• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    細(xì)莖石斛多糖的提取條件優(yōu)化及其抗氧化活性研究

    2018-05-14 08:59MuhammadNaeemAsghar
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年20期
    關(guān)鍵詞:抗氧化活性

    Muhammad Naeem Asghar

    摘要 [目的]研究細(xì)莖石斛多糖的最佳提取條件及其抗氧化活性。[方法]通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面分析,研究細(xì)莖石斛多糖(DMP)的最佳提取條件。通過(guò)體外試驗(yàn)評(píng)價(jià)細(xì)莖石斛多糖的體外抗氧化活性。[結(jié)果]在料液比為1∶53,時(shí)間為3 h,溫度為83 ℃的提取條件下,DMP最高產(chǎn)量可達(dá)185 mg/g。體外抗氧化活性研究結(jié)果表明,DMP對(duì)超氧陰離子自由基、ABTS自由基、羥基自由基具有明顯的清除作用,其中對(duì)ABTS自由基清除能力與維生素C相當(dāng);DMP對(duì)DPPH自由基的清除能力和還原能力效果比較適中。[結(jié)論]該研究揭示細(xì)莖石斛多糖可以作為一種天然抗氧化劑,為基于多糖的藥物及保健食品的開(kāi)發(fā)提供新思路。

    關(guān)鍵詞 細(xì)莖石斛;多醣;最佳提取條件;抗氧化活性

    中圖分類號(hào) S-3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2018)20-0001-05

    Abstract [Objective] The research aimed to study the optimal extraction conditions and antioxidant activity of polysaccharide from Dendrobium monliforme.[Method] Through singlefactor tests and response surface analysis, the optimal conditions for extraction of polysaccharide from Dendrobium monliforme were studied. The antioxidant activity of polysaccharide from Dendrobium monliforme was evaluated in vitro.[Result]The maximum yield obtained 185 mg/g at solidliquid ratio 1∶53, time 3 hours and temperature 83 ℃.The results of in vitro antioxidant activity showed that DMP had obvious scavenging effects of superoxide anion radical, ABTS radical, hydroxyl radical,while moderate scavenging effects of DPPH radical. In addition, ABTS radical scavenging activity of DMP was as stronger as vitamin C. [Conclusion]This polysaccharide could be developed as a new source of natural antioxidants, polysaccharide-based drugs or food ingredients with specific health improving functions.

    Key words Dendrobium moniliforme;Polysaccharide;Optimal extraction conditions;Antioxidant activity

    細(xì)莖石斛[Dendrobium moniliforme (L.) Sw.]為蘭科石斛屬(Dendrobium)多年生草本植物,其莖是藥用石斛的重要來(lái)源,具有滋陰養(yǎng)胃、益氣潤(rùn)肺、潤(rùn)陰生津、清腦明目、益壽延年等功效,對(duì)咽喉疾病、腸胃疾病、白內(nèi)障、心血管疾病、糖尿病和抑制腫瘤生長(zhǎng)具有顯著療效[1]。石斛的藥用成分主要是多糖,在石斛多糖的作用下,能夠顯著提高人體內(nèi)超氧化歧化酶(SOD)含量,降低過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)對(duì)人體的作用,清除體內(nèi)自由基[2-3]。而且,石斛多糖還有抗激素、抗前列腺、抗腫瘤等功能活性[4-6]。但是,目前尚缺少有關(guān)細(xì)莖石斛多糖的最佳提取條件和體外抗氧化活性方面的研究。筆者基于Box-Behnken設(shè)計(jì),采用響應(yīng)面法(RSM)優(yōu)化細(xì)莖石斛的水溶性多糖的提取條件,并研究多糖的抗氧化活性,以期為其應(yīng)用開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料 細(xì)莖石斛原材料采集于安徽省。

    1.2 方法

    1.2.1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

    通過(guò)單因素試驗(yàn)分析提取溫度、提取時(shí)間和料液比對(duì)DMP產(chǎn)率的影響。在優(yōu)化試驗(yàn)因素期間,改變其中一個(gè)因素,而其他因素在每個(gè)試驗(yàn)中保持不變。試驗(yàn)設(shè)計(jì)5個(gè)料液比1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60,選擇5個(gè)提取時(shí)間分別為0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h,提取溫度分別設(shè)計(jì)在20、40、60、80、100 ℃。

    1.2.2 Box-Behnken設(shè)計(jì)。

    根據(jù)單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì),確定提取變量的范圍。根據(jù)Box-Behnken設(shè)計(jì),將它們作為提取多糖的因子,并進(jìn)行了17次隨機(jī)試驗(yàn)以確定最佳水平。設(shè)計(jì)的5個(gè)重復(fù)用于估計(jì)誤差平方和。所有試驗(yàn)進(jìn)行3次,提取糖的平均含量作為響應(yīng)。通過(guò)初步的單因素試驗(yàn)確定變量的水平。表1中顯示了變量的實(shí)際值和編碼值,選擇用于試驗(yàn)的3個(gè)因素X1、X2和X3,分別表示高、中、低值,編碼分別為+1、0和-1。

