烏梅有機(jī)酸的提取工藝及其抑菌活性

張丹丹，姜修婷

(青島科技大學(xué) 化工學(xué)院，山東 青島 266000)

烏梅別名酸梅、黃仔、合漢梅或干枝梅，為薔薇科落葉喬木植物梅Prunusmume的近成熟果實(shí)，經(jīng)煙火熏制而成[1-2]。烏梅始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為收澀藥，性平味酸，歸肝、脾、肺和大腸經(jīng)，具有斂肺澀腸、生津止渴和驅(qū)蟲(chóng)止痢的功效，可用于肺虛久咳、久痢滑腸、虛熱消渴和膽道蛔蟲(chóng)癥等[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明：烏梅主要功能為抑菌、護(hù)肝，具有抗腫瘤、抗過(guò)敏、抗氧化、抗生育和治療結(jié)腸炎等作用[4]。烏梅的主要成分為有機(jī)酸、氨基酸、糖類、揮發(fā)油、脂類、甾醇類、生物堿和黃酮類等。其中有機(jī)酸類可以軟化血管，延緩血管硬化，具有防老抗衰、抗菌作用[5]。

張小瓊等[6]、楊瑩菲等[7]以及Seneviratne等[8]的實(shí)驗(yàn)表明：烏梅醇煎液對(duì)炭疽桿菌、白喉和類白喉?xiàng)U菌、枯草桿菌、葡萄球菌(金黃色、檸檬色和白色)及肺炎球菌皆有抑制作用，對(duì)大腸桿菌、痢疾桿菌、變形桿菌、傷寒、副傷寒桿菌、綠膿桿菌和霍亂弧菌等腸內(nèi)致病菌也有效果，而對(duì)甲或乙種鏈球菌無(wú)作用。體積分?jǐn)?shù)為50%烏梅煎液(紙片法)對(duì)百日咳桿菌和腦膜炎球菌作用效果最強(qiáng)，對(duì)肺炎球菌和溶血性鏈球菌作用效果中等，對(duì)牛型布氏桿菌和白喉?xiàng)U菌也有作用，而對(duì)流感桿菌和綠色鏈球菌無(wú)作用。烏梅乙醇浸液對(duì)一些革蘭陽(yáng)性和陰性細(xì)菌以及人型結(jié)核桿菌皆有顯著抗菌作用[9]。烏梅粉在培養(yǎng)皿上對(duì)白色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌及傷寒桿菌作用效果較強(qiáng)。

目前，在對(duì)烏梅有機(jī)酸提取工藝研究中以熱回流法較多。熱回流法提取效率較高，但溶劑消耗量大，操作較麻煩，耗時(shí)耗能；并且由于操作的局限性，在實(shí)際生產(chǎn)中較少被采用。超聲波提取法是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種有效的物質(zhì)提取方法，具有有效成分提取率高、時(shí)間短、溫度低和適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn);利用超聲波的機(jī)械效應(yīng)、熱效應(yīng)與空化效應(yīng)，使得有效成分能更好地在溶劑中溶解與擴(kuò)散，因此可有效提高產(chǎn)物的得率。

筆者及所在課題組采用超聲波提取法對(duì)烏梅有機(jī)酸的提取工藝進(jìn)行了研究，對(duì)其具體參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，并對(duì)其抑菌活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，以便提高烏梅有機(jī)酸得率，從而達(dá)到更好的抑菌效果，以期為烏梅的合理炮制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，以及為今后深入研究和開(kāi)發(fā)應(yīng)用烏梅提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

烏梅粉,由新鮮烏梅曬干后粉碎，粒度為840 μm，西安四季生物科技有限公司；枸櫞酸標(biāo)準(zhǔn)品,上海哈靈生物科技有限公司；NaOH(分析純)、無(wú)水乙醇(分析純)、NaCl(分析純)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；牛肉浸膏、蛋白胨和瓊脂,北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司；菌種(枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和四聯(lián)球菌)，由青島綠谷菌種保藏中心提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

M297714型電子天平，北京賽多利斯天平有限公司；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；DZKW-4型電子恒溫水浴鍋，天津泰斯特儀器有限公司；SK60-09119 4型兩裝高速中藥粉碎機(jī)，北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司；KH-250DB型數(shù)控超聲波清洗器，昆山禾創(chuàng)超聲儀有限公司；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；P7021TP-6型微波爐，佛山市格蘭仕電器有限公司；SW-CJ-1F型單人凈化雙面工作臺(tái)，上海予卓?jī)x器有限公司；ZDJ-5B型自動(dòng)滴定儀，上海雷磁儀器廠；立式壓力蒸氣滅菌器，GZX-9240 MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；生化培養(yǎng)箱，上海一恒科技有限公司。

