溶血患兒與非溶血患兒COHb、參數(shù)的變化觀察

王琦

(南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 南陽(yáng) 473000)

新生兒溶血可以導(dǎo)致患兒病死率的顯著上升，其病因主要與血型抗體對(duì)于不同抗原表位的結(jié)合導(dǎo)致的患兒紅細(xì)胞的溶解有關(guān)。流行病學(xué)研究顯示，ABO新生兒溶血的發(fā)生率可達(dá)223－455/1萬(wàn)人左右，且在二胎或者既往具有溶血性疾病的孕產(chǎn)婦中，其發(fā)病率更高[1，2]。直接抗人球蛋白試驗(yàn)等血清學(xué)檢查評(píng)估ABO新生兒溶血的靈敏度較低，但其檢測(cè)過(guò)程不夠簡(jiǎn)便易行。新生兒碳氧血紅蛋白（COHb）、網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)等指標(biāo)，能夠反應(yīng)新生兒溶血過(guò)程中紅細(xì)胞分解、血紅素的代謝等病理過(guò)程，并能夠反應(yīng)患兒體內(nèi)造血功能的代償程度。部分研究證實(shí)了COHB在新生兒溶血中的異常表達(dá)，揭示高表達(dá)的COHB是促進(jìn)新生兒核黃疸、膽紅素腦病等不良臨床結(jié)局的重要因素[3－5]，但缺乏對(duì)于COHB的診斷學(xué)價(jià)值的分析，本次研究選取90例ABO溶血患兒，研究了COHB、網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)等指標(biāo)的異常表達(dá)及其診斷學(xué)效能。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取90例ABO溶血患兒 （病例組），病例收集時(shí)間2014年2月－2016年9月，選取同期非溶血病理性黃疸兒90例作為對(duì)照組，同期健康新生兒90例（健康組）。

病例組，男58例、女32例，分娩孕周 37～41周， 平均 39.6±1.5 周， 新生兒體質(zhì)量 3304.2±391.2g，發(fā)病日齡 2.9±0.5d，母親血型均為 O 型，患兒血型：A型50例、B型40例，游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性例72例。對(duì)照組，男54例、女36例，分娩孕周37～41 周， 平均 39.4±1.2 周， 新生兒體質(zhì)量 3341.7±366.9g，發(fā)病日齡 2.8±0.5d，母親血型均為 O 型，患兒血型：A型53例、B型37例，游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性例70例。健康組，男50例、女40例，分娩孕周37～41 周， 平均 39.2±1.3 周， 新生兒體質(zhì)量 3321.6±300.2g，母親血型均為O型，新生兒血型：A型49例、B型41例。病例組和對(duì)照組的性別、分娩孕周、新生兒體質(zhì)量、發(fā)病日齡、新生兒血型比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；三組新生兒的性別、分娩孕周、體質(zhì)量、母體及新生兒血型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴ABO溶血的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；⑵孕周37～41周；⑶體質(zhì)量＞1.5kg；⑷入組前患兒未接受退黃治療；⑸日齡＜10d；⑹本研究獲得研究對(duì)象父母的知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴具有宮內(nèi)窘迫、窒息病史；⑵合并妊娠糖尿病、高血壓；⑶伴有免疫功能障礙、遺傳性疾?。虎劝橛挟惓Ｆ渌膊。B內(nèi)出血、敗血癥等）。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)方法 采集靜脈血約5ml并分作兩份，一份自然抗凝后以3000r/min離心10min，取上清液采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中COHb、STB水平，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作；另一份置于枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)，加入RET、HFR、MFR檢測(cè)試劑盒后，利用免疫發(fā)光法檢測(cè)RET、HFR、MFR水平，試劑盒購(gòu)自上海奧普生物醫(yī)藥有限公司，具體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS 16.0，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，組間比較采用t檢驗(yàn)，繪制ROC曲線(xiàn)，選取最佳診斷臨界值時(shí)對(duì)應(yīng)的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率及AUC值；P值＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對(duì)照組的COHb、STB水平指標(biāo)比較病例組的COHb水平顯著的高于對(duì)照組和健康組（P＜0.05），病例組的STB水平與對(duì)照組均高于健康組 （P＜0.05）；對(duì)照組的COHb水平高于健康組（P＜0.05）；（表 1）。

表1 病例組和對(duì)照組的COHb、STB水平指標(biāo)比較（±s）

表1 病例組和對(duì)照組的COHb、STB水平指標(biāo)比較（±s）

組別病例組對(duì)照組健康組F值P值n C O H b（%） S T B（μ m o l/L）9 0 9 0 9 0 1.8 5±0.3 3 1.5 1±0.3 6 1.0 4±0.2 9 3 2.9 6 4＜0.0 0 1 2 6 7.8±8 9.1 2 6 2.0±9 4.2 1 1.0±5.2 1 5 8.4 0 1＜0.0 0 1