    響應(yīng)曲面曲線可以預(yù)測(cè)變量的最佳水平,實(shí)現(xiàn)多糖的最大產(chǎn)量?;貧w模型的重要性通過(guò)每個(gè)反應(yīng)的方差分析(ANOVA)來(lái)檢驗(yàn)。R2、調(diào)整R2、 預(yù)測(cè)R2顯示擬合指數(shù)的質(zhì)量,通過(guò)P值發(fā)現(xiàn)模型中的重要變量。另外,比較每個(gè)自變量的實(shí)驗(yàn)值和預(yù)測(cè)值(表2)。

    1.2.3 細(xì)莖石斛多糖的提取。根據(jù)提取參數(shù)將干燥的細(xì)莖石斛粉末用蒸餾水提取3次,3次提取物合并,將合并的提取物過(guò)濾,收集上清液,以10 000 r/min離心10 min,并將濾液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將該物質(zhì)冷卻至室溫,并以1∶4(V/V)的比例緩慢加入95%乙醇,同時(shí)迅速攪拌,于室溫放置過(guò)夜[7]。乙醇沉淀后,通過(guò)Sevag的方法進(jìn)行脫蛋白[8]。然后,將提取物以8 000 r/min離心10 min后,并用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行干燥,最終得到細(xì)莖石斛粗多糖(DMP),用于測(cè)定抗氧化活性的研究。

    1.2.4 體外抗氧化活性測(cè)定。

    1.2.4.1 DPPH自由基清除活性測(cè)定。根據(jù)Gao等[9]方法稍作修改,測(cè)定DMP對(duì)DPPH自由基的清除活性。2 mL不同濃度的多糖樣品(0.5、 1.0、 2.0、4.0和8.0 mg/mL)和2 mL的DPPH-乙醇溶液(0.16 mmol/L)混勻后在25 ℃下溫育15 min,然后在525 nm處測(cè)量吸光度。使用相同濃度抗壞血酸(VC)代替樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。通過(guò)以下公式計(jì)算樣品的DPPH自由基清除活性。

    1.2.4.2 超氧自由基清除活性測(cè)定。

    DMP對(duì)超氧自由基的清除活性是根據(jù)He等[10]的方法并稍作修改。取pH 8.2的Tris-HCl緩沖液4.5 mL,在25 ℃水浴中預(yù)熱20 min。1 mL不同濃度的多糖溶液(0.5、 1.0、 2.0、4.0 和8.0 mg/mL)中依次加入0.4 mL (25 mmol/L)的焦性沒(méi)食子酸,并劇烈混合,在25 ℃反應(yīng)5 min,并用1 mL(8 mol/L)鹽酸終止反應(yīng),測(cè)定吸光度為A1。使用相同的測(cè)定程序,其中蒸餾水代替多糖和焦性沒(méi)食子酸測(cè)定吸光度為A2,焦性沒(méi)食子酸代替多糖測(cè)定吸光度為A3,蒸餾水代替焦性沒(méi)食子酸測(cè)定吸光度為A4。在325 nm處測(cè)量吸光度,通過(guò)以下公式以樣品的清除率評(píng)估樣品的清除超氧化物自由基活性。

    超氧陰離子自由基清除率=[A3(A1A4)-A2]×100%

    1.2.4.3 ABTS自由基清除試驗(yàn)。ABTS+試驗(yàn)溶液的配制是將5.0 mL (7 mmol/L) ABTS+和 2.88 μL (2.45 mmol/L)過(guò)硫酸鉀的混合而成,并在室溫下溫育16 h。在使用時(shí),ABTS+溶液用去離子水稀釋后,在 734 nm處測(cè)得吸光度為0.70±0.02可用。將0.1 mL不同的濃度(0.5、 1.0、 2.0、4.0 和8.0 mg/mL)的多糖樣品加入到1 mL的ABTS+溶液中并混合均勻。將樣品溶液在室溫下放置6 min進(jìn)行反應(yīng), 使用抗壞血酸(VC)作為陽(yáng)性對(duì)照,立即在734 nm處測(cè)量吸光度。在空白對(duì)照中, 樣品用蒸餾水代替。ABTS+清除率通過(guò)以下公式計(jì)算。

    1.2.4.4 羥基自由基清除試驗(yàn)。

    根據(jù)He等[10]的方法測(cè)量羥基自由基的清除活性。1 mL不同濃度的多糖樣品溶液(0.5、 1.0、 2.0、4.0 和8.0 mg/mL)、 l mL(9 mmol/ L)硫酸亞鐵和1 mL(9 mmol/ L)水楊酸乙醇溶液,于37 ℃混合反應(yīng)30 min。用蒸餾水作為參考,在510 nm處測(cè)量吸光度。考慮到多糖本身的吸光度,將用8.8 mmol/L H2O2替代多糖測(cè)定吸光度。通過(guò)下面公式評(píng)估樣品的抗氧化活性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素分析

