人體后,大部分經(jīng)代謝排出,最初使用時(shí)對(duì)其毒性認(rèn)識(shí)并不十分明確[7]。1998年,Routledge等[8]首次發(fā)現(xiàn)了尼泊爾金酯具有雌激素活性,隨后進(jìn)行的一些暴露學(xué)實(shí)驗(yàn)也提示該類(lèi)防腐劑可能與乳腺癌的發(fā)病有關(guān)[9-10]。歐盟已于2014年開(kāi)始限制部分尼泊爾金酯類(lèi)物質(zhì)應(yīng)用于化妝品中[11]。不同于日用品,食品中尼泊爾金酯類(lèi)物質(zhì)直接進(jìn)入人體,過(guò)多的攝入會(huì)導(dǎo)致其代謝不完全而被吸收儲(chǔ)存于人體組織中,造成多種疾病的發(fā)生。

    口含煙是一種無(wú)煙氣煙草制品,主要通過(guò)口腔含服對(duì)其吸食。為了保證口感,這類(lèi)產(chǎn)品的含水率較卷煙高,有的甚至加入大量的保潤(rùn)劑以保持其濕潤(rùn)狀態(tài)[12]。由于溫度較高時(shí)極易產(chǎn)生霉菌等腐敗物質(zhì),因此,會(huì)在產(chǎn)品中加入一定量的防腐成分。目前,我國(guó)規(guī)定食品中此類(lèi)防腐劑的限量為10~1 500 mg/kg(按照不同的對(duì)羥基苯甲酸酯分類(lèi),且以對(duì)羥基苯甲酸鹽計(jì)),而國(guó)際上關(guān)于口含煙成分安全監(jiān)控研究的報(bào)道較少。因此,尼泊爾金酯等防腐劑的準(zhǔn)確檢測(cè)具有重要的意義。

    尼泊爾金酯類(lèi)物質(zhì)的檢測(cè)方法包括毛細(xì)管電泳[13]、氣相色譜[14-15]、氣相色譜-質(zhì)譜[5,16]、液相色譜[17]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜[18-20]等技術(shù)。其中,氣相色譜法的檢測(cè)靈敏度較低;氣相色譜-質(zhì)譜法在測(cè)定之前需要對(duì)樣品進(jìn)行衍生化處理,操作繁瑣;液相色譜法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法均可實(shí)現(xiàn)尼泊爾金酯類(lèi)物質(zhì)的準(zhǔn)確測(cè)定,但液相色譜法需要使用大量的有機(jī)溶劑,對(duì)操作者和環(huán)境的危害較大。合相色譜是2012年由Waters公司推出的全新色譜技術(shù),其主要的流動(dòng)相為壓縮二氧化碳(CO2),與液體流動(dòng)相或載氣相比,降低了成本和毒性,且分析速度快,與質(zhì)譜聯(lián)用可以進(jìn)一步提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度。

    本研究擬采用乙腈提取,超高效合相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPC2-MS/MS)測(cè)定口含煙中尼泊爾金酯類(lèi)物質(zhì),希望為該類(lèi)物質(zhì)的檢測(cè)提供新途徑。

    1 實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 儀器與設(shè)備

    Acquity UPC2Xevo超高效合相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(配有電噴霧離子源)、Acquity UPC2 TMHSS C18 SB色譜柱(3.0 mm×100 mm×1.8 μm)、Acquity UPC2 TMBEH 2-EP色譜柱(3.0 mm×100 mm×1.7 μm)、Acquity UPC2 TMBEH色譜柱(3.0 mm×100 mm×1.7 μm)、Acquity UPC2 TMCSHTMFluoro-Phenyl色譜柱(3.0 mm×100 mm×1.7 μm):均為美國(guó)Waters公司產(chǎn)品;KQ700-DB超聲波發(fā)生器:江蘇昆山超聲儀器公司產(chǎn)品;XH-D漩渦混合器:無(wú)錫沃信儀器有限公司產(chǎn)品;Sigma 3-30 K冷凍高速離心機(jī):德國(guó)Sigma公司產(chǎn)品;0.22 μm尼龍濾頭:上海安譜公司產(chǎn)品;BSA2245-CW電子天平(感量0.1 mg):德國(guó)Sartorius公司產(chǎn)品。

