現(xiàn)代分析技術(shù)在藥物分析中的研究與應(yīng)用

孟慶妍

[摘要] 伴隨社會進(jìn)步及經(jīng)濟(jì)發(fā)展，健康生活得到越來越多人民群眾的關(guān)注及重視，促使醫(yī)藥市場迎來全新的發(fā)展機(jī)遇及發(fā)展契機(jī)。質(zhì)量作為保證藥品生產(chǎn)安全性的基礎(chǔ)，是藥品分析學(xué)的研究重點(diǎn)內(nèi)容，而做好藥品生產(chǎn)及開發(fā)工作對于創(chuàng)造健康生活環(huán)境具有不可比擬的積極作用，客觀上保證藥物生產(chǎn)質(zhì)量。該文以現(xiàn)代化分析技術(shù)為切入點(diǎn)分析其技術(shù)特點(diǎn)及研發(fā)階段，就提出具體的藥物分析應(yīng)用要點(diǎn)進(jìn)行深入探究，旨在為從業(yè)人員積累更多的工作經(jīng)驗(yàn)。

[關(guān)鍵詞] 現(xiàn)代化分析技術(shù)；藥物分析；研究及應(yīng)用

[中圖分類號] R917 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）10（c）-0082-02

近幾年來，現(xiàn)代化分析技術(shù)手段被廣泛應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域，得到越來越多從業(yè)人員的關(guān)注及重視，并且藥物定量分析不止局限于測定藥物中包含的微量元素，更需要檢測藥物中各項(xiàng)有機(jī)成分。按方法原理，藥物分析手段可分為毛細(xì)管電泳法、色譜法、質(zhì)譜法、光度分析法及其他分析法等，并且以往研究及相關(guān)研究資料中傾向于采取化學(xué)發(fā)光法、熒光光度法及分光光度法進(jìn)行藥物分析[1-2]。由此可見，相關(guān)技術(shù)人員以質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、磷光光譜法及吸收光譜法為切入點(diǎn)分析其于藥物分析測定方面的應(yīng)用現(xiàn)狀，尤其是聯(lián)用技術(shù)進(jìn)步，將高效液相色譜法與質(zhì)譜法相結(jié)合或?qū)⒚?xì)管電泳法與氣相色譜法相結(jié)合，促使測定樣品種類更為豐富多樣，甚至由簡單藥劑向復(fù)雜生物樣品拓展，成為臨床藥物分析的主要技術(shù)手段。鑒于此，該文針對現(xiàn)代分析技術(shù)在藥物分析中應(yīng)用的研究具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

1 共振瑞利散射法

自上個世紀(jì)90年代末期出現(xiàn)共振瑞利散射法（英文簡稱RRS）以來，被廣泛應(yīng)用于生物大分子測定領(lǐng)域，例如：無機(jī)離子測定、蛋白質(zhì)測定及核算測定等，屬于新興分析技術(shù)手段之一，并且與其他分析技術(shù)手段相比，具有靈敏度高及便捷快速等鮮明特點(diǎn)[3-4]。同時，共振瑞利散射法應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域的報(bào)道及研究較多，例如：選擇共振瑞利散射法測定四環(huán)素類抗生素類藥物及氨基糖苷類藥物，甚至有學(xué)者利用共振瑞利散射法研究部分蒽環(huán)類抗癌藥物與剛果紅間相互作用原理，一定程度上提高藥物定量測定準(zhǔn)確性，初步取得令人滿意的測定效果。

2 原子吸收光譜法

原子吸收光譜法（又稱原子吸收分光光度法且英文簡稱AAS），起源于澳大利亞科學(xué)家率先發(fā)表的原子吸收光譜法分析文章，被廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)領(lǐng)域得到越來越多從業(yè)人員的關(guān)注及重視，并且初步發(fā)現(xiàn)適用于原子吸收法測定金屬離子多達(dá)十余種。近幾年來，原子吸收法被應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域，側(cè)重于測定藥物中有機(jī)成分[5-6]。按技術(shù)原理，原子吸收光譜法可分為間接原子吸收法及直接原子吸收法。有學(xué)者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，選擇直接原子吸收光譜法測定藥物鹽酸苯海拉明，其結(jié)果與藥典法相比其相對平均偏差不超過0.4%且線性范圍為5.0～50.0 μg/L。

