非小細胞肺癌多途徑標本檢測EGFR基因突變研究進展

王曉薇　李文新

【摘 要】肺癌是目前發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，其中非小細胞肺癌是其主要組成部分，可以占到肺癌患者總數(shù)的80%以上。隨著分子學的高速發(fā)展，驅(qū)動基因突變成為了肺癌治療領(lǐng)域的研究熱點，非小細胞肺癌的治療已經(jīng)進入了個體化靶向治療的時代。酪氨酸激酶抑制劑是分子靶向治療的代表藥物，研究發(fā)現(xiàn)其療效和EGFR基因突變密切相關(guān)。腫瘤組織是EGFR基因檢測的金標準，臨床上許多患者初診時已為中晚期，可能無法獲得足夠的腫瘤組織標本。本文就非小細胞肺癌多途徑標本檢測EGFR基因突變的對比進行綜述。

【關(guān)鍵詞】非小細胞肺癌；多標本；EGFR基因檢測

【中圖分類號】R734.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783（2018）05-03--01

引言

非小細胞肺癌是肺癌的常見組織類型。以往，晚期非小細胞肺癌只能規(guī)律使用鉑類藥物進行化療，化療與支持治療相比，雖然在一定程度上延長了患者的總生存期，但化療的反應(yīng)率較低，也僅局限于20%的反應(yīng)率（1）。近來，人們對肺癌驅(qū)動基因的研究越來越多。已知EGFR基因通過激活其下游的信號通路，引起細胞的惡性轉(zhuǎn)化。有研究發(fā)現(xiàn)，EGFR基因突變率與人種密切相關(guān)，在歐美人群中突變率約為10%；在東亞人群中突變率約為30%-50%，其中在亞洲、女性、不吸煙患者中 EGFR突變率更高，可達到60%-70%。因此，進行EGFR基因檢測對非小細胞肺癌患者具有十分重要的臨床意義?，F(xiàn)就非小細胞肺癌多途徑標本檢測EGFR基因突研究進展綜述如下。

1 原發(fā)灶腫瘤組織EGFR基因突變的檢測

基因檢測的金標準是腫瘤組織，其常見的獲取方式包括手術(shù)切除、支氣管鏡活檢、肺穿刺活檢等。2004年，美國的 Lynch和 Paez等（2-3）提出了吉非替尼的療效與 EGFR基因的第19和第21號外顯子密切相關(guān)，該兩處外顯子有突變的患者對吉非替尼反應(yīng)率高。隨后在日本，Kosaka等（4）進行了有關(guān) EGFR基因突變的研究，在選取的277例患者中有111例患者存在基因突變，突變率為40%，其中主要的基因突變發(fā)生在第19號和第21號外顯子上。在韓國，Han等（5）的有關(guān)研究也指出EGFR基因突變主要集中在第19-21號外顯子，這與之前的研究結(jié)果一致。Han的研究還發(fā)現(xiàn)，EGFR基因突變型的患者預(yù)后更好，他們對分子靶向藥物的反應(yīng)率更高。已有研究（6-8）證實了EGFR基因突變型的患者使用EGFR-TKI的有效率高達70%以上，大部分患者的中位生存時間高達20-30個月。對于EGFR基因突變型的患者，使用靶向藥物可明顯提高其生活質(zhì)量。中國的 Huang等（9）做了有關(guān)研究，EGFR基因的總突變率為38.6%，在101例基因突變的患者中，有13例為第19號外顯子突變，有4例為第20號外顯子突變，有22例為第21號外顯子突變。在2005年，北京協(xié)和醫(yī)院的Mu等（10）對76例肺癌患者進行EGFR基因檢測，其總突變率為39.8%。

大多數(shù)晚期患者無法獲得足夠的腫瘤組織進行基因檢測，此外，EGFR基因突變情況可能隨著治療和病程發(fā)生變化，這就使得基因檢測變得困難，同時限制了患者進行靶向治療。所以我們需要探尋合理的代替品來做EGFR基因突變檢測。

2 轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR基因突變的檢測

相比與腫瘤組織，淋巴結(jié)取材更為簡便，患者受痛苦較小。2015年，劉毅等（11）通過收集非小細胞癌患者原發(fā)灶和相應(yīng)的縱膈轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標本 100例，其中原發(fā)灶EGFR基因突變有37例，縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR基因突變有34。隨后對100例患者同時檢測原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的基因突變情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)同時存在 EGFR基因突變的概率為95.77%，同時不存在EGFR基因突變的概率為97.67%。其中3例患者原發(fā)灶有基因突變，但是縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)無基因突變，肺癌原發(fā)灶和縱隔淋巴結(jié)EGFR基因突變一致率高達97%。也就是說EGFR基因突變率在原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)十分相似，兩者具有較好的同一性。另外，有Meta結(jié)果分析顯示（12），非小細胞肺癌患者原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的EGFR基因突變一致率高達84%（RR=0.90，P=0.45）。EGFR基因突變的異質(zhì)性無論在原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶還是復(fù)發(fā)灶中均比較少見，因此我們需要不斷提高檢測方法的敏感性，更便利地輔助臨床診治。

3 外周血EGFR基因突變的檢測

循環(huán)DNA主要來源于細胞凋亡和細胞壞死。肺癌在進展的不同階段伴隨著特定基因的改變，這些改變的基因片段會進入血液循環(huán)中。目前已有研究利用外周血進行EGFR基因突變檢測。在西班牙，SLOG研究顯示（13），外周血和腫瘤組織EGFR基因突變的一致率為59.1%。在國內(nèi)，何誠等（14）收集了術(shù)后病理確診為非小細胞肺癌的組織蠟塊標本和外周血標本，實驗表明，453例腫瘤組織樣本中有185例存在EGFR基因突變，突變率為40.84%，229例外周血樣本中有66例存在EGFR基因突變，突變率為28.82%。研究對象中包括配對樣本132例，在配對實驗中外周血有35例存在EGFR基因突變，腫瘤組織有54例存在EGFR基因突變，兩樣本同時存在EGFR基因突變有34例，其基因突變的一致率為84.09%。目前利用血液標本檢測基因突變還有很多問題有待解決，隨著臨床檢測手段的不斷成熟，血液標本的發(fā)展前景會越來越好。

4 胸腔積液EGFR基因突變的檢測

惡性胸水是晚期非小細胞肺癌患者的常見并發(fā)癥，獲取胸水相對較容易，胸水中包含的腫瘤信息更加豐富。2015年，我國王斯等（15）進行了有關(guān)研究，他選取了非小細胞肺癌患者72例，利用胸腔積液和活檢組織對比檢測EGFR基因。研究表明，在胸水組，EGFR基因突變率為48.61%；在活檢組織組，EGFR基因突變率為51.39%，兩者差異無統(tǒng)計學意義。魏冰等（16）檢測109例肺癌患者胸腔積液及配對腫瘤組織中 EGFR基因突變，實驗表明，兩樣本基因突變的一致率較高，胸水可以代替腫瘤組織進行EGFR基因檢測，從而為更多的晚期患者帶來治療機會。

5 展望

分子靶向藥物是肺癌研究的熱點，這是非小細胞肺癌治療的新領(lǐng)域，目前腫瘤組織仍是檢測驅(qū)動基因的金標準，但在很多時候，我們要利用腫瘤組織的代替品，不管是轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)、外周血、還是胸水，都需要更多的研究來證實其檢測結(jié)果的準確性，從而為臨床提供更可靠的依據(jù)。

參考文獻

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