2014-2015年鄱陽湖地區(qū)禽流感病毒流行風(fēng)險分析

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禽流感是一種禽類感染疾病，由A型禽流感病毒引起，可分為無致病性禽流感、低致病性禽流感和高致病性禽流感。該病毒有多種不同的亞型，其中，H9N2等可以引起輕型呼吸道疾病、禽蛋減產(chǎn)[1]，H5N6、H10N8、H7N9，H5N1等血清型則能引起嚴(yán)重性疾病甚至致死[2]，嚴(yán)重威脅禽類和人類的健康。鄱陽湖是我國最大的淡水湖泊，也是全球候鳥遷徙的主要途經(jīng)地，有研究發(fā)現(xiàn)候鳥很可能長時間攜帶禽流感病毒并沿遷徙路線將其傳播至遠(yuǎn)處[3]。由于環(huán)鄱陽湖區(qū)生態(tài)環(huán)境適宜，擁有養(yǎng)殖水禽的優(yōu)良條件，因而養(yǎng)禽業(yè)發(fā)達(dá)，擁有國內(nèi)較大的禽蛋產(chǎn)品交易市場。有研究認(rèn)為我國2014年人感染禽流感H10N8 病毒很有可能就來自江西省當(dāng)?shù)鼗钋菔袌鯷4]。近年來，江西省報告禽流感病例較頻繁，因此，探究該地區(qū)容易存在禽流感病毒的環(huán)境場所，以及影響其病毒陽性率的因素成為了一個十分有意義的問題，有利于為今后的禽流感病毒防治工作提供合理的建議。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本收集 采取分層隨機抽樣的方法，以鄱陽湖為核心，選取九江市的永修縣、德安縣和廬山區(qū)、南昌市的南昌縣和新建縣、上饒市的余干縣和萬年縣作為我們的研究現(xiàn)場，詳見圖1。在確定的研究現(xiàn)場中，選取家庭散養(yǎng)戶較多、以養(yǎng)殖雞鴨為主、存在禽類棲息的區(qū)域進行采樣，采樣場所總共分為四類，即候鳥保護區(qū)、家庭散養(yǎng)戶、活禽批發(fā)市場、活禽零售市場。于2014年9月、2015年1月及2015年3月底共進行3次采樣。采集的標(biāo)本共5種，分別是禽類糞便、羽毛、飲水、籠具涂抹物、蛋表面擦拭物，采集完成后，將采集的標(biāo)本置于采樣液中，震蕩離心后，取上層清液分裝，置于-70 ℃低溫保存，并運送至國家流感中心。

圖1 研究現(xiàn)場分布圖Fig.1 Map of the study site

1.2標(biāo)本檢測 吸取200 μL本液，接種于SPF雞胚尿囊腔，在37 ℃恒溫環(huán)境中培養(yǎng)48 h后，利用A型流感病毒快速檢測試紙進行檢測，試紙出現(xiàn)兩條橫線即為陽性結(jié)果，僅一條則為陰性結(jié)果。收集出現(xiàn)快檢陽性結(jié)果的尿囊液，提取核酸進行Realtime RT-PCR，以確定是否為A型流感病毒。

1.3方法 采取Epidata3.0進行雙錄入，SPSS19.0軟件進行相關(guān)統(tǒng)計學(xué)分析。采用卡方檢驗進行構(gòu)成比的比較，檢驗標(biāo)準(zhǔn)選取α=0.05。鑒于候鳥保護區(qū)中并不涉及消毒、清洗、免疫等方面，因此單因素及多因素分析中，并未將此場所納入。

2 結(jié) 果

2.1各類場所禽流感病毒陽性率分布情況 對采樣的4類場所分別進行禽流感病毒檢測，共采集7 470份標(biāo)本，各場所病毒陽性率結(jié)果各有差異，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1377.7，P<0.05)。其中，活禽批發(fā)市場和活禽零售市場的陽性率(分別為32.5%、36.86%)遠(yuǎn)高于候鳥保護區(qū)和家庭散養(yǎng)戶(分別為0.36%、0.9%)，詳見表1。

表1 四類場所禽流感病毒陽性率分布

Tab.1 Distribution of positive rates of avian influenza viruses in four types of sites

地點標(biāo)本數(shù)陽性數(shù)陰性數(shù)陽性率(%)χ2P候鳥保護區(qū)2473924640.361377.70家庭散養(yǎng)戶41903841520.9活禽批發(fā)市場56720935836.86活禽批發(fā)市場56720935836.86合計747033471364.47--

