乳腺癌患者血液中PGRMC1濃度與臨床相關(guān)性

趙 越 阮祥燕，2* 張泉東 王虎生 李 雪 蔡桂舉 谷牧青 Alfred O. Mueck，2

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院內(nèi)分泌科，北京 100026；2.德國(guó)圖賓根大學(xué)婦產(chǎn)醫(yī)院婦女健康部與婦女健康研究中心, 圖賓根 D-72076，德國(guó)；3. 解放軍263醫(yī)院外科，北京 101149)

在全球女性群體中，乳腺癌已經(jīng)成為最常見(jiàn)的浸潤(rùn)性癌癥之一，女性一生中罹患乳腺癌的概率為1/8。2015年中國(guó)腫瘤新發(fā)病例數(shù)為429.2萬(wàn)，其中女性乳腺癌發(fā)病人數(shù)為26.86萬(wàn)，占到女性新發(fā)腫瘤的15%，其中45～59歲的發(fā)病率為23%[1]。這個(gè)年齡階段正是女性的圍絕經(jīng)或絕經(jīng)階段。激素治療是目前治療絕經(jīng)相關(guān)癥狀最有效的方法，它對(duì)維持絕經(jīng)婦女身體健康、提高生活質(zhì)量具有其他任何單一藥物不能取代的作用。但是目前有研究[2]認(rèn)為，激素治療會(huì)使乳腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加。婦女經(jīng)過(guò)5年以上的雌/孕激素聯(lián)合治療，乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)將增加(HR=1.24,95%CI:1.01～1.54)[3]。此外，也有大部分的臨床研究[2-5]顯示，激素治療超過(guò)5年，乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加。

有研究[3]發(fā)現(xiàn)，健康女性乳腺內(nèi)存在惡性細(xì)胞的概率是40%，有一部分女性即使在內(nèi)源性雌激素、孕激素的刺激下，乳腺惡性細(xì)胞也可能會(huì)發(fā)生快速增生而發(fā)展為臨床乳腺癌。如能早期檢測(cè)雌激素孕、激素、相關(guān)乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)，篩選出乳腺癌高?；颊卟⒉扇∠鄳?yīng)措施，對(duì)減少激素治療的乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)具有重要指導(dǎo)意義，但是直到現(xiàn)在，臨床上關(guān)于乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)血清學(xué)標(biāo)志物均缺乏一定的敏感度、特異度。在最近十幾年，發(fā)現(xiàn)了一些新的孕激素受體膜組分，其中孕激素受體膜組分1(progesterone receptor membrane components 1， PGRMC1)，雌激素、孕激素聯(lián)合治療可以明顯促進(jìn)PGRMC1表達(dá)陽(yáng)性的乳腺癌細(xì)胞的增生，體外研究[4-6]顯示，體外雌激素、孕激素對(duì)MCF7/PGRMC1與未轉(zhuǎn)染PGRMC1的乳腺癌細(xì)胞(MCF7)增生作用有明顯不同，雌激素和某些孕激素明顯增加了轉(zhuǎn)染了PGRMC1的乳腺癌細(xì)胞的增生，并可能參與了腫瘤發(fā)生。近幾年陸續(xù)有關(guān)于PGRMC1在實(shí)體瘤中表達(dá)情況的報(bào)道[7-8]，但研究結(jié)果不一致，同時(shí)這些臨床數(shù)據(jù)比較零散，研究樣本量小，絕大部分研究集中于評(píng)估乳腺癌組織中特定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)而無(wú)法對(duì)患者血液中PGRMC1的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)估，而后者對(duì)于激素治療前的常規(guī)風(fēng)險(xiǎn)篩查十分必要。本課題組[4]在前期的預(yù)實(shí)驗(yàn)研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者血液中PGRMC1表達(dá)與乳腺正常參照人群血液中PGRMC1表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，發(fā)現(xiàn)PGRMC1的表達(dá)與乳腺癌發(fā)生相關(guān)，本研究將進(jìn)一步通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測(cè)血液中PGRMC1濃度，這對(duì)預(yù)測(cè)MHT乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)，為激素治療的安全臨床應(yīng)用具有重要意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 基本情況與分組

