磺胺-磺胺二甲基嘧啶污染對小白菜生長和生理指標(biāo)的影響及相關(guān)性分析

司雄元, 熊科勝, 徐慧敏, 檀華蓉, 司友斌

(1.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院, 安徽 合肥 230036; 2.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心, 安徽 合肥 230036; 3.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)田生態(tài)保育與污染防控安徽省重點實驗室, 安徽 合肥 230036)

多磺胺類抗生素(sulfonamides,SAs) 具有對氨基苯磺酞胺結(jié)構(gòu),是人工合成的的一類抗菌藥物,具有抗菌譜廣、使用方便、價格低廉、性質(zhì)穩(wěn)定、毒性小、口服吸收迅速以及療效好等優(yōu)點,在抗感染藥物市場中占有一定地位[1],是我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)中廣泛使用的獸用抗菌藥物之一[2]。由于抗生素的濫用、超量使用[3],同時抗生素的生物利用率有限,超過一半的抗生素隨著動物糞尿排出體外[4],致使環(huán)境中抗生素污染風(fēng)險備受關(guān)注,如環(huán)境(土壤、水體等)中SAs殘留量檢測及環(huán)境質(zhì)量影響評價[5-7]。

此外,已有報道顯示,蔬菜可以吸收環(huán)境中的SAs,蔬菜中均不同程度檢測出磺胺嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶和磺胺甲惡唑,其中青菜中SAs殘留量最高[8],根莖類蔬菜平均含量為289 μg·g-1,瓜果類蔬菜平均含量為143 μg·kg-1,葉菜類蔬菜平均含量為98.1 μg·kg-1[9]。然而對于磺胺脅迫條件下蔬菜的生理及生長研究還鮮有報道。植物種子的萌發(fā)和根長被認為是直觀、有效的污染物生態(tài)毒理效應(yīng)指標(biāo)[10]。污染脅迫會導(dǎo)致蔬菜的多種生理應(yīng)激反應(yīng),使其代謝加速和能量需求增加,同時伴隨著活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS)的過量產(chǎn)生。自由基累積過多會引起蛋白質(zhì)、核酸和甾醇類物質(zhì)損傷以及細胞膜脂質(zhì)過氧化等[11]。過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)是機體清除自由基的關(guān)鍵酶類,而丙二醛(MDA)作為脂類物質(zhì)氧化應(yīng)激的最終產(chǎn)物,可以衡量機體內(nèi)活性氧水平和氧化應(yīng)激程度[12]。葉綠素和可溶性蛋白質(zhì)是重要的生理生化指標(biāo),反映了外界環(huán)境因子的影響程度[13-14]。

筆者以小白菜(Brassicacampestris)為研究對象,探討其在SAs污染情況下種子萌發(fā)、抗氧化酶活性和MDA含量,以及葉綠素、蛋白質(zhì)含量等相關(guān)生理生長指標(biāo)的變化,對探究SAs對蔬菜生長及品質(zhì)的影響和保障食品安全具有現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

小白菜(Brassicacampestris)品種為無夕白,獲取于豐原種子公司;磺胺(SA)純度w>99%,上海阿拉丁公司;磺胺二甲基嘧啶(SMT)純度w>99%,上海阿拉丁公司。

1.2 實驗步驟

1.2.1SAs溶液的配制

采用超純水配制母液ρ均為500 mg·L-1,單一SAs污染溶液ρ分別設(shè)置為5、10、20、40和60 mg·L-1,復(fù)合SAs污染溶液SA和SMTρ分別設(shè)置為20和20、20和40、 40和20、40和40 mg·L-1。

1.2.2種子萌發(fā)實驗

將小白菜種子用φ為3%的雙氧水消毒浸泡15 min,用去離子水沖洗干凈,晾干待用。在9 cm直徑的培養(yǎng)皿中等距放置25粒大小均一、顆粒飽滿的種子,培養(yǎng)皿內(nèi)鋪有雙層濾紙,每培養(yǎng)皿分別加入5 mL不同濃度的單一及復(fù)合SAs溶液,每個處理濃度設(shè)置4個重復(fù)和空白對照(CK)。將培養(yǎng)皿密封后,置于溫度為25 ℃、濕度為80%的培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)。當(dāng)CK處理小白菜種子發(fā)芽率大于90%,平均根伸長至20 mm時實驗結(jié)束[14]。在根伸長抑制率為10%～60%區(qū)間內(nèi),用超純水配置SA和SMT的不同處理濃度,進行種子萌發(fā)實驗[15]。參照國家種子質(zhì)量檢驗標(biāo)準(zhǔn),于第3、7天記錄所有種子的發(fā)芽個數(shù),計算發(fā)芽勢、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)。