    1.2 材料與試劑

    甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈:均為色譜純,美國(guó)Tedia公司產(chǎn)品;對(duì)羥基苯甲酸甲酯(MPB)、對(duì)羥基苯甲酸乙酯(EPB)、對(duì)羥基苯甲酸丙酯(PPB)、對(duì)羥基苯甲酸丁酯(DPB):純度均大于99%,上海安譜公司產(chǎn)品;氘代-對(duì)羥基苯甲酸甲酯(D4-MPB):純度大于99%,德國(guó)Dr. EHrenstorfer GmbH公司產(chǎn)品;HLB固相萃取小柱:美國(guó)Waters公司產(chǎn)品;Sigmole EN 3008(25 mg PSA,2.5 mg GCB,150 mg MgSO4)萃取試劑盒:上??泼鸦瘜W(xué)科技有限公司產(chǎn)品;BondElut 5982-5021(25 mg PSA,150 mg MgSO4)和BondElut 5982-5321(25 mg PSA,7.5 mg Carbon,150 mg MgSO4)萃取試劑盒:美國(guó)Agilent科技有限公司產(chǎn)品。

    1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

    分別準(zhǔn)確稱(chēng)取約0.05 g MPB、EPB、PPB、DPB于燒杯中,加入乙腈溶解,轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中,用乙腈定容,得到1 g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

    向2.5 mg氘代對(duì)羥基苯甲酸甲酯加入25 mL乙腈,得到100 mg/L的內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

    1.4 樣品前處理

    剪開(kāi)袋裝口含煙的包裝,準(zhǔn)確稱(chēng)取約1 g(精確至0.000 1 g)樣品至50 mL離心管中,加入10 mL乙腈,再加入50 μL內(nèi)標(biāo)溶液,超聲提取30 min,以10 000 r/min離心2 min。取1~1.5 mL上清液至含有QuEChERS試劑(25 mg PSA、7.5 mg Carbon、150 mg MgSO4)的離心管中,渦旋混合1~2 min,以10 000 r/min離心1 min,取上清液,過(guò)0.22 μm尼龍濾膜,待測(cè)。

    1.5 實(shí)驗(yàn)條件

    1.5.1色譜條件 色譜柱:Waters Acquity UPC2 TMHSS C18 SB柱(3.0 mm×100 mm×1.8 μm);柱溫55 ℃;流動(dòng)相:A為CO2,B為異丙醇-甲醇溶液(V/V,1∶1);流速1.5 mL/min;梯度洗脫程序:0~3.0 min(98%A),3~3.2 min(98%~92%A),3.2~4.0 min(92%~98%A),4.0~5.0 min(98%A);進(jìn)樣體積1 μL;動(dòng)態(tài)備壓1.03×107Pa;補(bǔ)償液:0.1%甲酸水溶液;流速0.2 mL/min。

    1.5.2質(zhì)譜條件 電噴霧離子源(ESI)負(fù)離子模式;質(zhì)量掃描范圍m/z50~250;離子源溫度150 ℃;毛細(xì)管電壓3.0 kV;脫溶劑氣溫度400 ℃;脫溶劑氣流速600 L/h;反吹氣流速50 L/h;多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式。具體質(zhì)譜條件列于表1。

    表1 各化合物基本信息和質(zhì)譜測(cè)定條件Table 1 Standard information of the compounds and optimized conditions of mass spectrometry

    注:*表示定量離子

    2 結(jié)果與討論

    2.1 色譜柱的選擇

    選取合相色譜最常用的4種分析柱測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液,結(jié)果示于圖1。由圖1可知,采用UPC2 TMCSHTMFluoro-Phenyl色譜柱(圖1a)和UPC2 TMBEH 2-EP色譜柱(圖1b)無(wú)法完全分離4種成分。4種成分在UPC2 TMBEH 2-EP色譜柱上的響應(yīng)較低,靈敏度較差。采用Acquity UPC2 TMBEH色譜柱(圖1c)時(shí),對(duì)羥基苯甲酸甲酯和對(duì)羥基苯甲酸乙酯無(wú)法分離。在UPC2 TMHSS C18 SB色譜柱上(圖1d),4種成分實(shí)現(xiàn)分離,峰形對(duì)稱(chēng)、尖銳,有利于定量分析。因此,本實(shí)驗(yàn)選擇 UPC2 TMHSS C18 SB色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離。