    2.1.1 料液比對(duì)細(xì)莖石斛多糖提取率的影響。

    從圖1可看出,在固定的提取時(shí)間3 h 和溫度80 ℃時(shí),隨著料液比從1∶20增加至1∶50,提取產(chǎn)率逐漸增加,當(dāng)料液比為1∶50提取率達(dá)到最高值。料液比超過(guò)1∶50時(shí),提取率會(huì)顯著降低。原因可能是水與原料的較大比例意味著內(nèi)部植物細(xì)胞與外部溶劑之間的濃度差異較大,從而使材料中進(jìn)入更多的多糖分子[11]??梢?jiàn)高比率可以反過(guò)來(lái)降低提取率。因此,該試驗(yàn)中1∶50被認(rèn)為是水與原料的最佳比例。

    2.1.2 提取時(shí)間對(duì)DMP提取率的影響。

    在水與原料的比例為1∶50,提取溫度為80 ℃時(shí),對(duì)不同提取時(shí)間對(duì)提取率的影響進(jìn)行考察。從圖2可以看出,在最初的3 h期間,提取產(chǎn)率顯著增加,然而隨著時(shí)間進(jìn)一步增加,產(chǎn)率會(huì)降低。這可能是由于加熱效應(yīng)和過(guò)度較長(zhǎng)的提取時(shí)間,使多糖的結(jié)構(gòu)遭到破壞和分解[12]。提取率在3 h前與提取時(shí)間成正比,3 h后沒(méi)有顯著增加。因此,最佳提取時(shí)間設(shè)定為3 h。

    2.1.3 提取溫度對(duì)DMP提取率的影響。

    提取溫度對(duì)DMP提取率的影響見(jiàn)圖3, 而提取時(shí)間和料液比分別固定為3 h和1∶50。當(dāng)提取溫度從20 ℃升高到80 ℃時(shí),提取率迅速增加,隨著溫度的進(jìn)一步升高,提取率有所下降。這種趨勢(shì)可能是由于高溫提高了多糖的擴(kuò)散系數(shù),提高了多糖在提取溶劑中的溶解度,導(dǎo)致多糖物質(zhì)從物料中流出到提取液中[13]。然而,較高的溫度可能會(huì)促進(jìn)多糖化合物的降解反應(yīng)。因此,該試驗(yàn)選擇的最佳提取溫度為80 ℃。

    2.2 Box-Behnken分析

    2.2.1 DMP提取條件的優(yōu)化。

    經(jīng)計(jì)算,所得模型中的F值

    為13.47,這意味著該模型是顯著的。相對(duì)于純粹的誤差,失擬值0.23并不顯著。檢測(cè)方程回歸系數(shù)的顯著性結(jié)果表明,多糖產(chǎn)量受線性項(xiàng)X1、X2、X3、X2X3、X22、X32影響顯著。P值是顯著的,因?yàn)樗鼈兊陀陬A(yù)期的 R2(0.799 6)與調(diào)整R2(0.875 2)合理,所以該模型可用。

    通過(guò)使用Design Expert軟件繪制響應(yīng)曲面來(lái)研究2個(gè)參數(shù)之間的相互作用并確定最大DMP產(chǎn)量的最佳條件。3D響應(yīng)面和2D輪廓圖如圖4和圖5所示。每幅圖顯示了2個(gè)變量對(duì)DMP產(chǎn)量的影響,而另一個(gè)固定在0水平。輪廓圖的不同形狀表示變量之間的不同相互作用。

    響應(yīng)曲面曲線(圖4~5)反映了變量與DMP多糖產(chǎn)量之間的定量關(guān)系。隨著料液比、提取時(shí)間和提取溫度的升高,

    多糖產(chǎn)量逐漸增加。當(dāng)料液比增加時(shí),可以將多糖產(chǎn)量從120 mg/g提高至183 mg/g。隨著料液比增加,較高的溫度也可以增加多糖的產(chǎn)量。但料液比超過(guò)1∶50或提取時(shí)間超過(guò)3 h或提取溫度超過(guò)80 ℃時(shí),多糖產(chǎn)量將下降,并分別在響應(yīng)面上得到峰值。在一定范圍內(nèi),較長(zhǎng)的提取時(shí)間和較高的溫度將顯著提高多糖產(chǎn)量。

    2.2.2 驗(yàn)證預(yù)測(cè)模型。

    從回歸方程得到DMP最大產(chǎn)量的最佳提取條件為料液比1∶53、提取時(shí)間3 h、提取溫度83 ℃。在最佳提取條件下,試驗(yàn)DMP產(chǎn)量為185 mg/g,與預(yù)測(cè)值相符,表明響應(yīng)模型可用于優(yōu)化DMP提取過(guò)程。因此,可以確定DMP多糖的最佳提取條件是料液比1∶53、提取時(shí)間3 h、提取溫度83 ℃,多糖產(chǎn)量可以達(dá)185 mg/g。

