心脈隆注射液減輕表柔比星致大鼠心臟毒性的實驗研究

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以阿霉素、表柔比星、吡柔比星等代表的蒽環(huán)類藥物，已逐漸成為乳腺癌、肺癌等多種惡性實體瘤及血液系統(tǒng)惡性腫瘤的主要治療藥物，臨床治療效果好，抗瘤譜廣，對處于缺氧環(huán)境的細胞同樣有顯著效果[1]，但該類藥物有較明顯的心臟毒性且與劑量累積有關，限制其在臨床的進一步使用[2]。心脈隆注射液是從動物蜚蠊中提取有效成分制成的中藥創(chuàng)新藥，是目前治療慢性心力衰竭的純生物制劑之一，能有效改善心功能，延緩心力衰竭進程，同時具有神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)作用、正性肌力和正性松弛等多重療效。本研究觀察心脈隆注射液防治表柔比星所致大鼠心臟毒性的效果及作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 SPF級Wistar雌性大鼠39只，體重214 g±5 g(河北醫(yī)科大學實驗動物中心)；心脈隆注射液；鹽酸阿霉素；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌鈣蛋白I(cTnI)測定試劑盒(上海源葉生物科技有限公司，批號20120501A)；超聲心動圖采用PhilipSonos7500超聲心動圖機檢測。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗分組及干預措施 將39只大鼠隨機分為對照組、表柔比星組及表柔比星聯(lián)合心脈隆組，各13只。對照組常規(guī)飼養(yǎng)；表柔比星組靜脈注射表柔比星2 mg/kg每周1次；表柔比星聯(lián)合心脈隆組靜脈注射表柔比星2 mg/kg，心脈隆注射液3 mg/kg每周1次。3組大鼠干預10周。

1.2.2 觀察指標

1.2.2.1 大鼠體重 在基礎狀態(tài)、實驗第5周末及第10周末分別測量大鼠體重，觀察大鼠體重變化。

1.2.2.2 心功能指標測定 在基礎狀態(tài)、實驗第5周末及第10周末分別行心臟超聲檢測左室射血分數(shù)(LVEF)、左室短軸縮短率(LVFS)指標。

1.2.2.3 血清酶檢測 在基礎狀態(tài)、實驗第5周末及第10周末各組處死部分動物，心腔取血，2000r/min～3000r/min離心15min，取上清液，測定cTnI、MDA、SOD水平。

2 結(jié) 果

2.1 3組大鼠體重變化比較 實驗第10周末表柔比星組大鼠體重較對照組明顯下降(P<0.05)，表柔比星聯(lián)合心脈隆組體重較表柔比星組顯著提高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表1。

組別實驗前實驗第5周末實驗第10周末對照組218.96±5.12256.82±6.23305.87±8.14表柔比星組220.15±4.47221.19±2.46239.11±5.351)表柔比星聯(lián)合心脈隆組219.68±3.88253.39±6.91 279.42±14.642) 與對照組同時間點比較,1)P<0.05;與表柔比星組比較,2)P<0.05。

2.2 3組大鼠心功能指標比較 實驗第10周末表柔比星組LVFS、LVEF指標均較對照組顯著下降(P<0.05)，表柔比星聯(lián)合心脈隆組心功能指標優(yōu)于表柔比星組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。表柔比星組化療后射血分數(shù)明顯低于聯(lián)合心脈隆組。詳見表2。

組別項目實驗前實驗第5周末實驗第10周末對照組LVFS43.92±3.2144.04±4.0743.92±5.23LVEF82.06±4.6782.33±3.8582.76±6.47表柔比星組LVFS44.64±4.5744.16±5.4032.28±3.181)LVEF82.76±4.4778.10±4.5668.62±4.731)表柔比星聯(lián)合心脈隆組LVFS43.51±4.4242.84±5.2340.54±5.082)LVEF81.73±3.4877.62±5.2478.46±5.462) 與對照組同時間點比較,1)P<0.05;與表柔比星組比較,2)P<0.05。

2.3 3組血清SOD、MDA及cTnI水平比較 實驗第10周末表柔比星組各指標較對照組顯著改善，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；表柔比星聯(lián)合心脈隆組MDA、cTnI低于表柔比星組(P<0.05)，SOD較對照組升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表3。

組別時間SOD(U/mL)MDA(nmol/mL)cTnI(ng/mL)對照組實驗前320.10±9.68 4.01±2.211.87±2.48實驗第5周末314.28±10.123.99±4.641.91±3.31實驗第10周末317.25±12.174.09±2.451.88±2.96表柔比星組實驗前317.10±14.683.79±0.831.94±0.48實驗第5周末253.29±91.527.45±3.043.24±0.89實驗第10周末221.32±55.951)9.35±2.101)7.87±1.511)表柔比星聯(lián)合心脈隆組實驗前321.83±33.984.04±1.031.55±0.56實驗第5周末309.73±38.785.90±2.352.39±0.73實驗第10周末297.56±80.304.93±1.962)5.16±1.791)2) 與對照組同時間點比較,1)P<0.05;與表柔比星組同時間點比較,2)P<0.05。