    2.2 改性劑的選擇

    在合相色譜分析中,主要的流動(dòng)相為非極性超臨界CO2,通過(guò)在CO2中加入一定量的液體助劑(也稱(chēng)為改性劑),可以適當(dāng)?shù)母淖兞鲃?dòng)相性質(zhì),從而改變其對(duì)化合物的洗脫能力,改善各化合物的峰形和分離情況。實(shí)驗(yàn)考察了甲醇、乙腈、異丙醇、甲醇-異丙醇(V/V,1∶1)等改性劑對(duì)分離的影響,示于圖2。結(jié)果表明,甲醇、乙腈和異丙醇不能實(shí)現(xiàn)所有成分的良好分離;而采用甲醇-異丙醇(V/V,1∶1)時(shí),4種成分得到了較好分離。因此,本實(shí)驗(yàn)選取甲醇-異丙醇(V/V,1∶1)作為改性劑。

    2.3 柱溫的選擇

    超臨界流體的黏度會(huì)隨著溫度升高而降低,導(dǎo)致溶劑化能力減小,出峰延時(shí),所以相對(duì)于液相色譜的流動(dòng)相,溫度對(duì)合相色譜的流動(dòng)相——超臨界狀態(tài)下的CO2影響更大。合相色譜柱溫的范圍一般為10~60 ℃。實(shí)驗(yàn)考察了15~60 ℃柱溫對(duì)目標(biāo)物分離的影響。結(jié)果表明,當(dāng)柱溫小于55 ℃時(shí),各化合物出峰較快,部分物質(zhì)難以分離;當(dāng)柱溫為55 ℃時(shí),各化合物分離度較好,峰形對(duì)稱(chēng);當(dāng)柱溫繼續(xù)升高,各化合物保留時(shí)間沒(méi)有明顯提高,且分離度變化不大。因此,本實(shí)驗(yàn)選取柱溫55 ℃對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定。

    2.4 動(dòng)態(tài)備壓的選擇

    合相色譜動(dòng)態(tài)備壓控制整個(gè)操作過(guò)程中CO2的超臨界流體狀態(tài),是影響分離過(guò)程的重要因素之一。實(shí)驗(yàn)考察了動(dòng)態(tài)備壓在1.03×107~1.37×107Pa范圍內(nèi)對(duì)目標(biāo)物分離的影響。當(dāng)動(dòng)態(tài)備壓由1.03×107Pa逐漸上升時(shí),各化合物分離度開(kāi)始呈緩慢下降趨勢(shì);升至1.10×107Pa及以上時(shí),分離度下降較快。因此,選擇動(dòng)態(tài)備壓1.03×107Pa,此時(shí),系統(tǒng)壓力不大,4種化合物分離良好。

    注:a.UPC2 TM CSHTM Fluoro-Phenyl色譜柱;b.UPC2 TM BEH 2-EP色譜柱;c.Acquity UPC2 TM BEH色譜柱;d.UPC2 TM HSS C18 SB色譜柱;1.對(duì)羥基苯甲酸甲酯;2.對(duì)羥基苯甲酸乙酯;3.對(duì)羥基苯甲酸丙酯;4.對(duì)羥基苯甲酸丁酯圖1 4種色譜柱上標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖Fig.1 Chromatograms of standard solution on 4 kinds of column

    注:a.甲醇;b.乙腈;c.異丙醇;d.甲醇-異丙醇(V/V,1∶1)圖2 改性劑的選擇對(duì)分離的影響Fig.2 Effect of the selection of modifiers on separation