1.3 培養(yǎng)基制備

1.3.1 液體培養(yǎng)基

準(zhǔn)確稱取NaCl 0.25 g、牛肉浸膏 0.15 g、蛋白胨0.5 g于50 mL小燒杯中，加入50 mL蒸餾水?dāng)嚢杈鶆蚝螅吹靡后w培養(yǎng)基(澄清透明的淡黃色溶液)[10]。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的NaOH溶液調(diào)pH至7.4～7.6，再用移液管移取已配好的培養(yǎng)基置于試管中，20 mL試管中移取4 mL，50 mL試管中移取5 mL分裝于12支試管中，用硅膠塞塞住試管口。用報(bào)紙包裹后放入滅菌鍋中，121 ℃高溫蒸氣滅菌15 min。冷卻后取出培養(yǎng)基，分別接種大腸桿菌、四聯(lián)球菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌，每種菌種分別用4個(gè)培養(yǎng)基。

1.3.2 固體培養(yǎng)基

準(zhǔn)確稱取NaCl 5 g、牛肉浸膏3 g、蛋白胨10 g放入1 000 mL大燒杯中，加水1 000 mL，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH至7.4～7.6，再加入瓊脂15～20 g，把大燒杯放在加熱套上加熱，并不斷攪拌至溶液呈淡黃色澄明狀態(tài)。把1 000 mL的固體培養(yǎng)基平均倒入已滅菌的4個(gè)大錐形瓶中，塞上硅膠塞。用報(bào)紙包裹好瓶口放入滅菌鍋中，121 ℃高溫蒸氣滅菌15 min。冷卻至不燙手后，取出4個(gè)錐形瓶。把已配好的4種液體培養(yǎng)基分別倒入4個(gè)錐形瓶中，輕輕搖勻。把錐形瓶中的液體倒入培養(yǎng)皿中，至稍高于培養(yǎng)皿高度的一半即可，大約可倒4～6個(gè)培養(yǎng)基。

1.4 烏梅有機(jī)酸得率的測(cè)定方法

將提取的烏梅提取液經(jīng)抽濾濃縮成浸膏后,用水稀釋，然后采用電位滴定法[11]，用NaOH滴定液(0.1 mol/L)進(jìn)行滴定。每1 mL的NaOH滴定液(0.1 mol/L)相當(dāng)于6.404 mg的枸櫞酸(C6H8O7)[12]。

1.5 提取工藝的單因素試驗(yàn)

1.5.1 烏梅中有機(jī)酸的提取方法考察

分別考察冷浸提取法、熱回流提取法、超聲波提取法和微波提取法對(duì)烏梅中有機(jī)酸得率的影響[13]。具體方法：每份均取烏梅粉2 g，按料液比(g/mL)為1∶ 25加入體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇溶液，按各提取方法處理(冷浸為24 h，熱回流為1 h，超聲為30 min和微波為5 min)后，提取溶液減壓抽濾后得到濾液，濃縮成浸膏，將粗提物用蒸餾水定容或溶解，定容后用NaOH滴定液進(jìn)行滴定，從而得出其有機(jī)酸的含量。

1.5.2 烏梅中有機(jī)酸提取乙醇濃度的考察

采用料液比(g/mL)1∶ 25，提取時(shí)間60 min，超聲100 kHz，溫度60 ℃，分別按80%、85%、90%、95%和100%的乙醇體積分?jǐn)?shù)配制好乙醇溶液后，按料液比(g/mL)1∶ 25備好平行4組實(shí)驗(yàn)，得烏梅提取液[14]，經(jīng)抽濾、濃縮成浸膏，將粗提物用蒸餾水溶解定容，后用NaOH滴定液進(jìn)行滴定，計(jì)算有機(jī)酸的含量，篩選有機(jī)酸得率較高的條件，再進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

1.5.3 烏梅中有機(jī)酸的提取時(shí)間考察

采用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇，料液比(g/mL)1∶ 25，超聲100 kHz，溫度60 ℃，提取時(shí)間分別為30、40、50、60和70 min平行5組試驗(yàn)得烏梅提取液，經(jīng)抽濾、濃縮成浸膏，將粗提物用蒸餾水溶解定容，后用NaOH滴定液進(jìn)行滴定計(jì)算有機(jī)酸的含量，分別測(cè)定提取液中有機(jī)酸得率。