1.2.3水培實驗

將種子在電熱恒溫培養(yǎng)箱中催芽72 h后,將其轉(zhuǎn)移到含有不同濃度SAs的50 mL Hoagland營養(yǎng)液中培養(yǎng),置于陽光溫室(25 ℃),每個濃度梯度設(shè)4個重復(fù)。每2 d換一次培養(yǎng)液。從添加污染物開始至培養(yǎng)14 d后收獲幼苗,用于生長生理指標(biāo)的測定[16]。

1.3 測定方法與數(shù)據(jù)分析

1.3.1小白菜生長指標(biāo)的測定

(1) 種子萌發(fā)實驗:按國家種子質(zhì)量檢驗標(biāo)準(zhǔn),發(fā)芽勢于試驗第3天測定,發(fā)芽率則于試驗第7 天測定,各指標(biāo)計算公式如下:

發(fā)芽勢=前3 d內(nèi)正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100%，發(fā)芽率=前7 d內(nèi)正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100%，發(fā)芽指數(shù)=某段時間內(nèi)發(fā)芽總數(shù)/相應(yīng)的發(fā)芽時間。

(2)根長和芽長的測定:用直尺測量小白菜的根伸長和芽伸長。

(3)鮮重和干重的測定:每個處理濃度取10株小白菜樣品清洗干凈,用濾紙吸干表面水分后稱取鮮重,然后冷凍干燥48 h,稱取小白菜干重,將干燥好的小白菜樣品研磨混勻后,過0.150 mm孔徑篩保存于干燥器中備用。

1.3.2小白菜生理指標(biāo)的測定

葉綠素含量采用改進的混合液提取法[17]測定?？扇苄缘鞍踪|(zhì)含量采用考馬斯亮藍G250染色法[18]測定 。丙二醛的含量采用硫代巴比妥酸法測定[19]測定。過氧化物酶活性采用愈創(chuàng)木酚氧化法[20]測定。過氧化氫酶活性采用高錳酸鉀滴定法[21]測定。

1.3.3蔬菜中SAs的提取及高效液相色譜檢測方法

以φ=0.1%的H3PO4(pH=2.2)水溶液提取蔬菜中SAs;以Penomenex C18為分析柱,以w=0.5%(NH4)2HPO4-H3PO4溶液(pH=3.0)和乙腈為流動相,柱溫30 ℃,流速1.0 mL·min-1,檢測波長為270 nm的方法檢測蔬菜中SAs含量[22]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用DPS 7.05軟件進行LSD差異顯著性分析,采用SPSS 18.0軟件進行Pearson相關(guān)性分析,采用Origin 8.5軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 SA和SMT對小白菜生長的影響

2.1.1SA和SMT對種子萌發(fā)的影響

不同濃度SA和SMT污染對小白菜種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)的影響如表1所示。從表1可知,當(dāng)ρ(SAs)為0～40 mg·L-1時白菜種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)總體呈下降趨勢,但未達顯著水平;ρ(SA)達60 mg·L-1時對種子萌發(fā)仍無抑制作用,而當(dāng)ρ(SMT)達60 mg·L-1時對種子萌發(fā)有顯著抑制作用,這與金彩霞等[23]的研究結(jié)果一致,種子萌發(fā)過程中可從胚內(nèi)獲取養(yǎng)分,從而減少外界環(huán)境對種子萌發(fā)的影響。

表1SAs對白菜種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)的影響

Table1EffectofSAsonthegerminationvigor,germinationrateandgerminationindexofBrassicacampestrisseeds

