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    長奈瑟菌致血流感染1例

    2022-03-30 10:40:24葉青萍任建敏丁卉麗水市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科浙江麗水323000
    臨床檢驗(yàn)雜志 2022年2期
    關(guān)鍵詞:奈瑟巧克力平板

    葉青萍,任建敏,丁卉(麗水市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,浙江麗水323000)

    長奈瑟菌(Neisseriaelongata)屬于奈瑟菌屬。奈瑟菌屬細(xì)菌主要寄居于人或動(dòng)物的口咽、鼻咽、胃腸道及泌尿生殖道等部位,人源性奈瑟菌除淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌被認(rèn)為是致病菌外[1],其他大部分奈瑟菌(包括長奈瑟菌)被認(rèn)為是健康人群口咽部的定植菌,通常不致病。由長奈瑟菌引起的感染在國內(nèi)鮮有報(bào)道,僅有的幾例報(bào)道中以引起感染性心內(nèi)膜炎多見[2-3]?,F(xiàn)我院從1例膽道感染患者的血培養(yǎng)中分離到該菌,報(bào)道如下。

    1 病例摘要

    患者,男,57歲,因“肝癌術(shù)后一年半,發(fā)熱3 d”于2021年6月13日收住麗水市中心醫(yī)院。患者1年余前診斷為肝癌,曾多次入院治療。本次入院3 d前患者無明顯誘因下出現(xiàn)發(fā)熱,自述最高體溫39 ℃,自行使用吲哚美鋅栓退熱治療后體溫好轉(zhuǎn)。1 d前再次發(fā)熱,遂至我院急診就診,床邊心臟超聲示:左室擴(kuò)大,主動(dòng)脈瓣輕-中度關(guān)閉不全,二尖瓣輕度關(guān)閉不全。心肺聽診無殊。血液檢查示:快速超敏C反應(yīng)蛋白100.79 mg/L,白細(xì)胞10.5×109/L,中性粒細(xì)胞比例77.4%,淋巴細(xì)胞比例8.2%,紅細(xì)胞3.07×1012/L,血紅蛋白96 g/L,降鈣素原2.05 ng/mL,凝血酶原時(shí)間13.0 s,國際標(biāo)準(zhǔn)化比率1.20,凝血酶時(shí)間16.8 s,D-二聚體1.07 mg/L,總膽紅素56.9 μmol/L,肌酸激酶<20 U/L,CK同工酶18 U/L,乳酸脫氫酶288 U/L,尿素9.3 mmol/L,擬“膿毒血癥、肝惡性腫瘤”收住入院。6月13日于我院急診送檢血培養(yǎng),15 h后陸續(xù)有3瓶血培養(yǎng)報(bào)陽,經(jīng)質(zhì)譜鑒定為長奈瑟菌(Neisseriaelongata)。予氧頭孢烯類拉氧頭孢針靜滴、喹諾酮類莫西沙星口服抗感染,治療后體溫正常,C反應(yīng)蛋白、降鈣素原等感染指標(biāo)較前好轉(zhuǎn),考慮抗感染治療有效。本案例中的患者為惡性腫瘤末期,全身情況欠佳,在體溫控制正常之后,臨床主要予對(duì)癥支持姑息治療,改善癥狀,緩解痛苦。

    2 細(xì)菌鑒定

    2.1細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定 分別采集患者雙側(cè)2套血培養(yǎng)送檢,血培養(yǎng)采用VIRTUO全自動(dòng)微生物培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行,14 h 22 min后左側(cè)厭氧瓶報(bào)陽,14 h 45 min后右側(cè)厭氧瓶報(bào)陽,17 h后左側(cè)需氧瓶報(bào)陽。取陽性瓶內(nèi)菌懸液直接涂片革蘭染色(珠海貝索公司),鏡下可見革蘭陰性桿菌,轉(zhuǎn)種于哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力瓊脂平板(溫州康泰公司),置35 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h后,在血平板和巧克力平板上生長良好,呈1~2 mm、淡黃色、圓形、濕潤、凸起的菌落(見圖1),純培養(yǎng)物涂片呈陰性球桿菌。觸酶陰性,氧化酶陽性。3瓶陽性報(bào)警瓶轉(zhuǎn)種后的純培養(yǎng)物經(jīng)法國生物梅里埃Vitek MS質(zhì)譜儀鑒定均為長奈瑟菌(Neisseriaelongata),置信度均為99.9%。將血平板及巧克力平板繼續(xù)溫育3~4 d后,呈現(xiàn)典型的奈瑟菌屬細(xì)菌的菌落形態(tài)(見圖2)。

    圖1 35 ℃、5%CO2培養(yǎng)24 h菌落形態(tài)(左:血平板;右:巧克力平板)

    圖2 35 ℃、5%CO2培養(yǎng)4 d菌落形態(tài)(左:血平板;右:巧克力平板)

    2.2分子生物學(xué)方法 將細(xì)菌送至杭州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司利用IonPGM個(gè)人化操作基因組測序儀進(jìn)行測序,其方法為檢測16S rDNA V2、V3、V4、V6、V7、V8、V9可變區(qū),得出的序列號(hào)經(jīng)BLAST比對(duì),顯示相似度最高的為NO.NR_104944.1,百分比為99.66%,第二NO.NR_025893.1為99.33%,第三NO.NR_028900.1為96.63%,前兩名均為Neisseriaelongata。

