氟丙菊酯原藥對大鼠亞慢性毒性作用的研究＊

李本長，謝興華，朱若凱，楊慎華

(江西省職業(yè)病防治研究院毒理/實驗動物中心，南昌 330006)

氟丙菊酯（Acrinathrin）屬于高效、低毒、廣譜、新型的擬除蟲菊酯類殺螨、殺蟲劑。對多種食植性害螨具有良好的活性，并對刺吸口器害蟲和鱗翅目害蟲，如木虱、潛葉蛾、薊馬、蚜蟲等也具有良好的活性。其具有用量少、高效、低毒等優(yōu)點，常用于棉花、果樹、大豆、玉米、蔬菜、茶葉、葡萄、柑橘、煙草等作物，在國內(nèi)外受到廣泛的應用[1，2]。為了明確氟丙菊酯的亞慢性毒性并確定其最大無作用劑量，我們依據(jù)GB 15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》對96%氟丙菊酯原藥進行了大鼠亞慢性經(jīng)口毒性試驗，現(xiàn)將實驗情況分析討論如下，以供生產(chǎn)單位、使用者、同行及農(nóng)業(yè)衛(wèi)生監(jiān)督管理部門參考。

1　材料與方法

1.1實驗動物、試劑設備 SD大鼠（SPF級）80只，90-120g，雌性、雄性大鼠各半，來源為斯萊克景達實驗動物有限公司（湖南），許可證號：SCXK（湘）2011-0003；實驗在江西省職業(yè)病防治研究院動物房完成，許可證號：SYXK(贛)2013-0002。動物飼料購自科奧協(xié)力飼料股份有限公司（北京），許可證號：SCXK（京）2009-0012。氟丙菊酯原藥，主要成分為96%氟丙菊酯，性狀為白色粉末，由國內(nèi)化工股份有限公司提供；檢測設備包括深圳邁瑞B(yǎng)C-2800vet全自動血液細胞分析儀、日本TOSHIBA TBA-40FR全自動生化分析儀、德國Bayer公司Clinitek STATUS拜施達尿分析儀。

1.2方法 實驗動物適應性飼養(yǎng)5d后，依據(jù)氟丙菊酯原藥雌性大鼠急性經(jīng)口LD50（1470mg/kg）的1/3200、1/400、1/50 將雌性大鼠隨機分成低、中、高3個實驗組，設立正常對照組，每組10只。依據(jù)氟丙菊酯原藥雄性大鼠急性經(jīng)口LD50（3590mg/kg）的1/7360、1/920、1/115將雄性大鼠隨機分成低、中、高3個實驗組，設立正常對照組，每組10只。將受試物混入飼料中連續(xù)喂飼90d，動物自由飲水進食，低、中、高劑量組雌性大鼠染毒劑量分別為0.45mg/kg·bw、3.62mg/kg·bw、29mg/kg·bw，低、中、高劑量組雄性大鼠染毒劑量分別為0.49mg/kg·bw、3.91mg/kg·bw、31.25mg/kg·bw。

1.3指標檢測

1.3.1常規(guī)觀察 每天定時觀察和記錄實驗動物的各種狀態(tài)及異常表現(xiàn)。每周定期測量一次體重，依據(jù)每周各劑量組體重結果來配制下一周喂飼飼料。動物常規(guī)染毒結束后每組動物稱取空腹體重，計算各劑量組實驗動物臟器系數(shù)。

1.3.2尿常規(guī)檢測 90d染毒結束，隔夜禁食后，從股動脈處取血，檢測指標分別為亞硝酸鹽（NIT）、pH 值、尿比重（SG）、尿糖（GLU）、尿隱血（BLD）、尿膽紅素（BIL）、尿蛋白（PRO）、白細胞（WBC）、尿膽元（URO）和酮體（KET）。

1.3.3血清生化檢測 90d染毒結束后，隔夜禁食后，從股動脈處取血 5ml，離心 10min（3000r/min）分離血清，檢測指標分別為天門冬氨酸氨基轉移酶活性（AST）、血糖含量（GLU）、丙氨酸氨基轉移酶活性（ALT）、堿性磷酸酶活性（ALP）、白蛋白含量（ALB）、總蛋白含量（TP）、總膽紅素含量（TBIL）、尿素氮含量（BUN）、肌酐含量（CREA）、膽固醇含量（CHOL）、甘油三脂含量（TG）、膽堿酯酶（CHE）。

1.3.4臟器系數(shù)檢測 90d染毒結束后，隔夜禁食后，檢查心、腦、脾、肝、肺、腎、腎上腺、睪丸、卵巢（含子宮）等器官，并測定其臟器系數(shù)。

1.4統(tǒng)計學處理 實驗所得數(shù)據(jù)以（x±s）表示，采用SPSS 16.0軟件包，組間均數(shù)比較采用LSD-t檢驗，數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析。

