子宮內(nèi)膜樣腺癌中酪氨酸蛋白激酶受體A7和星形膠質(zhì)細胞上調(diào)基因-1的表達及相關(guān)性

金艷霞 張曉蘭 冶俊玲

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤婦科，青海 西寧 810001)

子宮內(nèi)膜癌中最常見的類型是子宮內(nèi)膜樣腺癌，是由子宮內(nèi)膜異型增生轉(zhuǎn)變而來，這種轉(zhuǎn)化伴有基因和蛋白的表達失?！?〕。酪氨酸蛋白激酶受體(Eph)蛋白構(gòu)成最大受體酪氨酸激酶亞家族，EphA7是家族中最重要的成員，參與發(fā)育過程，可以調(diào)節(jié)細胞黏附和細胞增殖過程〔2〕。星形膠質(zhì)細胞上調(diào)基因(AEG)-1是近年發(fā)現(xiàn)的癌基因，通過核因子(NF)及相關(guān)信號通路表達在多種腫瘤組織中〔3〕。本文檢測子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中EphA7和AEG-1的表達特征，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2016年1～12月青海大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的子宮內(nèi)膜樣腺癌并行手術(shù)根治的患者為觀察組57例，年齡41～81歲，平均56.2歲。診斷均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型。排除標(biāo)準(zhǔn)：①林奇綜合征；②伴有生殖系統(tǒng)畸形。子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生伴不典型增生21例為對照組1，年齡35～70歲，平均54.3歲。子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生不伴不典型增生21例為對照組2，年齡40～68歲，平均50.9歲。子宮脫垂后行子宮全切后15例為對照組3，年齡56～80歲，平均60.2歲。4組均留取術(shù)后子宮內(nèi)膜的蠟塊組織。4組年齡構(gòu)成差異無統(tǒng)計學(xué)意義，均知情同意。

1.2EphA7和AEG-1檢測 術(shù)后標(biāo)本常規(guī)甲醛溶液固定，常規(guī)取材，石蠟包埋，切取4 μm切片，采用免疫組化SP法檢測EphA7和AEG-1表達，行二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。嚴(yán)格質(zhì)量控制，并設(shè)陽性對照，嚴(yán)格按說明書操作，盡量減少誤差。

1.3結(jié)果判斷方法 EphA7定位于細胞質(zhì)，AEG-1定位于細胞核和(或)細胞質(zhì)，以出現(xiàn)淡黃色-棕褐色為顯色；按顯色強度分4個等級：0分，無顯色；1分，淡黃色；2分：棕黃色；3分，棕褐色。根據(jù)高倍鏡下(400倍視野)陽性細胞數(shù)的不同分為5個等級：0分，<5%；1分，5%～25%；2分，26%～50%；3分，51%～75%；4分，76%～100%。將顯色強度×陽性細胞數(shù)的得分作為最終評定標(biāo)準(zhǔn)，0～3分為陰性，>3分為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗，線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.14組EphA7和AEG-1陽性率比較 4組EphA7和AEG-1陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組EphA7和AEG-1陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床特征中EphA7和AEG-1陽性率的比較 EphA7和AEG-1表達與腫瘤增殖指數(shù)、腫瘤最大徑相關(guān)；AEG-1的表達與腫瘤的浸潤深度密切相關(guān)。二者均與年齡、腫瘤分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。見表2。

2.3觀察組中EphA7和AEG-1相關(guān)性 EphA7和AEG-1呈正相關(guān)(r=0.46，P=0.047)。

表2 觀察組不同臨床特征中EphA7和AEG-1陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

子宮內(nèi)膜樣腺癌的惡性腺體類似于正常增生期子宮內(nèi)膜腺體，具有惡性細胞學(xué)特征，同時還具有融合篩狀生長、缺乏單個腺體完整性、絨毛腺管狀結(jié)構(gòu)，多數(shù)腫瘤是1、2級，即分化較好，但是少數(shù)腫瘤分化較差。病變形成中具有腫瘤基因的表達失?！?，5〕。根據(jù)序列相似性將Eph受體分為兩種，即EphA和EphB，共有14個Eph受體，8個Ephrin配體，EphA7是重要成員〔6，7〕，其控制著一系列不同細胞間的相互作用，EphA7與相應(yīng)的配體結(jié)合后可以引起其結(jié)構(gòu)變化，能有效活化細胞質(zhì)內(nèi)的酪氨酸激酶，引起自身的磷酸化，并活化底物分子，引發(fā)受體細胞的正向信號傳導(dǎo)，發(fā)揮生物學(xué)作用〔8，9〕。孟祥瑞等〔10〕通過觀察非小細胞肺癌中EphA7的表達，發(fā)現(xiàn)EphA7在腫瘤中高表達，同時與腫瘤纖維化和腫瘤大小有關(guān)，并對腫瘤細胞增殖有一定的影響。AEG-1的基因定位于染色體8q22上，包含11個內(nèi)含子和12個外顯子，分子量為80 kD。AEG-1可促進腫瘤細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，同時可以使腫瘤細胞逃逸凋亡的過程，促進腫瘤細胞的侵襲和播散〔11，12〕。余劍琴等〔13〕通過觀察AEG-1在子宮頸癌中的表達，發(fā)現(xiàn)AEG-1的表達水平與脈管浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，認為AEG-1能促進子宮頸癌間質(zhì)的微血管生成，其機制可能與NF-κB信號途徑引起血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)上調(diào)有關(guān)。

