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    寶心寧膠囊對(duì)小鼠改善睡眠作用研究

    2018-06-29 02:40:00李善姬宋春梅葛紅娟張洋婷梁承武
    關(guān)鍵詞:閾下巴比妥鈉失眠癥

    李善姬,宋春梅,葛紅娟,張洋婷,劉 敏,梁承武

    (吉林醫(yī)藥學(xué)院,吉林 吉林 132013)

    失眠癥屬于睡眠障礙的范疇,主要表現(xiàn)為入睡困難或早醒,常伴有睡眠不深與多夢(mèng)。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,由于失眠、抑郁或焦慮等疾病的發(fā)生,可嚴(yán)重影響人們的正常生活、工作和學(xué)習(xí),并能加重或誘發(fā)其他心腦血管方面的疾病,增加社會(huì)和家庭的負(fù)擔(dān),因此開發(fā)具有防治失眠癥或能改善睡眠質(zhì)量的新藥具有重要意義。針對(duì)失眠的藥物治療在改善睡眠的同時(shí)容易影響正常生理睡眠,以及清醒后存在藥物延續(xù)作用。此外,藥物治療失眠癥常引起藥物依賴、耐受等不良反應(yīng),因此該類藥物多按照“按需用藥”和“間斷性用藥”的原則使用。而中醫(yī)藥治療失眠,因其不良反應(yīng)小以及依賴性輕,具有一定優(yōu)勢(shì)[1-2]。

    寶心寧膠囊為擬研制開發(fā)的具有滋陰養(yǎng)血、寧心安神、安神鎮(zhèn)靜作用,用于失眠癥的中藥復(fù)方新藥,由酸棗仁、琥珀、珍珠母、黃芩、梔子和冰片組成[3],具有鎮(zhèn)靜安神,清熱瀉火之效,適用于治療心火擾動(dòng)、熄風(fēng)定眩以及神志不安所致的眩暈和失眠癥[4-7]。為探索其療效機(jī)理,本研究探討寶心寧膠囊對(duì)小鼠睡眠的影響。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    清潔級(jí)昆明小鼠,雌雄各半,體重(20±2)g。動(dòng)物合格證號(hào):SCXK-(吉)2011-0004,購于長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司。

    寶心寧膠囊,規(guī)格:0.3 g/粒,批號(hào):20170201,由長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)植物化學(xué)研究中心提供。地西泮片,規(guī)格:2.5 mg/片,批號(hào):1611014,天津力生制藥股份有限公司產(chǎn)品。戊巴比妥鈉,規(guī)格:500 mg/瓶,批號(hào):WXBB6772V,美國Sigma公司產(chǎn)品。

    多功能小鼠自主活動(dòng)記錄儀,型號(hào):YLS-1A,山東省社會(huì)科學(xué)院設(shè)備站產(chǎn)品;大小鼠轉(zhuǎn)棒儀,型號(hào):DXP-2,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所產(chǎn)品。

    1.2 寶心寧膠囊對(duì)戊巴比妥鈉閾下劑量小鼠睡眠率的影響

    50只昆明小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后,按體重隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為空白對(duì)照組,陽性對(duì)照組(地西泮片10 mg/kg)組,寶心寧膠囊高、中、低(1800、900、450 mg/kg)給藥劑量組。給藥組灌胃不同濃度的寶心寧混懸液,1次/d,20 mL/kg,連續(xù)給藥1周,對(duì)照組給予等容量蒸餾水灌胃。實(shí)驗(yàn)期間每2天稱量體重1次,正常攝食飲水。通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定戊巴比妥鈉閾下催眠劑量80%~90%小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥鈉最大閾下劑量為32 mg/kg。選擇接近藥物達(dá)峰濃度的平均時(shí)間,即給動(dòng)物灌胃超純水1 h后,腹腔注射戊巴比妥鈉,記錄15 min內(nèi)入睡動(dòng)物數(shù)(翻正反射消失達(dá)1 min以上者),進(jìn)行協(xié)同睡眠測(cè)定。比較對(duì)照組與不同劑量給藥實(shí)驗(yàn)組入睡動(dòng)物數(shù)之間的差異。組間顯著性統(tǒng)計(jì)處理方法采用χ2檢驗(yàn)。

    1.3 寶心寧膠囊對(duì)戊巴比妥鈉閾上劑量小鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間的影響

    將50只昆明小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后,分組及給藥同“1.2”。

    選擇戊巴比妥鈉劑量。給小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉,30 min內(nèi)小鼠翻正反射消失達(dá)到1 min以上者,說明其進(jìn)入睡眠狀態(tài)。試驗(yàn)前通過預(yù)試驗(yàn)確定使小鼠完全入睡,但又不使睡眠時(shí)間過長(zhǎng)(≤10 min)的戊巴比妥鈉的劑量為44 mg/kg。末次給藥1 h按44 mg/kg劑量給小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉溶液。記錄戊巴比妥鈉注射時(shí)間、小鼠入睡時(shí)間及睡眠結(jié)束時(shí)間,入睡時(shí)間與注射時(shí)間差計(jì)為睡眠潛伏期,睡眠結(jié)束時(shí)間與入睡時(shí)間差計(jì)為睡眠時(shí)間。給藥組與對(duì)照組交替進(jìn)行試驗(yàn),觀察被試藥物和戊巴比妥鈉聯(lián)用對(duì)小鼠睡眠潛伏期及睡眠時(shí)間的作用。結(jié)果以平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用組間t檢驗(yàn)。