污染物處理組ρ1)/(mg·L-1)發(fā)芽勢/%發(fā)芽率/%發(fā)芽指數(shù)/% 空白CK079.64±7.19a90.41±8.23a74.55±6.01a SAA1582.22±6.74a93.67±6.59a74.50±6.14a A21079.20±6.31a92.73±9.09a74.33±6.79a A32079.59±7.89a91.44±5.20a73.32±6.58a A44077.46±8.97a90.12±9.53a72.19±5.62a A56075.52.±6.17a87.69±8.21a71.43±6.16a SMTB1578.36±7.81a89.11±7.48a73.62±4.97a B21078.14±8.40a91.70±9.31a73.01±8.14a B32077.87±9.12a90.07±12.65a72.08±7.19a B44074.59±10.25a89.73±10.47a72.22±11.54a B56066.59±9.25b86.49±9.36b71.01±12.16b SA-SMTA3B320,2078.67±8.93a91.99±8.87a74.64±4.16a A3B420,4076.33±8.74a90.12±12.32a73.18±6.17a A4B340,2079.39±9.09a90.85±9.71a72.33±6.46a A4B440,4073.84±10.08a88.94±11.33a71.79±4.72a

同一列數(shù)據(jù)后英文小寫字母不同表示處理間某指標(biāo)差異顯著(P<0.05)。1)SA-SMT復(fù)合污染下，前者為SA濃度，后者為SMT濃度。

植物種子在一定濃度污染物脅迫下萌發(fā)表現(xiàn)為不受抑制或部分受抑制,可能是由于種皮阻礙了外界污染物向胚芽滲透,只有環(huán)境受到嚴(yán)重污染時種子萌發(fā)才會被抑制。SA-SMT復(fù)合污染ρ均為40 mg·L-1時對種子萌發(fā)仍無顯著抑制作用。

2.1.2SA和SMT對小白菜生長指標(biāo)(根伸長、芽伸長、干重和鮮重)的影響

從表2可知,當(dāng)ρ(SAs)為5 mg·L-1時,僅SMT對根伸長有顯著抑制作用,其他指標(biāo)均無顯著影響,但隨著SAs濃度增加,SA和SMT單一及復(fù)合污染對小白菜各生長指標(biāo)均存在顯著抑制作用。

MIGLIORE 等[24]研究表明植物體內(nèi)磺胺類污染物會與葉酸產(chǎn)生競爭吸收,降低植物體內(nèi)葉酸含量,葉酸影響嘌呤的合成,從而影響其正常的生理功能,使根伸長和芽伸長受到抑制。 單一污染下,SAs對根伸長的影響大于對芽伸長的影響,其中SMT對小白菜的生理指標(biāo)影響大于SA。SA和SMT單一污染對小白菜干重和鮮重有不同程度的影響,ρ(SMT)和ρ(SA)均為5 mg·L-1時,小白菜干重和鮮重有增加趨勢,但未達顯著水平,隨著SAs濃度的增加,小白菜鮮重和干重均有所下降?？傮w來說,單一SMT污染對小白菜生物量的影響要大于單一SA污染。

表2SAs污染對小白菜根伸長、芽伸長、鮮重和干重的影響

Table2EffectofSAsontherootlength,sprout,freshweightanddryweightofBrassicacampestris

污染物處理組ρ1)/(mg·L-1)根伸長/mm芽伸長/mm鮮重/〔g·(10株)-1〕干重/〔g·(10株)-1〕 空白CK029.95±0.54a14.30±0.28a7.13±0.33ab0.550±0.028ab SAA1529.43±0.33a14.50±0.36a7.15±0.06ab0.553±0.029a A21026.95±0.31b11.68±0.41c7.13±0.33ab0.550±0.018abA32019.55±1.35e10.43±0.72de7.15±0.17ab0.543±0.015abcdA44018.65±0.34f10.18±0.05def7.03±0.21abc0.537±0.022abcdeA56016.60±0.36g9.85±0.35fg7.00±0.18abc0.535±0.013abcde SMTB1527.43±0.33b14.00±0.26a7.25±0.17a0.555±0.038a B21025.45±0.31c12.48±0.39b7.25±0.17a0.545±0.019abcB32022.30±0.18d10.68±0.70d7.10±0.08ab0.537±0.010abcdeB44018.65±0.34f9.85±0.42fg7.00±0.12abc0.535±0.010abcdeB56014.10±0.77h9.38±0.40g6.80±0.20cd0.525±0.010bcde SA-SMTA3B320,2019.68±1.05e10.55±0.58d7.08±0.10ab0.532±0.005abcdeA3B420,4018.33±0.40f9.95±0.06ef6.93±0.05bcd0.520±0.001deA4B340,2018.38±0.44f9.95±0.10ef6.90±0.01bcd0.518±0.010cdeA4B440,4018.23±0.22f9.85±0.19fg6.70±0.16d0.515±0.006e

