• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    hMTERF3基因在卵巢癌組織的表達(dá)及其對(duì)預(yù)后的影響*

    2018-05-18 08:33:06楊勇琴嚴(yán)長寶戴莉萍
    實(shí)用醫(yī)藥雜志 2018年5期
    關(guān)鍵詞:卵巢癌卵巢數(shù)據(jù)庫

    熊 偉,楊勇琴,李 彬,梅 雯,嚴(yán)長寶,戴莉萍,余 敏

    卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而居第三位,但卵巢癌病死率居各類婦科惡性腫瘤的首位,5年生存率不足30%,嚴(yán)重威脅女性健康和生命[1]。卵巢癌早期癥狀隱匿,常在癥狀出現(xiàn)之前已經(jīng)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,大多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期[1]。卵巢癌的臨床治療以手術(shù)為主,化療為輔,并配合放療、生物學(xué)治療等手段[2]。近年來,隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)理論和技術(shù)的發(fā)展,卵巢癌的基因治療成為大家關(guān)注的焦點(diǎn),并在臨床上取得了較好的療效,具有較好的應(yīng)用前景。

    人線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子3(human mitochondrial transcription termination factor 3,hMTERF3),也稱為線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子結(jié)構(gòu)域1(human mitochondrial transcription termination factor domain containing 1,hMTERFD1),是由417個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)[3]。在人、大鼠、小鼠等7個(gè)不同的物種中進(jìn)行氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn),該蛋白質(zhì)包含5個(gè)保守的MTERF基序,含有3個(gè)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu),是MTERF蛋白家族進(jìn)化最保守的成員[4]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,敲除MTERF3基因的小鼠線粒體DNA拷貝數(shù)上升,MTERF3通過結(jié)合線粒體DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)啟動(dòng)子區(qū)而抑制線粒體基因表達(dá)過程,缺失MTERF3的細(xì)胞線粒體DNA兩條鏈的轉(zhuǎn)錄起始活性均有增加,證明核基因編碼的MTERF3是一種轉(zhuǎn)錄負(fù)性調(diào)控因子[5]。 Park 等[5]研究表明,哺乳動(dòng)物MTERF3顯著抑制mtDNA的表達(dá),通過減少呼吸鏈復(fù)合體蛋白亞基的產(chǎn)生而降低氧化磷酸化水平,從而減少細(xì)胞內(nèi) ATP 的合成[5,6]。但目前為止,關(guān)于hMTERF3在卵巢癌中研究的尚未見報(bào)道。

    利用基因芯片或者轉(zhuǎn)錄組分析為代表的高通量測序技術(shù)目前已經(jīng)成為惡性腫瘤研究的強(qiáng)大工具,然而由于測序平臺(tái)、樣本數(shù)量以及分析方法的不同,常導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果有偏差,結(jié)果分析比較片面。如何有效利用上述資源是當(dāng)前科研人員面臨的重大問題。數(shù)據(jù)挖掘及整合分析可以聯(lián)合運(yùn)用多種數(shù)據(jù)消除以上因素的影響,從整體的角度來理解這些數(shù)據(jù)。目前,生物數(shù)據(jù)整合分析逐漸成為大數(shù)據(jù)挖掘的重要方向,并已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種類型的惡性腫瘤分析中。

    Oncomine數(shù)據(jù)庫是大型的腫瘤基因芯片整合數(shù)據(jù)庫,最新數(shù)據(jù)涵蓋已知所有的癌癥類型,包含715個(gè)數(shù)據(jù)集,共計(jì)86 733個(gè)癌組織及正常組織數(shù)據(jù)。利用Oncomine可以進(jìn)行腫瘤組織及其相應(yīng)的正常組織中的mRNA表達(dá)差異分析,可以尋找潛在感興趣的基因,其整合的大量數(shù)據(jù)保證分析結(jié)果具有極其重要的參考價(jià)值,也可以發(fā)現(xiàn)潛在的腫瘤生物標(biāo)志物和腫瘤基因治療靶點(diǎn)。該研究擬通過對(duì)Oncomine基因芯片和臨床實(shí)驗(yàn)檢測數(shù)據(jù)的整合分析,比較分析hMTERF3基因在正常卵巢上皮組織與卵巢癌組織中表達(dá)水平,并探討其表達(dá)水平與卵巢癌患者預(yù)后的相關(guān)性。

