尿沉渣染色在尿全自動(dòng)分析儀人工復(fù)檢中的應(yīng)用

杜雙迎

（吉林省吉林市人民醫(yī)院，吉林 吉林 132001）

尿液中有很多有形成分，不同的染料會(huì)使不同的有形成分著色，這樣，就可以快速準(zhǔn)確的鑒別這些成分[1]。目前實(shí)驗(yàn)室尿沉渣檢查基本以流式細(xì)胞儀及鏡下形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)為主，但是兩種方法都存在一定誤差，必要時(shí)都需要人工復(fù)檢[2]。在復(fù)檢的過(guò)程中，一些有形成分難以鑒別。尿液中的有形成分中，難以鑒別的是紅細(xì)胞與一些結(jié)晶，白細(xì)胞與移行上皮細(xì)胞等，它們的大小相似，形態(tài)結(jié)構(gòu)也難以區(qū)分，如果能找到一種適合的染料，快速將有形成分染上不同的顏色，達(dá)到準(zhǔn)確判定的目的[3-4]。本項(xiàng)目旨在于篩選不同的染料，將一些難以辨別的成分區(qū)分開來(lái)，及時(shí)，準(zhǔn)確的發(fā)出報(bào)告，在提高實(shí)驗(yàn)室效率的同時(shí)，也能為臨床提供科學(xué)的診斷依據(jù)，更好的為患者服務(wù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與對(duì)象：儀器：OLYPUMS顯微鏡，朗邁尿全自動(dòng)分析儀，10 mL尿沉渣離心管。染色試劑：尿沉渣Sternheimer-Malbin改良染色液（S-M法，批號(hào)408111）、Sternheimel染色液（S法，批號(hào)409111）、阿利新蘭-中性紅染色液（阿-中法，批號(hào)419321）。取80份人工復(fù)檢異常尿液標(biāo)本10 mL置入尿沉渣離心管中，其中男性標(biāo)本45例，女性標(biāo)本35例。

1.2 檢測(cè)方法：所有尿液標(biāo)本進(jìn)行400轉(zhuǎn)/分離心5 min，棄上清液，取下層尿沉渣充分混勻（約0.2 mL），進(jìn)行尿沉渣染色分析。所有檢測(cè)由本科室專業(yè)檢驗(yàn)師負(fù)責(zé)檢驗(yàn)，每份標(biāo)本都在10 min之內(nèi)檢測(cè)完畢，每日質(zhì)控均在受控范圍。記錄不同染色時(shí)間，同時(shí)進(jìn)行染色效果的比較，根據(jù)尿沉渣染色結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：選擇SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與記錄，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 染色時(shí)間對(duì)比：S-M、S、阿-中染色法最佳時(shí)間都為2～5 min，染色0～2 min與5～8 min的效果為良，對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具體見表1。S染色法背景清晰或有少量雜質(zhì)分布；S-M染色法背景的清晰度與S法的染色效果相近；阿-中染液染色背景雜質(zhì)較多，有形成分結(jié)構(gòu)模糊。

2.2 半定量結(jié)果對(duì)比：半定量結(jié)果顯示S與S-M染色法對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），S、S-M染色法與阿-中染色法比較差異明顯（P＜0.05）。見表2。

表2 不同尿沉渣染色在尿全自動(dòng)分析儀人工復(fù)檢的半定量結(jié)果對(duì)比（n）

3 討 論

尿液分析是三大臨床檢驗(yàn)常規(guī)之一，分析的內(nèi)容包括干化學(xué)檢查、外觀及物理性狀檢查、顯微鏡檢查等。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，尿全自動(dòng)分析儀得到了廣泛應(yīng)用，能分析尿液中的各種指標(biāo)，可隨檢驗(yàn)科的不同需要而修改，從而指導(dǎo)進(jìn)行治療。

尿液沉渣顯微鏡檢查是尿全自動(dòng)分析重要內(nèi)容之一，也是泌尿系統(tǒng)鑒別診斷、病情判斷、疾病診斷、療效觀察的金標(biāo)準(zhǔn)，也是經(jīng)典手工法[5]。由于尿沉渣中有形成分的多樣性和對(duì)染料親和力的不同，導(dǎo)致尿沉渣在不同的染色方法下的特征也各不相同，為此在臨床上要合理選擇染色方法[6]。不同的染料著色的重點(diǎn)不同，理論上講結(jié)晶不著色，只有由蛋白質(zhì)組成的各種細(xì)胞才能著色，而且不同的染料染后的顏色也不同，如何能將不同成分著上不同的顏色是研究的難點(diǎn)。