同一列數(shù)據(jù)后英文小寫字母不同表示處理間某指標(biāo)差異顯著(P<0.05)。1)SA-SMT復(fù)合污染下，前者為SA濃度，后者為SMT濃度。

SA-SMT復(fù)合污染時,當(dāng)ρ(SMT)為20 mg·L-1時,對根伸長和芽伸長在SA低濃度下呈拮抗作用,SA高濃度下為協(xié)同作用;對鮮重和干重均表現(xiàn)為協(xié)同作用。當(dāng)ρ(SMT)為40 mg·L-1時,僅SA低濃度下對芽伸長表現(xiàn)為拮抗作用,其他均為協(xié)同作用。當(dāng)ρ(SA)為20 mg·L-1時,僅SMT高濃度下對芽伸長表現(xiàn)為拮抗作用;當(dāng)ρ(SA)為40 mg·L-1時,SMT對各指標(biāo)均為協(xié)同抑制作用。

2.2 SA和SMT對小白菜生理的影響

2.2.1SA和SMT對葉綠素含量的影響

從表3可知,當(dāng)SAs單一污染為5 mg·L-1時,總?cè)~綠素含量與對照組無顯著差異,但隨著濃度的升高,各濃度處理間與對照組相比總?cè)~綠素、葉綠素a和葉綠素b含量均顯著降低(P<0.05),且SMT對總?cè)~綠素、葉綠素a的影響強于SA;低濃度下SMT對葉綠素b的抑制作用強于SA,但當(dāng)ρ達60 mg·L-1時SA抑制作用強于SMT。逆境可導(dǎo)致小白菜體內(nèi)活性氧的累積,進而使葉綠素加速分解[25]。SAs污染條件下,葉綠素a受到的抑制作用強于葉綠素b,這與葉綠素a較葉綠素b敏感、更易與活性氧發(fā)生反應(yīng)的結(jié)論[14]一致。當(dāng)SAs濃度較高,產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化作用時,細胞膜結(jié)構(gòu)和功能遭到破壞,葉綠素下降影響小白菜的生長發(fā)育,這與顧國平等[26]的研究結(jié)果相一致。SA-SMT復(fù)合污染對小白菜葉綠素含量的影響在較低濃度時表現(xiàn)為拮抗作用,在較高濃度時表現(xiàn)為協(xié)同作用。

2.2.2SA和SMT對小白菜過氧化物酶(POD)活性的影響

從圖1可知,在單一污染條件下,SA和SMT對小白菜POD活性影響趨勢相似,小白菜體內(nèi)POD活性均為先增加后降低。ρ(SA)為40 mg·L-1,ρ(SMT)在10 mg·L-1時POD活力達最高,各處理之間均有顯著差異(P<0.05),這與高若松[27]研究磺胺間甲氧嘧啶對大豆幼苗體內(nèi)POD活性變化一致。

單一污染下,20 mg·L-1SA使小白菜中POD活性較CK處理增加28.94%,而在20 mg·L-1SMT下,小白菜POD活性較CK處理增加42.10%,而在SA-SMT復(fù)合污染(ρ均為20 mg·L-1)下,小白菜POD活性較CK處理增加42.21%,比相同濃度的單一SMT污染的增加程度稍大。在SA-SMT復(fù)合污染(ρ均為40 mg·L-1)條件下,POD活性最低。SA-SMT 復(fù)合污染對小白菜POD活性的影響均表現(xiàn)為協(xié)同抑制作用。

表3SAs污染對小白菜葉綠素含量的影響

Table3EffectofSAsonthechlorophyllcontentofBrassicacampestris

污染物處理組ρ1)/(mg·L-1)w(總?cè)~綠素)/(mg·g-1)w(葉綠素a)/(mg·g-1)w(葉綠素b)/(mg·g-1) 空白CK01.820±0.014a1.308±0.015a0.475±0.029a SAA151.820±0.014a1.308±0.015a0.473±0.030a A2101.650±0.049b1.175±0.031c0.405±0.019b A3201.355±0.055c1.000±0.012de0.335±0.042c A4401.210±0.039ef0.938±0.038f0.249±0.033efA5601.060±0.038g0.833±0.036hi0.188±0.017hi SMTB151.818±0.015a1.228±0.024b0.420±0.034b B2101.268±0.043d1.038±0.046d0.310±0.028cdB3201.038±0.062g0.893±0.029g0.220±0.035fghiB4400.958±0.025h0.798±0.015i0.220±0.035fghiB5600.805±0.056j0.668±0.033j0.200±0.026ghi SA-SMTA3B320,201.260±0.041de0.968±0.029ef0.270±0.016deA3B420,401.170±0.000f0.958±0.019f0.225±0.013fghA4B340,200.973±0.026h0.853±0.019h0.233±0.033efgA4B440,400.883±0.026i0.813±0.019i0.183±0.021i

