不同月份產(chǎn)羔奶山羊初乳免疫球蛋白和常乳乳成分檢測(cè)

趙曉娥, 孫念琴，宋愛愛，魏 強(qiáng), 徐明輝，李延華, 王軍寧, 馬保華*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院/ 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 楊凌 712100; 2.許昌百益奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng), 河南 許昌 461000；3.富平縣畜牧技術(shù)推廣中心, 陜西 富平711700；4.富平縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西 富平 711700)

泌乳是哺乳動(dòng)物重要的生理機(jī)能，為哺育仔畜、繁衍種族所必需[1]。母畜生產(chǎn)后，母乳是仔畜重要的營養(yǎng)物質(zhì)來源，乳汁的質(zhì)量和產(chǎn)量對(duì)仔畜的生長發(fā)育很重要。母羊乳汁質(zhì)量越好，羔羊生長發(fā)育也就越好，尤其是哺乳前期。初乳中含有豐富的免疫球蛋白、乳鐵蛋白、維生素等，可防止感染和增強(qiáng)免疫機(jī)能[2]。常乳中含有乳蛋白、乳糖、脂肪、無機(jī)元素、氨基酸、酶類和維生素等[3]。研究表明哺乳動(dòng)物產(chǎn)奶量受遺傳、胎次、環(huán)境、營養(yǎng)水平等因素的影響[4-5]，乳成分與泌乳期、胎次、日糧組成、環(huán)境及管理等因素相關(guān)，其成分含量存在明顯差異[6]。奶山羊在不同季節(jié)產(chǎn)羔后，季節(jié)性變化是否引起母羊乳中免疫球蛋白和其他乳成分含量的變化還不是很清楚。因此，本研究收集不同月份產(chǎn)羔母羊的乳樣，通過乳中免疫球蛋白及不同乳成分含量的比較分析，為后期調(diào)整奶山羊日糧組成以保證不同月份產(chǎn)羔母羊的乳品質(zhì)提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及管理

關(guān)中奶山羊，年齡1.5～4歲，體況良好，無繁殖及傳染性疾病，發(fā)情周期正常，于當(dāng)年8月、10月、12月、翌年2月同期發(fā)情、配種處理，翌年的1月、3月、5月和7月產(chǎn)羔、產(chǎn)奶。隨機(jī)抽出1月、3月、5月和7月產(chǎn)羔的關(guān)中奶山羊各10只，共40只奶山羊作為本研究的試驗(yàn)動(dòng)物。每批次的10只試驗(yàn)羊在同一條件下舍飼飼喂，常規(guī)管理。

1.2 主要試劑

山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒，山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒(上海邦奕生物科技有限責(zé)任公司)。

1.4 乳樣的收集與處理

每批10只奶山羊，分別于產(chǎn)羔后的0，2，5 d 和7d收集兩個(gè)6～8 mL初乳樣品，用于IgA和IgG水平測(cè)定。2 000 r/min離心初乳樣品，收集上清液保存于-20 ℃冰箱內(nèi)待測(cè)。山羊初乳中IgA和IgG的濃度用ELISA試劑盒檢測(cè)[7-9]，上海邦奕生物科技有限責(zé)任公司代測(cè)。

在泌乳期的7，9，30，60，90，120，150 d和180 d，每只試驗(yàn)羊每次采集45 mL乳樣，重復(fù)收集兩個(gè)乳樣，貯于-20 ℃冰箱保存，用于乳成分(乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物)測(cè)定。乳成分及其含量用全自動(dòng)乳樣分析儀(MilkoScan FT120，F(xiàn)OSS Corporation, Denmark)分析。測(cè)試時(shí)，首先對(duì)全自動(dòng)乳樣分析儀進(jìn)行校正，預(yù)溫40 min，將乳樣提前置于40 ℃水浴缸中進(jìn)行水浴解凍，待乳樣溫度達(dá)到30 ℃左右時(shí)將乳樣上下顛倒輕晃，然后將全自動(dòng)乳樣分析儀吸頭置于乳樣中檢測(cè)，乳樣分析儀會(huì)對(duì)乳樣的主要成分、酸度、冰點(diǎn)和密度進(jìn)行兩次分析，分析后計(jì)算兩次的平均值。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 奶山羊初乳中免疫球蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線