    1 資料與方法

    1.1 從Oncomine數(shù)據(jù)庫中挖掘數(shù)據(jù)Oncomine v4.5數(shù)據(jù)庫是一個(gè)基于基因芯片研究的數(shù)據(jù)庫和整合數(shù)據(jù)挖掘平臺(tái),在此數(shù)據(jù)庫中可根據(jù)研究的需要進(jìn)行數(shù)據(jù)篩選和挖掘的條件設(shè)定。該研究中,筆者設(shè)定的數(shù)據(jù)篩選條件為:(1)“Gene:MTERFD1”;(2) “Analysis Type:Cancer vs.Normal Analysis”;(3)“Cancer Type:Ovarian Cancer”;(4)“Date Type:mRNA”;(5)“Simple Type:Clinical Specimen”;(6)臨界值設(shè)定條件 (P value<1×10-4,fold change=2,gene rank=top 10%)。數(shù)據(jù)輸出另存為Excel表格。

    1.2 Western blot檢測hMTERF3蛋白在卵巢癌和正常卵巢上皮組織中的表達(dá)選取2016年—2017年大理白族自治州第一人民醫(yī)院病理科收集的30例卵巢癌組織及其對(duì)應(yīng)的正常卵巢上皮組織,提取30對(duì)配對(duì)卵巢癌和正常卵巢上皮組織總蛋白,采用BCA法測定各組樣本蛋白質(zhì)的濃度。各取50 μg蛋白質(zhì)上樣,用SDS-PAGE凝膠電泳儀系統(tǒng)電泳分離總蛋白質(zhì),采用Trans-BlotTurboTM將蛋白質(zhì)半干轉(zhuǎn)?。?5 V,7 min)至PVDF膜上,用含5%脫脂牛奶的TBST封閉2 h,加入兔抗人MTERFD1多克隆抗體 (1∶1000稀釋)4℃冰箱內(nèi)孵育過夜,同時(shí)檢測GAPDH蛋白的表達(dá)水平作為內(nèi)參照;TBST液洗滌3次,5 min/次,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔二抗 (1∶5000稀釋)4℃孵育2 h,TBST洗滌3次,5 min/次。將超敏型ECL顯影液滴于PVDF膜條上,用ChemiDocTMXRS+超靈敏化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)顯色曝光,掃描成圖像。蛋白質(zhì)條帶用Image LabTM5.2.1軟件進(jìn)行灰度值的計(jì)算,以MTERF3/GAPDH的比值表示MTERF3蛋白的相對(duì)表達(dá)水平,實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次。

    1.3 Kaplan-Meier Plotter進(jìn)行患者生存周期分析利用 Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫(http://kmplot.com/analysis/)的卵巢癌數(shù)據(jù)集對(duì)hMTERFD1進(jìn)行分析,得到相應(yīng)的Kaplan-Meier生存曲線、風(fēng)險(xiǎn)比(Hazard ratio,HR)及 Log rank P(P value)值。探針選擇為 JetSet,所需的有效Affymetrix ID:219363_s_at(MTERFD1)。首先根據(jù)人MTERFD1 mRNA表達(dá)水平分為高表達(dá)組和低表達(dá)組,截尾數(shù)據(jù)為腫瘤無進(jìn)展生存期 (progression free survival,PFS)。符合條件的總病例數(shù)為1436例,分析人MTERFD1表達(dá)水平與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系。然后,設(shè)定截尾數(shù)據(jù)為總體生存期 (overall survival,OS),符合條件總病例數(shù)為1657例,分析人MTERFD1表達(dá)水平與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系。篩選條件如下:(1)“Cancer type:Ovarian Cancer”;(2)“Gene:MTERFD1”;(3)“Survival:OS or PFS”。

    1.4 hMTERF3在不同分期卵巢癌中的預(yù)后作用

    分別設(shè)截尾數(shù)據(jù)為PFS和OS,然后探針選擇為JetSet, 所 需 的 有 效 Affymetrix ID:219363_s_at(MTERFD1),在Stage選項(xiàng)下面分別選擇1期、1+2期、2期、2+3期、2+3+4期、3期、3+4期、4期, 分別在線分析人MTERFD1在不同腫瘤分期的卵巢癌患者中的預(yù)后作用。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析正常對(duì)照組和卵巢癌患者病例組之間hMTERF3表達(dá)的差異采用t檢驗(yàn)。所用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行,以雙側(cè)P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。

    2 結(jié)果

    2.1 hMTERF3在所有腫瘤類型中的表達(dá)Oncomine v4.5數(shù)據(jù)庫中共收集了756個(gè)不同類型的研究結(jié)果,其中關(guān)于hMTERF3表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的研究結(jié)果共104個(gè),hMTERF3表達(dá)增高的研究有76個(gè),hMTERF3表達(dá)降低的研究有28個(gè) (表1)。在婦科常見的惡性腫瘤中,乳腺癌中高表達(dá)的研究有12個(gè),低表達(dá)的有5個(gè);子宮頸癌中高表達(dá)的研究有2個(gè),低表達(dá)的研究有0個(gè);卵巢癌中高表達(dá)的研究有1個(gè),低表達(dá)的研究有2個(gè)。