S-M染色法就是采用結(jié)晶紫一沙黃染色，染色方便，染料價(jià)廉易得，可進(jìn)一步提高管型、紅細(xì)胞、白細(xì)胞的鑒別，白細(xì)胞經(jīng)S-M染色后，細(xì)胞核為淡藍(lán)或藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)不染色或淡藍(lán)色，是尿液常規(guī)沉渣染色檢查的常用方法。S染色法中的胞質(zhì)及RNA被派洛寧染成紅色，細(xì)胞核及管型基質(zhì)可被阿爾新藍(lán)染成藍(lán)色，易于鏡下觀察[7]。但是上述兩種方法在檢測(cè)中都存在紅細(xì)胞染色欠佳等缺陷。本研究顯示S-M、S、阿-中染色法最佳時(shí)間都為2～5 min，染色0～2 min與5～8 min的效果為良，對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；S染色法背景清晰或有少量雜質(zhì)分布；S-M染色法背景的清晰度與S法的染色效果相近；阿-中染液染色背景雜質(zhì)較多，有形成分結(jié)構(gòu)模糊。通過(guò)具體分析，阿-中染色法染色5 min后有大量褐色集結(jié)，致使識(shí)別和分類困難；S-M與S法的背景較清晰，但有形成分識(shí)別困難，結(jié)構(gòu)模糊。

表1 不同尿沉渣染色在尿全自動(dòng)分析儀人工復(fù)檢中的應(yīng)用（n=80）

由于尿沉渣中各種成分的復(fù)雜性、易變性、多樣性，對(duì)于檢測(cè)的要求更高。尿沉渣染色顯微鏡檢查是目前輔助臨床醫(yī)師診斷泌尿系統(tǒng)疾病的主要方法，臨床上合理選擇染色方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義[8]。本研究半定量結(jié)果顯示S與S-M染色法對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），S、S-M染色法與阿-中染色法比較差異明顯（P＜0.05）。結(jié)果說(shuō)明尿沉渣S-M染色法、S染色法染色效果最佳，更適合于臨床尿沉渣染色顯微鏡檢查。不過(guò)在臨床檢查中，各種尿液的pH不同，試驗(yàn)時(shí)要進(jìn)行調(diào)節(jié)；尿液必須新鮮，不同的染色液要注意其pH變化，保障染色質(zhì)量。當(dāng)尿沉渣染色法的檢測(cè)結(jié)果與其他方法不一致時(shí)，需要密切結(jié)合臨床資料，才能得到客觀、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。對(duì)于可疑或確診為腎病者進(jìn)行診斷和觀察療效時(shí)，必須采取傳統(tǒng)手工法檢測(cè)，以減少漏診和誤診；采集標(biāo)本后30 min內(nèi)要送至檢驗(yàn)室，采集過(guò)程要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程避免標(biāo)本被污染。總之，尿沉渣染色在尿全自動(dòng)分析儀人工復(fù)檢中的應(yīng)用有很好的效果，特別是S、S-M染色法對(duì)于不同細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)清晰易于識(shí)別，有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1] 樊黎,張昭平.尿沉渣白細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)菌計(jì)數(shù)對(duì)男性淋菌性尿道炎的診斷價(jià)值[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐,2017,2(5):141-142.

[2] 夏建新,桂瑞豐,王長(zhǎng)林.尿白細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)在男性淋菌性尿道炎診斷中的價(jià)值[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(15):2160-2162.

[3] 李琳.非染色尿沉渣鏡檢法用于診斷小兒血尿癥的效果觀察[J].中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理,2016,7(1):162-163.

[4] 蔡桂蓮,韓全良.尿沉渣檢測(cè)在男性淋菌性尿道炎中的診斷價(jià)值[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2016,26(9):379.

[5] 嚴(yán)雪梅,劉寶,夏曙華.5種尿沉渣染色方法的效果比較[J].貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,40(7):747-749,753.

[6] 陳錕,許育,徐佳學(xué),等.尿沉渣檢測(cè)在男性淋菌性尿道炎中的診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2015,30(8):791-793.

[7] 萬(wàn)芳,陳恒,杜利軍,等.Sysmex UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀計(jì)數(shù)L型大腸埃希菌研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(7):855-857.

[8] 蔡旭君,韋建武,韓瑩,等.尿沉渣涂片瑞氏-姬姆薩染色紅細(xì)胞形態(tài)分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(20):2724-2725.