胃腺癌中異黏蛋白和原癌基因C-myc表達(dá)的關(guān)系及臨床意義

王 靜 于 敏 牛亞靖 張 紅

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院外科，遼寧 錦州 121001)

胃腺癌是高度惡性的浸潤(rùn)性上皮源性腫瘤，來源于胃黏膜上皮，其分化常較差，可以直接蔓延及向周圍播散，侵襲能力強(qiáng)〔1〕。異黏蛋白(MTDH)是近年來發(fā)現(xiàn)的一個(gè)癌基因，已被證實(shí)在人體大部分組織中低表達(dá)，在惡性腫瘤中的表達(dá)不同程度升高，其可以通過多種信號(hào)通路影響腫瘤的形成〔2,3〕。原癌基因C-myc(C-myc)其編碼的蛋白質(zhì)可以介導(dǎo)細(xì)胞外轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的生物信號(hào)，對(duì)細(xì)胞增殖及腫瘤生長(zhǎng)有重要作用〔4,5〕。本文關(guān)注胃腺癌術(shù)后組織中MTDH和C-myc的表達(dá)，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年1月至2016年12月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院確診為胃腺癌，并行手術(shù)治療的患者為觀察組，共87例，其中男45例，女42例，年齡40～86歲，平均59.3歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者或家屬同意觀察；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其他器官惡性腫瘤；②胃部手術(shù)史；③血液系統(tǒng)疾病；④手術(shù)前行放、化療。同時(shí)選取上述患者中距離腫物邊緣>3 cm的正常胃黏膜組織45例為對(duì)照組,其中男25例，女20例，年齡42～81歲，平均58.3歲。兩組均常規(guī)留取術(shù)后蠟塊組織(取材由病理醫(yī)師完成)。兩組常規(guī)資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2MTDH和C-myc蛋白表達(dá)的檢測(cè) MTDH和C-myc試劑均為濃縮液，按不同比例行預(yù)實(shí)驗(yàn)，然后檢測(cè)其表達(dá)效果，仔細(xì)觀察并選擇最理想的濃度用在正式實(shí)驗(yàn)(MTDH為1∶100，C-myc為1∶50)。MTDH和C-myc的檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化二步法，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均由同一技師進(jìn)行操作，嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)步驟，減少人為誤差。

1.3MTDH和C-myc結(jié)果判讀 MTDH陽性表達(dá)部位是細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，C-myc的陽性表達(dá)部位是細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核，以染成淺黃-棕褐色為著色細(xì)胞，以著色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比的評(píng)分之和進(jìn)行判定。顯色強(qiáng)度評(píng)分：0分，無；1分，弱；2分，中；3分，強(qiáng)。陽性細(xì)胞百分比評(píng)分：選擇5個(gè)400倍的視野，計(jì)數(shù)陽性率，取其平均值；0分，<5%；1分，≥5%且<25%；2分，≥25%且<50%；3分，≥50%且<75%；4分，≥75%。取兩項(xiàng)評(píng)分之和的值作為最終評(píng)分結(jié)果。以0～2分為陰性，>2分為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組MTDH和C-myc蛋白表達(dá) 兩組MTDH和C-myc表達(dá)陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見表1。

2.2觀察組中不同臨床特征中MTDH和C-myc表達(dá)的比較 MTDH和C-myc的表達(dá)均與腫瘤的最大徑和增殖指數(shù)相關(guān)，MTDH的表達(dá)與分化程度相關(guān)，C-myc的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。見表2。

2.3觀察組中MTDH和C-myc表達(dá)的相關(guān)性 MTDH和C-myc的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.52，P<0.05)。

表1 兩組中MTDH和C-myc蛋白陽性表達(dá)〔n(%)〕

表2 觀察組中不同臨床特征中MTDH和C-myc表達(dá)〔n(%)〕

3 討 論

侵襲性的胃腺癌進(jìn)展快，腫瘤細(xì)胞分化低，細(xì)胞體積小，易于直接蔓延和播散，對(duì)周圍組織的破壞能力強(qiáng)，病變進(jìn)展中相關(guān)蛋白可以出現(xiàn)明顯的表達(dá)失常〔6〕。分化是胃腺癌形成中內(nèi)在的調(diào)控作用，胃腺癌細(xì)胞常為低分化狀態(tài)，呈現(xiàn)幼稚的細(xì)胞形態(tài)。MTDH是近年發(fā)現(xiàn)的癌基因，其全長(zhǎng)為3 611 bp，包含11個(gè)內(nèi)含子和12個(gè)外顯子，位于人類8號(hào)染色體上，其是一種保守蛋白，也是一個(gè)Ⅰb型的膜蛋白〔7,8〕，分子量為64 kD，由于其富含賴氨酸和絲氨酸的殘基，可被翻譯后修飾〔9,10〕。C-myc是原癌基因，氨基端有兩個(gè)磷酸化修飾位點(diǎn)，均可以使C-myc形成泛素化而引起降解，因此C-myc在腫瘤中的嚴(yán)格調(diào)控是其平衡的重要方面〔11,12〕。