    2.3 多糖的抗氧化活性

    2.3.1 DPPH自由基清除活性。

    DPPH是具有質(zhì)子自由基的重要化合物,一旦接觸質(zhì)子自由基清除劑會(huì)使其含量極大減少。目前,許多研究表明,從植物中分離出的多糖能夠清除自由基,因此可以歸類為天然抗氧化劑[14-16]。從圖6可看出,0.5、1.0、2.0、4.0 和 8.0 mg/mL的DMP對(duì)DPPH自由基清除能力分別為2.35%、8.79%、18.99%、33.28%和49.29%。在相同濃度0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/mL下,VC的清除活性分別為88.00%、91.52%、91.99%、92.60%和92.40%,可見(jiàn)當(dāng)VC濃度增加到8.0 mg/mL其清除率有所降低。細(xì)莖石斛多糖溶液以劑量依賴的方式對(duì)DPPH自由基產(chǎn)生清除作用,但在相同濃度下其作用稍低于VC。因此,DPPH清除率隨著DMP濃度的增加而增加,進(jìn)一步揭示DMP可以提供氫原子并對(duì)DPPH自由基發(fā)揮強(qiáng)有力的清除活性。

    2.3.2 超氧自由基清除活性。

    超氧化物自由基是具有高毒性的活性氧物質(zhì),可以轉(zhuǎn)化為有害的物質(zhì),如過(guò)氧化氫、羥基自由基和破壞性生物分子,導(dǎo)致慢性疾病。過(guò)氧化物陰離子自由基由酶系統(tǒng)產(chǎn)生,如過(guò)氧化物酶、NADPH氧化酶和黃嘌呤氧化酶[17-18]。盡管超氧陰離子在大多數(shù)生物體中是由線粒體電子系統(tǒng)產(chǎn)生的自由基。它可以很容易地與其他分子反應(yīng)并形成更強(qiáng)的活性氧和次生自由基,如羥基自由基、過(guò)氧化氫和單線態(tài)氧,然后可能導(dǎo)致各種疾病如炎癥、癌癥和神經(jīng)變性。因此,超氧陰離子自由基的清除對(duì)抗氧化非常重要。最近研究證實(shí),特定的天然多糖表現(xiàn)出顯著的清除超氧陰離子自由基的活性[19]。

    從圖7可看出,DMP以劑量依賴性方式對(duì)超氧陰離子自由基發(fā)揮明顯的清除活性,特別是當(dāng)DMP的濃度為4.0和8.0 mg/mL時(shí),其清除率分別為41.21%和65.60%。而較低濃度(0.5~2.0 mg/mL)的DMP溶液顯示出較低的清除活性。表明DMP可清除超氧化物陰離子自由基,特別是在高濃度時(shí)。

    2.3.3 ABTS自由基清除試驗(yàn)。

    ABTS分析經(jīng)常用于評(píng)估單種化合物和各種植物的復(fù)雜混合物的總抗氧化能力[20-22]。為了研究DMP的抗氧化能力,對(duì)ABTS自由基清除活性進(jìn)行測(cè)定。ABTS可以被氧化劑氧化產(chǎn)生亞穩(wěn)態(tài)自由基陽(yáng)離子的過(guò)氧化物酶底物,作為反映提取多糖的抗氧化活性的指標(biāo)[23]。在該測(cè)定中,在過(guò)硫酸鉀存在下的ABTS被轉(zhuǎn)化為自由基陽(yáng)離子(在734 nm處具有吸光度)。當(dāng)與抗氧化劑反應(yīng)時(shí),藍(lán)色ABTS自由基陽(yáng)離子變?yōu)闊o(wú)色。因此,抗氧化能力越高,在734 nm處吸光度越小[22]。

    從圖8可看出,DMP多糖樣品對(duì)ABTS自由基的清除活性隨著濃度的升高而增加。不同濃度的DMP多糖(0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/mL)和VC的清除能力分別為5.05%、23.77%、48.73%、73.35%、95.62%和99.16%、98.99%、99.16%、99.32%、100.00%。當(dāng)濃度為8.0 mg/mL時(shí),DMP多糖表現(xiàn)出與VC幾乎相同的清除活性,僅比VC低4.38%。表明DMP對(duì)ABTS自由基具有很強(qiáng)的清除能力,可以作為潛在的抗氧化劑進(jìn)行探索。

    2.3.4 羥基自由基清除活性。

    羥基自由基(·OH)被認(rèn)為是一種強(qiáng)大的氧化劑,可嚴(yán)重?fù)p害生物分子[24]?!H是最具反應(yīng)活性和有害的活性氧物質(zhì)之一,可以輕易地攻擊脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA,導(dǎo)致細(xì)胞死亡和組織損傷。因此,去除羥基對(duì)保護(hù)生命系統(tǒng)非常重要[25]。

    從圖9可看出,DMP樣品對(duì)·OH的清除效果呈劑量依賴性,0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/mL的DMP樣品對(duì)·OH的清除率分別達(dá)到45.35%、56.46%、70.16%、77.18%和80.29%;DMP對(duì)·OH的清除作用非常接近VC。表明在以VC為陽(yáng)性對(duì)照下,DMP多糖可以劑量依賴性方式清除·OH,進(jìn)一步驗(yàn)證DMP多糖可作為潛在抗氧化劑。