同一列數(shù)據(jù)后英文小寫字母不同表示處理間某指標(biāo)差異顯著(P<0.05)。1)SA-SMT復(fù)合污染下，前者為SA濃度，后者為SMT濃度。

各處理組含義見表1。直方柱上方英文小寫字母不同表示各處理組間POD活性差異顯著(P<0.05)。

各處理組含義見表1。直方柱上方英文小寫字母不同表示各處理組間CAT活性差異顯著(P<0.05)。

2.2.3SA和SMT污染對小白菜過氧化氫酶(CAT)活性的影響

圖2為在SA和SMT單一復(fù)合污染條件下小白菜CAT活性的變化,SA和SMT單一污染對小白菜CAT活性的影響不同,當(dāng)ρ(SA)<20 mg·L-1時小白菜CAT活性低于對照,但隨著SA濃度的增加,產(chǎn)生較多H2O2，誘導(dǎo)CAT活性升高[28]。而SMT對小白菜中CAT活性的影響呈現(xiàn)低濃度的激活作用和高濃度的抑制作用,且各處理之間均具有顯著性差異(P<0.05)。SA-SMT復(fù)合污染對CAT活性的抑制增加,為協(xié)同抑制作用。

2.2.4SA和SMT對小白菜可溶性蛋白質(zhì)含量的影響

從圖3可知,ρ(SA)≤20 mg·L-1時小白菜體內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)含量與CK差異未達顯著水平(P>0.05),當(dāng)ρ(SA)>20 mg·L-1時可溶性蛋白質(zhì)含量顯著下降。隨SMT污染濃度提高,可溶性蛋白質(zhì)含量不斷降低,這與趙保真[16]研究結(jié)果相類似,當(dāng)磺胺類藥物污染濃度超過小白菜的忍受閾值,蛋白合成就會受阻,含量下降。單一污染下,SMT污染對小白菜蛋白質(zhì)含量的影響要大于SA污染處理。在SA-SMT復(fù)合污染條件下,SA與SMT混合污染(ρ均為20 mg·L-1)會在一定程度上緩解SA對小白菜中蛋白質(zhì)含量的毒性效應(yīng)而表現(xiàn)為拮抗作用,ρ(SMT)濃度較高(40 mg·L-1)時與SA混合增加了SA對小白菜中蛋白質(zhì)的毒性效應(yīng),表現(xiàn)為協(xié)同作用。

各處理組含義見表1。小白菜質(zhì)量以鮮重計。直方柱上方英文小寫字母不同表示各處理組間可溶性蛋白質(zhì)含量差異顯著(P<0.05)。

2.2.5SA和SMT污染對小白菜丙二醛(MDA)含量的影響

從圖4可知,在SA單一污染條件下小白菜中MDA含量隨SA濃度增加而增加,當(dāng)ρ(SA)為60 mg·L-1時MDA含量顯著增加,這與徐敦明等[29]研究得到的農(nóng)藥對上海青(Brassicarapa)的影響結(jié)果一致。

各處理組含義見表1。直方柱上方英文小寫字母不同表示各處理組間MDA含量差異顯著(P<0.05)。

不同污染物對小白菜體內(nèi)MDA含量的影響不同,SMT單一污染時小白菜中MDA含量隨SMT濃度的増加呈先增加后降低趨勢,并達顯著水平。MDA含量與污染物濃度及抗氧化酶保護系統(tǒng)等有關(guān),MDA含量增加驗證了植物細胞啟動膜保護系統(tǒng)的應(yīng)激機制[30]。當(dāng)ρ(SMT)≥40 mg·L-1時小白菜體內(nèi)MDA含量下降，可能與白菜中SMT的吸收速率降低及抗氧化酶保護的滯后性有關(guān)。SA和SMT復(fù)合污染時MDA含量也呈降低趨勢。