有研究資料顯示，多位學(xué)者分別發(fā)現(xiàn)選擇間接原子吸收光譜法測定頭孢類藥物、氫溴酸山莨菪堿及胱氨酸藥物均可取得令人滿意的結(jié)果。由此可見，原子吸收光譜法與化學(xué)發(fā)光法原理相似，主要通過將原子吸收分光光度法與流動注射技術(shù)相結(jié)合，一定程度上減輕原子吸收光譜法中沉淀、手工分離、洗滌及稀釋的難度，不止大大簡化操作流程，更適用于批量生產(chǎn)，有利于控制其總體質(zhì)量。有學(xué)者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，選擇流動注射在線過濾稀釋-原子吸收分光光度法測定克托普利、安乃近及諾氟沙星等藥物能取得令人滿意的結(jié)果，大大壓縮總體檢測時間。

3 磷光分析法

相較于熒光，磷光具有使用年限長、輻射波長長及磷光年限及強(qiáng)度對重原子及順磁性離子極其敏感等鮮明特點(diǎn)。從磷光發(fā)展至分析應(yīng)用各個階段，歷經(jīng)十余年發(fā)展變革，先后形成固體基質(zhì)室溫磷光法、敏化/猝滅室溫磷光法（又稱能量轉(zhuǎn)移室溫磷光法）、膠束增穩(wěn)室溫磷光法、環(huán)境誘導(dǎo)室溫磷光法及磷光傳感器與磷光探針結(jié)合法等，被廣泛應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域。同時，有學(xué)者以室溫磷光傳感器、低溫磷光、流體介質(zhì)室溫磷光及固體基質(zhì)室溫磷光為切入點(diǎn)分析于藥物分析中應(yīng)用效果，發(fā)現(xiàn)上述分析技術(shù)適用于測定抗癌藥物、維生素B2、四環(huán)素類、中草藥有效成分及生物堿等藥物。

4 現(xiàn)代化色譜法

自上個世紀(jì)初期俄羅斯植物學(xué)家明確提出色譜法概念以來，主要將碳酸鈣視為固定相裝入色譜柱中充分發(fā)揮石油醚流動作用實(shí)現(xiàn)上下洗脫分離植物色素，并且歷經(jīng)百余年發(fā)展，色譜法中涉及技術(shù)、方法及理論日趨成熟，例如：高效液相色譜及氣相色譜等，其自動化水平不斷增強(qiáng)，逐步研發(fā)出全新的檢測器及固定相，尤其是新興的全新色譜法憑借其自身應(yīng)用優(yōu)勢，占據(jù)藥物分析領(lǐng)域極其重要的地位及作用。按技術(shù)類型，現(xiàn)代化色譜法可分為高效液相色譜法、毛細(xì)管氣相色譜法、毛細(xì)管電色譜法及超臨界流體色譜法，而高效液相色譜法可細(xì)分為超高效液相色譜法及反相高效液相色譜法。

4.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法（英文簡稱HPLC）是目前我國藥物分析應(yīng)用最為廣泛的分析方法，適用于分離分析熱不穩(wěn)定性、離子、極性及高分子化合物，其實(shí)質(zhì)為層析以流體為流動相柱，其測定過程為使用高壓泵促使溶劑瓶中液體（即流動相）流入檢測器、色譜柱及樣器后排出其廢液，確保樣品再由樣器進(jìn)入隨著流動相再次進(jìn)入色譜柱。同時，樣品中各被測組分于色譜柱中依次柱填料類型不同則以不同色譜原理為參照，例如：凝膠排阻、離子對、離子交換、分配原理及吸附作用等，出現(xiàn)相應(yīng)的差速遷移實(shí)現(xiàn)色譜柱分離，再由流動相先后帶出柱，經(jīng)檢測器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，輸入記錄器中記錄形成色譜峰。

目前我國藥物分析中醫(yī)超高效液相色譜法及反相液相色譜法為最為常用的高效液相色譜法。相較于傳統(tǒng)HPLC，超高效液相色譜法（英文簡稱UPLC）分離原理與其相似，并且由HPLC速率理論范式方程可得出色譜分離度隨著色譜柱填料顆粒粒徑下降而上升。一旦填料顆粒粒徑下降至1.7 μm是理論板高度最小值區(qū)域不斷被擴(kuò)大，說明流量范圍越寬則所獲取的柱效越高，而UPLC主要通過改變色譜柱填料顆粒粒徑改善其柱效，確保其以不損失高分離度為前提條件優(yōu)化其流速，進(jìn)一步提高其分析速度。此外，選擇UPLC法測定咖啡酸、丹酚酸B及迷迭香酸等化學(xué)成分時優(yōu)勢較為明顯，例如：可重復(fù)性及便捷準(zhǔn)確等。