    3 結(jié)論

    綜合以上研究結(jié)果,可得到DMP最佳的提取條件為料液比1∶53、提取時(shí)間3 h、提取溫度83 ℃,在這種提取條件下,DMP的最大產(chǎn)量可達(dá)到185 mg/g。而且,DMP表現(xiàn)出顯著的抗氧化活性。因此,DMP可作為功能性食品中的天然抗氧化劑。

    參考文獻(xiàn)

    [1] LUKOVA P,KARCHEVABAHCHEVANSKA D,NIKOLOVA M,et al. Comparison of structure and antioxidant activity of polysaccharides extracted from the leaves of Plantago major L., P. media L. and P. lanceolata L.[J]. Bulgarian chemical communications,2017,49(4):282-288.

    [2] WANG M C,ZHU P L,ZHAO S W,et al.Characterization, antioxidant activity and immunomodulatory activity of polysaccharides from the swollen culms of Zizania latifolia[J].International journal of biological macromolecules,2017, 95:809-817.

    [3] XU Z,WANG H D,WANG B L,et al.Characterization and antioxidant activities of polysaccharides from the leaves of Lilium lancifolium Thunb.[J].International journal of biological macromolecules,2016,92:148-155.

    [4] LEE Y H,PARK J D,BAEK N I,et al. In vitro and in vivo antitumoral phenanthrenes from the aerial parts of Dendrobium nobile[J].Planta medica, 1995,61(2):178-180.

    [5]LIN T H,CHANG S J,CHEN C C,et al.Two phenanthraquinones from Dendrobium moniliforme[J].Journal of natural products,2001,64(8):1084-1086.

    [6] HSU J L,LEE Y J,LEU W J,et al.Moniliformediquinone induces in vitro and in vivo antitumor activity through glutathione involved DNA damage response and mitochondrial stress in human hormone refractory prostate cancer[J].The journal of urology,2014,191(5):1429-1438.

    [7] JIANG P,YUAN L,CAI D L,et al.Characterization and antioxidant activities of the polysaccharides from mycelium of Phellinus pini and culture medium[J]. Carbohydrate polymers,2015,117:600-604.

    [8] SEVAG M G,LACKMAN D B,SMOLENS J.The isolation of the components of streptoeoeeal nueleoproteins in serologieally active form[J]. Journal of biological chemistry,1938,124(1):42-49.

    [9] GAO J,ZHANG T,JIN Z Y,et al.Structural characterisation, physicochemical properties and antioxidant activity of polysaccharide from Lilium lancifolium Thunb.[J].Food chemistry,2015,169:430-438.

    [10] HE Y,YE M,JING L Y,et al.Preparation, characterization and bioactivities of derivatives of an exopolysaccharide from Lachnum[J].Carbohydrate polymers, 2015,117:788-796.

    [11] SAMAVATI V,MANOOCHEHRIZADE A.Polysaccharide extraction from Malva sylvestris and its antioxidant activity[J].International journal of biological macromolecules,2013,60(6):427-436.

    [12] YING Z,HAN X X,LI J R.Ultrasoundassisted extraction of polysaccharides from mulberry leaves[J].Food chemistry,2011,127(3):1273-1279.

    [13] SAMAVATI V,YARMAND M S.Statistical modeling of process parameters for the recovery of polysaccharide from Morus alba leaf[J].Carbohydrate polymers,2013,98(1):793-806.

    [14] AMAROWICZ R,PEGG R B,RAHIMIMOGHADDAM P,et al. Free-radical scavenging capacity and antioxidant activity of selected plant species from the Canadian prairies[J].Food chemistry,2004,84(4):551-562.

    [15] MISHRA K,OJHA H,CHAUDHURY N K.Estimation of antiradical properties of antioxidants using DPPH assay:A critical review and results[J]. Food chemistry,2012,130(4):1036-1043.

    [16] XU W T,ZHANG F F,LUO Y B,et al.Antioxidant activity of a watersoluble polysaccharide purified from Pteridium aquilinum[J].Carbohydrate research, 2009,344(2):217-222.

    [17] YUAN H M,ZHANG W W,LI X G,et al.Preparation and in vitro antioxidant activity of κcarrageenan oligosaccharides and their oversulfated, acetylated, and phosphorylated derivatives[J].Carbohydrate research,2005,340(4):685-692.

    [18] CHEN J J,ZHANG T,JIANG B,et al.Characterization and antioxidant activity of Ginkgo biloba exocarp polysaccharides[J].Carbohydrate polymers,2012, 87(1):40-45.

    [19] WOOTTONBEARD P C,RYAN L.Improving public health?:The role of antioxidantrich fruit and vegetable beverages[J].Food research international, 2011,44(10):3135-3148.

