血清補(bǔ)體C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白12與非酒精性脂肪性肝病相關(guān)性研究

沈德峰，張　磊，倪小英，傅聿明，龐東岳，蘇長春，劉　婧

非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD） 是最常見的慢性肝臟疾病之一［1］，NAFLD涵蓋了不同階段的肝臟疾病，從單純性脂肪變性、脂肪性肝炎到纖維化和肝硬化［2］。NAFLD被廣泛認(rèn)為是代謝綜合征的肝臟表現(xiàn)［3］。胰島素抵抗、炎癥、肝臟脂肪代謝紊亂是NAFLD重要的發(fā)病機(jī)制，而2型糖尿病和肥胖是其重要的危險(xiǎn)因素［4］。

研究表明，眾多脂肪因子與胰島素抵抗相關(guān)性疾病關(guān)系密切，并參與了NAFLD的發(fā)生和發(fā)展［5］。脂肪因子補(bǔ)體C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白12（serum complement C1q/tumor necrosis factor related protein 12，CTRP12）屬于CTRPs家族，具有胰島素增敏和抗炎作用，并在肥胖和糖尿病小鼠血清和脂肪組織中水平下降［6］。此外，也有研究發(fā)現(xiàn)血清CTRP12在糖尿病患者中較對(duì)照組濃度下降［7］。該研究旨在測定NAFLD患者血清CTRP12水平，并探討其與NAFLD患者臨床代謝參數(shù)及胰島素抵抗的關(guān)系。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2016年10月—2016年11月在興化市人民醫(yī)院體檢中心通過彩色超聲篩選出臨床資料完整的NAFLD患者86例，其中男56例，女30例；年齡34～69歲；均符合2002年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)《非酒精性脂肪性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)》。另選同期該醫(yī)院健康體檢者86例為對(duì)照組，男54例，女32例；年齡33～71歲。NAFLD入選者乙醇攝入男性每周<140 g，女性每周<70 g，并排除自身免疫性肝病、病毒性肝炎、藥物及毒物引起的肝病。所有入選者均排除糖尿病、嚴(yán)重肝腎疾病、心力衰竭、惡性腫瘤、庫欣綜合征、急性感染等，無吸煙史。該研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有觀察對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2研究方法

1.2.1體質(zhì)參數(shù)的測定所有受試者均穿單衣單褲，脫鞋襪，測量腰圍（WC）、臀圍（HC），并計(jì)算腰臀比（WHR），WHR=WC/HC。測量身高體質(zhì)量，并計(jì)算體質(zhì)量指數(shù) BMI。 BMI=體質(zhì)量/身高2（kg/m2）；由體檢中心護(hù)士測量3次血壓取平均值，受試者測血壓前靜坐至少15 min。

1.2.2生化指標(biāo)測定空腹至少10 h后，所有研究對(duì)象采集晨起靜脈血15 ml，3000 r/min離心10 min后分離血清，部分存于-80℃冰箱待測定CTRP12（ELISA，Aviscera，Santa，USA）。 其余血清用于總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、空腹血糖（FBG）、血尿酸（UA）、空腹胰島素 （FIns）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的測定。FIns采用化學(xué)發(fā)光法測定 （AIA-2000ST，TOSOH company，Japan）。

1.2.3穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估法測定胰島素抵抗指數(shù)（HOMAIR）HOMA-IR=FIns（mIU/L）×FBG（mmol/L）/22.5。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，兩組連續(xù)變量比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。CTRP12與其他變量分別進(jìn)行Spearman相關(guān)、多元線性逐步回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1臨床代謝指標(biāo)及血清CTRP12水平比較兩組一般臨床資料及血清CTRP12水平比較見表1。兩組間年齡、性別、血壓、TC、LDL-C無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，WC、BMI、WHR、HDL-C、UA、HOMA-IR、TC、FBG、CTRP12 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01 或 P＜0.05）。

2.2IMT與臨床指標(biāo)的相關(guān)分析在NAFLD組中 Spearman相關(guān)分析顯示，CTRP12與 WC （r=0.312，P＜0.01）、WHR（r=0.361，P＜0.01）、BMI （r=0.357，P＜0.01）、FBG （r=0.342，P＜0.01）、HOMA-IR（r=0.265，P＜0.01）、TG（r=0.242，P＜0.01）呈正相關(guān)，與其他指標(biāo)相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。

