老年高血壓患者左心室肥厚與血漿Klotho蛋白水平的相關(guān)性

李寶善 蔣 宜 唐渝平 馬厚勛 裴文楠 李婷婷 周 敏 褚靜鑫

(重慶市急救醫(yī)療中心老年病科，重慶 400014)

研究發(fā)現(xiàn)Klotho基因突變與人類衰老的各種表型，如壽命縮短、肺氣腫、動(dòng)脈硬化、骨質(zhì)疏松等密切相關(guān)〔1〕。劉曉林等〔2〕研究發(fā)現(xiàn)Klotho基因單核苷酸多態(tài)性與老年高血壓相關(guān)，左心室肥厚(LVH)是高血壓的最常見并發(fā)癥，本課題組進(jìn)一步研究還發(fā)現(xiàn)Klotho基因多態(tài)性與其高血壓LVH明確相關(guān)〔3〕。腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的Klotho基因轉(zhuǎn)導(dǎo)在自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)在體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)Klotho蛋白表達(dá)的增加可以抑制SHR高血壓進(jìn)程，并且發(fā)現(xiàn)Klotho蛋白高表達(dá)可以降低心臟指數(shù)、抑制心肌細(xì)胞肥大和心肌纖維化，即提示Klotho蛋白表達(dá)調(diào)節(jié)可能在LVH的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用〔4〕。本研究旨在揭示Klotho蛋白水平與LVH的相關(guān)性及可能的作用機(jī)制。

1 對象和方法

1.1研究對象 2015 年5月至2016年5月重慶市急救醫(yī)療中心老年病科住院的老年高血壓合并LVH患者74例為LVH組，所有病例完善超聲心動(dòng)圖檢查，根據(jù)歐洲協(xié)會(huì)心血管影像協(xié)會(huì)(EACVI)/美國超聲協(xié)會(huì)(ASE)2015年推薦的LVH標(biāo)準(zhǔn)診斷〔5〕。LVH標(biāo)準(zhǔn)：左心室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)：老年男性LVMI≥115 g/m2，女性LVMI≥120 g/m2，即診斷LVH。對照組為同期住院患者經(jīng)超聲心動(dòng)圖檢查排除LVH的老年高血壓患者80例。血脂異常的診斷參考《中國成人血脂異常防治指南》(2007)〔6〕；高血壓診斷符合《中國高血壓防治指南2010》〔7〕；參考1999年世界衛(wèi)生組織2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷2型糖尿病。重慶市急救醫(yī)療中心醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過本研究方案，所有入選患者充分知情并簽署知情同意書。

1.2方法 左心室參數(shù)的檢測方法：采用Acuson 128XP/10彩色多普勒超聲儀變頻探頭2.5～4.0 MHz。獲取心臟胸骨旁左心室長軸二尖瓣腱索水平的M型二維圖像，在舒張末期分別測出室間隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室內(nèi)徑(LVID)，然后計(jì)算LVMI。本研究所涉及的所有心臟超聲檢查由同一個(gè)經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員完成，確保檢查結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。入院次日清晨，空腹測量患者體重、身高，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)。共抽取靜脈血6 ml，取其中3 ml使用肝素鈉抗凝，使用湘儀L400臺(tái)式低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(中國湖南湘儀離心機(jī)廠生產(chǎn))2 500 r/min離心10 min分離血漿，-20℃冰箱保存?zhèn)溆茫皇Ｓ? ml靜脈血使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，2 500 r/min離心10 min分離血清，使用日立7060全自動(dòng)生化分析儀測定血糖、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。吸取血漿樣品100 μl，使用人Klotho蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測試劑盒(編號(hào)：DY5334-05、DY008，購自美國R&D公司)，SpectraMax M2e 酶標(biāo)儀(Molecular Devices)，按照ELISA試劑盒說明書流程操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用PASW Statistics 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、Logistic多因素回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組一般臨床情況對比 LVH組BMI明顯高于對照組(P<0.01)，Klotho蛋白水平明顯低于對照組(P<0.001)。LVH組糖尿病患者比例高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組年齡、性別、血清腦鈉素(BNP)水平、血脂異常比較均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般臨床情況對比

2.2多因素回歸分析 以Klotho蛋白測定值的中位數(shù)為分界線，低于中位數(shù)視為血漿Klotho蛋白降低，賦值為1，高于中位數(shù)賦值為0；患有高血壓、糖尿病、血脂異常者賦值為1，無則賦值為0。該模型包括性別、2型糖尿病、BMI、血脂異常及血漿Klotho蛋白水平。在單因素分析高血壓LVH危險(xiǎn)因素時(shí)，高BMI這個(gè)傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素和血漿Klotho蛋白水平在兩組間就有顯著型差異。Logistic 多因素回歸分析提示低血漿Klotho蛋白水平、2型糖尿病、高BMI是LVH的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見表2。