1.5.4 烏梅中有機(jī)酸的提取超聲頻率考察

采用體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇，提取時(shí)間60 min，料液比(g/mL)1∶ 25，溫度60 ℃，超聲頻率分別為70、80、90、100和110 kHz進(jìn)行平行5組試驗(yàn)得烏梅提取液后配制溶液，測(cè)定有機(jī)酸含量，并計(jì)算出有機(jī)酸得率。

1.5.5 烏梅中有機(jī)酸的提取料液比考察

采用體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇，提取時(shí)間60 min，超聲100 kHz，溫度60 ℃，配制好乙醇溶液后，按料液比(g/mL)分別為1∶ 15、1∶ 20、1∶ 25、1∶ 30和1∶ 35的比例,進(jìn)行平行的5組試驗(yàn)后配制溶液，測(cè)定有機(jī)酸含量并計(jì)算出有機(jī)酸得率[15-16]。

1.6 正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上選擇優(yōu)化后的試驗(yàn)因素，以有機(jī)酸得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用四因素三水平的正交試驗(yàn)，按照L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)優(yōu)化各因素水平，以優(yōu)化超聲提取法提取烏梅中有機(jī)酸的最佳工藝參數(shù)[17]。

1.7 驗(yàn)證試驗(yàn)

按照正交試驗(yàn)考察后的工藝條件進(jìn)行提取，得到3批烏梅有機(jī)酸提取液，經(jīng)抽濾、濃縮成浸膏，將粗提物用蒸餾水溶解定容后，用NaOH滴定液進(jìn)行滴定，計(jì)算有機(jī)酸得率。

1.8 抑菌試驗(yàn)

抑菌試驗(yàn)采用打孔法[18]。具體操作步驟：用打孔器在含菌培養(yǎng)基上打出直徑為5 mm的圓孔，用微量移液器注射100 μL水溶烏梅提物于圓孔中，重復(fù)3次，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的硫酸鏈霉素水溶液為藥物對(duì)照，以無(wú)菌水為空白對(duì)照。倒置平皿37 ℃培養(yǎng)18 h后，用游標(biāo)卡尺量取抑菌直徑，得抑菌圈計(jì)算公式：抑菌圈直徑=抑菌直徑-5。

最低抑菌質(zhì)量濃度(MIC)的測(cè)定：取無(wú)菌96孔板，于A～F行第1～9孔內(nèi)加入培養(yǎng)液100 μL，然后第1孔中加入受試藥物(500 mg/mL，以生藥計(jì))100 μL，混勻后取出100 μL移至第2孔中，依此類推進(jìn)行倍比稀釋至第7孔，混勻后棄去100 μL。藥物最終質(zhì)量濃度依次為(以生藥計(jì))250、125、62.5、31.25、15.625和7.812 5 mg/mL。其中C 和F 行第1～7孔內(nèi)不加菌液，加無(wú)菌生理鹽水100 μL，作為陰性對(duì)照；A、B、D和E行第1～7孔分別加入4種菌液100 μL，作為樣品組；第8列不加藥物，加入菌液100 μL，作為陽(yáng)性對(duì)照；第9列加入無(wú)菌水100 μL，混勻后取出100 μL棄去，不加菌液，加無(wú)菌生理鹽水100 μL，作為空白對(duì)照。將96孔板置于37 ℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h，觀察孔內(nèi)細(xì)菌生長(zhǎng)情況，澄清者為無(wú)菌生長(zhǎng)，混濁者為有菌生長(zhǎng)。無(wú)菌生長(zhǎng)的各孔中，質(zhì)量濃度最低的孔對(duì)應(yīng)的濃度即為MIC。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取工藝單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 烏梅中有機(jī)酸提取方法的確定

考察烏梅中有機(jī)酸的提取方法,結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可知：微波提取和冷浸法的提取效果不佳；熱回流提取有機(jī)酸得率較好，但耗時(shí)較長(zhǎng)；超聲波提取法下的有機(jī)酸得率最高，耗時(shí)短且操作簡(jiǎn)單。由此確定提取方法為超聲波提取法，并進(jìn)一步考察單因素試驗(yàn)。

圖1 提取方法對(duì)有機(jī)酸得率的影響Fig.1 The influence of the extraction method to the organic acid yield

