絕經后女性冠心病患者趨化因子CCL5水平與冠狀動脈病變程度的相關性△

錢 芳 李 華 瞿秋紅 王育斌

(武漢科技大學醫(yī)學院生理與病理生理學系 武漢 430065)

心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)是影響人類生存和生活質量的“頭號殺手”，冠心病(coronary heart disease，CHD)在CVD中位居前列[1]。CHD確切機制尚不清楚，目前普遍認為其發(fā)生發(fā)展與遺傳、環(huán)境因素有關。流行病學資料顯示，絕經前的女性CHD發(fā)病率明顯少于同齡男性，但絕經后發(fā)病率則迅速上升。超敏C反應蛋白(hs-CRP)是已被證實的引發(fā)CVD的獨立危險因素，其水平對CVD的干預及預后有重要參考價值。趨化因子RANTES/CCL5(CCL5)是近年發(fā)現(xiàn)的一類小分子量炎癥性細胞因子，具有趨化和活化T細胞和單核細胞的功能，并在炎癥反應、病原體感染、創(chuàng)傷修復及腫瘤發(fā)生發(fā)展等方面具有廣泛作用[2～4]。本研究通過絕經后女性CHD患者CCL5水平與臨床病理因素相關性分析，探討CCL5作為CHD危險的預測價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2014年5月～2016年4月在我院心內科根據(jù)冠狀動脈造影結果首次確診為冠心病的絕經后女性患者44例，以同期參加健康體檢的絕經后女性志愿者44例為對照。所有受試者均排除腫瘤或其他系統(tǒng)嚴重疾病，且近期無急性疾病、損傷或外科手術史，同意參加此項研究并簽署了知情同意書。

1.2 實驗室相關檢測

抽取受試者空腹狀態(tài)下(CHD患者造影前)的靜脈血5ml，室溫下30min內離心，取上層血清，用全自動分析儀(OLYMPUS日本)檢測總膽固醇、低密度脂蛋白、膽固醇、甘油三酯、空腹血糖等，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測CCL5(Human RANTES ELISA Kit 北京博奧森生物公司)、膠體金法檢測hs-CRP水平(南京 基蛋生物公司)。

1.3 冠脈造影及病變程度評估

完善術前準備，經皮穿刺橈動脈行冠狀動脈造影，通過影像回放進行診斷及冠狀動脈病變評分，具體參照Gensini評分方法進行。采用加拿大心血管協(xié)會(CCS)分級法對患者的臨床癥狀分級。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 一般資料

兩組受試者在年齡、絕經年限比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；腰圍、體重指數(shù)、總膽固醇及低密度脂蛋白水平，CHD組顯著高于對照組(P<0.05)；CHD陽性家族史、糖尿病及高血壓比例，CHD組顯著高于對照組(P<0.05)。

表1 兩組受試者基線特征

特征對照組(n=44)CHD組(n=44)P值年齡(歲)62.5±2.1864.5±1.940.13絕經年限(年)8.1±1.988.4±2.130.56腰圍(cm)92.31±7.98105.68±10.710.03體重指數(shù)(kg/m2)21.95±2.1328.95±2.130.03CHD陽性家族史3(6.81%)14(31.81%)0.03糖尿病5(11.36%)30(68.18%)0.03高血壓7(11.36%)35(68.18%)0.03總膽固醇(mmol/L)4.55±0.215.71±0.180.01低密度脂蛋白(mmol/L)2.69±0.172.92±0.150.04高密度脂蛋白(mmol/L)1.49±0.431.43±0.210.15甘油三酯1.52±0.321.54±0.350.30

2.2 CCL5、hs-CRP水平及其與血管病變程度、癥狀分級的相關性

ELISA法檢測CCL5、hs-CRP水平，結果(表2)顯示，與對照組比較，CHD組血清CCL5水平顯著升高[(42.5±8.21) vs (88.1±10.21)μg/L，P<0.05]，血清hs-CRP水平顯著升高[(0.45±0.14) vs (5.42±2.13)mg/L，P<0.05]。CHD組患者病變血管數(shù)量單支24例，≥2支20例；Gensini評分在12～102之間，平均(56.70±27.37)；CCS分級I～III級，I級15例、II級18例、III級11例。

CHD組血清CCL5、hs-CRP水平與患者冠狀動脈病變程度及臨床癥狀分級的相關性(表3)顯示，血清CCL5、hs-CRP水平與病變血管數(shù)量、Gensini評分及CCS分級呈正相關(P<0.05)；此外，血清水平CCL5與hs-CRP水平無顯著相關性(P>0.05)。

分組CCL5(μg/L)hs-CRP(mg/L)對照組(n=44)42.5±8.210.45±0.14CHD組(n=44)88.1±10.21*8.42±2.13*