反向高效液相色譜（英文簡稱RP-HPLC）與正相高效液相色譜以流動相及固定相的相對極性為主要區(qū)別，而RP-HPLC固定相屬于非極性，流動相屬于相對極性，例如：以四氫呋喃、丙酮、乙腈、甲醇及水為典型代表的水互溶性有機(jī)溶劑等，能不斷調(diào)節(jié)保留時間。由此可見，RP-HPLC是一種兼顧穩(wěn)定性、靈敏度及選擇性的新型分離分析技術(shù)手段，適用于藥物定性定量分析。伴隨柱填料技術(shù)快速發(fā)展，RP-HPLC分析應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，被廣泛應(yīng)用于易解離樣品及無機(jī)樣品分析領(lǐng)域。為了控制樣品分離過程中解離速度，普遍使用緩沖液控制流動相中pH值。值得注意的是，pH值過高存在造成硅膠溶解的可能性。

4.2 毛細(xì)管氣相色譜法

毛細(xì)管氣象色譜法（英文簡稱CGC）歷經(jīng)50余年發(fā)展，是一項(xiàng)技術(shù)相對成熟且應(yīng)用較為廣泛的復(fù)雜混合物分離分析技術(shù)，并且將氣體視為流動相，具有氣體年度小及色譜柱內(nèi)流動阻力低等鮮明特點(diǎn)。同時，由于氣體擴(kuò)散系數(shù)較大且組分于兩柱間傳質(zhì)速率較快，客觀上加快分離速率。毛細(xì)管柱與填充柱間以毛細(xì)管柱屬于無法安裝填充劑的空心柱（又稱開管柱）為主要區(qū)別，普遍將固定液相涂抹于固定化柱管內(nèi)壁，并且開關(guān)柱滲透性較高且固定液量較少，促使毛細(xì)管柱具備吸附性小、柱流失低、柱效高、分析速度快及分離溫度低等鮮明特點(diǎn)。此外，CGC法普遍采取程序升溫，將FD視為檢測器且可測定多組分含量。

近幾年來，頂空氣相色譜法及全二維相色譜法被廣發(fā)應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域，逐漸展露出令人廣闊的應(yīng)用前景及驚人的應(yīng)用優(yōu)勢，但是氣相色譜法于藥物分析中存在著一定的局限，尤其是無純樣品條件下，客觀上加劇試樣中未知物定性定量的工作難度，往往需要憑借質(zhì)譜或紅外線廣譜等結(jié)構(gòu)分析儀器實(shí)現(xiàn)二者聯(lián)用。

5 結(jié)語

通過該文探究，認(rèn)識到從現(xiàn)代化分析技術(shù)于藥物分析中應(yīng)用進(jìn)展角度來看，選擇靈光分析法、原子吸收光譜法及共振瑞利散射法進(jìn)行藥物有機(jī)組分定量測定能取得令人滿意的結(jié)果，并且與其他分析技術(shù)手段相比，現(xiàn)代化分析技術(shù)手段具有靈敏度高及檢測便利等鮮明特點(diǎn)，是藥物分析研究的重點(diǎn)內(nèi)容及熱點(diǎn)內(nèi)容。同時，將質(zhì)譜法與毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、液相色譜法相結(jié)合形成全新的分析技術(shù)手段，是實(shí)現(xiàn)復(fù)雜藥物樣品快速鑒定的有力途徑，尤其是色質(zhì)與萃取技術(shù)聯(lián)用，促使復(fù)雜藥物樣品處理更為便捷，大大縮短分析時間，提高分析方法選擇靈敏度。

綜上所述，在新興技術(shù)蓬勃發(fā)展的大背景下，拓展分析技術(shù)于藥物分析領(lǐng)域中的應(yīng)用范圍是不可逆轉(zhuǎn)的主流趨勢。

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（收稿日期：2018-07-26）