2.2 病例組和對(duì)照組的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)指標(biāo)比較病例組的RET、HFR、MFR檢測(cè)值顯著的高于對(duì)照組和健康組（P＜0.05），病例組的 LFR 測(cè)定值顯著的低于對(duì)照組和健康組（P＜0.05）；對(duì)照組的 RET、HFR、MFR 檢測(cè)值顯著的高于健康組（P＜0.05），對(duì)照組的LFR測(cè)定值顯著的低于健康組 （P＜0.05）；（表 2）。

表2 病例組和對(duì)照組的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)指標(biāo)比較（±s）

表2 病例組和對(duì)照組的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)指標(biāo)比較（±s）

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2.3 COHb、RET、HFR、MFR、LFR 鑒 別 診 斷 ABO溶血患兒的 ROC曲線(xiàn)分析 COHb、RET、HFR、MFR、LFR鑒別診斷ABO溶血患兒的AUC值分別為 0.887、0.924、0.865、0.872、0.856，COHb、RET、HFR、MFR、LFR鑒別診斷ABO溶血患兒的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率詳見(jiàn)表3；（表3）。

表 3 COHb、RET、HFR、MFR、LFR 鑒別診斷ABO溶血患兒的ROC曲線(xiàn)分析

3 討論

ABO新生兒溶血的發(fā)生，是現(xiàn)階段臨床上較為常見(jiàn)的新生兒疾病，其疾病的發(fā)生發(fā)展能夠在下列幾個(gè)方面影響到新生兒臨床結(jié)局[6，7]：⑴ABO新生兒溶血導(dǎo)致的高膽紅素血癥，促進(jìn)新生兒腦組織的氧化應(yīng)激損傷，加劇了神經(jīng)元細(xì)胞膜的破壞；⑵ABO新生兒溶血的發(fā)生，能夠加劇肝腎功能損傷，促進(jìn)心肌細(xì)胞膜的破壞等，增加患兒的病死率。因此ABO新生兒溶血的早期診斷具有重要的臨床意義，能夠早期指導(dǎo)臨床上光照治療等，改善高膽紅素血癥表現(xiàn)，降低多器官損害的并發(fā)癥的發(fā)生[8，9]。但迄今為止雖然直接抗球蛋白試驗(yàn)的檢查，能夠作為臨床上評(píng)估溶血發(fā)生的主要指標(biāo)，但其對(duì)采血、檢測(cè)、設(shè)備要求及費(fèi)用等方面均有較為嚴(yán)格的要求，而且抗球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)難以評(píng)估患兒體內(nèi)的造血系統(tǒng)的代償性表現(xiàn)，只能在協(xié)助診斷方面具有一定的參考價(jià)值，而對(duì)于治療、預(yù)后評(píng)估等方面無(wú)相應(yīng)的預(yù)測(cè)作用。

COHb是血紅素分解為膽紅素的過(guò)程中一氧化碳與氧氣結(jié)合的產(chǎn)物，其能夠較為靈敏的反應(yīng)紅細(xì)胞破壞、膽紅素生成等病理過(guò)程。已經(jīng)證實(shí)的是COHB在RH溶血患兒體內(nèi)存在明顯的波動(dòng)，其檢測(cè)能夠?yàn)镽H溶血的發(fā)生提供較為理想的篩查指標(biāo)，其篩查的靈敏度可達(dá) 65%以上[10，11]；高、中、低熒光網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率（HFR、MFR、LFR）是評(píng)估骨髓造血系統(tǒng)紅細(xì)胞成熟過(guò)程的重要指標(biāo)，并能夠反應(yīng)溶血新生兒體內(nèi)的網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟程度[12，13]。