    2.5 萃取溶劑的選擇

    對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)物質(zhì)微溶于水,易溶于甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈等有機(jī)溶劑。甲醇[20-21]和乙腈是文獻(xiàn)中常用的提取溶劑,但提取前都要加鹽,如NaCl[22]或Na2SO4[23],這主要是因?yàn)樘穷?lèi)和蛋白質(zhì)等物質(zhì)會(huì)在有機(jī)溶劑中聚集成團(tuán),使得目標(biāo)分析物被樣品顆粒包裹,降低了提取效率??诤瑹熤袩煵荨⒌鞍踪|(zhì)和糖類(lèi)等物質(zhì)的含量均較高,并且由于制作工藝的不同,其水分和鹽的含量比普通煙草高很多。實(shí)驗(yàn)考察了甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈對(duì)樣品的提取效率。結(jié)果表明,相較于乙醇和異丙醇,甲醇和乙腈的提取效率均較高,但是甲醇提取的樣品色素含量較高,因此,選擇乙腈為萃取溶劑。另外,實(shí)驗(yàn)考察加入Na2SO4對(duì)提取效率的影響,發(fā)現(xiàn)加入Na2SO4后提取效率變化不大,這可能是因?yàn)榭诤瑹煴旧淼暮}量較高,不需外加鹽即可直接提取。

    2.6 樣品凈化條件的選擇

    質(zhì)譜分析中,相較于其他類(lèi)型的離子源,電噴霧離子源更易產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)。凈化樣品可以有效地降低基質(zhì)效應(yīng),是前處理過(guò)程的重要環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)考察了固相萃取(SPE)和QuEChERS方法對(duì)樣品的凈化效果。采用的固相萃取小柱為T(mén)hermo Fisher OnGuard RP柱、Waters Oasis HLB 柱,采用的QuEChERS萃取試劑盒為Sigmole EN 3008(25 mg PSA,2.5 mg GCB,150 mg MgSO4)、BondElut 5982-5021(25 mg PSA,150 mg MgSO4)、BondElut 5982-5321(25 mg PSA,7.5 mg Carbon,150 mg MgSO4),結(jié)果示于圖3。由圖3可知,2種固相萃取小柱和BondElut 5982-5021試劑盒處理后的樣品回收率差別不大;采用Sigmole EN 3008試劑盒處理后的樣品回收率有所提高;當(dāng)增加QuEChERS試劑盒中碳含量,即采用BondElut 5982-5321試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí),回收率較為滿意。石墨化碳主要去除樣品中色素,說(shuō)明色素類(lèi)物質(zhì)對(duì)測(cè)定的干擾較大。實(shí)驗(yàn)最終選擇BondElut 5982-5321試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行凈化。

    2.7 方法學(xué)驗(yàn)證

    2.7.1加標(biāo)回收率和精密度 選取口含煙樣品進(jìn)行低、中、高加標(biāo)水平回收率實(shí)驗(yàn),加標(biāo)量分別為50、100、200 μg/L,每個(gè)水平平行測(cè)定3次。將不加標(biāo)樣品平行測(cè)定6次,計(jì)算平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),結(jié)果列于表2??梢?jiàn),低、中、高加標(biāo)水平條件下的回收率為94.6%~105.6%;4種成分6次平行測(cè)定的RSD為2.14%~3.95%。

    圖3 不同凈化條件對(duì)回收率的影響Fig.3 Effect of different sorbents on the recoveries

    2.7.2線性關(guān)系、定量限和檢出限 用乙腈稀釋1.3節(jié)中的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,分別配制濃度為50、80、100、200、300、500 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(內(nèi)標(biāo)加入量為50 μL)。采用優(yōu)化后的UPC2-MS/MS條件進(jìn)行分析測(cè)定,以待測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別以信噪比S/N=3和S/N=10計(jì)算方法的檢出限(LOD)和定量限(LOQ),其線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限列于表3。

    2.8 實(shí)際樣品的測(cè)定

    選取10種市售口含煙樣品,采用優(yōu)化后的條件進(jìn)行測(cè)試,結(jié)果示于圖4。結(jié)果表明,在多個(gè)樣品中均檢出對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)防腐劑,較常見(jiàn)的是對(duì)羥基苯甲酸甲酯和對(duì)羥基苯甲酸乙酯的混合使用,僅在1個(gè)樣品中同時(shí)檢出4種成分。從定量角度看,所有樣品中單個(gè)成分的含量和多種成分的總含量均小于10 mg/kg,低于我國(guó)對(duì)于食品中此類(lèi)防腐劑的添加限量要求。但是,鑒于歐盟對(duì)此類(lèi)物質(zhì)日益嚴(yán)格的限制,今后對(duì)此類(lèi)物質(zhì)的使用需持謹(jǐn)慎態(tài)度。