2.2不同場所禽流感病毒陽性率相關(guān)影響因素分析

2.2.1各類場所活禽密度與陽性率分布情況 進行采樣的4類場所中，活禽零售市場的活禽密度和活禽批發(fā)市場(分別為6.4羽/平米、4.7羽/平米)遠(yuǎn)高于家庭散養(yǎng)戶活禽密度和候鳥保護區(qū)(分別為3 羽/平米、0.002 羽/平米)，與各類場所禽流感病毒陽性率分布趨勢大致相同。詳見圖1。

圖2 各類場所活禽密度與陽性率分布圖Fig.2 Distribution of live poultry density and positive rate in different places

2.2.2家庭散養(yǎng)戶、活禽批發(fā)市場以及活禽零售市場陽性率的單因素分析 對家庭散養(yǎng)戶、活禽批發(fā)市場以及活禽零售市場這3類場所進行單因素分析發(fā)現(xiàn)，調(diào)查時間、活禽密度、消毒頻率以及采樣場所類型均對禽流感病毒陽性率有影響，詳見表2。

2.2.3多因素Logistic回歸分析 單因素分析中有統(tǒng)計學(xué)意義的因素為自變量，禽流感病毒陽性率為因變量，進行多因素Logistic回歸分析，賦值情況見表3。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，活禽密度、消毒頻率以及采樣場所均對禽流感病毒陽性率有顯著影響。其中，與高密度組相比，中密度組的禽流感病毒陽性率為高密度組的0.590倍(95%CI=0.398～0.876)，低密度組的禽流感病毒陽性率僅為高密度組的0.014倍(95%CI=0.009～0.021)；與消毒間隔超過7 d組相比，消毒間隔小于7 d組的禽流感病毒陽性率為該組的0.275倍，95%CI=0.187～0.404；與活禽零售市場相比，活禽批發(fā)市場的禽流感病毒陽性率為其的0.825倍(95%CI=0.599～1.135)，家庭散養(yǎng)戶則僅為其的0.016倍，(95%CI=0.011～0.023)。詳見表4。

表2 家庭散養(yǎng)戶、批發(fā)市場和零售市場陽性率的單因素分析結(jié)果

Tab.2 Single-factor analysis of positive rate of scattering raising-households, wholesale markets and retail markets

表3 變量賦值表

Tab.3 Variable assignment table

表4 影響禽流感病毒陽性率的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

Tab.4 Multivariate logistic regression analysis of the positive rate of avian influenza virus

模型系數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤wald值POROR(95%CI)截距0.5070.2703.5180.061采樣時間2014年9月0.1580.1650.9260.3361.1720.849～1.618活禽密度低密度組-4.270.198464.6450.0000.0140.009～0.021中密度組-0.5270.2016.8510.0090.5900.398～0.876消毒頻率消毒間隔小于7天組-1.2920.19743.0320.0000.2750.187～0.404采樣場所活禽批發(fā)市場1.2570.111129.0930.0000.8250.599～1.135家庭散養(yǎng)戶-2.7060.122496.3120.0000.0160.011～0.023

注：采樣時間(參照2015年3月組)；活禽密度(參照高密度組)；消毒頻率(參照消毒間隔超過7 d組)；采樣場所(參照活禽零售市場)

2.2.4活禽家庭散養(yǎng)戶免疫情況與陽性率關(guān)系 對有完整免疫程序與無完整免疫程序的家庭散養(yǎng)戶分別進行采樣，共采集4 190份標(biāo)本，在有完整免疫程序的家庭散養(yǎng)戶采集的2 889份樣本中，陽性標(biāo)本共13份，陽性率為0.45%；在無完整免疫程序的家庭散養(yǎng)戶采集的1 301份樣本中，陽性標(biāo)本共25份，陽性率為1.92%。不同免疫情況的活禽家庭散養(yǎng)戶禽流感病毒陽性率相比，具有統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=21.6,P<0.05)。詳見表5。

表5 活禽家庭散養(yǎng)戶免疫情況

Tab.5 Immunization of domestic poultry households

免疫情況標(biāo)本數(shù)陽性數(shù)陰性數(shù)陽性率(%)χ2P有完整免疫程序28891328760.4521.60.000無完整免疫程序13012512761.92合計41903841520.90--