3 討 論

蒽環(huán)類藥物屬于周期非特異性化療藥，對腫瘤細胞DNA造成不可逆轉(zhuǎn)破壞，具有抗瘤譜廣，臨床療效高，對缺氧細胞有效等顯著特點，是多種化療方案的核心[3]。由于其存在一定的進展性、不可逆轉(zhuǎn)性心臟毒性，使蒽環(huán)類藥物劑量受限，化療提前中止，生存質(zhì)量降低甚至生存期縮短[4]。正確使用蒽環(huán)類藥物同時，盡可能避免心臟毒性等不良反應發(fā)生，并將已發(fā)生毒性降到最低，是目前較大的研究熱點。蒽環(huán)類藥物有多種毒副作用，其中心臟毒性尤為嚴重，研究顯示首次使用蒽環(huán)類藥物即可造成不可逆心肌損害。目前認為，表柔比星等蒽環(huán)類藥物引起的心肌損傷與其產(chǎn)生的氧化應激反應及細胞凋亡有關。表柔比星可降低體內(nèi)清除自由基能力，產(chǎn)生過多的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，同時導致心肌細胞抗氧化防御機制受損，產(chǎn)生過量自由基，破壞心肌細胞膜和線粒體膜，導致心肌酶類外流，細胞凋亡[5-6]。此外，抑制核酸和蛋白質(zhì)合成、鈣超載、能量代謝障礙等均參與心肌損傷過程[7]。

心脈隆注射液是從昆蟲美洲大蠊體內(nèi)工藝分離提煉出的小分子活性肽類，有效成分為復合核苷堿基、多肽及結(jié)合氨基酸等。多項藥理學研究表明，心脈隆注射液在治療心血管系統(tǒng)疾病方面具有獨特作用，主要包括強心和抑制心肌重塑兩個方面。強心作用：心脈隆注射液通過調(diào)節(jié)鈣離子代謝，增加心肌細胞內(nèi)鈣離子含量增強心肌收縮力，發(fā)揮強心作用[8-9]。陳建[10]研究發(fā)現(xiàn)，心脈隆注射液可擴張冠狀動脈、肺動脈，降低肺動脈壓力，減輕肺循環(huán)淤血，從而增加心肌供氧量，改善心肌細胞能量代謝，使心肌收縮力提高。抑制心肌重塑作用：研究發(fā)現(xiàn)，心力衰竭早期腫瘤壞死因子α、白介素-6等炎癥因子過度表達，內(nèi)皮素(ET)基因調(diào)節(jié)作用及氧自由基損傷引起負性肌力并參與心肌重構(gòu)[11-12]。張文靜等[13]研究發(fā)現(xiàn)，心脈隆注射液能明顯降低心力衰竭大鼠血ET含量。有研究顯示心脈隆注射液能明顯降低心力衰竭病人血腫瘤壞死因子α、白介素-6及C反應蛋白水平從而抑制心肌重構(gòu)，并且能顯著增強SOD活性代謝機體的活性氧保護心肌細胞[14-15]。上述研究表明，心脈隆注射液通過減輕心力衰竭炎癥反應、抑制ET分泌、清除活性氧等途徑抑制心肌細胞重塑。

本研究通過觀察大鼠體重、心功能指標、血清SOD、MDA及cTnI水平變化，表明心脈隆注射液對表柔比星所致大鼠心功能損傷的保護作用，結(jié)果顯示，表柔比星組體重較對照組及表柔比星聯(lián)合心脈隆組明顯下降，表柔比星聯(lián)合心脈隆組化療后心臟射血分數(shù)明顯高于表柔比星組，實驗第10周末表柔比星組心功能指標、血清SOD、MDA、cTNI水平與對照組差異顯著，表柔比星聯(lián)合心脈隆組MDA、cTnI低于表柔比星組，SOD高于表柔比星組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。本研究結(jié)果表明，心脈隆注射液能減輕表柔比星等蒽環(huán)類化療藥物所致心臟毒性。其機制可能為：心脈隆注射液清除氧自由基，增強SOD活性、降低MDA、cTnI含量，提高或保護機體本身抗氧化酶類活性，加快清除多種自由基，減輕自由基對細胞膜或細胞器膜損傷，減少脂質(zhì)過氧化反應，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物含量，減少或阻斷自由基損傷作用，增加內(nèi)源性活性氧自由基清除系統(tǒng)功能。

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