本研究結(jié)果提示MTDH和C-myc二者高表達(dá)是促進(jìn)胃腺癌形成的重要蛋白因素。MTDH高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖并使其抗凋亡作用增加，其途徑被認(rèn)為是受到PI3K信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用。MTDH還可以在轉(zhuǎn)錄水平活化核因子通路，參與周期素蛋白及Bcl-2等多種細(xì)胞的增殖過程〔13〕。MTDH的促侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制還可能是通過與內(nèi)皮細(xì)胞上未知受體的相互作用，同時(shí)活化一些與黏附因子相關(guān)的信號(hào)通路引起的〔14〕。張艷艷等〔15〕通過觀察MTDH在上皮性卵巢癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤中表達(dá)升高，同時(shí)其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子有明顯的促進(jìn)作用，認(rèn)為其高表達(dá)在促進(jìn)腫瘤過程生長(zhǎng)過程中，對(duì)血管生長(zhǎng)的調(diào)控是其機(jī)制之一。因此MTDH可能具有多種調(diào)節(jié)功能。C-myc也是促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的蛋白因素，當(dāng)外部和內(nèi)部的各種刺激使C-myc基因表達(dá)增加時(shí)，引起分裂周期中的靜息期細(xì)胞增殖，導(dǎo)致癌變〔16〕。本研究結(jié)果提示MTDH和C-myc二者高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞的失控性增殖。MTDH的表達(dá)與分化程度相關(guān)，提示MTDH參與腫瘤細(xì)胞的幼稚到成熟的演變過程中。C-myc高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤淋巴道播散的重要因素，因此C-myc高表達(dá)也是轉(zhuǎn)移相關(guān)的因子。MTDH和C-myc二者之間有一定的協(xié)同作用。MTDH啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)現(xiàn)其含有兩個(gè)能與C-myc結(jié)合的元件，這種結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)使MTDH可以與C-myc有一定的結(jié)合作用。此時(shí)C-myc作為轉(zhuǎn)錄因子通過結(jié)合E-box元件，提高了C-myc轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)〔17〕。

4 參考文獻(xiàn)

1陳衛(wèi)昌,史冬濤,郜恒駿,等.胃腺癌中β-連環(huán)蛋白、c-myc表達(dá)及其臨床意義〔J〕.中華消化雜志,2006;26(12):809-12.

2Nohata N,Hanazawa T,Kikkawa N,etal.Tumor suppressive microRNA-375 regulates oncogene AEG-1/MTDH in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC)〔J〕.J Hum Genet,2011;56(8):595-601.

3Sarkar D.AEG-1/MTDH/LYRIC in liver cancer〔J〕.Adv Cancer Res,2013;120(20):193-221.

4Munz M,Kieu C,Mack B,etal.The carcinoma-associated antigen EpCAM upregulates c-myc and induces cell proliferation〔J〕.Oncogene,2004;23(34):5748-58.

5Lan F,Wang H,Chen Y,etal.Hsa-let-7g inhibits proliferation of hepatocellular carcinoma cells by downregulation of c-Myc and upregulation of p16(INK4A)〔J〕.Int J Cancer,2015;128(2):319-31.

6李國(guó)華,錢 偉,王 靜,等.胃腺癌及癌旁正常組織中c-myc與鳥氨酸脫羧酶mRNA的表達(dá)及關(guān)系〔J〕.南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2006;46(3):114-6.

7Gong Z,Liu W,You N,etal.Prognostic significance of metadherin overexpression in hepatitis B,virus-related hepatocellular carcinoma〔J〕.Oncol Rep,2012;27(6):2073.

8Casimiro S,Fernandes A,Oliveira AG,etal.Metadherin expression and lung relapse in patients with colorectal carcinoma〔J〕.Clin Exp Metast,2014;31(6):689-96.

9Liang Y,Hu J,Li J,etal.Epigenetic activation of TWIST1 by MTDH promotes cancer stem-like cell traits in breast cancer〔J〕.Cancer Res,2015;75(17):3672-80.

10Zhang B,Liu X,He JR,etal.Pathologically decreased miR-26a antagonizes apoptosis and facilitates carcinogenesis by targeting MTDH and EZH2 in breast cancer〔J〕.Carcinogenesis,2011;32(1):2-3.

11Gu C,Lang F,Peng H,etal.MTDH is an oncogene in multiple myeloma,which is suppressed by Bortezomib treatment〔J〕.Oncotarget,2016;7(4):4559-69.

12Zhang H,Gao P,Fukuda R,etal.HIF-1 inhibits mitochondrial biogenesis and cellular respiration in VHL-deficient renal cell carcinoma by repression of C-myc activity〔J〕.Cancer Cell,2007;11(5):407-20.

13Zhang E,Cristofanilli M,Robertson F,etal.Genome wide proteomics of ERBB2 and EGFR and other oncogenic pathways in inflammatory breast cancer〔J〕.J Proteome Res,2013;12(6):2805-17.

14陳鷺姍,張 聲.MTDH在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用〔J〕.臨床與病理雜志,2010;30(3):243-6.

15張艷艷,李紅雨,張 慧,等.MTDH和VEGF在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志,2014;19(1):18-22.

16張全武,肖艷景,趙 馳,等.胃腺癌組織C-myc與hnRNP K表達(dá)及其臨床意義的初步探討〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2009;14(21):1661-3.

17Srivastava J,Siddiq A,Gredler R,etal.Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) and c-Myc cooperate to promote hepatocarcinogenesis〔J〕.Hepatology,2015;61(3):915-29.