按照總體率估計(jì)公式[5]，以前期有關(guān)研究為參考值[6]，以容許誤差為10%，α=0.05，單側(cè) μα=1.64，來(lái)估計(jì)要測(cè)試的樣本，選取2016年9月至2018年1月期間，因乳腺疾病就診于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院乳腺外科、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院乳腺外科以及解放軍263醫(yī)院乳腺外科患者140例，檢測(cè)其血清及全血標(biāo)本。本研究經(jīng)首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理審批號(hào)：IEC-C-18-V04-FJ1)，所有血液來(lái)源者均已簽署知情同意書(shū)。(1)乳腺癌組：90例，均為女性，年齡23～70歲，年齡中位數(shù)為49歲，均經(jīng)術(shù)后臨床病理確診。依據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)腫瘤組織學(xué)分類(2003版)[9]為乳腺浸潤(rùn)性癌90例。根據(jù)美國(guó)癌癥分析聯(lián)合委員會(huì)(American Joint Committee on Cancer， AJCC)[10]臨床分期，Ⅰ期24例，Ⅱ期26例，Ⅲ期20例，Ⅳ期20例。(2)乳腺良性疾病組：50例，均為女性，年齡24～64歲，年齡中位數(shù)42歲，均經(jīng)乳腺影像學(xué)或乳腺穿刺活檢確診。(3)正常對(duì)照組：采用數(shù)字表法隨機(jī)抽取同期門診健康體檢者30例，均為女性，年齡25～68歲，年齡中位數(shù)為40歲。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

1)乳腺癌：①病理診斷乳腺癌(無(wú)論有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)；②無(wú)其他惡性腫瘤治療史；③所有患者均未經(jīng)過(guò)任何術(shù)前針對(duì)性治療；④足夠可利用的組織標(biāo)本。

2)乳腺良性疾病：①乳腺纖維腺瘤；②乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤；③乳腺囊性增生病。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

①男性乳腺癌；②術(shù)前接受任何形式新輔助化學(xué)藥物治療；③靶向治療等的患者；④近3個(gè)月內(nèi)接受激素替代治療者。

1.2 標(biāo)本采集

患者入院待檢清晨空腹靜脈血10 mL，其中5 mL離心分離血清后置于-80 ℃超低溫冰箱保存，待測(cè)血清CA153、CEA、CA125；另外5 mL至于EDTA-K3抗凝管中，50 μL/管分裝保存于-80 ℃超低溫冰箱，待測(cè)全血PGRMC1。

1.3 測(cè)定血清CA153、CEA、CA125

化學(xué)發(fā)光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay， CLIA)，采用雙抗體夾心法，分析過(guò)程全自動(dòng)化，儀器自動(dòng)吸樣品50 μL，液相試劑50 μL，固相試劑250 μL，37 ℃溫浴7.5 min，沖洗后，加入反應(yīng)試劑(堿性過(guò)氧化氫)激發(fā)反應(yīng)，其發(fā)光強(qiáng)度與樣品濃度成正比。按藥盒說(shuō)明，以CA125>35 U/mL，CA153>25 U/mL，CEA>5 μg/L為陽(yáng)性值。