    2 結(jié) 果

    在戊巴比妥鈉閾下劑量,空白對(duì)照組,陽性對(duì)照組組,寶心寧膠囊高、中、低小鼠睡眠動(dòng)物數(shù)分別為0、10、8、7、5只。與對(duì)照組比較,寶心寧膠囊高、中兩個(gè)劑量均有提高睡眠率的作用(P<0.01和P<0.05),均與戊巴比妥鈉產(chǎn)生協(xié)同作用。

    與對(duì)照組比較,寶心寧膠囊3個(gè)給藥劑量組均能顯著延長(zhǎng)閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時(shí)間,明顯加快小鼠入睡時(shí)間(P<0.01和P<0.05),結(jié)果見表1。

    表 1 寶心寧膠囊對(duì)小鼠睡眠發(fā)生率的影響(n=10,min)

    與空白對(duì)照組比較:*P<0.05,**P<0.01

    3 討 論

    頭痛發(fā)作時(shí)患者多伴有煩躁、失眠、焦慮、緊張等中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮的癥狀。此時(shí),將病人安置在環(huán)境柔和安靜的房間里,并給予適量的鎮(zhèn)靜催眠藥物,使病人保持適度的睡眠,即可有效緩解其急性期癥狀。因此,在研究抗偏頭痛藥物中方劑的鎮(zhèn)靜催眠作用是不可缺少的。戊巴比妥鈉是臨床已知的常用中樞鎮(zhèn)靜藥物,本實(shí)驗(yàn)選用此藥物作為已知藥物,觀察被測(cè)藥物即寶心寧膠囊與戊巴比妥鈉是否有協(xié)同作用。即用藥后動(dòng)物是否出現(xiàn)閉目、低頭、俯臥、自發(fā)活動(dòng)受抑制等表現(xiàn);用藥后是否具有對(duì)抗中樞神經(jīng)興奮作用,增強(qiáng)中樞神經(jīng)抑制藥的催眠作用[8-9]。

    本實(shí)驗(yàn)中,通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定80%~90%小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥鈉最大閾下劑量為32 mg/kg。對(duì)照組小鼠注射戊巴比妥鈉后僅以閉目、低頭、俯臥、自發(fā)活動(dòng)受抑制等表現(xiàn)為主,未出現(xiàn)翻正反射消失。且在注射藥物30 min后均恢復(fù)正常。高、中、低劑量組小鼠均出現(xiàn)了閉目、低頭、俯臥、自發(fā)活動(dòng)受抑制的表現(xiàn),其中高劑量組小鼠有8只翻正反射消失,中劑量組有7只翻正反射消失,低劑量組有5只翻正反射消失。與對(duì)照組比較P<0.01和P<0.05,給予寶心寧膠囊后,寶心寧膠囊高、中兩個(gè)劑量均有提高睡眠率的作用,均與戊巴比妥鈉產(chǎn)生協(xié)同作用。

    本研究通過觀察寶心寧膠囊對(duì)閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間、睡眠潛伏期的影響,評(píng)價(jià)寶心寧膠囊對(duì)小鼠的催眠作用,并與地西泮進(jìn)行了對(duì)照。結(jié)果表明,寶心寧膠囊3個(gè)給藥劑量均能顯著延長(zhǎng)閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時(shí)間,明顯加快小鼠入睡時(shí)間,提示寶心寧膠囊對(duì)戊巴比妥鈉有協(xié)同的催眠作用,具有良好的鎮(zhèn)靜、催眠作用。

    以酸棗仁、琥珀、珍珠母、黃芩、梔子和冰片諸多藥物配伍的寶心寧膠囊,擬研制開發(fā)為具有滋陰養(yǎng)血、寧心安神、安神鎮(zhèn)靜作用新藥,適用于治療心火擾動(dòng)以及神志不安所致的眩暈和失眠癥。實(shí)驗(yàn)表明:寶心寧膠囊可明顯提高睡眠率的作用,延長(zhǎng)閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時(shí)間,明顯加快小鼠入睡時(shí)間。顯示寶心寧膠囊具有改善小鼠睡眠作用。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 朱潔,申國明,汪遠(yuǎn)金,等.肝郁證失眠大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)[J].中醫(yī)雜志,2011,52(8):689-692.

    [2] 肖成榮,馬增春,李海靜,等.PCPA失眠大鼠模型的制作及其機(jī)制[J].毒理學(xué)雜志,2007,21(4):326.

    [3] 程曉英,王苗苗,趙明會(huì).高效液相色譜法測(cè)定寶心寧片中梔子苷的含量[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2016,16(A4):218-219.

    [4] 王旭東,王亞麗,戴體俊,等.地西泮對(duì)小鼠自主活動(dòng)和學(xué)習(xí)記憶功能的影響[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2008,13(4):374-377.

    [5] 涂人順,張國璽,孫斌輝.關(guān)于小鼠自主活動(dòng)規(guī)律的研[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2002,18(4):464-465.

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    [7] 孫軍貞,楊鳴東.養(yǎng)血清腦顆粒治療腦動(dòng)脈硬化所致眩暈失眠108例療效觀察[J].上海醫(yī)藥,2013,34(8):27-28.

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