本次研究中并未發(fā)現(xiàn)兩組患兒的血清中STB的表達(dá)差異，提示STB并不能作為臨床上評(píng)估新生兒溶血病情或者早期診斷篩查的依據(jù)，這主要與膽紅素代謝的多種因素影響有關(guān)，新生兒溶血或者其他原因?qū)е碌募t細(xì)胞的溶解代謝性疾病等，均可能促進(jìn)STB的上升；COHB的表達(dá)具有明顯的差異，其中病例組患兒血清中COHB的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，COHB的上升主要與患兒體內(nèi)一氧化碳對(duì)于血紅蛋白的結(jié)合程度、紅細(xì)胞分解代謝的速率等因素有關(guān)，由于新生兒ABO溶血的紅細(xì)胞破裂后血紅蛋白、含鐵血黃素等的分解，一氧化碳結(jié)合循環(huán)血中代謝產(chǎn)物的能力明顯增強(qiáng)。楊?lèi)?ài)娟等[14，15]研究者也發(fā)現(xiàn)，ABO溶血的新生兒，COHB的濃度可平均上升25%-55%左右，患者的體內(nèi)COHB的濃度越高，臨床預(yù)后越差、病程越長(zhǎng)。HFR、MFR是評(píng)估骨髓造血系統(tǒng)中不成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量的重要指標(biāo)，相關(guān)指標(biāo)的上升程度越高，骨髓造血的代償性表現(xiàn)越為明顯，本次研究中病例組新生兒體內(nèi)的HFR、MFR等指標(biāo)明顯上升，這主要與ABO溶血導(dǎo)致的骨髓造血系統(tǒng)的激活有關(guān)，而網(wǎng)織紅細(xì)胞比例的上升則符合溶血性貧血的一般性表現(xiàn)。LFR測(cè)定值顯著的低于對(duì)照組，其原因一方面與本次研究的臨床資料的收集偏差關(guān)，另一方面可能與LFR測(cè)定的臨床影響因素較為復(fù)雜有關(guān)。最后，本次研究發(fā)現(xiàn) COHb、RET、HFR、MFR、LFR 對(duì)鑒別診斷ABO溶血患兒的診斷價(jià)值較高，臨床上可以通過(guò)評(píng)估RET等指標(biāo)，對(duì)于抗球蛋白抗體檢測(cè)尚無(wú)開(kāi)展或者無(wú)相關(guān)檢測(cè)條件的醫(yī)院，可以考慮檢測(cè)上述相關(guān)指標(biāo)來(lái)評(píng)估新生兒ABO溶血的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，ABO溶血新生兒 COHb、RET、HFR、MFR顯著的升高，STB水平顯著的降低，對(duì)于早期診斷ABO溶血新生兒具有一定的臨床價(jià)值。

[1]Akanmu AS，Oyedeji OA，Adeyemo TA，et al.Estimating the Risk of ABO Hemolytic Disease of the Newborn in Lagos[J].J Blo，2015，25(4)：1-5.

[2]Malhotra S，Dhawan HK，Jain A，et al.Acute Hemolytic Transfusion Reaction in a Patient with Bombay Phenotype：Implications for ABO Grouping[J].Indian J Hematol Blotol，2014，30(1)：108-110.

[3]李小紅.臍血IgG血型抗體與新生兒溶血病相關(guān)性探討[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2017，35(4)：631-632.

[4]劉瓊，劉蜜.血清學(xué)診斷ABO新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)研究[J].湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2016，13(6)：6-10.

[5]劉建成，邵峰，楊潔，等.寧夏回族地區(qū)2015年ABO/Rh新生兒溶血病檢測(cè)結(jié)果分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38(7)：979-981.

[6]Beken S，Hirfanoglu I，TurkyilmazC，etal.Intravenous Immunoglobulin G Treatment in ABO Hemolytic Disease of the Newborn，is it Myth or Real?[J].Indian J Hematol Blo，2014，30(1)：12-15.

[7]Doyle B，Quigley J，Lambert M，et al.A correlation between severe haemolytic disease of the fetus and newborn and maternal ABO blood group[J].Transfusion Medicine，2014，24(4)：239-243.

[8]Ohsumi A，Chen F，Yurugi K，et al.Incidence and pattern of hemolytic anemia after minor ABO-mismatched living-donor lobar lung transplantation[J].Surgery Today，2013，43(11)：1250-1253.

[9]毛淑清，王晴，黃宇翔，等.許昌地區(qū)新生兒溶血病產(chǎn)前、產(chǎn)后檢測(cè)與發(fā)病情況調(diào)查分析[J].中國(guó)臨床研究，2014，27(5)：580-582.

[10]黃海東，周美華，徐慧芳，等.228例疑似新生兒溶血病患兒相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果分析 [J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2016，26(19)：2819-2820.

[11]陳倩，張志亮，唐秋萍.212例ABO新生兒溶血病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2015，26(13)：1932-1934.

[12]辛榮傳.新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)在臨床中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(6)：680-681.

[13]顏沛云，朱萬(wàn)壽，凌衛(wèi)賓，等.新生兒溶血病血型分布及血清學(xué)檢測(cè)的臨床意義[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床，2015，26(3)：85-86.

[14]施麗，田雪梅，何明.伊犁地區(qū)1034例新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)輸血雜志，2015，28(3)：289-291.

[15]楊?lèi)?ài)娟，李磊，王艷維，等.碳氧血紅蛋白在新生兒abo溶血病診斷中的價(jià)值[J].中國(guó)婦幼健康研究，2017，28(2)：121-124.