1.4 ELISA法測(cè)定全血PGRMC1

取新鮮抗凝血，400～500 g離心5 min，離心棄上清。取900 μL(分2管各450 μL)每管加入9倍體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解時(shí)間8～10 min，400～500 g 4 ℃離心5 min，棄紅色上清。加入 3～4 mL PBS洗滌1次，400～500 g離心2～3 min，棄上清。1 mL RIPA 加入10 μL PMSF，使 PMSF的最終濃度為1 mmol/L，混勻備用。將裂解后的樣品10 000～14 000 g 離心3～5 min，取上清。加液器在微孔板每孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本100 μL，輕輕晃動(dòng)混勻，覆上板貼，37 ℃溫育2 h。棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃恒育1 h。棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。每孔加辣根過(guò)氧物酶標(biāo)記親和素工作液100 μL，覆上新的板貼， 37 ℃恒育1 h。棄去孔內(nèi)液體，甩干，吸去或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液按200 μL/孔注入孔內(nèi)，浸泡2 min；洗板5次，每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。依序每孔加底物溶液90 μL。當(dāng)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品前3～4孔有明顯梯度藍(lán)色，后3～4孔顯色不明顯時(shí)，即可加入終止液終止反應(yīng)；37 ℃避光顯色15～30 min。依序每孔加終止溶液50 μL，終止反應(yīng)。在反應(yīng)終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)依次測(cè)量各孔的吸光度(A值)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

PGRMC1檢測(cè)將標(biāo)準(zhǔn)品及樣本值減去S0孔數(shù)值后繪制曲線，設(shè)置復(fù)孔則取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，A值為橫坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本A值，用標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與A值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣本的A值代入方程式，計(jì)算出樣本濃度。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 PGRMC1濃度在乳腺癌、乳腺良性疾病及正常對(duì)照組間比較

血PGRMC1濃度在各組間分布如圖1所示。對(duì)照組中，PGRMC1濃度為(39.36±25.10)ng/L；乳腺良性疾病組中，PGRMC1濃度為(42.77±29.81)ng/L；乳腺癌組中，PGRMC1濃度為(74.06±28.76)ng/L，其中Ⅰ期(56.14±15.65)ng/L，Ⅱ期(60.89±16.86)ng/L，Ⅲ期(95.54±16.79)ng/L，Ⅳ期(113.78±41.20)ng/L，各組間PGRMC1濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常對(duì)照組與乳腺良性疾病組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；乳腺癌早期(Ⅰ期)與乳腺良性疾病組及正常組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。乳腺癌Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者血液PGRMC1濃度隨期別的增加而逐漸升高，顯著高于乳腺良性疾病組及正常對(duì)照組(P<0.05)(表1)。

圖1 PGRMC1在組間的分布Fig.1 Blood PGRMC1 level among groups

PGRMC1: progesterone receptor membrane components 1；0: control group;1: benign breast disease group;2: stage Ⅰ of breast cancer；3：stage Ⅱ of breast cancer；4：stage Ⅲ of breast cancer；5：stage Ⅳ of breast cancer.

表1 乳腺良惡性腫瘤血液PGRMC1濃度比較Tab.1 Blood PGRMC1 level in benign and malignant breast tumors

*P<0.05vsbreast benign disease group and control group；PGRMC1: progesterone receptor membrane components 1.

2.2 乳腺良、惡性腫瘤血液中腫瘤標(biāo)志物水平比較

血清腫瘤標(biāo)志物(CA125、CA153、CEA)陽(yáng)性率在3組間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.001)。兩兩比較結(jié)果顯示，乳腺癌早期患者(Ⅰ期、Ⅱ期)與乳腺良性疾病組及正常對(duì)照組相比，CA125、CA153和CEA陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。乳腺癌晚期(Ⅲ、Ⅳ期)患者3種血清腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性率均顯著升高，與對(duì)照組和乳腺良性疾病組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(CA125:χ2=12.26，P=0.000; CA153:χ2=28.19，P=0.000; CEA:χ2=6.52，P=0.011；CA125:χ2=16.46，P=0.000; CA153:χ2=42.19，P=0.000; CEA:χ2=14.29，P=0.000)(表2)。

2.3 PGRMC1對(duì)乳腺癌的診斷及早期預(yù)測(cè)價(jià)值

以組織病理學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，鑒于CA125、CA153和CEA血清含量在早期(Ⅰ期和Ⅱ期)乳腺癌中無(wú)顯著性變化，故將乳腺癌患者分為早期(Ⅰ期和Ⅱ期)50例和晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)40例，分別以正常組作為對(duì)照繪制PGRMC1、CA125、CA153、CEA的ROC曲線進(jìn)行診斷試驗(yàn)診斷效果的比較(圖2、3)。

表2 不同組別CA125、CA153、CEA表達(dá)比較Tab.2 Serum CA125， CA153 and CEA level in different groups n(%)

PGRMC1:progesterone receptor membrane components 1;CA125: carbohydrate antigen 125；CA153: carbohydrate antigen 153；CEA: carcino-embryonic antigen;*P<0.05vsbreast benign disease group and control group.

