補(bǔ)腎強(qiáng)督祛濕法治療腎虛督寒型強(qiáng)直性脊柱炎療效及對MMP-9、TIMP-1水平的影響

李遠(yuǎn)峰，宋寒冰，徐煒明，張大鵬，姜益常

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)又名Marie-strümpell病、Von Bechterew病，是一種自身免疫系統(tǒng)疾病，多發(fā)于青少年男性，在中國的發(fā)病率約為0.25%[1]。該病屬于西醫(yī)風(fēng)濕疾病范疇，首先侵犯骶髂關(guān)節(jié)，而后逐漸沿脊柱上行并可發(fā)展到頸椎，早期癥狀可有骶髂關(guān)節(jié)酸痛感、僵硬，活動后可改善，病情逐漸發(fā)展，可出現(xiàn)脊柱骨質(zhì)破壞，引起脊柱段活動受限和畸形，導(dǎo)致脊柱強(qiáng)直僵硬，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[2-3]。目前西醫(yī)臨床上多采用非甾體抗炎藥、糖皮質(zhì)激素及生物制劑等治療本病，但長期應(yīng)用這些藥物產(chǎn)生的不良反應(yīng)和生物制劑昂貴的價格往往令患者難以接受。尋求中醫(yī)中藥治療AS一直是人們研究的熱點且深受患者青睞。本研究觀察比較了補(bǔ)腎強(qiáng)督法治療方案與洛索洛芬鈉片治療AS的療效及對血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、組織金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)水平的影響，旨在探討補(bǔ)腎強(qiáng)督法治療AS的相關(guān)作用機(jī)制。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇2016年1月—2017年1月在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨三科門診確診為腎虛督寒型AS患者80例，中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床研究指導(dǎo)原則》[4]。排除哺乳期婦女及妊娠者，其他血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病者，嚴(yán)重脊柱關(guān)節(jié)畸形者，發(fā)病前2個月使用過非甾體抗炎藥物者，酗酒或精神障礙者。將患者隨機(jī)分為2組：中藥組40例，男32例,女6例；年齡15～37(26.61±10.3)歲。西藥組40例，男31例，女9例；年齡14～38(25.61±10.2)歲。2組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05) 。

1.2治療方法 中藥組:采用自擬補(bǔ)腎強(qiáng)督祛濕湯治療。藥物組成:鹿角膠10 g、附子10 g(先煎)、金毛狗脊30 g、桑寄生30 g、葛根30 g、白芍30 g、茯苓25 g、生甘草10 g、青風(fēng)藤30 g、威靈仙15 g，以上藥由本院統(tǒng)一煎制，每日1劑，每煎取汁150 mL，早、晚2次分服。西藥組:洛索洛芬鈉片(商品名：樂松，上海第一三共制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H20030769，60 mg/片)口服，每次1片，每日3次。2組均以3個月為1個療程,均治療觀察1個療程。

1.3觀察項目

1.3.1血清及上清中MMP-9 、TIMP-1水平 分別于治療前及治療3個月末采集2組患者晨空腹外周肘靜脈血10 mL，在3 000 r/min下離心25 min，分離血清及上清，保存在1mL Eppendorf 管內(nèi)，超低溫(-80 ℃)冷凍。采用雙抗體夾心ELISA法檢測，人MMP-9 ELISA試劑盒購自大連泛邦化工技術(shù)開發(fā)有限公司；人TIMP-1 ELISA試劑盒購自北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司按照說明書進(jìn)行操作。

1.3.2血清C反應(yīng)蛋白(CRP)水平及血沉(ESR)分別于治療前及治療3個月末采集2組患者晨空腹外周肘靜脈血，采用ELISA法檢測CRP水平，采用魏氏法檢測ESR。

1.3.3中醫(yī)證候評分 分別于治療前及治療3個月末對2組患者主癥(腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關(guān)節(jié)冷痛)和次癥(四末不溫、口不渴、大便溏泄)進(jìn)行評分，其中主癥按照輕重程度分級量化給予0分、2分、4分、6分，次癥按照輕重程度分級量化給予0分、1分、2分、3分，評分越高提示癥狀越重[5]。

1.3.4臨床療效 參照《中藥新藥治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床研究指導(dǎo)原則》[4]擬定療效評價標(biāo)準(zhǔn)。近期控制：治療3個月主癥、次癥消失，病情控制；顯效：治療3個月主癥、次癥改善≥2/3，病情穩(wěn)定；有效：治療3個月主癥、次癥改善≥1/3；無效：治療3個月主癥、次癥改善<1/3，且不穩(wěn)定。

1.3.5不良反應(yīng) 治療過程中觀察2組不良反應(yīng)發(fā)生情況。

2 結(jié) 果

2.12組治療前后血清MMP-9、TIMP-1水平比較 治療前2組血清MMP-9、TIMP-1水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)；治療后2組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯降低(P均<0.05)，且中藥組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯低于西藥組(P均<0.05)。見表1。