    表2 加標(biāo)回收率Table 2 Recoveries of different compounds

    表3 線性范圍、相關(guān)系數(shù)、定量限和檢出限Table 3 Linear ranges, correlation coefficients (R2), limits of quantification (LOQs) and limits of detection (LODs)

    注:a.對(duì)羥基苯甲酸甲酯;b.對(duì)羥基苯甲酸乙酯;c.對(duì)羥基苯甲酸丙酯;d.對(duì)羥基苯甲酸丁酯圖4 實(shí)際樣品的選擇性離子譜圖Fig.4 Selected ion chromatograms of real samples

    3 結(jié)論

    通過(guò)乙腈提取,UPC2 TMHSS C18 SB色譜柱分離,超高效合相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPC2-MS/MS)定性和定量分析對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)防腐劑,實(shí)現(xiàn)了口含煙中該類(lèi)防腐劑的合相色譜-質(zhì)譜分析。該方法綠色、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高,適用于實(shí)際樣品的分析測(cè)定。

    猜你喜歡
    含煙柱溫異丙醇
    本期面孔
    遼河(2022年5期)2022-07-05 02:06:52
    異丙醇生產(chǎn)工藝研究進(jìn)展
    云南化工(2021年7期)2021-12-21 07:27:24
    六氟異丙醇-水溶液中紅外光譜研究
    夏夜懷草海
    氣相色譜法測(cè)定正戊烷含量的方法研究
    廣州化工(2020年20期)2020-11-02 03:02:52
    有記
    牛朝作品
    藝術(shù)家(2017年6期)2017-07-02 06:04:08
    β分子篩的改性及其在甲苯與異丙醇烷基化反應(yīng)中的應(yīng)用
    如何用好異丙醇潤(rùn)版液
    柱溫對(duì)膽固醇鍵合固定相分離黃酮苷的影響及其熱力學(xué)分離機(jī)理研究
    男女啪啪激烈高潮av片| 精品久久久久久久久久久久久| 色吧在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲精品国产av成人精品 | 精品乱码久久久久久99久播| 成年版毛片免费区| 如何舔出高潮| 国产精品女同一区二区软件| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产真实乱freesex| 久久久精品94久久精品| 22中文网久久字幕| 日韩在线高清观看一区二区三区| aaaaa片日本免费| 国产精品爽爽va在线观看网站| av在线观看视频网站免费| 欧美激情久久久久久爽电影| 欧美人与善性xxx| 亚洲久久久久久中文字幕| 给我免费播放毛片高清在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲av不卡在线观看| 国产精品国产高清国产av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99热这里只有是精品50| 无遮挡黄片免费观看| 一级av片app| 亚洲美女黄片视频| 久久精品国产亚洲网站| 丰满的人妻完整版| 波多野结衣高清无吗| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久久国产成人精品二区| 男女之事视频高清在线观看| 永久网站在线| 99久久精品一区二区三区| 内地一区二区视频在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 成人特级av手机在线观看| 99久久精品热视频| 日韩av不卡免费在线播放| 黄色配什么色好看| 亚洲三级黄色毛片| 91精品国产九色| 99久国产av精品国产电影| 一个人免费在线观看电影| АⅤ资源中文在线天堂| 91av网一区二区| 九九在线视频观看精品| 久久久欧美国产精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 99久久无色码亚洲精品果冻| 在线免费观看的www视频| 深夜a级毛片| 日本-黄色视频高清免费观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 十八禁国产超污无遮挡网站| 成年免费大片在线观看| 美女内射精品一级片tv| 中文字幕熟女人妻在线| 无遮挡黄片免费观看| 高清午夜精品一区二区三区 | 亚洲国产色片| 99久久中文字幕三级久久日本| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产午夜精品论理片| av在线老鸭窝| 丝袜喷水一区| 99精品在免费线老司机午夜| 一级黄片播放器| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品av视频在线免费观看| 日韩一本色道免费dvd| 国产毛片a区久久久久| 久久久精品大字幕| 成人二区视频| 69av精品久久久久久| 亚洲精品色激情综合| 色在线成人网| 国产成人精品久久久久久| 又黄又爽又免费观看的视频| 99久久精品一区二区三区| 久久精品国产亚洲av天美| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产精品久久久久久av不卡| 免费电影在线观看免费观看| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲,欧美,日韩| 久久久久精品国产欧美久久久| 一级黄片播放器| 欧美在线一区亚洲| 床上黄色一级片| 国产三级中文精品| 精品福利观看| a级一级毛片免费在线观看| 免费看日本二区| 人妻少妇偷人精品九色| 男女视频在线观看网站免费| 久久综合国产亚洲精品| 床上黄色一级片| 日日撸夜夜添| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产乱人视频| 一级黄色大片毛片| 成人综合一区亚洲| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 在线看三级毛片| 