圖2 晚期乳腺癌中各指標(biāo)的ROC曲線Fig.2 CA125，CA153，CEA， PGRMC1 diagnosisadvanced breast cancer by ROC curve analysis

ROC:receiver operating characteristic1;CA125: carbohydrate antigen 125;CA153: carbohydrate antigen 153;CEA: carcino-embryonic antigen；PGRMC1:progesterone receptor membrane components 1.

圖3 早期乳腺癌中各指標(biāo)的ROC曲線Fig.3 CA125，CA153，CEA， PGRMC1 diagnosisearly breast cancer by ROC curve analysis

ROC:receiver operating characteristic;CA125: carbohydrate antigen 125;CA153: carbohydrate antigen 153;CEA: carcino-embryonic antigen；PGRMC1:progesterone receptor membrane components 1.

在乳腺癌晚期診斷中，PGRMC1的AUC為82.7%(P<0.05，95%CI： 0.731～0.923)，CA125的AUC為78.3%(P<0.05，95%CI： 0.677 ～ 0.890)，CA153的AUC為86.8%(P<0.05，95%CI： 0.853 ～ 0.918)，CEA的AUC為77.3%(P<0.05，95%CI： 0.853 ～ 0.918)，在診斷晚期乳腺癌中PGRMC1及3種腫瘤標(biāo)志物均有一定的參考意義。其中CEA的AUC最大，敏感度為86.8%，特異度為75.0%，對(duì)晚期乳腺癌的診斷最有價(jià)值，其次為PGRMC1，利用PGRMC1診斷晚期乳腺癌患者的準(zhǔn)確性較高(表3)。

在早期乳腺癌的ROC曲線分析中，CA125、CA153和CEA的AUC均小于60%，且對(duì)早期乳腺癌的診斷沒(méi)有參考意義(P>0.05)。而PGRMC1的AUC為0.688，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，95%CI：0.853～0.918)，敏感度為94.0%，特異度為50.0%，利用血PGRMC1檢測(cè)有助于提高對(duì)乳腺癌的診斷性能和早期檢出率(表4)。

3 討論

乳腺癌是危及婦女健康乃至生命的首要原因，2014年Lancet最新數(shù)據(jù)顯示中國(guó)每年乳腺癌新發(fā)數(shù)量和死亡數(shù)量分別占全世界的12.2%和9.6%[1]。隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展、生活方式的改變及人口老齡化增加，在北京、上海等大城市乳腺癌發(fā)病率已位居女性所有惡性腫瘤的首位。我國(guó)診斷為乳腺癌的高發(fā)年齡為45～55歲，其中62.9%的女性被診斷為乳腺癌時(shí)還未絕經(jīng)[11]。由于乳腺癌初期癥狀不明顯，多數(shù)患者就診時(shí)病情已發(fā)展到中晚期，因此提高乳腺癌早期診斷水平，探索良好的早期診斷指標(biāo)具有重要意義。腫瘤標(biāo)志物在協(xié)助臨床診斷腫瘤、分析病情、指導(dǎo)治療、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移、判斷預(yù)后方面有著重要的意義[12]。血清CA153是目前公認(rèn)的診斷乳腺癌較為特異的腫瘤標(biāo)志物，最早發(fā)現(xiàn)于乳腺癌上皮細(xì)胞，是乳腺細(xì)胞上皮表面糖蛋白的變異體，細(xì)胞癌變時(shí)，由于糖基化轉(zhuǎn)移酶被激活，引起細(xì)胞表面糖類的變化，由癌細(xì)胞向血循環(huán)中釋放。血清CA153常在乳腺癌中過(guò)度表達(dá)，是監(jiān)測(cè)浸潤(rùn)性或轉(zhuǎn)移性乳腺癌的重要標(biāo)志物。但CA153對(duì)診斷早期乳腺癌的敏感度和特異度欠佳，在乳腺癌Ⅰ期、Ⅱ期診斷的敏感度僅有10%～15%、20%～25%，在部分乳腺癌患者中呈陰性表達(dá)，并且其濃度與乳腺癌的臨床分期、腫瘤直徑、腋窩淋巴結(jié)狀況、雌激素受體密切相關(guān)[13-14]。進(jìn)行性疾病如乳腺癌如果得到早期診斷后，那么啟動(dòng)治療對(duì)患者的生存或生活質(zhì)量有積極影響。此外，公認(rèn)或臨床確認(rèn)的有重要臨床意義的腫瘤標(biāo)志物目前并無(wú)增加。而已證實(shí)至少25%的增加，才被解釋為有臨床重要意義。因此CA153在乳腺癌診斷中存在一定的局限性。

