家兔延髓迷走神經連合核的形態(tài)及細胞構筑研究

潘玲玲

摘 要 本實驗用石蠟切片和尼氏體染色的方法，對家兔延髓中迷走神經連合核的形態(tài)結構及核內細胞的數(shù)量、大小做了精確測量分析，測得迷走神經聯(lián)合核全長2.1mm，位于中央管上方，由中央管兩側的迷走神經背核過渡而來。俯視觀察呈“Y” 字型，側視觀察前端高度小，后端高度大，而后經過對部分家兔迷走神經連合核細胞面積的測定，最后得出家兔迷走神經連合核細胞大多為小型細胞，極少數(shù)為大型及中型細胞，這些結果為神經生物學奠定了一些形態(tài)學和解剖學的基礎。

關鍵詞 家兔 延髓 神經核 迷走神經連合核

中圖分類號：S826.1 文獻標識碼：A

延髓位于腦干的最后端，是上下行神經傳導的必由之路，具有許多復雜的結構和極其重要的生理功能。迷走神經連合核是延髓內的重要核團。位置在延髓尾段，中央管背外方，背正中隔近旁， 是副交感一般內臟運動核，發(fā)出迷走神經節(jié)前纖維，控制大部分胸腹腔臟器的活動，在器官內和旁節(jié)交換神經元。節(jié)后纖維管理胸腹腔內臟平滑肌、心肌、胃肌、腺體的運動和分泌。隨著神經解剖學和神經生理學研究方法的不斷發(fā)展，人們對其的認識也不斷深入。然而，迄今關于家兔腦迷走神經連合核的實驗研究國內很少有報道，僅見于國外六十年代以前的一些資料，其中Monnier等和H.Sawyer等人作的兔腦定位圖譜雖較為系統(tǒng)，但仍有腦干包括不全和室位粗略之不足。這種狀況遠不能適應現(xiàn)代醫(yī)學科研的要求。本課題擬對“家兔”的迷走神經連合核做細致的測量研究，從而為醫(yī)學科研領域提供可靠詳盡的神經解剖學依據(jù)。

1材料與方法

1.1兔腦石蠟切片的制作

1.1.1灌流固定、取材和水洗

家兔頸總動脈放血后，由該動脈向頭端灌流10%福爾馬林（4%甲醛）溶液700ml，進行固定。5日后取下兔腦用骨鉗剝去頭骨，取出腦組織，流水沖洗48小時以盡量洗去甲醛固定液。

1.1.2脫水與透明

水洗后的兔腦標本入50%乙醇24小時→70%乙醇24小時→95%乙醇24小時→正丁醇Ⅰ24小時→正丁醇Ⅱ24小時。

1.1.3透蠟和石蠟包埋

透明后的材料入1/2正丁醇+1/2石蠟24小時→石蠟Ⅰ24小時→石蠟Ⅱ24小時→石蠟包埋。

1.1.4連續(xù)切片

腦組織脫水、透明、浸蠟、包埋后做成一套20 m厚的腦切片，隔4張取1張，溫水展片后各貼于0.5%鉻礬明膠處理過的載玻片上，37oC24小時以上烘干。

1.2染色液的制備

1.2.1 Unna氏多色性美藍染液配方

美藍（Methylene blue）1g，碳酸鉀1g，蒸餾水100ml，無水乙醇20ml。

1.2.2染液的制備

將配方內各成分混合后緩慢加熱、攪拌使之溶解，然后室溫下放置2-3日，染色時用蒸餾水稀釋5-10倍。

1.3尼氏體染色

染色程序兔腦石蠟切片入二甲苯Ⅰ 10分鐘→二甲苯Ⅱ 10分鐘→1/2二甲苯+1/2無水乙醇2分鐘→無水乙醇Ⅰ2分鐘→無水乙醇Ⅱ2分鐘→95%乙醇2分鐘→70%乙醇2分鐘→蒸餾水2分鐘→Unna氏多色性美蘭染液6分鐘→乙二醇2分鐘→自來水2分鐘→50%乙醇2分鐘→70%乙醇2分鐘→95%乙醇2分鐘→無水乙醇Ⅰ2分鐘→無水乙醇Ⅱ2分鐘→二甲苯Ⅰ2分鐘→二甲苯Ⅱ2分鐘→中性樹膠封片。

1.4觀察與統(tǒng)計計算

切片經過染色封片后，于室溫下晾干。使用光學顯微鏡（日本Olympus公司）觀察，并用microview MVC3000 數(shù)碼顯微照相機在光學顯微鏡（日本Olympus公司）和解剖鏡（日本Nikon公司）下進行拍照。數(shù)碼相片經過Adobe Photoshop處理，并用數(shù)據(jù)分析軟件Scion Image（Version beta 4.0.2，美國Scion公司）進行圖像中細胞的數(shù)據(jù)測量分析，Microsoft Excel XP進行生物統(tǒng)計處理。確定核團：根據(jù)前人對禽類和哺乳動物腦干延髓中神經核團的認識，結合光鏡下對家兔腦干延髓中核團形態(tài)、位置以及組成核團細胞胞體形態(tài)，大小等特征的觀察辨認核團。核團命名依據(jù)國際哺乳動物解剖學名詞。

計算延髓內核團的吻尾徑長度：根據(jù)該核團在冠狀切面上出現(xiàn)的切片數(shù)乘以切片的厚度即為核團長度。

通過觀察描述核團的形態(tài)、大小和位置。對細胞的觀察主要通過4倍物鏡下的肉眼觀看，此時效果最佳。

觀察和研究核團的細胞構筑：觀察描述細胞的形態(tài)，測量細胞胞體直徑，在高倍顯微鏡下，對可辨認出核仁的細胞胞體，過胞體中心測量該細胞的最長徑和與該最長徑垂直的徑。用兩者之和除以2的數(shù)據(jù)作為胞體的直徑。

2結果

迷走神經聯(lián)合核的染色結果、長度、位置、形態(tài)和大小

尼氏體和核仁呈天藍色，背景色很淺或無色。細胞核的核質染色亦淺。迷走神經連合核全長2.1mm，在解剖鏡下觀察，位于中央管上方，由中央管兩側的迷走神經背核過渡而來。后端位于閂的前部，薄束核下方，前端位于延髓頂部，兩側薄束核之間，第四腦室后端消失。俯視觀察呈“Y” 字型，側視觀察前端高度小，后端高度大，部分斷面面積如表一所示。

迷走神經連合核尼氏體的形狀小而圓，密度大，核為圓形居中，位置在延髓尾段，中央管背外方，背正中隔近旁。分尼氏體長徑、短徑及面積如表一所示。饒志仁等（1985）對鼠、楊振鐸等 （1985）對狗的研究中，認為胞體直徑在20 m以下為小型細胞，20-35 m為中型細胞，35 m以上為大細胞。據(jù)此可以看出，家兔迷走神經連合核細胞大多為小型細胞，極少數(shù)為大型及中型細胞。