2.1.2 烏梅中有機(jī)酸提取乙醇分?jǐn)?shù)的確定

考察烏梅中有機(jī)酸得率隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的變化，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可知：乙醇體積分?jǐn)?shù)小于95%時(shí)，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)增大，有機(jī)酸得率顯著增大；但在乙醇體積分?jǐn)?shù)大于95%時(shí)，隨乙醇體積分?jǐn)?shù)增大而有機(jī)酸得率下降。分析原因，一方面可能是由于有機(jī)酸在植物體內(nèi)通常與蛋白質(zhì)、多糖以氫鍵和疏水鍵形式形成穩(wěn)定的化合物，而有機(jī)溶劑具有氫鍵斷裂的作用，因此復(fù)合體系有利于有機(jī)酸的提??；另一方面可能是由于乙醇的溶劑分子與水分子之間作用力不同而造成其對(duì)有機(jī)酸溶解性能的改變。因此，綜合考慮選擇體積分?jǐn)?shù)95%為最佳的乙醇提取濃度。

圖2 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)有機(jī)酸得率的影響Fig.2 The influence of the ethanol concentration to the organic acid yield

2.1.3 烏梅中有機(jī)酸提取時(shí)間的確定

考察烏梅中有機(jī)酸得率隨熱浸時(shí)間的變化，結(jié)果見(jiàn)圖3。由圖3可知：熱浸時(shí)間在60 min前，有機(jī)酸得率隨提取時(shí)間延長(zhǎng)而顯著增大；而60 min后，有機(jī)酸得率有所下降。從理論上來(lái)說(shuō)，提取時(shí)間越長(zhǎng)，提取也應(yīng)該越充分。但是在提取過(guò)程中會(huì)有空氣進(jìn)入提取液，使有機(jī)酸類物質(zhì)與O2接觸，從而發(fā)生氧化、聚合等反應(yīng)，使有機(jī)酸提取率下降。在實(shí)際生產(chǎn)中，延長(zhǎng)提取時(shí)間，還會(huì)延長(zhǎng)生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)成本，增大能量消耗。因此，選擇最佳提取時(shí)間為60 min。

圖3 提取時(shí)間對(duì)有機(jī)酸得率的影響Fig.3 The influence of the extraction time to the organic acid yield

2.1.4 烏梅中有機(jī)酸提取超聲頻率的確定

考察烏梅中有機(jī)酸得率隨超聲頻率的變化，結(jié)果見(jiàn)圖4。由圖4可知：在超聲頻率為70～100 kHz時(shí)，有機(jī)酸得率隨超聲頻率的增大而增大，超聲頻率為100 kHz時(shí)，有機(jī)酸得率達(dá)11.28%。當(dāng)超聲頻率超過(guò)100 kHz時(shí)，有機(jī)酸的得率開(kāi)始降低，這可能是因?yàn)槌曨l率越大對(duì)細(xì)胞的破碎作用越強(qiáng)；但當(dāng)超聲頻率超過(guò)一定范圍時(shí)，提取液流動(dòng)速度加快，減少了物料在超聲場(chǎng)中的停留時(shí)間，細(xì)胞破碎作用也就隨之減弱[19]。另外，高功率作用可能會(huì)導(dǎo)致有機(jī)酸成分的降解，從而影響有機(jī)酸得率。因此,綜合考慮選擇超聲頻率以100 kHz為宜。

圖4 超聲頻率對(duì)有機(jī)酸得率的影響Fig.4 The influence of the ultrasonic frequency to the organic acid yield

2.1.5 烏梅中有機(jī)酸提取料液比的確定

考察烏梅中有機(jī)酸得率隨料液比的變化，結(jié)果見(jiàn)圖5。由圖5可知：料液比(g/mL)在1∶ 25前，隨著乙醇量的增加，有機(jī)酸得率逐漸增大，但在料液比(g/mL)為1∶ 25后，有機(jī)酸得率反而下降。這是因?yàn)樵趥髻|(zhì)過(guò)程中，隨著提取溶劑逐漸增加，溶液中有機(jī)酸質(zhì)量濃度逐漸稀釋，增加了固相與液相間有機(jī)酸濃度差，傳遞速度加快；當(dāng)料液比(g/mL)達(dá)到1∶ 25時(shí)，有機(jī)酸得率達(dá)到最大值，但料液比(g/mL)大于1∶ 25時(shí)有機(jī)酸得率開(kāi)始下降，可能是因?yàn)榱弦罕冗^(guò)大時(shí)，超聲波破碎細(xì)胞的阻力增大，使細(xì)胞破碎程度下降，從而降低了有機(jī)酸得率[20]。另外，料液比越大，在濃縮過(guò)程中消耗的時(shí)間越長(zhǎng)，使有機(jī)酸被氧化的可能性提高，同時(shí)也增大了濃縮時(shí)的能量消耗。因此，綜合考慮有機(jī)酸得率和節(jié)約原料，最終選擇最佳料液比(g/mL)為1∶ 25。

圖5 料液比對(duì)有機(jī)酸得率的影響Fig.5 The influence of the material liquid ratio to the the organic acid yield