表3 PGRMC1、CA125、CA153、CEA表達(dá)濃度對(duì)晚期乳腺癌診斷效果評(píng)價(jià)Tab.3 Evaluation of PGRMC1， CA125， CA153 and CEA on diagnosis of advanced breast cancer

PGRMC1:progesterone receptor membrane components 1;CA125: carbohydrate antigen 125;CA153: carbohydrate antigen 153;CEA: carcino-embryonic antigen;AUC: area under the ROC curve;ROC:receiver operating characteristic.

表4 PGRMC1、CA125、CA153、CEA表達(dá)對(duì)早期乳腺癌診斷效果評(píng)價(jià)Tab.4 Evaluation of PGRMC1， CA125， CA153 and CEA on diagnosis of early breast

PGRMC1:progesterone receptor membrane components 1;CA125: carbohydrate antigen 125;CA153: carbohydrate antigen 153;CEA: carcino-embryonic antigen;AUC: area under the ROC curve;ROC:receiver operating characteristic.

CA125是一種細(xì)胞表面的糖蛋白，最初由乳頭狀漿液囊性卵巢癌中提出。健康成人CA125的上限為35 U/mL，在乳腺癌中有20%血清CA125超過(guò)35 U/mL。CA125是上皮性卵巢癌的主要標(biāo)志物，在非卵巢癌的一些惡性腫瘤中，如肺癌、肝癌、和乳腺癌等，CA125也會(huì)出現(xiàn)不同程度的升高[15]。但CA125在乳腺癌的診斷價(jià)值方面也稍顯不足，在乳腺癌診斷中的敏感度僅為24.6%～38%[16]。因此，研究[17]表明CA125不能單獨(dú)用于乳腺癌的早期診斷和病程反應(yīng)。

CEA是目前臨床上應(yīng)用最廣泛的腫瘤標(biāo)志物之一，但其主要存在于胎兒組織和胃腸道腫瘤中，同時(shí)在肺腫瘤疾病中如肝炎、肝硬化中也存在[17]。CEA與CA153一樣，作為一個(gè)乳腺癌標(biāo)志物，CEA的敏感性通常低于CA153，由于CEA的非特異性，常與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用。綜上，現(xiàn)在的血液學(xué)生物標(biāo)志物在乳腺癌的早期診斷中并無(wú)價(jià)值，因此，迫切需要一種新型、具有較高敏感度和特異度的血液生物學(xué)標(biāo)志物。

在最近幾十年，人們發(fā)現(xiàn)了一種新的乳腺癌細(xì)胞膜受體-PGRMC1，此受體為跨膜受體，具有跨膜域和胞質(zhì)域。前期體外實(shí)驗(yàn)、初步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究[18-20]均說(shuō)明了PGRMC1與激素誘導(dǎo)的乳腺癌發(fā)生、發(fā)展有重要的相關(guān)性，如果能在應(yīng)用激素治療前對(duì)女性進(jìn)行PGRMC1的檢測(cè)，對(duì)表達(dá)陽(yáng)性的女性采取措施，則可以減少激素治療中乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)。但目前的測(cè)定方法僅限于組織標(biāo)本，這種檢測(cè)方法是有創(chuàng)的，不利于大規(guī)模篩查。