久99久视频精品免费| 亚洲va在线va天堂va国产| 久久久精品94久久精品| 十八禁网站免费在线| 久久久久久久久久黄片| 一进一出好大好爽视频| 美女免费视频网站| 此物有八面人人有两片| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品99久久久久久久久| 成人综合一区亚洲| 久久人妻av系列| 欧美国产日韩亚洲一区| 少妇熟女欧美另类| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 嫩草影院新地址| 亚洲国产欧美人成| 五月玫瑰六月丁香| 婷婷六月久久综合丁香| 国产 一区精品| 久久国产乱子免费精品| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲18禁久久av| 99热网站在线观看| 久久久久久伊人网av| 久久久久久伊人网av| 成人国产麻豆网| 国产不卡一卡二| 国产精品av视频在线免费观看| 日韩欧美三级三区| 国产精品久久久久久精品电影| 在线免费观看的www视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 日韩中字成人| av国产免费在线观看| 久久亚洲精品不卡| 色噜噜av男人的天堂激情| 一区福利在线观看| 久久国产乱子免费精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 看免费成人av毛片| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲人成网站在线播| 国产精品永久免费网站| 天堂网av新在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲av熟女| 美女黄网站色视频| 国产男人的电影天堂91| 在线免费观看的www视频| 亚洲18禁久久av| a级毛片a级免费在线| 中文字幕熟女人妻在线| 精品免费久久久久久久清纯| 一个人免费在线观看电影| 久久6这里有精品| 一区二区三区免费毛片| 亚洲最大成人手机在线| 日本欧美国产在线视频| 亚洲成人久久爱视频| 51国产日韩欧美| 国产69精品久久久久777片| 晚上一个人看的免费电影| 久久精品国产亚洲av天美| 国产在视频线在精品| av在线老鸭窝| 亚洲成av人片在线播放无| av在线亚洲专区| 伦理电影大哥的女人| 91在线观看av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 99久久精品热视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 日韩三级伦理在线观看| 高清日韩中文字幕在线| 久久久久久久午夜电影| 日本a在线网址| 色播亚洲综合网| 亚洲精品久久国产高清桃花| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 最近2019中文字幕mv第一页| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费看日本二区| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 午夜久久久久精精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 大香蕉久久网| 在线天堂最新版资源| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产不卡一卡二| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 免费观看人在逋| 亚洲七黄色美女视频| 毛片女人毛片| 日韩高清综合在线| 岛国在线免费视频观看| 国产精品免费一区二区三区在线| 搞女人的毛片| 99久久精品热视频| 中文字幕熟女人妻在线| 日韩欧美精品v在线| 国产精品伦人一区二区| 午夜爱爱视频在线播放| 夜夜夜夜夜久久久久| 色尼玛亚洲综合影院| av专区在线播放| 亚洲最大成人中文| 看十八女毛片水多多多| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲自拍偷在线| 黑人高潮一二区| 日本爱情动作片www.在线观看 | 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 国产高清有码在线观看视频| 久久久久国内视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产精品久久电影中文字幕| av在线老鸭窝| 日韩精品中文字幕看吧| 国内精品美女久久久久久| 欧美又色又爽又黄视频| 香蕉av资源在线| 淫秽高清视频在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 最新在线观看一区二区三区| 成人无遮挡网站| 在线免费十八禁| 欧美成人免费av一区二区三区| 联通29元200g的流量卡| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日本成人三级电影网站| 亚洲美女视频黄频| 我要看日韩黄色一级片| 久久久久国内视频| 欧美3d第一页| 99热这里只有是精品50| 亚洲中文日韩欧美视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| av中文乱码字幕在线| 香蕉av资源在线| 嫩草影院新地址| 能在线免费观看的黄片| 免费黄网站久久成人精品| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费无遮挡裸体视频| 在线观看av片永久免费下载| 久久精品国产自在天天线| 精品久久国产蜜桃| 六月丁香七月| 99热6这里只有精品| 国产在视频线在精品| 尾随美女入室| 亚洲欧美精品自产自拍| 3wmmmm亚洲av在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 日本爱情动作片www.