    2.2 hMTERF3在卵巢癌中的表達(dá)在Oncomine v4.5數(shù)據(jù)庫中,從2004年開始至今,共有11項(xiàng)研究涉及hMTERF3在卵巢癌組織和正常卵巢組織中的表達(dá),共包括995個(gè)樣本(圖1)。文章分別發(fā)表 于 Cancer Research[7,8]、Clinic Cancer Research[9]及 Cancer Science[10]。 薈萃 11 個(gè)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,hMTERF3在卵巢癌中高表達(dá),其中位數(shù)值為3781.0,P=0.020,表明其高表達(dá)具有顯著性差異。

    表1 hMTERF3在Oncomine數(shù)據(jù)庫中所有人類腫瘤相關(guān)研究中的表達(dá)

    圖1 Oncomine數(shù)據(jù)庫中hMTERF3基因在卵巢癌中的表達(dá)

    2.3 在不同研究中卵巢癌組織與正常卵巢組織hMTERF3的表達(dá)差異在Oncomine數(shù)據(jù)庫中,筆者獲取4個(gè)不同研究的基因芯片數(shù)據(jù),作箱圖比較分析,在所有研究的結(jié)果中,與正常卵巢組織相比,hMTERF3 mRNA在卵巢癌中的表達(dá)量均顯著增高(P<0.05)(圖 2)。

    2.4 卵巢癌組織與正常卵巢上皮組織hMTERF3蛋白的表達(dá)通過Western blot檢測30例配對(duì)卵巢癌與正常卵巢上皮組織中hMTERF3蛋白的表達(dá)水平,結(jié)果顯示,28例 (93.33%)卵巢癌組織中hMTERF3蛋白表達(dá)水平較正常卵巢上皮組織顯著增高 (P<0.05),而在2例卵巢癌組織中hMTERF3蛋白表達(dá)水平增高不顯著(P>0.05)(圖 3)。

    2.5 hMTERF3表達(dá)量與卵巢癌預(yù)后的關(guān)系為進(jìn)一步明確hMTERF3基因表達(dá)量與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系,通過Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫進(jìn)行生存分析、風(fēng)險(xiǎn)比和Log-Rank檢驗(yàn)。當(dāng)截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為卵巢癌患者PFS,經(jīng)Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫在線分析,HR=1.21,log-rank P 值為0.0027。當(dāng)截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為卵巢癌患者OS,Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫在線分析,得到了相似的結(jié)果,HR=1.22,log-rank P值為0.0028。以上結(jié)果提示,hMTERF3 mRNA的表達(dá)水平是卵巢癌患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素(HR>1),其表達(dá)水平越高,患者的預(yù)后越差(圖 4)。

    2.6 各個(gè)分期卵巢癌患者的預(yù)后與hMTERF3 mRNA水平的關(guān)系截尾數(shù)據(jù)為PFS時(shí),早期卵巢癌患者(1期、1+2期或2期)中hMTERF3表達(dá)水平越高,患者預(yù)后越差(HR>1)。其中在1+2期卵巢癌患者中HR值為2.43,表明越早期的卵巢癌患者,hMTERF3表達(dá)水平的預(yù)后價(jià)值越大。將截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為OS,得出了相似的結(jié)果(表2)。認(rèn)為早期卵巢癌患者中hMTERF3 mRNA水平越高,患者預(yù)后的越差。

    圖2 Oncomine數(shù)據(jù)庫中hMTERF3基因在不同卵巢癌研究芯片中的表達(dá)

    圖3 卵巢癌與其相應(yīng)的正常卵巢上皮組織的hMTERF3蛋白的表達(dá)(*P<0.05)