    [20] LUO A X,HE X J,ZHOU S D,et al.Purification, composition analysis and antioxidant activity of the polysaccharides from Dendrobium nobile Lindl.[J]. Carbohydrate polymers,2010,79(4):1014-1019.

    [21] HUANG S S,HUANG G J,HO Y L,et al.Antioxidant and antiproliferative activities of the four Hydrocotyle species from Taiwan[J].Botanical studies, 2008,49(4):311-322.

    [22] KATALINIC V,MILOS M,KULISIC T,et al.Screening of 70 medicinal plant extracts for antioxidant capacity and total phenols[J].Food chemistry,2006, 94(4):550-557.

    [23] HAN J,WENG X C,BI K S.Antioxidants from a Chinese medicinal herb-Lithospermum erythrorhizon[J].Food chemistry,2008,106(1):2-10.

    [24] YUAN J F,ZHANG Z Q,F(xiàn)AN Z C,et al.Antioxidant effects and cytotoxicity of three purified polysaccharides from Ligusticum chuanxiong Hort.[J].Natural product research &development,2012,74(4):822-827.

    [25] CHEN S X,SCHOPFER P.Hydroxylradical production in physiological reactions[J].FEBS Journal,1999,260(3):726-735.

    猜你喜歡
    抗氧化活性
    幾種無(wú)花果干制產(chǎn)品抗氧化性的測(cè)定
    牡蠣多糖蘋(píng)果果醋的制備及其抗氧化活性研究
    海洋藥物
    黃酮類化合物的抗氧化性與其化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系
    级片在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 91在线观看av| 天堂网av新在线| 99久久成人亚洲精品观看| 久久人人爽人人片av| 国产成人影院久久av| videossex国产| 乱人视频在线观看| 国产成年人精品一区二区| 国产精品人妻久久久影院| 午夜a级毛片| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩一本色道免费dvd| 内射极品少妇av片p| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产亚洲精品av在线| a级一级毛片免费在线观看| 青春草视频在线免费观看| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产精品久久久久久久电影| 伦精品一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 午夜视频国产福利| 级片在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 91精品国产九色| 国产精品一二三区在线看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 日本-黄色视频高清免费观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 色5月婷婷丁香| 久久久久久久久久成人| 久久久久免费精品人妻一区二区| 中文字幕av在线有码专区| 精品久久久噜噜| 青春草视频在线免费观看| 国内精品久久久久精免费| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久精品国产亚洲网站| 99久久精品国产国产毛片| 卡戴珊不雅视频在线播放| 一级毛片久久久久久久久女| 偷拍熟女少妇极品色| 久久久久久久午夜电影| 嫩草影院精品99| 偷拍熟女少妇极品色| 综合色丁香网| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品久久视频播放| 天天躁日日操中文字幕| 国产精品久久视频播放| 国产av一区在线观看免费| 中出人妻视频一区二区| 国产91av在线免费观看| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品永久免费网站| 在线播放国产精品三级| 一本精品99久久精品77| 别揉我奶头 嗯啊视频| 直男gayav资源| 久久久a久久爽久久v久久| 成人精品一区二区免费| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产成人freesex在线 | 黄色视频,在线免费观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| av在线播放精品| 91在线精品国自产拍蜜月| av在线播放精品| 久久久久九九精品影院| 毛片女人毛片| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品欧美国产一区二区三| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品无人区乱码1区二区| 成年女人毛片免费观看观看9| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av不卡在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 日本在线视频免费播放| 国产精品永久免费网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 日本在线视频免费播放| 真实男女啪啪啪动态图| 真人做人爱边吃奶动态| 内射极品少妇av片p| 在线播放无遮挡| 免费看光身美女| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 美女cb高潮喷水在线观看| 一进一出抽搐动态| 欧美丝袜亚洲另类| 午夜激情欧美在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 十八禁国产超污无遮挡网站| 看片在线看免费视频| 看黄色毛片网站| 成年版毛片免费区| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 精品人妻偷拍中文字幕| 又粗又爽又猛毛片免费看| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲美女视频黄频| 国产高清视频在线观看网站| 麻豆国产97在线/欧美| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲av二区三区四区| 日本黄色视频三级网站网址| 一区二区三区高清视频在线| 免费看a级黄色片| 国产伦精品一区二区三区视频9| 少妇的逼好多水| 免费观看人在逋| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 99热这里只有精品一区| 国产在视频线在精品| 赤兔流量卡办理| 久久久久国产网址| 亚洲电影在线观看av| 日本与韩国留学比较| 成人三级黄色视频| 午夜a级毛片| 国产男人的电影天堂91| 激情 狠狠 欧美| 免费搜索国产男女视频| 国产亚洲欧美98| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲国产欧美人成| 狠狠狠狠99中文字幕| 插阴视频在线观看视频| 一进一出抽搐动态| 一级av片app| 免费观看精品视频网站| 国产精品不卡视频一区二区| 国产黄片美女视频| ponron亚洲| 亚洲美女黄片视频| av免费在线看不卡| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 超碰av人人做人人爽久久| 男插女下体视频免费在线播放| a级毛色黄片| 欧美国产日韩亚洲一区| av专区在线播放| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| ponron亚洲| 精品国产三级普通话版| 亚洲自偷自拍三级| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 99久久精品国产国产毛片| 