茶葉中乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定

◎ 鄧金蘭

（茂名市食品藥品檢驗所，廣東 茂名 525000）

乙酰甲胺磷是有機磷類農(nóng)藥，現(xiàn)在農(nóng)業(yè)種植過程使用較多的農(nóng)藥，有部分農(nóng)藥殘留在小麥、茶葉和蔬菜等食品中，影響人們的身體健康。乙酰甲胺磷會抑制體內(nèi)膽堿酯酶，進入人體后通過血液、淋巴運送至身體各個器官，對人的傷害大，測定食品中有機磷農(nóng)藥殘留關(guān)系著人們的食品安全。乙酰甲胺磷殘留容易吸附和高溫容易分解，乙酰甲胺磷殘留較難準確測定。GB/T5009.103-2003植物性食品中的乙酰甲胺磷殘留的測定方法是采用玻璃柱測定乙酰甲胺磷的殘留[1]，但用玻璃柱測定乙酰甲胺磷的峰形不好，響應(yīng)值低，結(jié)果重復(fù)性差。本文采用DB-1701毛細管柱代替玻璃柱，用乙腈代替丙酮作提取液，測定茶葉中乙酰甲胺磷殘留的結(jié)果重現(xiàn)性好，檢測限低，回收率高[2-3]。

1 實驗部分

1.1 原理

含有機磷的樣品在富氫火焰上燃燒，以HPO碎片的形式放射出波長526 nm的特征光。這種特征光通過濾光片選擇后，由光電倍增管接收，轉(zhuǎn)換成電信號，經(jīng)過微電流放大器放大后被記錄下來，樣品的峰高與標準品的峰高相比較，計算出相當?shù)臉悠泛俊?/p>

1.2 儀器與試劑

氣相色譜GC-7890A：安捷倫氣相色譜配備火焰光度檢測器、電動振蕩器、氮吹儀、色譜柱：DB-1701毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）。

試劑：丙酮（色譜純）、乙腈（色譜純）、乙酰甲胺磷標準品純度＞99%。

1.3 色譜條件

色譜條件：檢測器溫度250 ℃；進樣口溫度200 ℃；柱溫使用程序升溫：初始溫度80 ℃保持1 min，程序升溫第一階20 ℃/min升到180 ℃；程序升溫第二階20 ℃/min升到220 ℃；柱流速：1 mL/min；不分流進樣；氫氣流量75 mL/min；空氣流量：100 mL/min；進樣量 1 μL。

1.4 標準曲線的配制

乙酰甲胺磷標準溶液配成濃度為0.02、0.04、0.08、0.16、0.2、0.32、0.4μg/mL和0.64 μg/mL的標準使用溶液，繪制標準曲線。

1.5 樣品處理

樣品添加標物的水平為0.04、0.20、0.50 mg/kg，每個濃度分別加入丙酮和乙腈兩種不同的溶劑提取，每個濃度每種溶劑做個3平行樣品，測得丙酮提取液回收率與乙腈提取液回收率。

樣品經(jīng)過粉碎機粉碎，過20目篩，稱取茶葉試樣10 g左右，置于150 mL的具塞三角瓶中，分別加入丙酮和乙腈40 mL，樣品置于電動振蕩器振搖1 h，過濾，濃縮。濾液過活性炭小柱，活性炭小柱預(yù)先用10 mL乙腈-甲苯（體積比3∶1）淋洗活性炭小柱，棄去淋洗液。把樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至活性炭小柱，用5 mL乙腈-甲苯淋洗液洗滌樣品瓶，把洗滌液轉(zhuǎn)移到活性炭小柱，再用20 mL乙腈-甲苯淋洗液淋洗活性炭小柱，收集濾液濃縮。丙酮濾液置于氮吹儀下40 ℃水浴濃縮為1 mL，乙腈濾液置于氮吹儀下50 ℃水浴濃縮為1 mL，按1.2色譜條件進樣1.0 μL了用火焰光度檢測器檢測。

2 結(jié)果分析與討論

2.1 提取方式的影響

丙酮提取液回收率與乙腈提取液回收率見表1和表2。由表1和表2的結(jié)果可知，用丙酮作提取液和用乙腈作提取液檢測的回收率結(jié)果相差不大，都達到標準的要求，因此可以用乙腈代替丙酮作為提取液。丙酮的沸點是56 ℃，容易揮發(fā)，在操作過程中容易被吸入人體內(nèi)。乙腈是穩(wěn)定的極性物質(zhì)，沸點是81 ℃，乙腈沸點比丙酮高，在操作過程中不易揮發(fā)。用乙腈作提取液所檢測的結(jié)果，對檢驗人員的身體毒害小于丙酮。