注：*與對照組比較，P<0.05。

表3 CCL5、hs-CRP水平及其與血管病變程度、癥狀分級的相關性

CCL5(μg/L)P值hs-CRP(mg/L)P值病變血管數(shù)量單支(n=24)49.12±8.98≥2支(n=20)98.17±10.050.045.13±1.548.02±4.330.01Gensini評分<57(n=21)31.52±12.92≥57(n=23)79.70±12.42*0.034.95±2.139.12±3.180.03CCS分級CCS I(n=15)21.95±27.35CCS II(n=18)51.95±18.34*CCS III(n=11)91.95±13.04*0.033.87±1.526.34±2.3810.01±3.160.01

3 討論

動脈粥樣硬化或動力性血管痙攣是導致CHD發(fā)生的主要病理變化，但動脈粥樣硬化不是一種簡單的脂質沉積，而是具體慢性炎癥長期累積的結果[5～6]。hs-CRP作為炎癥標志物，被美國疾病控制預防中心(CDC)與美國心臟協(xié)會(AHA)推薦為CVD危險分類的預測指標，具體分類標準根據(jù)hs-CRP水平分為：相對低危險(<1mg/L)、中度危險(1.0～3.0mg/L)和高度危險(>3.0mg/L)。本研究結果發(fā)現(xiàn)，CHD組血清hsCRP水平較對照組顯著升高，其水平與病變血管數(shù)量、Gensini評分及CCS分級呈正相關(P<0.05)。冠狀動脈硬化斑塊破裂是導致CHD患者發(fā)生急性心肌梗死(AMI)的首要原因。研究報道， AMI者在發(fā)作6h內hs-CRP呈數(shù)十倍增長，提示可能炎癥反應導致了斑塊破裂[7]。這些結果提示，血清hs-CRP水平可以作為CHD血管病變程度、分級及斑塊活動情況的評估指標，從而預測AMI等發(fā)生的危險性，起到二級預防的作用。但也有研究者認為，hs-CRP易受到感染、創(chuàng)傷等多種因素影響，特異性不強，其能否作為心血管病危險性評估的金指標存在爭議[8]。目前，hs-CRP和其他心肌標志物(如肌鈣蛋白)聯(lián)合使用判斷急性冠狀動脈綜合征(ACS)預后中得到普遍采用。

趨化因子CCL5含有68個氨基酸殘基，分子量為8kd，屬于分泌型的小分子量炎癥性細胞因子，主要來自于T淋巴細胞、血小板及NK細胞，也可以在其他組織細胞誘導表達。首先作為趨化性介質被發(fā)現(xiàn)，近年來的研究表明其對組織損傷、感染和腫瘤免疫等方面也發(fā)揮重要的作用。本研究結果發(fā)現(xiàn)，CHD組血清CCL5水平與hs-CRP表現(xiàn)了相同的趨勢，但血清水平CCL5與hs-CRP水平并無顯著相關性(P>0.05)，表明CCL5水平可能是影響CHD發(fā)生的獨立危險因素。有研究報道心肌梗死的患者CCL5表達水平升高，尤其是復雜心力衰竭患者[7]；此外，在動物實驗中使用抗CCL5的單克隆抗體或抑制劑能減少梗死后心肌損傷，在血管周圍脂肪組織中高表達的CCL5對血管炎性細胞的招募及其介導的內皮功能障礙起重要作用[8～9]。這些結果提示CCL5不僅可以作為CVD危險分類的預測指標，而且可能成為治療的新靶點。CCL5可以在中性粒細胞和單核巨噬細胞等表達，并對這些炎性細胞有趨化作用，但有研究報道，炎性細胞的數(shù)量與CCL5水平無顯著相關性。

近年來，隨著人們對CHD的發(fā)病機制及危險因素等相關研究的深入，對CHD的發(fā)生、發(fā)展也有了更深的認識，并采取了三級預防有利措施，明顯降低了冠心病的發(fā)病率與死亡率。但是在絕經后女性人群中CHD的發(fā)病未得到明顯的改善，流行病學資料表明，絕經前的女性在CHD的發(fā)病率顯著低于男性，也因此在本病的篩查和預防上容易忽視。研究表明，絕經后女性CHD的發(fā)病率呈現(xiàn)迅速上升的趨勢，其中最重要的原因在于雌激素水平的降低，雌激素與血管粥樣硬化的發(fā)生存在密切關系。本研究以絕經后女性健康人群和 CHD患者為研究對象，通過絕經后女性CHD患者CCL5水平與臨床病理因素相關性分析，探討CCL5作為CHD危險的預測價值，結果發(fā)現(xiàn)絕經后女性冠心病患者CCL5水平升高，與冠脈病變程度及心絞痛癥狀分級呈正相關，可預測冠脈病變的嚴重程度，并可能作為hs-CRP等他心肌標志物的聯(lián)合指標或治療的新靶點。

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