氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS方法檢測蔬菜、水果中37種農(nóng)藥殘留

□ 李 雪 懷化市食品藥品檢驗(yàn)所

近年來隨著人民群眾生活水平的提高，他們對日常對蔬菜、水果的需求量正呈現(xiàn)逐年增長的趨勢。而為了提高各個(gè)季節(jié)中蔬菜、水果的產(chǎn)量，種植戶在蔬菜、水果的生長、發(fā)育以及運(yùn)輸貯存過程中廣泛且頻繁使用各種農(nóng)藥，導(dǎo)致蔬菜、水果表面出現(xiàn)大量的農(nóng)藥殘留，這對我國人民群眾的身體健康造成嚴(yán)重的威脅[1]。本研究就利用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS方法開展了蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的檢測工作，現(xiàn)將結(jié)果和分析報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜--質(zhì)譜聯(lián)用儀Agilent 5975c（SGHK-500）自動進(jìn)樣器 Agilent 7693；Thermo公司生產(chǎn)的高速冷凍離心機(jī)；睿科Fotector plusl AutoEVA60固相萃取儀；梅特勒XSE105DU分析天平；Milli-Q超純水器。

標(biāo)準(zhǔn)液及試劑：按照目前常用的可應(yīng)用于蔬菜、水果的并能夠被氣相色譜法進(jìn)行測定的農(nóng)藥，選擇由美國百靈威科技有限公司以及農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科技監(jiān)測所提供的37種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg/mL）；Sigma公司提供的分析純D-山梨醇、3-乙氧基-1，2-丙二醇。

1.2 儀器工作條件[2]

1.2.1 樣品前處理

取20 mL丙酮加入上述10 g樣品中，并置于50 mL離心管內(nèi)，利用振蕩器進(jìn)行振蕩30 min；再加入萃取鹽包同樣振蕩15 min后再放入高速冷凍離心機(jī)，按照4 ℃，10 000 r/min離心10 min，準(zhǔn)確吸取上層有機(jī)相5 mL置于離心管進(jìn)行真空離心至近干狀態(tài)，再利用丙酮定容至2 mL，搖勻。吸取2 mL，并用5 mL丙酮潤洗樣品瓶，保證安全上樣，置入合適的QuECHERS凈化管中并振蕩1 min后靜置10 min，再置入高速冷凍離心機(jī)，按照4 ℃，10 000 r/min離心30 min，取出后靜置至室溫后，吸取適量上清液置于氣相色譜樣品瓶，待用。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)條件[3]

色譜條件：HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，30 m×0.25 mm，0.25 μm； 進(jìn) 樣方式為不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1 μL，進(jìn)樣口溫度為250 ℃；載氣為純度超過99.999%的氦氣，恒流模式，流速1.0 mL/min。程序升溫：初始溫度設(shè)為70 ℃，維持1 min；再以30 ℃/min的速率升至130 ℃；再以5 ℃/min的速率升至250 ℃，維持5 min。

質(zhì)譜條件：離子源溫度設(shè)為230 ℃，接口溫度280 ℃，四極桿溫度150 ℃。電離模式：電子轟擊離子源（EI）。轟擊能：70 eV。全掃描范圍：m/z 50～450，掃描方式選擇多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。燈絲電流：80 μA。碰撞池壓力：2 mTorr，碰撞氣為純度超過99.999%的氦氣。腔體溫度40 ℃，溶劑延遲3.5 min。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法

取市場銷售的蔬菜、水果樣品500 g，均勻切塊為1 cm3大小后進(jìn)行粉碎并制成勻漿。精確稱取10 g勻漿置于50 mL離心管內(nèi)，加入10 mL乙腈搖晃1 min；再加入4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉以及0.5 g檸檬酸二鈉鹽，繼續(xù)搖晃混勻1 min。置入離心機(jī)按4 000 r/min，離心5m in，取上清液1 mL置于固相萃取凈化離心管內(nèi)，加入適量氨基/石墨化碳后再搖晃1 min至均勻。最好再按13 000 r/min，離心2 min后取上清液，進(jìn)行測定。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定以及定量限

蔬菜、水果農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)按照GB2763-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，食品中農(nóng)藥最大殘留限量，描述方法進(jìn)行相關(guān)測定，結(jié)果37種農(nóng)藥的相應(yīng)含量范圍中其線性相關(guān)系數(shù)均超過0.990；農(nóng)藥定量限為0.000 625～0.01 mg/kg。

2.2 37種農(nóng)藥及其代表性的色譜圖

37種市售農(nóng)藥具體名稱如下：二嗪磷、三唑磷、辛硫磷、丙溴磷、三唑酮、十三嗎啉、滅多威、甲胺磷、啶蟲脒、乙酰甲胺磷、樂果、氧樂果、毒死蜱、噠螨靈、多菌靈、涕滅威砜、涕滅威亞砜、噻蟲嗪、吡蟲啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、涕滅威、阿維菌素、克百威、3-羥基克百威、除蟲脲、滅幼脲 、氟啶脲、伏殺硫磷、嘧菌酯、甲萘威、亞胺硫磷、馬拉硫磷、烯酰嗎啉、氟蟲腈、苯醚甲環(huán)唑、二甲戊靈、以及咪鮮胺。其色譜圖見圖1。

圖1 37種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品MRM色譜圖（0.5 μg/L）

表1 實(shí)際樣品檢測結(jié)果

2.3 加標(biāo)回收率和精密度

選擇0.01、0.05、0.10 mg/kg的37種混合農(nóng)藥添加到空白的蔬菜、水果樣品中進(jìn)行回收率測定，每種濃度重復(fù)測定6次。結(jié)果顯示經(jīng)本研究方法，平均回收率為79.3%～119.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.1%～12.4%。

2.4 實(shí)際樣品檢測結(jié)果

本研究共挑選從本地區(qū)4個(gè)不同農(nóng)貿(mào)市場和水果批發(fā)市場隨機(jī)采集的西紅柿、小白菜、豇豆、芹菜、花椰菜、油菜以及蘋果、桃子、油桃、梨、草莓等130份蔬菜、水果樣品，按照1.2.3的實(shí)驗(yàn)方法對其進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測。結(jié)果顯示130份樣品中有4份為陽性，樣品中農(nóng)藥殘留率為3.08%。對檢測結(jié)果為陽性的樣品利用GB/T19648-2006（水果和蔬菜500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留的測定）的標(biāo)準(zhǔn)程序和方法，根據(jù)GC-MS/MS法進(jìn)行重新檢測，結(jié)果與本研究所用方法檢測結(jié)果一致，且農(nóng)藥殘留量基本相當(dāng)。見表1。

3 討論

農(nóng)藥殘留檢測常用萃取劑為丙酮、乙酸乙酯和乙腈，但丙酮容易將蔬菜、水果樣品中的色素等雜質(zhì)同時(shí)提取，而且丙酮能夠溶于水中，無法將水和有機(jī)溶劑進(jìn)行完全分離；雖然乙酸乙酯和水相溶度較低，但是大部分極性農(nóng)藥無法完全轉(zhuǎn)移至有機(jī)相，導(dǎo)致提取率低。而乙腈能夠通過對酸度調(diào)整以及含有的乙酸鹽作為緩沖液來確保穩(wěn)定性以及對酸堿敏感農(nóng)藥的回收率，因此最適合本研究。

綜上所述，在實(shí)際蔬菜、水果食品安全的檢測工作中，對于農(nóng)藥殘留可選擇高靈敏度、操作便捷、耗時(shí)短且準(zhǔn)確性較高的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS方法。