    圖4 hMTERF3表達(dá)量與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系

    3 討論

    卵巢癌發(fā)病的病因目前并不明確,可能與外部因素(包括物理、化學(xué)、生物致癌因子)和內(nèi)部因素(包括免疫功能、內(nèi)分泌、遺傳、精神等因素),以及飲食營養(yǎng)失調(diào)和不良生活習(xí)慣等相關(guān)[11-13]。MTERF3是MTERF蛋白家族進(jìn)化最保守的成員,基因敲除MTERF3的純合子小鼠將導(dǎo)致胚胎發(fā)育異常和死亡[14,15]。體外凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)和體內(nèi)染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn) (ChIP)證實(shí),哺乳動(dòng)物MTERF3能與線粒體重鏈轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)結(jié)合,缺失MTERF3將導(dǎo)致線粒體DNA轉(zhuǎn)錄起始水平的增加,則進(jìn)一步證實(shí)哺乳動(dòng)物MTERF3是一種線粒體基因轉(zhuǎn)錄的負(fù)調(diào)控因子[5]。Wrdenberg等報(bào)道,MTERF3蛋白還能調(diào)節(jié)線粒體中核蛋白體大亞基的組裝,影響核蛋白體的生物合成,導(dǎo)致氧化磷酸化水平降低,細(xì)胞內(nèi)能量合成減少[16]。Oncomine是一個(gè)大型的腫瘤基因芯片分析整合數(shù)據(jù)庫,為廣大的科研工作者提供公開、免費(fèi)的整合分析資源,數(shù)據(jù)來源為公開發(fā)表的各種高通量基因測序數(shù)據(jù)。Oncomine平臺(tái)為不熟悉高通量分析的科研工作者提供了一個(gè)便捷的方式獲取整合信息,只需要輸入基因名稱即可得到該基因在各種類型腫瘤中的mRNA表達(dá)水平差異等分析結(jié)果,并且以直觀的形式輸出[17]。通過對(duì)Oncomine數(shù)據(jù)庫的整合分析,筆者發(fā)現(xiàn)hMTERF3在卵巢癌組織中顯著高表達(dá)。目前研究報(bào)道,hMTERF3基因在肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌和肝癌中高表達(dá)[18],但是該基因在卵巢癌中的研究相對(duì)較少。筆者對(duì)hMTERF3基因在Oncomine數(shù)據(jù)庫中表達(dá)情況分析,發(fā)現(xiàn)該基因在大部分腫瘤類型中均呈現(xiàn)高表達(dá)(表1),這一結(jié)果也證實(shí)了已有的報(bào)道。該研究還采用Western blot技術(shù)對(duì)30例卵巢癌組織及其配對(duì)的正常卵巢上皮組織中hMTERF3蛋白表達(dá)水平進(jìn)行分析,檢測發(fā)現(xiàn)28例(93.33%)卵巢癌組織中hMTERF3蛋白比正常卵巢上皮組織中呈顯著的高表達(dá)(P<0.05),使結(jié)果得到實(shí)驗(yàn)證實(shí)。該研究的不足之處為樣本數(shù)量有限,亟待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。

    表2 各個(gè)分期卵巢癌患者的預(yù)后與hMTERF3 mRNA水平的關(guān)系

    Kaplan Meier Plotter是目前世界上被廣泛接受的一個(gè)預(yù)后相關(guān)的在線分析數(shù)據(jù)庫,總計(jì)涵蓋了10 461例腫瘤樣本,其中包括5143例乳腺癌樣本、1816例卵巢癌樣本、2437例肺癌樣本和1065例胃癌樣本,可以對(duì)54 675個(gè)基因進(jìn)行相關(guān)預(yù)后分析,并得出真實(shí)可信的客觀結(jié)果[19,20]。該文首次通過Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)了hMTERF3基因表達(dá)水平在卵巢癌患者及不同分期卵巢癌患者中的預(yù)后價(jià)值。結(jié)果顯示,卵巢癌臨床分期未明時(shí),hMTERF3表達(dá)量越高,卵巢癌的預(yù)后越差,是一個(gè)理想的預(yù)測卵巢癌預(yù)后的分子標(biāo)記;在1期、1+2期及2期卵巢癌中,當(dāng)截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為PFS時(shí),HR值均大于1。其中1+2期卵巢癌HR值為2.43,log rank P<0.01;該期截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為OS時(shí),HR值1.75,log rank P=0.1698??紤]到 OS 為總生存率患者死亡原因多樣(存在非腫瘤致死),且P值較小,推測hMTERF3可很好地預(yù)測早期卵巢癌患者預(yù)后;當(dāng)截尾數(shù)據(jù)設(shè)置為OS時(shí),在1期,1+2期,2期,2+3期,2+3+4期,3期,3+4期及4期卵巢癌患者中HR值均大于1,說明hMTERF3表達(dá)水平對(duì)早、中、晚期卵巢癌患者均具有很好的預(yù)后價(jià)值。

    總之,該研究通過Oncomine數(shù)據(jù)庫對(duì)腫瘤相關(guān)基因的信息進(jìn)行深入挖掘,提出hMTERF3在卵巢癌組織中高表達(dá);通過Western blot對(duì)卵巢癌及其配對(duì)的正常卵巢上皮組織中hMTERF3蛋白水平進(jìn)行檢測,實(shí)驗(yàn)證實(shí)hMTERF3在卵巢癌組織中高表達(dá);進(jìn)一步分析hMTERF3表達(dá)對(duì)卵巢癌患者預(yù)后的影響,發(fā)現(xiàn)hMTERF3高表達(dá)與卵巢癌患者的預(yù)后不良有關(guān),將為進(jìn)一步探討hMTERF3在卵巢癌發(fā)生中的作用提供重要的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。此外,利用Oncomine數(shù)據(jù)庫進(jìn)行惡性腫瘤及其對(duì)應(yīng)正常組織的基因表達(dá)差異分析,對(duì)普通科研工作者整合分析大量腫瘤基因芯片數(shù)據(jù),尋找潛在的感興趣的腫瘤相關(guān)基因具有參考價(jià)值。

    參考文獻(xiàn)

    [1]SIEGEL RL,MILLER KD,JEMAL A.Cancer statistics[J].CA Cancer J Clin,2016,66(1):7-30.