表1 丙酮提取液回收率結(jié)果表

表2 乙腈提取液回收率結(jié)果表

2.2 毛細管色譜柱和襯管的影響

用玻璃柱檢測乙酰甲胺磷目標物的響應(yīng)值低，峰形不好，甚至響應(yīng)不到，因為乙酰甲胺磷容易分解和降解，測定的重復(fù)性差。如果用帶玻璃棉的襯管檢測樣品響應(yīng)的乙酰甲胺磷沒有響應(yīng)值，因為乙酰甲胺磷被玻璃棉大量的吸附。玻璃棉的作用是使樣品充分氣化，阻攔部分較大沒被氣化的物質(zhì)進入色譜柱。但乙酰甲胺磷是容易分解和降解的物質(zhì)，被玻璃棉大量的吸附后對結(jié)果的影響很大，測定乙酰甲胺磷不適合用帶有玻璃棉的襯管。

采用DB-1701毛細管柱代替玻璃柱，用不帶玻璃棉的不分流襯管，檢測乙酰甲胺磷的響應(yīng)值高，峰形好，測定的結(jié)果重現(xiàn)性好。圖1是用帶玻璃棉的不分流襯管測定的譜圖，圖2是用帶玻璃棉的不分流褲管測定的譜圖。不分流玻璃襯管使用前先必須進行硅烷化處理，玻璃襯管的硅烷化處理步驟是把二甲基二氯硅烷試劑用正己烷稀釋為5%～10%，然后將玻璃襯管浸泡在硅烷化試劑12 h，然后用甲醇淋洗，干燥即可。

圖1 帶玻璃棉的不分流襯管譜圖

圖2 不帶玻璃棉的不分流襯管譜圖

2.3 濃縮的影響

用50 ℃水浴氮吹濃縮代替旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時溶劑沸騰會造成樣品的損失，回收率相對低。改用氮吹儀濃縮更準確、可減少樣品處理時的損失。氮氣是惰性氣體，能隔絕氧氣，防止氧化的作用下達到濃縮的目的，一次可同時處理十幾個樣品，縮短了樣品的處理時間，提高了回收率。

2.4 標準曲線的線性關(guān)系

將配制好濃度為 0.02、0.04、0.08、0.16、0.2、0.32、0.4μg/mL和0.64 μg/mL的標準系列作曲線用氣相色譜測定，以保留時間定性，以峰面積定量。結(jié)果表明，在0.02～0.64 μg/mL范圍內(nèi)乙酰甲胺磷顯良好線性關(guān)系，乙酰甲胺磷的線性關(guān)系R2=0.9989，函數(shù)f(x)=1.60509e+006x+0，重復(fù)測定濃度0.32 μg/mL標準溶液7次，RSD值為1.2%，儀器重現(xiàn)性較好。

2.5 活性炭小柱凈化

茶葉用丙酮和乙腈等有機試劑提取的濾液含有大量葉綠素，濾液用活性炭小柱凈化，活性炭小柱能有效吸附葉綠素等雜質(zhì)，凈化的效果比GB/T5009.103-2003標準中加0.2 g活性炭粉凈化好，過活性炭小柱處理的濾液減少了對儀器進樣口和檢測器的污染。

3 結(jié)論

實驗茶葉樣品用乙腈代替丙酮為提取液，50 ℃水浴氮吹濃縮代替旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用活性炭小柱凈化，采用DB-1701毛細管柱代替玻璃柱，用不帶玻璃棉的不分流襯管，測定乙酰甲胺磷。該方法所測的乙酰甲胺磷結(jié)果準確度高、精密度高、回收率高、檢測限低、檢測過程方便和快捷，解決乙酰甲胺磷檢測響應(yīng)值小和加收率低的問題，能滿足植物類樣品測定乙酰甲胺磷殘留的要求。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標準化管理委員會.GB/T 5009.103-2003 植物性食品中的甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定[S].北京：中國標準出版社，2004.

[2]楊龍江，劉拉平，李 嵐.蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留研究及對策[J].環(huán)境污染，2003，25（6）：370-372.

[3]康文靖.氣相色譜儀在蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：76-78.