2.3 小白菜對SA和SMT的吸收及富集

從表4可知，小白菜對SA和SMT的吸收累積有一定差異性，隨著SA和SMT濃度的增加，小白菜中SA和SMT含量也增加，累積量表現(xiàn)為SMT>SA。在低濃度處理下，小白菜體內(nèi)SA和SMT含量差異不明顯，只有在高濃度時小白菜體內(nèi)SA和SMT積累量才呈顯著差異。當(dāng)ρ為60 mg·L-1時，白菜體內(nèi)SMT含量最高，累積量達1.618 mg·kg-1，而SA累積量只有0.873 mg·kg-1。

表4不同濃度污染下小白菜中SA和SMT含量

Table4ContentsofSAandSMTinBrassicacampestrisunderdifferentconcentrationsofpollution

ρ/(mg·L-1)w(SA)/(mg·kg-1)富集系數(shù)w(SMT)/(mg·kg-1)富集系數(shù) 0NDNDNDND 5NDND0.023±0.002a0.004 100.056±0.034a0.0060.037±0.014a0.004 200.171±0.012b0.0070.637±0.110b0.031 400.452±0.094c0.0110.865±0.073c0.021 600.873±0.150d0.0141.618±0.102d0.026

ND表示未檢出。同一列數(shù)據(jù)后英文小寫字母不同表示處理間某指標(biāo)差異顯著(P<0.05)。

富集系數(shù)指植物體內(nèi)抗生素含量與溶液中該抗生素含量的比值,是評價植物富集抗生素能力的指標(biāo)之一,它反映了植物對抗生素的吸收能力大小。富集系數(shù)越大,富集能力越強[31]。從表4可知,ρ(SAs)為5～60 mg·L-1時,小白菜對SA的富集系數(shù)為0～0.014,對SMT的富集系數(shù)為0.004～0.031。隨著濃度的升高,小白菜對SA的富集系數(shù)呈升高趨勢,而對SMT的富集系數(shù)呈先升高后降低趨勢。相同濃度下小白菜幼苗對SA和SMT的富集系數(shù)整體上為SMT>SA,說明小白菜在幼苗期更容易從環(huán)境中吸收SMT。

2.4 SAs與小白菜生長生理指標(biāo)的相關(guān)性分析

SAs與其他生長生理指標(biāo)相關(guān)性分析見表5～6。小白菜體內(nèi)SA、SMT含量與SAs污染濃度呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,且與SA的相關(guān)性高于SMT;SAs污染濃度及小白菜體內(nèi)吸收SAs與各指標(biāo)具有類似的相關(guān)性,但不同磺胺抗生素種類與各指標(biāo)的相關(guān)性存在差異。

環(huán)境中和小白菜體內(nèi)SA濃度與CAT、POD活性均無相關(guān)性,與MDA含量均呈正相關(guān)關(guān)系,與其他指標(biāo)呈不同程度的負相關(guān)關(guān)系,環(huán)境中SA濃度與各指標(biāo)的相關(guān)性大小順序為葉綠素含量>可溶性蛋白質(zhì)含量>鮮重>MDA含量>根長>干重>芽長;小白菜體內(nèi)SA濃度與各指標(biāo)的相關(guān)性大小順序為MDA含量>可溶性蛋白質(zhì)含量>葉綠素>鮮重>根長>干重>芽長。

表5SA污染濃度與小白菜生長生理指標(biāo)的相關(guān)性分析

Table5CorrelationbetweenSAconcentrationswithgrowthandphysiologicalindexesinBrassicacampestris

指標(biāo)SA加入SA吸收根長芽長鮮重干重葉綠素含量 POD活性CAT活性可溶性蛋白質(zhì)含量 SA吸收0.986** 根長-0.911*-0.853* 芽長-0.825*-0.750 0.944** 鮮重-0.920**-0.932**0.7310.648 干重-0.827*-0.7610.972**0.875*0.638葉綠素含量-0.973**-0.940**0.978**0.916*0.837* 0.916* POD活性0.036-0.124-0.342-0.4920.098-0.387-0.182 CAT活性-0.093-0.082-0.126-0.2090.070-0.201-0.0660.171可溶性蛋白質(zhì)含量-0.925**-0.945**0.7420.7150.969**0.6100.858*0.1140.019 MDA含量0.912*0.949**-0.744-0.681-0.824*-0.606-0.857*-0.262-0.158-0.900*

**表示P<0. 01, *表示P<0.05。

表6SMT污染濃度與小白菜生長生理指標(biāo)的相關(guān)性分析

Table6CorrelationbetweenSMTconcentrationswithgrowthandphysiologicalindexesinBrassicacampestris