2.3多元線性逐步回歸分析為明確CTRP12的獨(dú)立相關(guān)因素，進(jìn)一步以CTRP12作為因變量，以年齡、性別、血壓、UA、FBG、血脂譜、HOMA-IR、BMI、WC、WHR等作為自變量，結(jié)果發(fā)現(xiàn) FBG、BMI、WC是NAFLD患者血清CTRP12的獨(dú)立影響因子（表 3）。

3　討論

越來越多的證據(jù)表明，脂肪組織分泌的脂肪因子參與了能量代謝、炎癥調(diào)節(jié)等病理生理過程。脂肪因子分泌調(diào)節(jié)的紊亂和肥胖相關(guān)性疾病關(guān)系極為密切，瘦素、脂聯(lián)素、抵抗素等脂肪因子在糖尿病、代謝綜合征、NAFLD等代謝性疾病中的作用已得到廣泛認(rèn)可［5］。CTRPs家族成員 CTRP1 和CTRP13已被證實(shí)參與了NAFLD的病理過程，血清CTRP1有可能成為 NAFLD 新的預(yù)測手段［8，9］。

表 1　兩組一般資料的比較

表 1　兩組一般資料的比較（續(xù)）

表 2　CTRP12與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析

表 3　CTRP12的獨(dú)立影響因素

NAFLD病因復(fù)雜，研究較多的有“二次打擊”學(xué)說、肥胖基因的多態(tài)性、炎癥機(jī)制、胃腸微生物群體變化等［4］。在“二次打擊”學(xué)說中，胰島素抵抗所致的肝臟脂質(zhì)代謝紊亂是NAFLD發(fā)病的始動(dòng)因素。胰島素抵抗時(shí)胰島素對(duì)脂肪代謝的調(diào)節(jié)作用減弱，導(dǎo)致脂肪的脂解作用增強(qiáng)，釋放游離脂肪酸（FFA）增多，致使循環(huán)中FFA增加，增多的FFA一方面通過血糖、血脂循環(huán)干擾肌肉組織對(duì)胰島素的敏感性，另一方面通過其在肝臟的β氧化途徑刺激糖異生，誘導(dǎo)肝糖輸出，并降低肝對(duì)胰島素的滅活能力，加重胰島素抵抗，形成惡性循環(huán)［10］。該研究中NAFLD組肥胖指標(biāo)、糖脂參數(shù)、HOMA-IR明顯高于對(duì)照組，與NAFLD的臨床表現(xiàn)相吻合。

CTRP12作為CTRP家族中的一員，和其他成員類似，擁有Clq/腫瘤壞死因子樣球形結(jié)構(gòu)域，其氨基酸序列與脂聯(lián)素同源性為20%［6］。研究表明，CTRP12能夠抑制肝糖異生，促進(jìn)脂肪細(xì)胞糖攝取，改善胰島素抵抗。Enomoto等［6］發(fā)現(xiàn) CTRP12能在胰島素濃度不變的前提下增加肥胖小鼠的糖耐量，改善其胰島素敏感性。該研究還發(fā)現(xiàn)肥胖小鼠經(jīng)CTRP12干預(yù)后，其體重下降，脂肪細(xì)胞體積較對(duì)照組明顯減小。進(jìn)一步研究表明，CTRP12主要是通過激活PI3K-Akt信號(hào)通路，抑制肝糖異生，促進(jìn)脂肪細(xì)胞對(duì)葡萄糖攝取。該研究首次發(fā)現(xiàn)，NAFLD組血清CTRP12濃度明顯高于對(duì)照組，且與血糖、TG、HOMA-IR、肥胖指標(biāo)有顯著相關(guān)性。多元線性回歸分析提示血糖、WC、BMI是CTRP的獨(dú)立影響因素。由此可見，CTRP12可能通過改善糖脂代謝及胰島素敏感性，參與NAFLD的病理生理過程。類似于瘦素和脂聯(lián)素抵抗，筆者推測CTRP12濃度升高可能是胰島素抵抗發(fā)生時(shí)的代償作用。

作為一項(xiàng)觀察性實(shí)驗(yàn)，筆者未能觀察CTRP12在NAFLD不同病理階段的變化，并不能明確血清CTRP12和NAFLD發(fā)生的因果關(guān)系，研究結(jié)果需在前瞻性隊(duì)列研究及基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)中證實(shí)。

綜上所述，脂肪因子CTRP12血清濃度在NAFLD患者中顯著升高，可能在NAFLD發(fā)病進(jìn)程中發(fā)揮作用。但具體機(jī)制亟待更加深入的研究。