腹瀉患兒大便細菌培養(yǎng)及輪狀病毒檢測結(jié)果與血清鋅、肌酸激酶同工酶的關(guān)系

陳素萍，杜寶靜，滑麗芳，張 京

(河北省邯鄲市婦幼保健院兒科 056001)

小兒腹瀉是臨床常見病，有報道顯示約80%的成人小兒時期有過腹瀉病史，在欠發(fā)達國家，腹瀉是小兒死亡的病因之一，僅次于小兒肺炎[1]。小兒腹瀉多見于感染性腹瀉，其中輪狀病毒感染占比相對較高[2]。鋅是維持腸道黏膜功能的重要微量元素，與免疫功能失調(diào)關(guān)系密切，可能與腹瀉有關(guān)。肌酸激酶同工酶(CK-MB)是心肌損傷的重要標志物，小兒腹瀉容易導(dǎo)致水電解質(zhì)紊亂等一系列病理改變，加之小兒心肺功能不健全，腹瀉容易造成小兒心肌損傷，導(dǎo)致CK-MB水平升高。分析小兒腹瀉與鋅、CK-MB水平分布特點，對于小兒腹瀉的防治、心肌損傷的預(yù)防有重要意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2016年6月本院住院腹瀉患兒作為研究對象。入選腹瀉患兒437例，按照大便細菌培養(yǎng)、輪狀病毒檢測結(jié)果進行分組，其中大便細菌培養(yǎng)為單純菌群失調(diào)未檢出病原菌感染241例，納入菌群紊亂組，男119例，女122例，年齡2.4～5.0歲，平均(3.1±0.7)歲；其他病毒或病原菌感染性腹瀉45例納入非輪狀病毒感染組，男23例，女22例，年齡2.7～5.0歲，平均(3.3±0.6)歲；檢出輪狀病毒感染151例納入輪狀病毒組，其中男79例，女72例，年齡2～6歲，平均(2.9±0.7)歲。另選取單純因外傷(如燙傷)入門診處理的小兒50例納入對照組，男25例，女25例，年齡2.5～4.0歲，平均(3.2±0.7)歲。腹瀉患兒納入標準：(1)懷疑為感染性腹瀉、社區(qū)獲得性腹瀉[1]；(2)病程短于1周，尚未應(yīng)用微生態(tài)制劑、抗病毒藥物等可能影響檢驗結(jié)果的藥物；(3)初診；(4)未合并其他可能導(dǎo)致CK-MB水平升高的疾病，如病毒性心肌炎；(5)未合并其他類型的感染；(6)未合并先天性代謝疾病等；(7)年齡2～5歲；(8)家屬知情同意并簽署知情同意書。腹瀉患兒排除標準：(1)拒絕參與本研究者；(2)已接受過相關(guān)治療，可能導(dǎo)致檢驗結(jié)果變化；(3)接受過補鋅治療。對照組研究對象納入標準：(1)否認先天缺陷疾病、近3個月腹瀉、反復(fù)呼吸道感染病史及藥物補鋅；(2)心電圖、心臟超聲檢查正常；(3)家屬知情同意并簽署知情同意書。4組研究對象的年齡、性別等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2菌群紊亂診斷標準 油鏡直接觀察涂片5個視野，計算細菌總數(shù)，參照《腸道菌群糞便涂片檢查圖譜》，革蘭陰性桿菌為50.2%～77.0%，革蘭陽性球菌為2.0%～13.0%[3]。

1.3方法

1.3.1細菌培養(yǎng)與輪狀病毒檢測 腹瀉患兒在門診詳細了解病史、用藥史，懷疑為感染性腹瀉，達到納入標準后，采集糞便，當日收集，治療前獲得，嚴格質(zhì)量控制，確認無污染，4 ℃保存，分批送檢，先進行涂片檢查，而后進行實驗室檢查，預(yù)處理，采用磷酸鹽緩沖液處理制備成懸液，-80 ℃冰箱保存。輪狀病毒檢測采用A群輪狀病毒膠體金診斷試劑盒(北京萬泰生物藥業(yè)，2109403)，參照試劑說明書操作，免疫層析雙抗體夾心法，在試劑條檢測區(qū)形成一條紅線，則可判斷為輪狀病毒感染，否則為陰性。細菌培養(yǎng)采用常規(guī)培養(yǎng)法，進行肉眼、鏡檢結(jié)合細菌鑒定，判斷是否出現(xiàn)菌群紊亂。醫(yī)院同時對標本懸液進行星狀病毒/腺病毒等其他可能導(dǎo)致感染性病毒的檢測?？梢删溆觅|(zhì)譜儀進行鑒定，分別接種克氏雙糖鐵瓊脂斜面，進行病原菌特異的生化反應(yīng)鑒定，然后用腸桿菌細菌生化鑒定編碼系統(tǒng)(GYZ-11 E系統(tǒng))及弧菌科細菌生化鑒定編碼系統(tǒng)(第2代GYZ-9V 系統(tǒng))進行生化鑒定，或直接用API 20E腸道菌鑒定系統(tǒng)(法國梅里埃)進行鑒定。瓊脂、培養(yǎng)基、細菌生化編碼鑒定管為杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)。