根據(jù)奶山羊初乳中IgA和IgG水平繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1。由圖1可以看出，IgA和IgG標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2分別為0.9991和0.9994，表明檢測(cè)方法正確、檢測(cè)結(jié)果可靠。

2.2 不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中免疫球蛋白的測(cè)定結(jié)果

不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG濃度的變化如圖2所示。

圖1 ELISA測(cè)定山羊初乳中IgA 和IgG的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curves for the measurement of IgA and IgG in goat colostrum with ELISA kits

圖2 不同月份產(chǎn)羔奶山羊初乳中IgA和IgG濃度的變化Fig.2 The concentration of IgA and IgG in colostrums of kidding goats in different months

由圖2可以看出，1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在相同的泌乳時(shí)間初乳中IgA和IgG水平無顯著差異(P>0.05)；不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG水平動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)一致，IgA濃度0～2 d下降較快，5～7 d下降緩慢維持在較低水平；IgG濃度0～5 d下降較快，5～7 d下降緩慢維持在較低水平。0 d時(shí)，IgA濃度最高為1890.84±124.51 μg/mL，7 d時(shí)，下降到951.02±1.34 μg/mL；0 d時(shí)，IgG濃度最高為127.26± 4.47 mg/mL，7 d時(shí)，下降到8.56±1.44 mg/mL。

2.3 不同月份產(chǎn)羔母羊常乳中乳成分的測(cè)定結(jié)果

不同月份產(chǎn)羔母羊常乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物測(cè)定結(jié)果見圖3。由圖3可以看出，1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在6個(gè)月泌乳期間，常乳中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物(干物質(zhì))含量變化趨勢(shì)一致，其均值變化范圍為3.31%～3.45%，4.91%～5.77%，4.03%～4.20%，8.48%～8.88%， 13.72%～15.07%。 5月份生產(chǎn)的母羊，在泌乳的7 d、30 d、60 d時(shí)，羊乳中的蛋白質(zhì)含量相對(duì)較低，在其它泌乳期，不同月份產(chǎn)羔母羊乳中的乳蛋白含量無顯著差異(圖3A)。5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳的7 d、9 d羊乳中的脂肪含量高于7月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05)，其他泌乳期，不同月份產(chǎn)羔母羊羊乳中的乳脂含量無差異性變化(圖3B)。在相同的泌乳期，不同月份產(chǎn)羔母羊乳中的乳糖含量無差異性變化(圖3C)。5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳的150 d，羊乳中的非脂含量低于其他月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05，P>0.05)。在泌乳的前期，7月份產(chǎn)羔母羊乳中的總脂含量顯著低于1月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05)，在泌乳的中期，5月份產(chǎn)羔母羊乳中的總脂含量低于其他月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05，P>0.05)(圖3E)。

圖3 不同月份產(chǎn)羔母羊乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物含量的變化Fig.3 The protein, fat, lactose, non-fat solid and total fat solid (TS) content in milk of kidding goats in different months

3 討 論

3.1 不同月份分娩的奶山羊初乳中IgA 和IgG含量變化分析

母畜生產(chǎn)后，初乳中免疫球蛋白含量的高低對(duì)仔畜成活及生長很重要。免疫球蛋白不僅可以提高仔畜的免疫力，同時(shí)，IgG和IgA對(duì)其乳腺也有保護(hù)作用[10]。因此，奶山羊初乳中IgA和IgG的含量的高低對(duì)于羔羊的生長發(fā)育具有很大的影響。在奶山羊整個(gè)泌乳過程中，乳汁中的免疫球蛋白的濃度變化很大[11]，1～18 h內(nèi)的初乳中免疫球蛋白的含量最高[12]，可達(dá)120 mg/mL，而泌乳高峰期則降至0.50～1 mg/mL。莎能奶山羊產(chǎn)后3 h和12 h，初乳中的IgG含量分別為72.01 mg/mL和 48.81 mg/mL[13]。本試驗(yàn)中，IgA和IgG的濃度0～2 d下降很快，5～7 d維持在較低水平，0 d時(shí)最高可達(dá)127.26 mg/mL，7 d時(shí)下降到8.56 mg/mL。初生羔羊?qū)Τ跞橹忻庖咔虻鞍椎奈章首罡呒s為50%[12]，剛出生的羔羊未吃初乳時(shí)外周血清中IgG和IgA含量極少，但羔羊哺食初乳后幾個(gè)小時(shí)，其外周血清中免疫球蛋白含量很高[13]。本試驗(yàn)對(duì)不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG的含量進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)1月、3月、5月、7月母羊產(chǎn)后初乳中IgA和IgG含量動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)一致，不同批次相同泌乳期乳中IgA和IgG的濃度無差異性變化，其動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)與陳祖秋報(bào)道的結(jié)果相符[12]。說明不同月份產(chǎn)羔對(duì)母羊初乳中IgA和IgG含量影響不大，其動(dòng)態(tài)變化與泌乳時(shí)間有關(guān)。