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，以有機(jī)酸得率為主要考查指標(biāo)，采用L9(34) 正交試驗(yàn)考察(A)乙醇體積分?jǐn)?shù)、(B)料液比(g/mL)、(C)超聲提取時(shí)間和(D)超聲提取頻率對(duì)烏梅中有機(jī)酸提取的影響。

根據(jù)單因素結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)因素及水平見(jiàn)表1，結(jié)果見(jiàn)表2，各效應(yīng)的曲線圖見(jiàn)圖6。

根據(jù)表2中極差R分析可知:影響有機(jī)酸得率的因素中A、B這2個(gè)因素對(duì)烏梅中有機(jī)酸得率的影響均具有顯著性，其中料液比對(duì)有機(jī)酸得率的影響最大，而超聲提取時(shí)間和頻率對(duì)有機(jī)酸得率的影響相對(duì)較小，且主次順序?yàn)锽、A、D和C。

由正交試驗(yàn)所確定的提取有機(jī)酸的最佳提取方案是A2B2C2D3，即提取溶劑為95%乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù))、料液比(g/mL)為1∶ 25、提取時(shí)間為60 min以及提取頻率為100 kHz。

表1 正交試驗(yàn)因素及水平

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

圖6 各因素效應(yīng)影響曲線Fig.6 The effect curve of each factor

2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

選擇最佳提取工藝參數(shù)：超聲波提取法，提取溶劑為95%乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù))、料液比(g/mL)為1∶ 25、提取時(shí)間為60 min、提取頻率為100 kHz，進(jìn)行3次平行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，烏梅有機(jī)酸得率結(jié)果分別為12.17%、12.25%和12.11%，平均值為12.17%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.57%，表明利用正交試驗(yàn)進(jìn)行烏梅總有機(jī)酸提取工藝優(yōu)化是可行的。

2.4 抑菌試驗(yàn)結(jié)果

最佳提取工藝下得到的烏梅有機(jī)酸提取物經(jīng)抽濾濃縮處理后，再用適量蒸餾水溶解，加入到含菌培養(yǎng)基中進(jìn)行抑菌試驗(yàn)和最小抑菌質(zhì)量濃度試驗(yàn)，抑菌圈試驗(yàn)結(jié)果分別見(jiàn)圖7和表3，最小抑菌質(zhì)量濃度試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可知：烏梅有機(jī)酸提取液在31.25 mg/mL時(shí)，對(duì)大腸桿菌、四聯(lián)球菌、枯草桿菌和金黃色葡萄球菌均具有明顯的抑制作用。對(duì)應(yīng)的抑菌圈直徑分別為10.23、9.58、8.93和9.97 mm，4種菌種其最小的抑菌質(zhì)量濃度分別為31.25、31.25、15.625和15.625 mg/mL。

圖7 抑菌圈試驗(yàn)Fig.7 Inhibition zone tests

實(shí)驗(yàn)組抑菌圈直徑/mm大腸桿菌四聯(lián)球菌枯草桿菌金黃色葡萄球菌空白對(duì)照0000提取液樣品10.239.588.939.97藥物對(duì)照9.524.535.344.67

表4 最小抑菌質(zhì)量濃度試驗(yàn)結(jié)果

注：-為沒(méi)長(zhǎng)菌；+為少量長(zhǎng)菌；++為適度長(zhǎng)菌；+++為大量長(zhǎng)菌。

3 結(jié)論

通過(guò)對(duì)烏梅中有機(jī)酸提取工藝方法進(jìn)行的探索，最后采用有機(jī)酸得率最高、耗時(shí)最短且操作簡(jiǎn)單的超聲波提取法提取有機(jī)酸。通過(guò)正交試驗(yàn)確定烏梅有機(jī)酸提取方法的最佳條件：提取溶劑為95%乙醇(體積分?jǐn)?shù))、料液比(g/mL)為1∶ 25、提取時(shí)間60 min以及超聲頻率100 kHz。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：烏梅中有機(jī)酸的最佳得率為12.17%，該方法高效、快速。抑菌試驗(yàn)顯示：烏梅有機(jī)酸提取液對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和四聯(lián)球菌均有明顯的抑制作用，最小抑菌質(zhì)量濃度分別為15.625、15.625、31.25和31.25 mg/mL。

本研究表明烏梅有機(jī)酸具備優(yōu)良的抗菌活性，其作為植物提取物活性成分可用于抑菌防腐，且具有天然性、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，具備開(kāi)發(fā)成為天然植物源性抗菌添加劑的潛力。

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