在本研究中，取代蛋白印跡半定量方法，采用ELISA檢測(cè)乳腺癌、乳腺良性疾病患者及正常人群全血PGRMC1濃度，并比較了乳腺癌患者組與乳腺良性疾病組和正常組PGRMC1血液陽(yáng)性檢出率、陽(yáng)性水平的差異情況，發(fā)現(xiàn)不同組別中PGRMC1均有不同程度的表達(dá)，乳腺癌組與對(duì)照組和良性疾病組相比，PGRMC1濃度明顯升高，且在不同期別中表達(dá)水平明顯不同。而臨床常用的腫瘤標(biāo)志物CA125、CA153、CEA雖在Ⅲ、Ⅳ期表達(dá)顯著升高，但在I、Ⅱ期乳腺癌中雖然表達(dá)水平有所升高，但與正常組和乳腺良性疾病組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示CA125、CA153和CEA在乳腺癌早期診斷中意義不大，這與以往報(bào)道[21-23]基本一致。

本研究應(yīng)用ROC曲線評(píng)價(jià)CA153、CEA、CA125診斷晚期乳腺癌(Ⅲ、Ⅳ期)ROC曲線下面積均>70%，表明其作為晚期乳腺癌臨床診斷標(biāo)志物具有一定的參考價(jià)值，而早期乳腺癌中3種腫瘤標(biāo)志ROC曲線下面積在幾乎在0.5以下，敏感度、特異度均較低，對(duì)早期乳腺癌診斷幾乎沒(méi)有意義。而PGRMC1在早晚期乳腺癌中ROC曲線下面積分別為68.8%和82.7%，這與乳腺癌組織中PGRMC1表達(dá)情況具有較高的一致性[5]。當(dāng)截取值為39.49 ng/L和75.35 ng/L時(shí)，PGRMC1預(yù)測(cè)乳腺癌的敏感度及特異度最高，有望成為激素治療前常規(guī)篩查的乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)標(biāo)志物。

本研究的局限性在于：①本研究只是對(duì)PGRMC1及腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在乳腺癌診斷中的臨床價(jià)值進(jìn)行評(píng)價(jià)，而未進(jìn)行乳腺癌術(shù)后隨訪，從而未能將PGRMC1對(duì)乳腺癌術(shù)后監(jiān)測(cè)中復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移中的評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行分析，在接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)中，本課題組將對(duì)乳腺癌患者進(jìn)行術(shù)后隨訪12～36個(gè)月，并定期對(duì)乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者監(jiān)測(cè)PGRMC1及相關(guān)腫瘤標(biāo)志物，ROC曲線下面積評(píng)價(jià)PGRMC1在監(jiān)測(cè)乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用價(jià)值，為PGRMC1成為乳腺癌血液生物學(xué)標(biāo)志物奠定基礎(chǔ)；②本研究雖然找到了PGRMC1的最佳診斷分界點(diǎn)，但樣本量較少，如果要在臨床上應(yīng)用，需要通過(guò)龐大的樣本量來(lái)確定。

綜上所述，PGRMC1在不同期別尤其是早期乳腺癌患者中的診斷價(jià)值優(yōu)于臨床常規(guī)腫瘤標(biāo)志物CA125、CA153和CEA，可以盡早篩選出激素用藥前存在乳腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的患者并及時(shí)做出評(píng)估和干預(yù)，同時(shí)對(duì)提高乳腺癌的早期診斷、早期治療具有重要的參考價(jià)值。如果能將PGRMC1作為早期、快速檢測(cè)的指標(biāo)，可以在未來(lái)建立一套關(guān)于PGRMC1對(duì)乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)早期評(píng)估的預(yù)測(cè)系統(tǒng)，這將為指導(dǎo)臨床激素治療的安全應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。