表2 LVH危險(xiǎn)因素的多因素回歸分析

3 討 論

高血壓作為最常見的衰老相關(guān)性心血管疾病之一，已成為影響老年人健康和長壽的重要因素。隨著高血壓病程發(fā)展，?？蓪?dǎo)致心、腦、腎等重要靶器官損害，其中以心臟損害最為常見(LVH尤為常見)。LVH是心臟負(fù)荷增加時(shí)的一種最初代償性改變，但隨著其病程的持續(xù)性進(jìn)展，包括心力衰竭、心肌梗死、心源性猝死等心血管事件的發(fā)生率明顯增高，嚴(yán)重危及患者生命，已成為臨床上心血管事件發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素〔8〕。早有研究證實(shí)心室肥厚是一個(gè)涉及包括多種刺激因素、膜受體、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大及多種轉(zhuǎn)錄因子、基因表達(dá)調(diào)控和效應(yīng)器參與其中的高度復(fù)雜的病理過程〔9〕。李龍等〔10〕證實(shí)人Klotho基因多態(tài)性與高血壓LVH有明確相關(guān)性。推測Klotho基因在高血壓LVH發(fā)生、發(fā)展中所起的作用有可能就是通過Klotho蛋白的生物活性來影響心肌細(xì)胞而發(fā)揮其生物學(xué)作用的。研究已證實(shí)膜型Klotho蛋白作為FGF23的一種特有的受體輔助因子，通過形成Klotho-FGF23-FGFR1復(fù)合物形式影響FGF23的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而發(fā)揮生物學(xué)作用〔11〕。由此推測Klotho蛋白可能通過FGF23通路，影響高血壓LVH的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程。而其具體調(diào)節(jié)機(jī)制、信號(hào)通路有待進(jìn)一步研究、探索。

Xie等〔12〕使用異丙腎上腺素誘導(dǎo)產(chǎn)生LVH小鼠模型，研究發(fā)現(xiàn)Klotho基因缺乏小鼠比野生鼠LVH更嚴(yán)重，而在Klotho轉(zhuǎn)基因小鼠中，Klotho基因過表達(dá)，可以阻止異丙腎上腺素誘導(dǎo)的LVH?？梢奒lotho蛋白可以保護(hù)心肌避免發(fā)生LVH。

4 參考文獻(xiàn)

1Kuro-o M,Matsumura Y,Aizawa H,etal.Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing〔J〕.Nature,1997；390(6655):45-51.

2劉曉林，馬厚勛，田小春，等.Klotho基因3個(gè)SNP位點(diǎn)與老年高血壓及脂代謝的相關(guān)性〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2010；30(23):3429-32.

3蔣 宜,劉曉林,田曉春,等.老年高血壓患者克老素基因單核苷酸多態(tài)性與其左心室肥厚的相關(guān)性研究〔J〕.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013;38(8):891-5.

4李寶善,馬厚勛,王艷嬌,等.Klotho基因轉(zhuǎn)導(dǎo)延緩自發(fā)性高血壓大鼠高血壓進(jìn)程及改善其心臟損害的作用研究〔J〕.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2012;29(6):662-8.

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6中國成人血脂異常防治指南制訂聯(lián)合委員會(huì).中國成人血脂異常防治指南〔J〕.中華心血管病雜志,2007;35(5):390-419.

7中國高血壓防治指南修訂委員會(huì).中國高血壓防治指南2010〔J〕.中華心血管病雜志,2011;39(7):579-616.

8閻國輝，張玉東，孫志丹.遺傳性高血壓致左室肥厚機(jī)制的研究現(xiàn)狀〔J〕.中國綜合臨床，2004;6(6):573-4.

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10李 龍,李 莉,崔天祥,等.Klotho基因多態(tài)性與高血壓左室肥厚的關(guān)系〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2013;33(11):2501-3.

11Yamazaki M,Ozono K,Okada T,etal.Both FGF23 and extracellular phosphate activate Raf/MEK/ERK pathway via FGF receptors in HEK293 cells〔J〕.J Cell Biochem,2010;111(5):1210-21.

12Xie J,Cha SK,An SW,etal.Cardioprotection by Klotho through downregulation of TRPC6 channels in the mouse heart〔J〕.Nat Commun,2011;3:1238.