在线观看 | 欧美日韩国产亚洲二区| 国产老妇女一区| 国产一区二区三区av在线 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费观看人在逋| 国产真实乱freesex| 日本在线视频免费播放| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 99精品在免费线老司机午夜| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩国内少妇激情av| 国产精品一区二区性色av| 美女免费视频网站| 欧美性猛交黑人性爽| 插阴视频在线观看视频| 美女高潮的动态| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲欧美日韩东京热| 成人av一区二区三区在线看| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲无线在线观看| 日本一二三区视频观看| 免费看日本二区| 国产午夜精品论理片| 午夜福利高清视频| 高清日韩中文字幕在线| 一区二区三区四区激情视频 | 午夜老司机福利剧场| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 精品国内亚洲2022精品成人| av天堂中文字幕网| 美女免费视频网站| 深爱激情五月婷婷| 精品人妻熟女av久视频| 成人美女网站在线观看视频| 小说图片视频综合网站| 日本 av在线| 成人午夜高清在线视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 成人精品一区二区免费| 91久久精品电影网| 天堂√8在线中文| 春色校园在线视频观看| 内地一区二区视频在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲欧美日韩高清专用| 最近最新中文字幕大全电影3| 成年版毛片免费区| 国产不卡一卡二| av视频在线观看入口| 国产精品一二三区在线看| 免费av观看视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | www.色视频.com| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产单亲对白刺激| 18+在线观看网站| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产不卡一卡二| 卡戴珊不雅视频在线播放| 色av中文字幕| 日本熟妇午夜| 亚洲成人中文字幕在线播放| 男女之事视频高清在线观看| 久久99热6这里只有精品| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 久久热精品热| 少妇的逼好多水| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产 一区 欧美 日韩| 成人亚洲欧美一区二区av| 日韩制服骚丝袜av| 免费人成视频x8x8入口观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产免费男女视频| 美女免费视频网站| 国产精品女同一区二区软件| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 中文资源天堂在线| 欧美日本亚洲视频在线播放| 丰满乱子伦码专区| 日韩欧美 国产精品| 亚洲精品色激情综合| 禁无遮挡网站| 亚洲av成人精品一区久久| 两个人的视频大全免费| 九色成人免费人妻av| 亚洲最大成人手机在线| 国产高清三级在线| 欧美区成人在线视频| 欧美性猛交黑人性爽| aaaaa片日本免费| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产爱豆传媒在线观看| 美女黄网站色视频| 精品欧美国产一区二区三| 黄色欧美视频在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 能在线免费观看的黄片| 国产av麻豆久久久久久久| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 日本精品一区二区三区蜜桃| 好男人在线观看高清免费视频| 国产精品一区二区免费欧美| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品精品国产色婷婷| 国产单亲对白刺激| 成年版毛片免费区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 熟女电影av网| 男女边吃奶边做爰视频| 色视频www国产| 搞女人的毛片| eeuss影院久久| 欧美成人一区二区免费高清观看| 老女人水多毛片| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 在现免费观看毛片| 青春草视频在线免费观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 18禁在线播放成人免费| 久久草成人影院| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲成人久久性| 亚洲精品国产成人久久av| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美激情久久久久久爽电影| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产片特级美女逼逼视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 校园人妻丝袜中文字幕| 午夜久久久久精精品| 成年女人看的毛片在线观看| 哪里可以看免费的av片| 久久久国产成人免费| 99久久精品一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 成熟少妇高潮喷水视频| 大香蕉久久网| 精品乱码久久久久久99久播| 久久久国产成人免费| 中文字幕av在线有码专区| 成人三级黄色视频| 国产成人a∨麻豆精品| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 听说在线观看完整版免费高清| 一级av片app| 国产精品1区2区在线观看.