    [2]ZHOU J,HUANG XH.Review of the treatment of ovarian cancer[J].Modern Oncology,2012,20(6):1308-1311.

    [3]ROBERTI M,POLOSA P L,BRUNI F,et al.The MTERF family proteins:mitochondrial transcription regulators and beyond[J].Biochim Biophys Acta,2009,1787(5):303-311.

    [4]XIONG W,YU M,ZUO SY.Regulatory roles of mitochondrial transcription termination factor(MTERF) family proteins in mitochondrial gene expression[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2015,31(3):223-231.

    [5]PARK CB,ASIN-CAYUELA J,CAMARA Y,et al.MTERF3 is a negative regulator of mammalian mtDNA transcription [J].Cell,2007,130(2):273-285.

    [6]ANDERSSON DC,F(xiàn)AUCONNIER J,PARK CB.Enhanced cardiomyocyte Ca(2+) cycling precedes terminal AV-block in mitochondrial cardiomyopathy Mterf3 KO mice[J].Antioxid Redox Signal,2011,15(9):2455-2464.

    [7]BONOME T,LEVINE DA,RANDONOVICH M,et al.A gene signature predicting for survival in subopimally debulked patients with ovarian cancer[J].Cancer Res,2008,68(13):5478-5486.

    [8]HENDRIX ND,WU R,KUICK R,et al.Fibroblast growth factor 9 has oncogenic activity and is a downstream target of Wnt signaling in ovarian endometrioid adenocarcinomas[J].Cancer Res,2006,66(3):1354-1362.

    [9]LU KH,PATTERSON AP,WANG L,et al.Selection of potential markers for epithelial ovarian cancer with gene expression arrays and recursive descent partition analysis[J].Clin Cancer Res,2004,10(10):3291-3300.

    [10]YOSHIHARA K,TAJIMA A,KOMATA D,et al.Gene expression profiling of advanced-stage serous ovarian cancers distinguishes novel subclasses and implicates ZEB2 in tumor progression and prognosis[J].Cancer Sci,2009,100(8):1421-1428.

    [11]JI XN,F(xiàn)ENG YJ.Progress in study of etiology of ovarian epithelial cancer[J].China Oncology,2014,24(11):861-864.

    [12]LIAO XY.Risk factors of epithelial ovarian cancer recurrence[J].Modern Oncology,2016,24(14):2283-2285.

    [13]ZHAO XC,HUANG HB.The immunological etiology research progress of ovarian cancer[J].Chinese Journal of Immunology,2014,30(6):862-865.

    [14]ROBERTI M,BRUNI F,LOGUERCIO-POLOSA P,et al.MTERF3,the most conserved member of the mTERF-family,is a modular factor involved in mitochondrial protein synthesis[J].Biochim Biophys Acta,2006,1757(9/10):1199-1206.

    [15]SPAHR H,SAMUELSSON T,HALLBERG BM,et al.Structure of mitochondrial transcription termination factor 3 reveals a novel nucleic acidbinding domain[J].Biochem Biophys Res Commun,2010,397(3):386-390.

    [16]WRDENBERG A,LAGOUGE M,BRATIC A,et al.MTERF3 regulates mitochondrial ribosome biogenesis in invertebrates and mammals[J].PLoS Genet,2013,9(1):e1003178.

    [17]LI L,XIONG GP,YAN L,et al.Expression and significance of CCNB1 in ovarian cancer[J].Current Advances in Obstetrics and Gynecology,2016,25(11):818-820.

    [18]ZHANG C,WU N,GAO F,et al.MTERFD1 functions as an oncogene[J].Oncotarget,2016,8(38):1-10.

    [19]SZASZ AM,LANCZKY A,NAGY A,et al.Cross-validation of survival associated biomarkers in gastric cancer using transcriptomic data of 1065 patients[J].Oncotarget,2016,7(31):49322-49333.

    [20]OCANA A,PEREZ-PENA J,ALCARAZ-SANABRIA A,et al.In silico analyses identify gene-sets,associated with clinical outcome in ovarian cancer:role of mitotic kinases[J].Oncotarget,2016,7(16):22865-22872.