    3 討論

    本例患者為中老年男性,肝癌術(shù)后1年半,期間進(jìn)行了多次手術(shù)及術(shù)后化療等診療措施?;颊哂?021年4月15日曾行“膽管支架植入術(shù)”,術(shù)前、術(shù)后反復(fù)發(fā)熱,血培養(yǎng)曾提示陰溝腸桿菌感染,診斷“膽道感染,敗血癥”,此次因發(fā)熱入院,在急診室就診時(shí)予以雙側(cè)雙瓶送檢血培養(yǎng),在4瓶中出現(xiàn)3瓶陽性,鑒定結(jié)果均為長奈瑟菌(Neisseriaelongata),同時(shí)血液中降鈣素原、CRP等感染指標(biāo)均提示升高,可以排除污染可能。

    關(guān)于長奈瑟菌引起的感染國內(nèi)報(bào)道極少,同時(shí)奈瑟菌屬一般被認(rèn)為是健康人群口咽部及鼻咽部的正常菌群,很少引起感染,主要見于牙科手術(shù)及介入性心血管操作后[2]。本例患者在發(fā)病前并未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)的介入性操作,其感染途徑及機(jī)制尚不明確??赡芘c床邊心臟超聲中提示的主動(dòng)脈瓣及二尖瓣關(guān)閉不全有關(guān),已知心臟瓣膜病是感染性心內(nèi)膜炎的主要發(fā)病因素之一,且該患者為肝癌術(shù)后,多次接受化療,免疫功能低下。

    奈瑟菌屬細(xì)菌鏡下形態(tài)大多為直徑不超過2 μm的球菌,單個(gè)或成雙排列。但長奈瑟菌為短桿狀[4],本例患者血培養(yǎng)直接涂片表現(xiàn)為革蘭陰性桿菌,在血平板及巧克力平板上生長良好,轉(zhuǎn)種后純培養(yǎng)物涂片呈陰性球桿菌。直接通過Vitek MS質(zhì)譜儀鑒定為長奈瑟菌(Neisseriaelongata),由于其形態(tài)與屬內(nèi)其他菌種相差較大,筆者再次通過質(zhì)譜儀進(jìn)行復(fù)查,結(jié)果與首次一致,置信度均為99.9%。觸酶陰性,氧化酶陽性,這與參考資料描述一致[1]。最終利用16S rRNA分子生物學(xué)方法鑒定,結(jié)果亦為長奈瑟菌(Neisseriaelongata)。奈瑟菌屬細(xì)菌一般為專性需氧菌,而該患者首先陽性報(bào)警的是厭氧瓶,經(jīng)分析可能有以下幾點(diǎn)原因。首先,本實(shí)驗(yàn)室采用的是生物梅里埃公司提供的普通型厭氧瓶,達(dá)不到完全的厭氧環(huán)境,但是其營養(yǎng)成分要比需氧瓶更好一些,通過查閱本實(shí)驗(yàn)室過去2年間報(bào)陽的其他專性需氧菌(如銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌)的生長情況,也一樣存在厭氧瓶先報(bào)陽的情況;其次,該患者首先報(bào)陽的厭氧瓶血量充足,而4瓶里最終沒有報(bào)陽的那瓶血量只有1 mL,筆者認(rèn)為這也是需要考慮的一部分原因,同時(shí)也應(yīng)該引起采血人員的注意,在平時(shí)的工作中要注意足量規(guī)范采血。

    本案例報(bào)道的長奈瑟菌引起敗血癥,基本可以明確,關(guān)于是否引起感染性心內(nèi)膜炎尚沒有明確的臨床證據(jù)證明,但是也應(yīng)該引起注意。由于該細(xì)菌比較少見,使用一般的生化反應(yīng)鑒定容易誤檢為其他細(xì)菌,若是臨床送檢為單套血培養(yǎng),極易被當(dāng)成污染菌而漏檢,由于本院已經(jīng)施行雙側(cè)雙瓶送檢,并且引進(jìn)了Vitek MS質(zhì)譜儀,才最終得以正確的鑒定。由于長奈瑟菌引起感染的病例報(bào)道較少,對(duì)該菌的認(rèn)識(shí)尚淺,也沒有相關(guān)的藥敏試驗(yàn)方法推薦?;颊呷朐汉笈R床予氧頭孢烯類拉氧頭孢針2 g q12 h靜滴、喹諾酮類莫西沙星0.4 g qd口服抗感染,抗感染治療后體溫恢復(fù)正常,考慮抗感染治療有效,故在收到實(shí)驗(yàn)室陽性結(jié)果后仍考慮繼續(xù)當(dāng)前治療。

    綜上所述,臨床微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)該對(duì)長奈瑟菌引起一定的重視,提高該菌的鑒定準(zhǔn)確性,并進(jìn)一步研究完善其相關(guān)資料,為以后的預(yù)防、診治提供依據(jù)。同時(shí)應(yīng)該提倡臨床及時(shí)規(guī)范送檢血培養(yǎng),按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行足量采血,做到雙側(cè)雙瓶送檢,而微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員也應(yīng)該加強(qiáng)與臨床的及時(shí)有效溝通,在遇到一些少見的細(xì)菌時(shí)更應(yīng)如此。本病例中長奈瑟菌的及時(shí)準(zhǔn)確鑒定依賴于質(zhì)譜技術(shù)的引進(jìn),表明質(zhì)譜技術(shù)的普及對(duì)臨床疑難菌和少見菌的快速鑒定有重大意義,可為臨床及時(shí)診治提供可靠的依據(jù)。

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