2　結果

2.196%氟丙菊酯原藥對大鼠常規(guī)狀態(tài)和體質(zhì)量的影響 試驗期間各組動物一般情況良好，無厭食和其它異常行為；雄性大鼠中、高劑量組周平均體重從第1周開始至實驗結束均明顯低于對照組（P＜0.05），雌性大鼠高劑量組周平均體重從第1周開始至實驗結束均明顯低于對照組（P＜0.05）。見表1、表 2。

2.296%氟丙菊酯原藥對大鼠臟器系數(shù)的影響 雄性大鼠高劑量組腦重量系數(shù)明顯高于對照組（P＜0.05），中、高劑量組腎、睪丸臟器重量系數(shù)明顯高于對照組（P＜0.05）；雌性大鼠高劑量組腦重量系數(shù)明顯高于對照組（P＜0.05），中、高劑量組肝臟器重量系數(shù)明顯低于對照組（P＜0.05）。 見表 3、表 4。

2.396%氟丙菊酯原藥對大鼠血液學指標的影響各劑量組中，只有雌性大鼠的中劑量組RBC、HGB值明顯高于對照組 （P＜0.05），其它均無顯著性差異，見表 5、表 6。

2.496%氟丙菊酯原藥對大鼠血清生化學指標的影響 雄性大鼠高劑量組的ALT、TBIL值明顯高于對照組（P＜0.05），CHE 明顯低于對照組（P＜0.05），中、高劑量組的GLU明顯低于對照組（P＜0.05）。雌性大鼠高劑量組的ALP明顯高于對照組 （P＜0.05），中、高劑量組的 TP、ALB、CHE 明顯低于對照組（P＜0.05）。其他顯著性差異無毒理學意義。見表7、表 8。

表1　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠體質(zhì)量的影響（x±s，n=10）

表2　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠體質(zhì)量的影響（x±s，n=10）

3　討論

90d喂養(yǎng)氟丙菊酯原藥的大鼠經(jīng)口毒性試驗的結果表明，雄性大鼠中、高劑量組體質(zhì)量增長較對照組緩慢，雌性大鼠高劑量組體質(zhì)量增長較對照組緩慢，而實驗動物體質(zhì)量的變化是反映動物機體中毒效應及毒物毒性的最基本指標[3]。實驗動物血清生化、尿常規(guī)和臟器系數(shù)是生物醫(yī)學研究的重要基礎指標，是臨床醫(yī)療和科學研究的重要依據(jù)，是病理學、毒理學研究以及探討發(fā)病機理等研究中動物選擇的根據(jù)。在本試驗中，90d喂養(yǎng)氟丙菊酯原藥對雄、雌性大鼠血常規(guī)無明顯影響。在血清生化學檢測中，31.25mg/kg劑量對雄性大鼠ALT、TBIL、CHE 有明顯影響，3.91mg/kg 及以上劑量對雄性大鼠GLU有明顯影響，29mg/kg劑量對雌性大鼠ALP有明顯影響，3.62mg/kg及以上劑量對雌性大鼠TP、ALB、CHE有明顯影響，可能由于受試物對實驗動物的毒性作用，造成實驗動物肝功能和脂類代謝出現(xiàn)異常，另一方面可能免疫缺陷引起繼發(fā)感染，從而造成實驗動物對受試物毒性作用敏感的靶器官受損，進而表現(xiàn)出了一系列的異常反應。本試驗所測定的血清生化、血常規(guī)及臟器系數(shù)等指標，在受試雄、雌性動物的中、高劑量組中均呈現(xiàn)出明顯的毒理學變化，并呈現(xiàn)出一定的劑量-效應關系，結合體質(zhì)量的檢測結果，能反映出90d喂飼氟丙菊酯原藥可以造成實驗動物亞慢性毒理學損傷，表明氟丙菊酯原藥有一定的毒性作用。

表3　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠臟器系數(shù)的影響（x±s，n=10）

表4　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠臟器系數(shù)的影響（x±s，n=10）

表5　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠血液學指標的影響（x±s，n=6）

表6　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠血液學指標的影響（x±s，n=6）

表7　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠血清生化學指標的影響（x±s，n=6）

表8　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠血清生化學指標的影響（x±s，n=6）

上述試驗結果表明，實驗動物體質(zhì)量、生化指標、血常規(guī)指標和臟器重量系數(shù)相互支持，表明氟丙菊酯原藥對雄性大鼠染毒劑量為3.91mg/kg.bw.d及以上時，對雄性大鼠有毒性效應。氟丙菊酯原藥對雌性大鼠染毒劑量為3.62mg/kg.bw.d及以上時，對雌性大鼠有毒性效應。因此，在本試驗條件下，90d喂養(yǎng)氟丙菊酯原藥對雄性大鼠經(jīng)口毒性的最大無作用劑量為0.49mg/kg.bw.d，對雌性大鼠經(jīng)口毒性的最大無作用劑量為0.45mg/kg.bw.d。