    猜你喜歡
    卵巢癌卵巢數(shù)據(jù)庫
    保養(yǎng)卵巢吃這些
    卵巢多囊表現(xiàn)不一定是疾病
    卵巢癌:被遺忘的女性“沉默殺手”
    如果卵巢、子宮可以說話,會(huì)說什么
    數(shù)據(jù)庫
    Wnt3 a和TCF4在人卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義
    數(shù)據(jù)庫
    數(shù)據(jù)庫
    數(shù)據(jù)庫
    microRNA與卵巢癌轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展
    久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 一个人免费看片子| 极品少妇高潮喷水抽搐| 精品亚洲成a人片在线观看| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产一区二区激情短视频 | 啦啦啦在线免费观看视频4| www日本在线高清视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 乱人伦中国视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 日日啪夜夜爽| 欧美黄色片欧美黄色片| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产精品无大码| 国产精品人妻久久久影院| 久久青草综合色| av女优亚洲男人天堂| 久久人人97超碰香蕉20202| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 五月开心婷婷网| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产一区二区在线观看av| 亚洲国产精品一区三区| 老司机影院成人| 成年av动漫网址| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 99国产综合亚洲精品| 亚洲美女黄色视频免费看| 最新在线观看一区二区三区 | √禁漫天堂资源中文www| 丁香六月欧美| 久久人人爽人人片av| 丝袜喷水一区| 国产成人一区二区在线| 人成视频在线观看免费观看| 男人操女人黄网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产成人av激情在线播放| 女性被躁到高潮视频| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 人体艺术视频欧美日本| 波多野结衣一区麻豆| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲欧美清纯卡通| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 成人亚洲欧美一区二区av| 日本av免费视频播放| 国产精品 欧美亚洲| 精品久久久精品久久久| 如何舔出高潮| 国产一卡二卡三卡精品 | 国产男人的电影天堂91| 99久久综合免费| 免费看av在线观看网站| av视频免费观看在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 99香蕉大伊视频| 在线观看国产h片| 热99国产精品久久久久久7| 免费黄网站久久成人精品| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产成人精品久久久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美精品av麻豆av| 亚洲欧美一区二区三区国产| 少妇精品久久久久久久| 看免费成人av毛片| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产男女内射视频| 一本大道久久a久久精品| 午夜精品国产一区二区电影| 热99久久久久精品小说推荐| 国产成人精品久久久久久| 国产一区二区在线观看av| 国产成人av激情在线播放| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产野战对白在线观看| 五月开心婷婷网| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品偷伦视频观看了| 大香蕉久久网| 一级爰片在线观看| 久久久欧美国产精品| 日本91视频免费播放| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 成人免费观看视频高清| 国产不卡av网站在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 人妻一区二区av| 色网站视频免费| 亚洲av中文av极速乱| av片东京热男人的天堂| 精品第一国产精品| av女优亚洲男人天堂| 精品一区二区三卡| 国产探花极品一区二区| 国产野战对白在线观看| 欧美激情 高清一区二区三区| a级片在线免费高清观看视频| kizo精华| 精品国产露脸久久av麻豆| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 操美女的视频在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲国产中文字幕在线视频| 不卡av一区二区三区| 三上悠亚av全集在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 18在线观看网站| 午夜久久久在线观看| 丝袜美足系列| 99久久人妻综合| 国产成人精品福利久久| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产视频首页在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲成人av在线免费| 亚洲,一卡二卡三卡| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲av国产av综合av卡| 多毛熟女@视频| 国产精品熟女久久久久浪| 国产一区有黄有色的免费视频| 欧美激情高清一区二区三区 | 在线观看一区二区三区激情| 国产伦人伦偷精品视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 国产一区二区激情短视频 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 欧美精品一区二区免费开放| 黄片播放在线免费| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产午夜精品一二区理论片| 国产精品 国内视频| 久久久国产一区二区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 美女午夜性视频免费| 中文字幕人妻丝袜制服| 最近最新中文字幕免费大全7| 人妻人人澡人人爽人人| 一级爰片在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 中国三级夫妇交换| 精品少妇内射三级| 男人舔女人的私密视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 在线观看免费午夜福利视频| 美女福利国产在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 九草在线视频观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产av国产精品国产| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美人与善性xxx| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久精品久久精品一区二区三区| 18禁动态无遮挡网站| 啦啦啦 在线观看视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 午夜免费鲁丝| 免费黄网站久久成人精品| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 精品卡一卡二卡四卡免费| 高清在线视频一区二区三区| 国产熟女欧美一区二区| 一区二区av电影网| 91精品伊人久久大香线蕉| www.