3 討 論

從2014年9月、2015年1月及2015年3月底3次標(biāo)本采集檢測結(jié)果來看，進行禽流感病毒檢測的4類場所中，禽流感病毒陽性率結(jié)果為活禽零售市場(36.86%)>活禽批發(fā)市場(32.5%)>家庭散養(yǎng)戶(0.9%)>候鳥保護區(qū)(0.36%)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1377.7,P<0.05)。有研究發(fā)現(xiàn)，很多從事禽類養(yǎng)禽人員本身的防護意識不高[5-8]，這是影響?zhàn)B殖場所禽流感病毒陽性率的重要因素。本研究發(fā)現(xiàn)，活禽零售市場及活禽批發(fā)市場病毒陽性率遠(yuǎn)高于家庭散養(yǎng)戶和候鳥保護區(qū)，且從本研究的多因素分析結(jié)果來看，家庭散養(yǎng)戶的活禽禽流感病毒陽性率僅為活禽零售市場的0.016倍，但活禽批發(fā)市場和活禽零售市場的病毒陽性率相差不大，這可能與活禽零售和批發(fā)的禽類接觸危險因素的機會更多有關(guān)。活禽通過各種渠道被運輸?shù)礁鞯?，會顯著增大疫病傳播的風(fēng)險[9]。因此，應(yīng)對各類相關(guān)工作人員做好宣傳教育工作，以提高其防范意識，從而降低禽流感病毒傳播和感染風(fēng)險。

各類場所活禽密度由高到低依次為：活禽零售市場、活禽批發(fā)市場、家庭散養(yǎng)戶、候鳥保護區(qū)，與禽流感病毒陽性率結(jié)果的大體趨勢相同。并且在對該地區(qū)家庭散養(yǎng)戶、活禽批發(fā)市場和活禽零售市場這3類場所進行單因素及多因素分析時，均發(fā)現(xiàn)低活禽密度、高消毒頻率對降低禽流感病毒陽性率有顯著影響：低密度組的禽流感病毒陽性率僅為高密度組的0.014倍，高頻率消毒組的禽流感病毒陽性率僅為低頻率消毒組的0.275倍；在對活禽家庭散養(yǎng)戶免疫情況與陽性率進行分析時發(fā)現(xiàn)，有完整免疫程序的家庭散養(yǎng)戶的陽性率遠(yuǎn)低于無完整免疫程序的家庭散養(yǎng)戶(χ2=21.6,P<0.05)。以上結(jié)果提示我們，對該地區(qū)的禽流感病毒防治工作可以重點從合理規(guī)劃活禽密度、規(guī)范并完善消毒免疫程序這兩個方面進行。

Garber L等人的研究也表明，每天的清潔消毒工作有利于降低活禽市場的陽性檢出率[10]。賈偉新等人認(rèn)為，活禽交易市場在禽流感病毒的傳播過程起著十分重要的作用，病毒陽性率隨著家禽進入市場后的停留時間延長而增加[11]，并且，由于鴨的“特洛伊木馬”作用，其感染病毒后可呈不患病的狀態(tài)[12]，因此，鄱陽湖區(qū)作為禽類貿(mào)易頻繁地區(qū)，加強各類禽類場所的日常消毒工作就顯得尤為重要。為更好地控制疫情傳入交易市場，不僅應(yīng)對各類場所進行消毒，還應(yīng)對運輸?shù)慕煌üぞ叩茸龊孟竟ぷ鳌?/p>

本次調(diào)查檢測到的候鳥保護區(qū)禽流感病毒陽性率雖相對較低，但由于禽流感本身就是適合在鳥類(包括雞鴨)中傳播的流感，感染病毒的候鳥在遷徙過程中，羽毛、糞便等可能污染水源從而造成家禽感染，且候鳥與家禽的密切接觸，也易發(fā)生病毒的交叉感染，因此加強湖區(qū)的監(jiān)測工作，有利于及時發(fā)現(xiàn)相關(guān)環(huán)境疫情，并控制其傳播。鄱陽湖由于其優(yōu)良的條件，擁有豐富的鳥類資源[13]，該地區(qū)作為候鳥遷徙的重要途徑地點，其禽流感病毒的防控工作對全球禽流感病毒控制具有重要意義。

禽流感疫情暴發(fā)后會嚴(yán)重影響禽類市場輸出，擾亂全球禽肉市場物價穩(wěn)定性[14-15]。因此，加強各類工作人員的相關(guān)知識教育、合理規(guī)劃各類場所活禽密度并規(guī)范消毒免疫程序、加強各類場所衛(wèi)生工作的監(jiān)察力度，全面做好禽流感的防控工作，將極大可能的避免由該病毒給各類人群及社會帶來的巨大經(jīng)濟損失。

由于現(xiàn)場調(diào)查受時間和經(jīng)費預(yù)算限制，因此2015年1月份沒有涉及活禽市場和家庭散養(yǎng)戶的采樣，無法分析相關(guān)環(huán)境禽流感病毒陽性率的持續(xù)性變化情況。此為本研究的局限性。

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