1.3.2血清鋅監(jiān)測 采集40 μL末梢血或靜脈血40 μL，聚乙烯塑料管中送檢。采用原子吸收分光光度法檢查，包括火焰原子吸收分光光度法、電熱原子化分光光度法，兩種方法誤差精密度在99.99%以上。血清鋅參考范圍：0～1歲58.00～100.00 μmol/L,>1～2歲62.00～110.00 μmol/L,>2～3歲66.00～120.00 μmol/L,>3～4歲72.00～130.00 μmol/L，4歲以上76.50～170.00 μmol/L[1]。

1.3.3CK-MB CK-MB檢測試劑盒由美康生物科技有限公司生產(chǎn)，全自動生化分析儀為日立7170A。CK-MB正常參考值范圍：0～37 U/L。

1.4觀察指標 各組血清鋅、CK-MB水平，以及各組血清鋅、CK-MB異常率。

2 結(jié) 果

2.14組研究對象血清鋅與CK-MB水平比較 見表1。菌群紊亂組、非輪狀病毒感染組、輪狀病毒組血清鋅均低于對照組，血清CK-MB水平均高于對照組；菌群紊亂組血清CK-MB、血清鋅水平低于輪狀病毒組；非輪狀病毒感染組血清CK-MB水平高于菌群紊亂組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1 4組研究對象血清鋅與CK-MB水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與菌群紊亂組比較，△P<0.05

2.24組研究對象血清鋅與CK-MB異常結(jié)果比較 見表2。菌群紊亂組、非輪狀病毒感染組、輪狀病毒組血清鋅異常率均高于對照組，菌群紊亂組血清CK-MB、血清鋅異常率低于輪狀病毒組，菌群紊亂組血清鋅異常率低于非輪狀病毒感染組和輪狀病毒組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。非輪狀病毒感染組和輪狀病毒組血清鋅與CK-MB異常率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表2 4組研究對象血清鋅與CK-MB異常結(jié)果比較[n(%)]

注：與對照組比較，*P<0.05；與菌群紊亂組比較，△P<0.05

3 討 論

本研究結(jié)果表明，對照組血清鋅水平高于非輪狀病毒感染組、菌群紊亂組和輪狀病毒組，3組血清鋅異常率均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，提示腹瀉可能與血清鋅異常特別是偏低有關(guān)。菌群紊亂組血清鋅水平與異常率均低于輪狀病毒組，提示輪狀病毒感染可能與缺鋅關(guān)系更密切。鋅水平偏低與腹瀉關(guān)系密切，主要原因可能為：(1)鋅與小兒生長發(fā)育、免疫功能關(guān)系密切。大量報道顯示，缺鋅與反復(fù)咳嗽等感染性疾病關(guān)系密切。鋅在兒童生長發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用，嬰兒在母體中的成長與鋅是密不可分的，缺鋅與生長發(fā)育遲緩有關(guān)，缺鋅可能導(dǎo)致免疫功能減退，出現(xiàn)腸道感染風險上升[3]。(2)鋅還是多種酶的輔基，與維生素D受體形成關(guān)系密切。間接影響患兒的免疫功能，鋅缺乏還與厭食癥有關(guān)，從而導(dǎo)致進食減少，更容易引起胃腸道功能障礙、腸道黏膜屏障功能減退[4]。(3)腸道對鋅的吸收與代謝是人類維持鋅代謝平衡的重要途徑，腸黏膜功能與鋅水平關(guān)系密切。大量研究顯示，補鋅成為治療小兒腹瀉的重要療法[5]。動物研究顯示，加鋅膳食纖維能改善燙傷休克大鼠腸道血流動力學，促進黏膜屏障功能恢復(fù)[6]。缺鋅容易出現(xiàn)腸道菌群紊亂，動物食物中添加鋅能夠減少腸道厭氧菌數(shù)量，補鋅能夠提高腸道黏膜屏障抗病能力；反之，缺鋅會增加腸道黏膜病變風險[7]?？偠灾?，缺鋅可直接或間接增加感染性腹瀉的風險，感染性腹瀉反過來又會影響鋅的代謝和吸收，加重缺鋅。

本研究結(jié)果表明，對照組CK-MB水平低于非輪狀病毒感染組、菌群紊亂組和輪狀病毒組，菌群紊亂組血清CK-MB水平和其異常率低于輪狀病毒組，非輪狀病毒感染組高于菌群紊亂組血清CK-MB水平與異常率，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。腹瀉特別是感染性腹瀉會導(dǎo)致患兒CK-MB水平升高，提示患兒的心臟負荷加重[7]。可能原因是：感染性腹瀉的治療難度相對更大，同時腹瀉往往更嚴重，更容易出現(xiàn)水電解質(zhì)紊亂，同時，感染性腹瀉還可能引起病毒血癥而致代謝異常，在感染急性期，血液濃縮、循環(huán)障礙、酸中毒等都會導(dǎo)致心臟負荷加重[8-9]。

需注意的是，本研究中血清鋅與CK-MB異常率比較，非輪狀病毒感染組與輪狀病毒組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，這可能與感染性腹瀉引起心肌損傷的機制存在一致性有關(guān)[10-11]。

今后需重視小兒特別是對于那些反復(fù)腹瀉的患兒進行缺鋅癥篩查，重視補鋅。對于腹瀉急性期小兒需重視口服藥物快速補鋅。對腹瀉小兒需加強CK-MB水平監(jiān)測，做好感染性腹瀉心肌損害的防治[12-14]。血清鋅偏低可能是導(dǎo)致感染性腹瀉發(fā)生的重要原因，感染性腹瀉可能會導(dǎo)致CK-MB水平明顯上升。

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