2.22組治療前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比較 治療前2組上清中MMP-9、TIMP-1水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。治療后中藥組上清中MMP-9水平明顯低于治療前及西藥組(P均<0.05)， TIMP-1水平有下降趨勢，但與治療前比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；西藥組上清中MMP-9、TIMP-1水平與治療前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。見表2。

表1 2組治療前后血清MMP-9、TIMP-1水平比較

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

表2 2組治療前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比較

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

2.32組治療前后血清CRP水平及ESR比較 治療后2組血清CRP水平及ESR均明顯降低(P均<0.05)，但2組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。見表3。

表3 2組治療前后血清CRP水平及ESR比較

注：①與治療前比較，P<0.05。

2.42組治療前后中醫(yī)證候評分比較 治療后中藥組腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關(guān)節(jié)冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯降低(P均<0.05)，西藥組僅腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛評分明顯降低(P均<0.05)，且中藥組四肢關(guān)節(jié)冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯低于西藥組(P均<0.05)。見表4。

表4 2組治療前后中醫(yī)證候評分比較分)

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

2.52組臨床療效比較 中藥組控顯率明顯高于西藥組(P<0.05)，2組總有效率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 2組臨床療效比較

注：①與西藥組比較，P<0.05。

2.62組不良反應(yīng)發(fā)生情況 中藥組有8例服藥后出現(xiàn)輕微腹瀉不適感，囑其飯后服用，不良反應(yīng)消失，不良反應(yīng)發(fā)生率為20.0%；西藥組出現(xiàn)惡心13例，腹瀉3例，肝功能異常1例，采取停藥及對癥處理后消失，不良反應(yīng)發(fā)生率為42.5%。中藥組不良反應(yīng)發(fā)生率明顯低于西藥組(P<0.05)。

3 討 論

AS是一種慢性炎性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與遺傳、感染、免疫、理化等因素有關(guān)[6]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為該病屬“痹證”范疇，屬于“脊痹”，癥狀為兩胯活動受限， 嚴(yán)重者脊柱彎曲變形，甚至強(qiáng)直僵硬；或背部酸痛、肌肉僵硬沉重感， 陰雨天及勞累加劇[7-8]。治療法則為補(bǔ)腎強(qiáng)督、扶正祛邪[9]。補(bǔ)腎強(qiáng)督祛濕法組方是本院經(jīng)驗方，方中金毛狗脊補(bǔ)腎通督強(qiáng)腰，附子、桑寄生祛風(fēng)除濕,補(bǔ)腎強(qiáng)筋；葛根發(fā)散風(fēng)寒；白芍緩急柔肝止痛；青風(fēng)藤、威靈仙、茯苓祛風(fēng)除濕，通絡(luò)止痛；鹿角膠引諸藥入督脈；生甘草緩急止痛，調(diào)和諸藥。全方共奏散寒除濕、補(bǔ)腎強(qiáng)督之功。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是體內(nèi)主要的蛋白水解酶家族之一，對組織重構(gòu)起著重要作用[10]。MMPs介導(dǎo)的基質(zhì)降解涉及多種疾病過程，例如動脈硬化、血管重構(gòu)、腫瘤轉(zhuǎn)移及免疫炎癥引起的關(guān)節(jié)和軟骨的破壞。以往研究認(rèn)為MMP-9與AS疾病活動度有關(guān)，可能是由于AS患者體內(nèi)炎癥刺激產(chǎn)生大量MMP-9，進(jìn)而可降解明膠及存在于軟骨中的其他膠原，從而破壞滑膜組織中破骨細(xì)胞進(jìn)而造成軟骨損傷，為疾病活動的有用標(biāo)記物，可能是參與AS疾病活動和炎性骨破壞的重要因素[11]。組織金屬蛋白酶抑制劑(TIMPs)是一組低分子量蛋白，在體內(nèi)分布廣泛，正常情況下，MMPs與TIMPs保持相對平衡，這種平衡在組織修復(fù)中發(fā)揮著重要意義[12]。AS活動期時MMPs與 TIMPs 表達(dá)均上調(diào)，二者之間平衡被打破，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)過度降解，促進(jìn)其侵襲擴(kuò)散，影響患者預(yù)后[13]。

本研究結(jié)果顯示，治療后中藥組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯低于西藥組；中藥組上清中MMP-9水平和腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關(guān)節(jié)冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯降低，西藥組僅腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛評分明顯降低，且中藥組上清中MMP-9水平和四肢關(guān)節(jié)冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯低于西藥組；中藥組控顯率明顯高于西藥組，不良反應(yīng)發(fā)生率明顯低于西藥組。提示補(bǔ)腎強(qiáng)督祛濕法治療AS療效更好，可明顯改善患者相關(guān)癥狀，可能與明顯下調(diào)MMP-9、TIMP-1水平有關(guān)。

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