自偷自拍.com| 99精国产麻豆久久婷婷| 色吧在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 成人影院久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 久久精品亚洲av国产电影网| 天堂8中文在线网| 美女视频免费永久观看网站| 久久久国产精品麻豆| 日日撸夜夜添| 国产在视频线精品| 精品一区二区三卡| 1024视频免费在线观看| 观看美女的网站| 黄色 视频免费看| 国产又色又爽无遮挡免| 国产在线免费精品| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 一级,二级,三级黄色视频| 少妇的丰满在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 天天影视国产精品| 美女大奶头黄色视频| 欧美国产精品一级二级三级| 韩国av在线不卡| 久久av网站| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 9191精品国产免费久久| 久久久国产欧美日韩av| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲国产欧美在线一区| 少妇 在线观看| 两个人免费观看高清视频| 交换朋友夫妻互换小说| 欧美国产精品一级二级三级| 热re99久久精品国产66热6| 最新的欧美精品一区二区| 高清av免费在线| 9热在线视频观看99| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| a级毛片在线看网站| 综合色丁香网| 亚洲伊人色综图| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜久久久在线观看| 韩国av在线不卡| www.av在线官网国产| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 日韩视频在线欧美| 色精品久久人妻99蜜桃| 两个人看的免费小视频| 久久久久久人人人人人| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品免费大片| 热re99久久精品国产66热6| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 91麻豆av在线| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久久久久久午夜电影| 性欧美人与动物交配| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产成人av教育| 女性被躁到高潮视频| 一区福利在线观看| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | av天堂在线播放| cao死你这个sao货| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 精品人妻1区二区| 一级,二级,三级黄色视频| 脱女人内裤的视频| 99国产极品粉嫩在线观看| cao死你这个sao货| 欧美最黄视频在线播放免费| 波多野结衣av一区二区av| 日韩大码丰满熟妇| 精品高清国产在线一区| 男女下面进入的视频免费午夜 | 日韩高清综合在线| 热re99久久国产66热| 美女午夜性视频免费| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲av成人一区二区三| 国产精品久久久久久精品电影 | 黄色丝袜av网址大全| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 啪啪无遮挡十八禁网站| 丁香六月欧美| 国产真人三级小视频在线观看| 制服诱惑二区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 1024香蕉在线观看| 国产成人av教育| 国产精品99久久99久久久不卡| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 51午夜福利影视在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 18禁观看日本| 日本 欧美在线| 成人精品一区二区免费| 婷婷六月久久综合丁香| 99久久国产精品久久久| 97人妻天天添夜夜摸| 久久久久久国产a免费观看| 婷婷丁香在线五月| 国产成人欧美| 国产成人精品久久二区二区91| 我的亚洲天堂| 欧美av亚洲av综合av国产av| 免费看十八禁软件| 在线观看舔阴道视频| 在线观看免费视频网站a站| 精品熟女少妇八av免费久了| 手机成人av网站| 国产精品九九99| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 午夜福利在线观看吧| 一区二区三区国产精品乱码| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 国产野战对白在线观看| 大香蕉久久成人网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 精品久久久久久久毛片微露脸| svipshipincom国产片| 成人av一区二区三区在线看| 69av精品久久久久久| 日日夜夜操网爽| 午夜a级毛片| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲人成77777在线视频| 正在播放国产对白刺激| 午夜福利18| 成人手机av| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 一区二区三区高清视频在线| 高清黄色对白视频在线免费看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 欧美在线黄色| 国产成人av教育| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 免费看美女性在线毛片视频| 免费在线观看日本一区| av欧美777| 极品人妻少妇av视频| 精品国产亚洲在线| 国产成人精品无人区| 男男h啪啪无遮挡| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美成人免费av一区二区三区| 999久久久国产精品视频| 这个男人来自地球电影免费观看| av电影中文网址| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久亚洲精品不卡| 免费不卡黄色视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 高清黄色对白视频在线免费看| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲,欧美精品.| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 嫩草影视91久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| av有码第一页| 精品第一国产精品| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 黄片小视频在线播放| 欧美丝袜亚洲另类 | 村上凉子中文字幕在线| 午夜精品在线福利| 国产乱人伦免费视频| 国产精品av久久久久免费| 日日夜夜操网爽| 亚洲激情在线av| 婷婷丁香在线五月| 99国产极品粉嫩在线观看| 好男人在线观看高清免费视频 | av天堂在线播放| 好男人在线观看高清免费视频 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 大香蕉久久成人网| 老司机在亚洲福利影院| 叶爱在线成人免费视频播放| 免费观看精品视频网站| 国产私拍福利视频在线观看| 中出人妻视频一区二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久久国产成人免费| av免费在线观看网站| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲午夜理论影院| 变态另类丝袜制服| xxx96com| 日本 av在线| 中文字幕色久视频| 乱人伦中国视频| 久久久国产成人免费| 成人特级黄色片久久久久久久| 夜夜爽天天搞| 欧美精品啪啪一区二区三区| 黄色视频,在线免费观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 午夜免费观看网址| 校园春色视频在线观看| 亚洲美女黄片视频| 午夜老司机福利片| 午夜视频精品福利| 桃红色精品国产亚洲av| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 黄频高清免费视频| 亚洲午夜理论影院| 