食源性疾病監(jiān)測中副溶血性弧菌現(xiàn)場快速檢測方法的建立與應(yīng)用

◎ 張作杰

（高密市疾病預(yù)防控制中心，山東 高密 261500）

副溶血性弧菌屬于食源性疾病中最主要的致病菌，對副溶血性弧菌進行有效檢測，將為臨床治療食源性疾病提供更具有參考價值的資料和信息[1]。本次研究主要建立了多種食源性疾病監(jiān)測中副溶血性弧菌現(xiàn)場快速檢測方法，并觀察不同檢測方法的實際應(yīng)用效果，具體研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取高密市疾病預(yù)防控制中心2016年8月—2017年8月收集的211份腸道門診腹瀉患者樣本，及以海水產(chǎn)品為主的150份食品樣本作為研究材料。同時，由高密市疾病預(yù)防控制中心提供副溶血性弧菌作為陽性對照菌株，并提供嗜水氣單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌、類志賀鄰單胞菌、鼠傷寒沙門菌和福氏志賀菌等作為對照菌株。

1.2 方法

快速檢測儀器主要選用發(fā)過生物梅里埃公司生產(chǎn)的全自動細(xì)胞鑒定儀、美國佰樂公司生產(chǎn)的ABI7500熒光PCR儀。研究中采用的具體快速檢測方法有典型生化聯(lián)合篩檢法、實時熒光定量PCR法和恒溫擴增-核酸試紙條法。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

本次研究當(dāng)中的所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行處理，計數(shù)資料采用數(shù)（n）率（%）表示，組間比較采用卡方（x2）檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同方法檢測副溶血性弧菌的特異性

本次研究中選取了20株副溶血性弧菌和11株其他細(xì)菌作為檢驗對象，分別采用典型生化聯(lián)合篩檢法、實時熒光定量PCR法和恒溫擴增-核酸試紙條法進行檢測。結(jié)果顯示，20株副溶血性弧菌中有1株為PCR陰性，19株為PCR陽性；11株其他細(xì)菌的3種檢測結(jié)果均為陰性，見表1。

表1 不同方法檢測副溶血性弧菌的特異性表

2.2 不同樣本采用不同檢測方法的副溶血性弧菌檢測結(jié)果

采用不同檢測方法對不同樣本的副溶血性弧菌進行檢測發(fā)現(xiàn)，典型生化聯(lián)合篩檢法、實時熒光定量PCR法和恒溫擴增—核酸試紙條法對211份腹瀉樣本的陽性檢出率均為12.3%；上述3種檢測方法對150份食品樣本的檢測結(jié)果中，陽性檢出率分別為19.4%、19.4%、18.7%，其中，海水產(chǎn)品的檢出率最高，均為18.7%。各種檢測方法的副溶血性弧菌陽性檢出率無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表2。

表2 不同樣本采用不同檢測方法的副溶血性弧菌檢測結(jié)果表

3 討論

副溶血性弧菌具有繁殖速度快等特點，因而臨床難以有效控制該細(xì)菌引起的食源性疾病的暴發(fā)與傳播[2-3]。本次研究主要制定了多種不同的食源性疾病中副溶血性弧菌的檢測方法，發(fā)現(xiàn)典型生化聯(lián)合篩檢法、實時熒光定量PCR法、恒溫擴增-核酸試紙條法均具有快速檢測優(yōu)勢，在應(yīng)用當(dāng)中均能夠產(chǎn)生相對良好的檢測效果。綜上所述，典型生化聯(lián)合篩檢法、實時熒光定量PCR法、恒溫擴增-核酸試紙條法在快速檢測副溶血性弧菌方面具有重大應(yīng)用價值。

[1]陳玉鳳，侯 君，李 瑞，等.2013-2014年大連市食源性疾病主動監(jiān)測中分離的副溶血性弧菌病原特征[J].中國衛(wèi)生工程學(xué)，2016，4（4）：338-341.

[2]姚利利，何 平，沈先標(biāo)，等.上海市寶山區(qū)540份水產(chǎn)品中副溶血性弧菌監(jiān)測結(jié)果分析[J].中國初級衛(wèi)生保健，2016，30（11）：47-49.

[3]王 鴿，申屠平平，朱珈慧.2014年金華市食源性疾病監(jiān)測結(jié)果分析[J].中國食品衛(wèi)生雜志，2017，29（1）：97-100.