欧美成人精品欧美一级黄| 欧美最黄视频在线播放免费| 99久久九九国产精品国产免费| 成人av一区二区三区在线看| 深夜a级毛片| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日本一二三区视频观看| 三级毛片av免费| 又爽又黄a免费视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 男女边吃奶边做爰视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 中文字幕av在线有码专区| 久久精品91蜜桃| 日本 av在线| 国产午夜福利久久久久久| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲乱码一区二区免费版| 在线免费观看的www视频| а√天堂www在线а√下载| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 校园春色视频在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久人人精品亚洲av| 亚洲av免费在线观看| 嫩草影院入口| 老司机福利观看| av在线亚洲专区| ponron亚洲| 91麻豆精品激情在线观看国产| 69人妻影院| 少妇熟女欧美另类| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美又色又爽又黄视频| 97超视频在线观看视频| 日韩欧美精品免费久久| 免费观看的影片在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 日韩欧美 国产精品| 久久这里只有精品中国| 免费大片18禁| 简卡轻食公司| 丝袜喷水一区| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 综合色av麻豆| 久久九九热精品免费| 精品久久久久久成人av| 欧美日韩国产亚洲二区| 日韩av不卡免费在线播放| 久久人人爽人人爽人人片va| 最近手机中文字幕大全| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 日日摸夜夜添夜夜爱| 搡老岳熟女国产| 亚洲国产精品久久男人天堂| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 久久久久久久久久成人| 99精品在免费线老司机午夜| 免费av不卡在线播放| 亚洲成人中文字幕在线播放| 偷拍熟女少妇极品色| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲av五月六月丁香网| 午夜影院日韩av| 91久久精品国产一区二区三区| 老司机影院成人| 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 国产久久久一区二区三区| 午夜视频国产福利| 亚洲成人av在线免费| 91av网一区二区| 嫩草影院精品99| aaaaa片日本免费| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产精品av视频在线免费观看| 69av精品久久久久久| 少妇熟女欧美另类| 一级毛片aaaaaa免费看小| 欧美区成人在线视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 日本三级黄在线观看| 91狼人影院| 日本色播在线视频| 18禁在线播放成人免费| 国产美女午夜福利| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 身体一侧抽搐| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲不卡免费看| 久久久久国产网址| 国产三级在线视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产美女午夜福利| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 国产高清有码在线观看视频| 国产精品伦人一区二区| 国产探花极品一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| a级毛片a级免费在线| av女优亚洲男人天堂| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 黄色日韩在线| 国产伦精品一区二区三区视频9| 午夜老司机福利剧场| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产精品1区2区在线观看.| 日韩精品有码人妻一区| 免费搜索国产男女视频| 99视频精品全部免费 在线| 国产高清不卡午夜福利| 久久久成人免费电影| 嫩草影院新地址| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 麻豆一二三区av精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 淫秽高清视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 看片在线看免费视频| 97碰自拍视频| 久久久精品欧美日韩精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲真实伦在线观看| 免费大片18禁| 又爽又黄无遮挡网站| 国产午夜精品论理片| 少妇被粗大猛烈的视频| 毛片一级片免费看久久久久| 国产久久久一区二区三区| 国产老妇女一区| 亚州av有码| 午夜激情福利司机影院| 国内精品久久久久精免费| 一区二区三区高清视频在线| 欧美精品国产亚洲| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 真人做人爱边吃奶动态| 国产三级在线视频| 日韩av在线大香蕉| 在线播放国产精品三级| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产男人的电影天堂91| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人人妻人人看人人澡| 欧美+亚洲+日韩+国产| 乱人视频在线观看| 免费看日本二区| 精品福利观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美一区二区国产精品久久精品| 可以在线观看的亚洲视频| 99热精品在线国产| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 一级av片app| 国产老妇女一区| 成年女人永久免费观看视频| 51国产日韩欧美| 成人永久免费在线观看视频| 日韩精品有码人妻一区| 午夜精品在线福利| 国产精品电影一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 一夜夜www| 日本在线视频免费播放| 日本黄大片高清| 国产精品女同一区二区软件| 校园春色视频在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 晚上一个人看的免费电影| 国产黄片美女视频| 天堂动漫精品| 美女 人体艺术 gogo| 欧美日韩国产亚洲二区| 一a级毛片在线观看| 1024手机看黄色片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日韩精品有码人妻一区| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲无线观看免费| 看非洲黑人一级黄片| 日韩高清综合在线| 午夜视频国产福利| 精品久久久久久久久亚洲| 男女视频在线观看网站免费| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久久久国内视频| 国产av麻豆久久久久久久| 欧美日本亚洲视频在线播放| 一个人观看的视频www高清免费观看| 免费观看精品视频网站| 国产 一区精品| 在线观看午夜福利视频| 国产av麻豆久久久久久久| 91av网一区二区| 毛片女人毛片| 欧美+日韩+精品| 精品国产三级普通话版| 麻豆国产av国片精品| 久久亚洲国产成人精品v| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲国产色片| 内射极品少妇av片p| 3wmmmm亚洲av在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩国内少妇激情av| 国产精品久久久久久精品电影| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久人人精品亚洲av| 精品欧美国产一区二区三| 国产探花极品一区二区| 天堂动漫精品| 晚上一个人看的免费电影| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲七黄色美女视频| 