指標(biāo)SMT加入SMT吸收根長芽長鮮重干重葉綠素含量 POD活性CAT活性可溶性蛋白質(zhì)含量 SMT吸收0.979** 根長-0.988**-0.967** 芽長-0.917*-0.902*0.957** 鮮重-0.920**-0.955**0.868*0.790 干重-0.884*-0.922**0.883*0.905*0.912* 葉綠素含量-0.858*-0.848*0.914*0.968**0.7180.900* POD活性-0.570-0.6020.4430.3190.8020.5600.197 CAT活性-0.805-0.828*0.7910.840*0.865*0.971**0.839*0.599 可溶性蛋白質(zhì)含量-0.989**-0.990**0.987**0.939**0.923**0.902*0.871*0.5470.811 MDA含量-0.247-0.2230.094-0.0900.4560.138-0.1930.861*0.2180.171

**表示P<0. 01, *表示P<0.05。

環(huán)境中和小白菜體內(nèi)SMT濃度與各生長生理指標(biāo)均呈負相關(guān)關(guān)系,且與MDA含量的相關(guān)性均較差,其中環(huán)境中SMT濃度與其他各指標(biāo)間的相關(guān)性大小順序為可溶性蛋白質(zhì)含量>根長>鮮重>芽長>干重>葉綠素>CAT活性>POD活性;小白菜體內(nèi)SMT含量與其他指標(biāo)的相關(guān)性大小順序為可溶性蛋白質(zhì)含量>根長>鮮重>干重>芽長>葉綠素>CAT活性>POD活性。比較發(fā)現(xiàn),環(huán)境中和小白菜體內(nèi)SA濃度與小白菜的葉綠素、可溶性蛋白質(zhì)含量間均呈極顯著相關(guān)關(guān)系,環(huán)境中和小白菜體內(nèi)SMT濃度與小白菜的可溶性蛋白質(zhì)含量、根長和鮮重間均呈極顯著相關(guān)關(guān)系。

SA-SMT復(fù)合污染下,當(dāng)ρ(SA)為20 mg·L-1時SMT僅與MDA含量呈正相關(guān)關(guān)系,與其他各指標(biāo)均呈負相關(guān)關(guān)系,SMT與葉綠素總量呈極顯著相關(guān)關(guān)系,與CAT活性呈顯著相關(guān)關(guān)系;當(dāng)ρ(SA)為40 mg·L-1時SMT濃度與芽伸長、根伸長、鮮重、可溶性蛋白質(zhì)含量、POD活性及MDA含量的相關(guān)性均有所提高,而與葉綠素含量和CAT活性相關(guān)性有所下降,SMT濃度僅與POD活性呈極顯著相關(guān);當(dāng)ρ(SMT)為20 mg·L-1時SA與各指標(biāo)相關(guān)關(guān)系均未達顯著水平,當(dāng)ρ(SMT)為40 mg·L-1時,SA僅與可溶性蛋白質(zhì)含量呈極顯著負相關(guān)關(guān)系。

3 結(jié)論

不同SAs對小白菜種子萌發(fā)的影響不同,SMT對小白菜種子萌發(fā)的抑制作用強于SA;SAs單一及復(fù)合污染下,隨著SAs污染濃度的增加，小白菜的生理和生長均受到不同的抑制作用,小白菜的根伸長、芽伸長、鮮重和干重均降低,小白菜的葉綠素含量、可溶性蛋白質(zhì)含量總體呈下降趨勢;不同SAs對小白菜中POD活性、CAT活性的影響不同,總體均呈下降趨勢。單一污染下,MDA含量隨SA濃度增加而增加,而隨SMT濃度增加，MDA含量先增加后降低,復(fù)合污染下呈下降趨勢。小白菜體內(nèi)SAs含量隨環(huán)境中SAs濃度的增加而增加,小白菜對不同SAs的富集能力不同,對SMT的富集大于SA。相關(guān)性分析結(jié)果表明,SAs單一及復(fù)合污染條件下,SAs分別與小白菜的可溶性蛋白質(zhì)含量、葉綠素含量、CAT活性和POD活性的相關(guān)性較好。在SAs污染下,小白菜的生理生長指標(biāo)及品質(zhì)均受到不同程度的影響,SAs也會通過富集進入小白菜體內(nèi),進而帶來潛在的食品安全風(fēng)險。

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