色综合站精品国产| 免费在线观看日本一区| 午夜福利,免费看| 在线播放国产精品三级| 美女午夜性视频免费| 久久久国产成人精品二区| 乱人伦中国视频| 亚洲人成电影免费在线| 身体一侧抽搐| 十八禁人妻一区二区| 国产精品一区二区精品视频观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产成+人综合+亚洲专区| 成人亚洲精品一区在线观看| 日日夜夜操网爽| 国产精品一区二区三区四区久久 | 色av中文字幕| 欧美av亚洲av综合av国产av| 免费不卡黄色视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 日本一区二区免费在线视频| 黄色 视频免费看| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲三区欧美一区| 中国美女看黄片| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲一码二码三码区别大吗| 99国产精品一区二区三区| 叶爱在线成人免费视频播放| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 国产精品亚洲av一区麻豆| 好男人电影高清在线观看| 日韩有码中文字幕| 老熟妇仑乱视频hdxx| 69精品国产乱码久久久| 身体一侧抽搐| 欧美色视频一区免费| 亚洲一区二区三区色噜噜| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲精品在线美女| 欧美成狂野欧美在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 精品欧美国产一区二区三| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 成人亚洲精品av一区二区| 午夜福利欧美成人| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 啦啦啦免费观看视频1| 少妇的丰满在线观看| 搡老岳熟女国产| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久久国产欧美日韩av| 99久久精品国产亚洲精品| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产男靠女视频免费网站| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 涩涩av久久男人的天堂| 日本vs欧美在线观看视频| 乱人伦中国视频| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费 | 韩国av一区二区三区四区| 极品教师在线免费播放| 成人永久免费在线观看视频| 久久中文字幕一级| 亚洲最大成人中文| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 9热在线视频观看99| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩精品中文字幕看吧| 久久亚洲真实| 国产精品亚洲一级av第二区| 禁无遮挡网站| 色哟哟哟哟哟哟| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 香蕉国产在线看| 少妇 在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产乱人伦免费视频| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 欧美一级a爱片免费观看看 | 99精品在免费线老司机午夜| 国产精品免费视频内射| 亚洲九九香蕉| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲av美国av| 免费在线观看日本一区| 色综合站精品国产| 黑人操中国人逼视频| 国产成人精品在线电影| 国产1区2区3区精品| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美激情 高清一区二区三区| 日本三级黄在线观看| 国产av一区二区精品久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久精品国产清高在天天线| 高清在线国产一区| 国产91精品成人一区二区三区| svipshipincom国产片| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产成人啪精品午夜网站| 午夜a级毛片| 日本三级黄在线观看| 丰满的人妻完整版| 91大片在线观看| 国产精品,欧美在线| 久久人妻av系列| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产激情欧美一区二区| 久久久久久久午夜电影| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久久久久久中文| 亚洲无线在线观看| 香蕉久久夜色| 嫩草影院精品99| 欧美性长视频在线观看| 欧美在线一区亚洲| 国产精品99久久99久久久不卡| 在线观看午夜福利视频| 国产99白浆流出| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲专区中文字幕在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲免费av在线视频| 最好的美女福利视频网| 亚洲一区高清亚洲精品| 美女免费视频网站| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久热这里只有精品99| 伦理电影免费视频| 精品乱码久久久久久99久播| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲av成人一区二区三| 国产亚洲精品久久久久5区| 色老头精品视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 久热爱精品视频在线9| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 夜夜夜夜夜久久久久| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产区一区二久久| 美女午夜性视频免费| 黄色丝袜av网址大全| 99国产精品免费福利视频| 一区二区三区国产精品乱码| 久久中文字幕人妻熟女| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲人成电影观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲美女黄片视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产精品野战在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 十八禁网站免费在线| 男男h啪啪无遮挡| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲午夜理论影院| 两个人视频免费观看高清| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 欧美色视频一区免费| 波多野结衣高清无吗| 99久久综合精品五月天人人| 欧美午夜高清在线| 精品国产乱子伦一区二区三区| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 午夜激情av网站| 国产色视频综合| 亚洲 国产 在线| 精品欧美一区二区三区在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 脱女人内裤的视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 真人一进一出gif抽搐免费| 乱人伦中国视频| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲av片天天在线观看| 久久久久久久精品吃奶| 激情视频va一区二区三区| 国产麻豆69| 国产主播在线观看一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址 | 91在线观看av| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 欧美不卡视频在线免费观看 | 成人国产一区最新在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲片人在线观看|