本研究結(jié)果提示在子宮內(nèi)膜腺體異型增生和癌變過程中，EphA7和AEG-1高表達起明顯的促進作用，即子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生-不典型增生-癌變過程中的趨勢性作用強。本文提示EphA7和AEG-1高表達可以促進腫瘤細胞的繁殖和腫瘤的生長，此時腫瘤細胞異型性明顯，失控性增生明顯，細胞數(shù)量增多，細胞生長加速，腫瘤的體積增大〔14，15〕。本文結(jié)果提示AEG-1高表達可以促進腫瘤向肌層浸潤，也提示腫瘤處于進展?fàn)顟B(tài)(高侵襲性)。本實驗提示EphA7和AEG-1二者對細胞由幼稚到成熟過程可能無明確的影響，也不對腫瘤的淋巴管形成及淋巴道播散有影響。EphA7和AEG-1二者具有正向協(xié)同作用，二者并無結(jié)構(gòu)上的同源性及互補性，但是二者均對腫瘤細胞的增殖有影響，也對腫瘤血管的新生有影響，因此二者的協(xié)同作用可能是與對細胞增殖和血管生成的間接橋梁作用實現(xiàn)的，但是其具體機制有待更多實驗證實。也有學(xué)者認為EphA7和AEG-1表達的變化能使腫瘤的浸潤模式發(fā)生改變，使腫瘤生長時細胞極性及構(gòu)象發(fā)生明顯異常，細胞的體積小，易于浸潤和直接蔓延〔16，17〕。

4 參考文獻

1李小毛，葉輝霞.子宮內(nèi)膜樣腺癌病理及臨床特點〔J〕.廣東醫(yī)學(xué)，2010；31(21)：2859-60.

2王建東，周曉軍.高甲基化導(dǎo)致EphA7基因在結(jié)直腸癌中低表達〔J〕.醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報，2007；20(1)：6-9.

3Srivastava J，Robertson C，Gredler R，etal.Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) contributes to nonthyroidal illness syndrome (NTIS) associated with hepatocellular carcinoma (HCC)〔J〕.J Biol Chem，2015；290(25)：15549-58.

4康 誼.子宮內(nèi)膜樣腺癌27例臨床病理分析〔J〕.中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2011；14(7)：999-1000.

5嚴(yán)粉琴，許 躍，陳 英.82例子宮內(nèi)膜癌臨床及病理組織學(xué)特點分析〔J〕.實用醫(yī)技雜志，2006；13(19)：3405.

6Huang Y，Li L.Progress of cancer research on astrocyte elevated gene-1/metadherin (review)〔J〕.Oncol Lett，2014；8(2)：493-501.

7Lee H，Park E，Kim Y，etal.EphrinA5-EphA7 complex induces apoptotic cell death via TNFR1〔J〕.Molec Cells，2013；35(5)：450-5.

8Tsuboi M，Mori H，Bunai T，etal.Secreted form of EphA7 in lung cancer.〔J〕.Int J Oncol，2010；36(3)：635-40.

9Rashid T，Upton A，Ciossek T，etal.Opposing gradients of ephrin-As and EphA7 in the superior colliculus are essential for topographic mapping in the mammalian visual system〔J〕.Neuron，2005；47(1)：57-69.

10孟祥瑞，陸 鵬，劉桂舉，等.酪氨酸蛋白激酶EphA7蛋白在非小細胞肺癌組織中的表達〔J〕.腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2014；27(3)：193-6.

11Srivastava J，Siddiq A，Gredler R，etal.Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) and c-Myc cooperate to promote hepatocarcinogenesis〔J〕.Hepatology，2015；61(3)：915-29.

12Esen H，Erdi F，Kaya B，etal.Tissue thioredoxin reductase-1 expression in astrocytomas of different grades〔J〕.J Neurol Oncol，2015；121(3)：451-8.

13余劍琴，周 清，王漢楚，等.AEG-1在子宮頸癌組織中的表達及與微血管生成的相關(guān)性〔J〕.中華全科醫(yī)學(xué)，2016；14(5)：796-8.

14周鳳睿，陳公琰.酪氨酸激酶受體EphA7在惡性腫瘤中的研究進展〔J〕.實用腫瘤學(xué)雜志，2015；29(1)：61-4.

15Yu C，Chen K，Zheng H，etal.Overexpression of astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) is associated with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) progression and pathogenesis〔J〕.Carcinogenesis，2009；30(5)：894-901.

16劉 志，張 晴，徐 玥，等.受體酪氨酸激酶EphA7在乳腺癌中的表達及其臨床意義〔J〕.臨床與實驗病理學(xué)雜志，2016；32(11)：1207-10.

17Rajasekaran D，Srivastava J，Ebeid K，etal.Combination of nanoparticle-delivered siRNA for astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) and all-trans retinoic acid (ATRA)：an effective therapeutic strategy for hepatocellular carcinoma (HCC)〔J〕.Bioconjug Chem，2015；26(8)：1651-2.