日本一本二区三区精品| 蜜臀久久99精品久久宅男| 美女内射精品一级片tv| 一级毛片aaaaaa免费看小| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲国产色片| 国产高清不卡午夜福利| 国产精品日韩av在线免费观看| 色av中文字幕| 91久久精品电影网| 搡老妇女老女人老熟妇| 丝袜喷水一区| 午夜福利18| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 午夜日韩欧美国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲成人av在线免费| 淫秽高清视频在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 久久精品人妻少妇| 夜夜爽天天搞| 久久久久免费精品人妻一区二区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久久国产成人精品二区| 国产精品一区二区性色av| 国产高清有码在线观看视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产高清激情床上av| 午夜激情福利司机影院| 一级黄色大片毛片| 国产精品精品国产色婷婷| 中文在线观看免费www的网站| 人人妻人人澡欧美一区二区| 日韩高清综合在线| 国产成人一区二区在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 免费黄网站久久成人精品| 日日啪夜夜撸| 免费观看的影片在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 成人特级av手机在线观看| 国产久久久一区二区三区| 国产男靠女视频免费网站| 久久久色成人| 国产中年淑女户外野战色| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲五月天丁香| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 亚洲美女视频黄频| 韩国av在线不卡| 国产成人精品久久久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 真人做人爱边吃奶动态| 色吧在线观看| 老司机福利观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 免费看光身美女| 中文字幕熟女人妻在线| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 久久久久国产网址| 淫秽高清视频在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产一级毛片七仙女欲春2| 色播亚洲综合网| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 日本黄色视频三级网站网址| 丝袜美腿在线中文| 18+在线观看网站| 亚洲精品色激情综合| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 日韩欧美精品v在线| 久久精品夜色国产| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久视频播放| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99久久精品热视频| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产淫片久久久久久久久| 一级黄色大片毛片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久亚洲国产成人精品v| 精品久久久久久久久av| 久久人妻av系列| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲五月天丁香| 久久久久国产网址| 国产精品女同一区二区软件| 波多野结衣巨乳人妻| 国产黄a三级三级三级人| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久这里只有精品中国| 国产单亲对白刺激| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 最近手机中文字幕大全| 亚洲专区国产一区二区| 免费人成视频x8x8入口观看| 一个人看视频在线观看www免费| 成人漫画全彩无遮挡| 波多野结衣巨乳人妻| 国产欧美日韩精品亚洲av| 99热这里只有是精品50| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 热99在线观看视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产男靠女视频免费网站| 热99re8久久精品国产| 日韩一本色道免费dvd| 成人性生交大片免费视频hd| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 最近手机中文字幕大全| 一个人看的www免费观看视频| 男女之事视频高清在线观看| 国产免费男女视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美日本视频| 露出奶头的视频| 91在线观看av| 亚洲最大成人av| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲无线在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 露出奶头的视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 97在线视频观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日韩在线观看h| 麻豆av噜噜一区二区三区| 嫩草影视91久久| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产日本99.免费观看| 亚洲av中文av极速乱| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久欧美精品欧美久久欧美| 热99re8久久精品国产| 99国产极品粉嫩在线观看| 久久99热6这里只有精品| 2021天堂中文幕一二区在线观| aaaaa片日本免费| 国产精品福利在线免费观看| 干丝袜人妻中文字幕| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品国产三级普通话版| 日本在线视频免费播放| 国产精品一及| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲成人av在线免费| 99久久精品国产国产毛片| 国产成人精品久久久久久| 久久久国产成人免费| 亚洲第一区二区三区不卡| av女优亚洲男人天堂| 此物有八面人人有两片| 精品人妻熟女av久视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品一二三区在线看| 成人三级黄色视频| 中文字幕免费在线视频6| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 欧美+亚洲+日韩+国产| 美女高潮的动态| 久久精品国产自在天天线| 久久久久久久久久久丰满| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 久久久久久久午夜电影| 欧美激情国产日韩精品一区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 小说图片视频综合网站| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美区成人在线视频| 1024手机看黄色片| 国产爱豆传媒在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 3wmmmm亚洲av在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲av成人av| 中文字幕av在线有码专区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲高清免费不卡视频| 女同久久另类99精品国产91| 午夜福利视频1000在线观看| 97碰自拍视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 久久久成人免费电影| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲熟妇熟女久久| 尾随美女入室| 99国产精品一区二区蜜桃av| 插逼视频在线观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| av在线观看视频网站免费|