3.2 奶山羊在不同月份分娩對(duì)母羊常乳乳成分含量的影響

山羊奶的主要營養(yǎng)成分有乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固型物等。在本研究中，1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在產(chǎn)后7 d、9 d及1～6個(gè)月的泌乳期間，乳汁樣品中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固型物含量動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)類似，乳糖和非脂固形物濃度動(dòng)態(tài)變化幅度不大，乳蛋白、乳脂和總脂固型物表現(xiàn)為泌乳初期含量較高，隨后逐漸下降，到檢測(cè)的末期又有所上升，這種變化趨勢(shì)是正常的，主要與泌乳期泌乳量的動(dòng)態(tài)變化有關(guān)，產(chǎn)奶量越高，乳脂肪含量越低[14]。采樣期間，從主要乳成分在乳樣品中的絕對(duì)含量來看，蛋白質(zhì)、乳糖和非脂固形物含量與文獻(xiàn)報(bào)道的奶山羊乳汁中含量相符或稍高(3.31%～3.45%，2.98%～3.08%; 4.03%～4.20%，3.90%～3.96%；8.48%～8.88%，8.38%～8.61%)[15-16]，脂肪含量與總脂固形物均相對(duì)偏高[15]，可能是所在養(yǎng)殖場(chǎng)奶山羊食用較高比例粗纖維的緣故。張彥明等[17]提出奶山羊日糧中粗纖維含量的高低對(duì)乳中脂肪含量變化影響最大。山羊除了腺泡上皮細(xì)胞直接從血液中攝取一部分脂肪酸外，還可以利用日糧中的纖維素在瘤胃中發(fā)酵所產(chǎn)生的低級(jí)脂肪酸(如乙酸、丙酸和丁酸等)。因此，可以通過調(diào)整日糧來改變羊奶中的脂肪含量。另外，發(fā)現(xiàn)5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳旺期(6～8月)乳中脂肪含量低于其他各組，可能是此羊場(chǎng)在每年的6～8月提供奶山羊大量青麥草導(dǎo)致泌乳母羊產(chǎn)奶量的增加，乳脂含量相對(duì)就會(huì)降低。盡管5月份產(chǎn)羔母羊乳脂含量相對(duì)偏低(4.91%)，但在正常范圍之內(nèi)，據(jù)報(bào)道羊奶中脂肪含量為3.6%～5.5%。而對(duì)1月、3月和7月產(chǎn)羔母羊來說，應(yīng)加強(qiáng)青綠飼料的補(bǔ)充，以降低乳汁中的乳脂和總脂含量?？偟膩碚f，山羊奶中含有的脂肪酸大多是中、短鏈脂肪酸，容易代謝，不會(huì)造成脂肪堆積引起肥胖[18-19]。因此我們可以認(rèn)為脂肪和總脂固形物含量偏高并沒有降低羊奶的質(zhì)量。

4 小 結(jié)

奶山羊在不同月份產(chǎn)羔并不影響初乳中IgA和IgG含量的變化，對(duì)常乳中乳脂、和總脂固形物有一定的影響，對(duì)乳蛋白和乳糖及非脂固形物影響不大，常乳中乳成分含量在部分泌乳期有變化，但并未降低羊奶的質(zhì)量。

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