| 国产男人的电影天堂91| 久久精品国产亚洲网站| 伊人久久精品亚洲午夜| 少妇被粗大猛烈的视频| 禁无遮挡网站| 看黄色毛片网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲欧美清纯卡通| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲欧美日韩高清专用| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 色av中文字幕| 免费在线观看影片大全网站| 校园人妻丝袜中文字幕| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99久久精品国产国产毛片| 联通29元200g的流量卡| 久久精品国产自在天天线| 99久国产av精品国产电影| 国产精品不卡视频一区二区| 国产成人91sexporn| av视频在线观看入口| 成人欧美大片| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 在线a可以看的网站| 亚洲最大成人av| 天堂影院成人在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 女同久久另类99精品国产91| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品一区二区免费欧美| 日本五十路高清| 国产v大片淫在线免费观看| 中文资源天堂在线| 久久99热这里只有精品18| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲av五月六月丁香网| 国产欧美日韩精品亚洲av| 中文字幕免费在线视频6| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲成人av在线免费| 一a级毛片在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩欧美精品v在线| 精品免费久久久久久久清纯| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日本五十路高清| 一本久久中文字幕| 伦精品一区二区三区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 男人狂女人下面高潮的视频| av.在线天堂| av在线播放精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 草草在线视频免费看| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美区成人在线视频| 免费大片18禁| 成人综合一区亚洲| 日韩中字成人| 少妇人妻精品综合一区二区 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 在线观看免费视频日本深夜| 深爱激情五月婷婷| 亚洲在线自拍视频| 色在线成人网| 简卡轻食公司| 在线观看免费视频日本深夜| 日本免费a在线| 中文在线观看免费www的网站| 色在线成人网| 人妻少妇偷人精品九色| 在线观看66精品国产| 免费大片18禁| 日韩大尺度精品在线看网址| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲成人久久爱视频| 免费av不卡在线播放| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 欧美最黄视频在线播放免费| 午夜a级毛片| 色视频www国产| 久久久午夜欧美精品| 亚洲国产精品成人久久小说 | 特级一级黄色大片| 成人特级av手机在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 精品国产三级普通话版| 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 日本一二三区视频观看| 在线观看66精品国产| av视频在线观看入口| 国产精品不卡视频一区二区| 久久中文看片网| 亚洲第一电影网av| 搡老岳熟女国产| 久久久久性生活片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 好男人在线观看高清免费视频| 99视频精品全部免费 在线| 色综合站精品国产| 精品久久久噜噜| 久久久久久久久大av| 九九爱精品视频在线观看| 午夜影院日韩av| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲中文字幕日韩| av视频在线观看入口| 赤兔流量卡办理| 国产不卡一卡二| 国内精品宾馆在线| 人人妻人人看人人澡| www日本黄色视频网| 亚洲av免费高清在线观看| 中文资源天堂在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 麻豆成人午夜福利视频| 成人永久免费在线观看视频| 久久99热这里只有精品18| 一级毛片我不卡| 日韩一区二区视频免费看| 国产男靠女视频免费网站| videossex国产| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 搡老岳熟女国产| 高清毛片免费观看视频网站| 中文字幕av在线有码专区| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 最近在线观看免费完整版| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲成人中文字幕在线播放| 俺也久久电影网| 亚洲无线观看免费| 精品久久久久久久久亚洲| 插阴视频在线观看视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产精品av视频在线免费观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲天堂国产精品一区在线| 色在线成人网| 性插视频无遮挡在线免费观看| 一级av片app| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久久午夜欧美精品| 亚洲精品国产成人久久av| 国模一区二区三区四区视频| 精品欧美国产一区二区三| 联通29元200g的流量卡| 久久久精品94久久精品| 看片在线看免费视频| 国产av不卡久久| 中文字幕久久专区| 五月玫瑰六月丁香| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 成人美女网站在线观看视频| 日韩三级伦理在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 丰满的人妻完整版| 亚洲天堂国产精品一区在线| 免费电影在线观看免费观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲自偷自拍三级| 久久久精品大字幕| АⅤ资源中文在线天堂| 国产av麻豆久久久久久久|