百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用

肖 遐，吳 雄，何純蓮

（湖南師范大學醫(yī)學院，湖南 長沙 410006）

百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用

肖 遐，吳 雄，何純蓮*

（湖南師范大學醫(yī)學院，湖南 長沙 410006）

目的：探討百合多糖對I 型糖尿病大鼠的降血糖作用。方法：從新鮮百合中提取出百合多糖，采用離子交換層析和凝膠層析 純 化得到3種多糖；優(yōu)選堿洗百合多糖、以鏈脲佐菌素誘導建立I 型糖尿病大鼠模型，通過百合多糖治療，比較治 療前后大鼠體質(zhì)量及空腹血糖的變化、測定治 療后胰島素水平以及己糖激 酶、琥珀酸脫氫酶、總超氧化物歧化酶的活性和丙二醛的含量，研究百合多糖對I型糖尿病大鼠的 降血糖作用。結(jié)果：百合多糖可減緩糖尿病 大鼠體 質(zhì)量的負增長；降低空腹血糖（P＜0.01 ）和 丙二醛含量（P＜0.05）；升高胰島素、己糖激酶、琥珀酸脫氫酶和總超氧化物歧化酶活性（P＜0.01）。結(jié)論：百合多糖一方面通過提高糖代謝酶的活性，促進葡萄糖的攝取和利用；另一方面通過提高機體抗氧化功能，抑制氧自由基對胰島β細胞的損傷，增加胰島素分泌，調(diào)節(jié)I型糖尿病大鼠的血糖。

百合多糖；I 型糖尿??；胰島素；超氧化物歧化酶

百合為百合科百合屬植物，為衛(wèi)生部審批通過的首批藥食兼用的植物，在我國常將其鱗莖加工成中草藥和各種保健食品[1]；在現(xiàn)存的最早一部本草專著《神農(nóng)本草經(jīng)》上就有對其防病治病的藥理活性有記載?，F(xiàn)代醫(yī)學研究表明百合多糖具有降血糖、抗腫瘤、抗氧化、抗疲勞、免疫調(diào)控等藥理作用[2-6]。近年來，中藥材所含植物多糖的降血糖控血脂作用備受關(guān)注，已有幾十余種中藥被用于相關(guān)研究[7]，多糖在降血糖方面有著廣闊的應用前景；但是國內(nèi)外對百合多糖降血糖作用的研究報道較少，對其降血糖機制的研究尚處于起步階段[8]。

本研究采用水提醇沉的方法從百合中提取出百合粗多糖，經(jīng)DEAE52-纖維素柱分離純化出3種百合多糖：水洗百合多糖、鹽洗百合多糖、堿洗百合多糖[9]。通過建立鏈脲佐菌素誘導的Ⅰ型糖尿病大鼠模型[10-11]，進行3種百合多糖降血糖作用預實驗；經(jīng)預實驗選取降血糖作用效果最好的堿洗百合多糖，用葡聚糖Sephadex G-100凝膠柱進一步純化[12]，并采用高效液相色譜對其平均分子質(zhì)量進行測定[13-14]?？疾旒兓蟛煌瑒┝康膲A洗百合多糖降血糖作用，并對糖尿病大鼠胰島素水平和相關(guān)糖代謝酶進行測定，為研制降血糖功能性食品或天然藥物的開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

百合 湖南省龍山縣提供。

鏈脲佐菌素 美國Sigma公司；鹽酸苯乙雙胍片山東仁和堂藥業(yè)有限公司；DEAE-Cellulose52 美國Whatman公司；Sephadex G-100 瑞典Pharmacial公司；葡萄糖測定試劑盒 上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；胰島素（insulin，INS）試劑盒、丙二醛（malondialdehyde，M D A）試劑盒、超氧化物歧化酶（s u p e r o x i d e dismutase，SOD）試劑盒、己糖激酶（hexokinase，HK）試劑盒、琥珀酸脫氫酶（succinate dehydrogenase，SDH）試劑盒 南京建成生物工程研究所；Bradford 蛋白質(zhì)定量試劑盒 北京鼎國昌盛生物技術(shù)公司。

1.2 實驗動物

SPF級健康雄性SD大鼠50只，體質(zhì)量（180±20）g由長沙市開福區(qū)實驗動物科技 服務(wù)部提供，合格證號：SCXK（湘）2009-0012。

1.3 儀器與設(shè)備

高速冷凍離心機 美國Beckman Coulter公司；BlueStar紫外-可見分光光度計 北京萊伯泰科儀器有限公司；DZF-6090真空干燥箱 上海精宏實 驗設(shè)備有限公司；LC-2010A HT高效液相色譜儀 日本島津公司；ELSD800蒸發(fā)光散射器 天津埃文森科技有限公司；ELX800酶標儀 美國Bio-Tek公司；TN-100微型提取濃縮回收機組 溫州市利宏輕工機械有限公司。

1.4 方法

1.4.1 百合多糖的提取工藝流程

新鮮百合→洗凈切碎、稱質(zhì)量→水提取→離心、過濾→4℃醇沉過夜→離心、過濾→復溶→Sevag法脫蛋白→醇沉、過濾→無水乙醇、無水乙醚、丙酮洗滌→烘干得多糖粗品

1.4.2 百合多糖的分離純化

將百合多糖粗品配成飽和溶液超聲溶解，離心分離得上清液備用。采用DEAE52-纖維素，經(jīng)預處理后裝柱，上樣。分別用去離子水、0.04 mol/L NaCl溶液、0.1 mol/L NaOH溶液依次洗脫，用苯酚-硫酸法在波長490 nm處測定收集樣中的糖含量。將測得結(jié)果以管數(shù)為橫坐標，吸光度為縱坐標，作出洗脫曲線。根據(jù)洗脫曲線圖，將各洗脫峰樣品收集合并，經(jīng)濃縮、透析后，加入3倍量95%乙醇，于4℃冰箱靜置過夜。離心混合液，將沉淀于通風櫥中分別用無水乙醇、無水乙醚、丙酮依次淋洗收集沉淀，真空干燥，得到水洗百合多糖Ⅰ、鹽洗百合多糖Ⅱ、堿洗百合多糖Ⅲ。經(jīng)3種百合多糖治療Ⅰ型糖尿病大鼠預實驗，選取降血糖作用效果最好的堿洗百合多糖Ⅲ以葡聚糖凝膠Sephadex G-100進一步純化，真空干燥得百合多糖Ⅲ純品。

1.4.3 百合多糖Ⅲ的平均分子質(zhì)量測定

采用島津高效液相色譜系統(tǒng)，恒流泵：L C-2010A HT，色譜柱：T S K g e l G 2 0 0 0 S WXL柱（300 mm×7.8 mm）；檢測器：ELSD800蒸發(fā)光散射器；流動相為超純水；柱箱溫度為室溫；進樣量10 μL；流速1.0 mL/min；漂移管溫度：60℃；氣體（N2）壓力：（3.00±0.5）bar。葡聚糖標準品6 000、11 800、47 500、112 000、212 000、402 000 kD配成質(zhì)量分數(shù)為0.2%的溶液，按分子質(zhì)量由小到大的順序依次進樣，測定保留時間，以1gMr（分子質(zhì)量對數(shù)）對TR（保留時間）繪制標準曲線，得線性回歸方程y=－4.615 7x+34.291（R2=0.992）。將純化所得的百合多糖Ⅲ配成質(zhì)量分數(shù)0.2%溶液于相同色譜條件下分析，測定保留時間，代入回歸方程計算其平均分子質(zhì)量。

1.4.4 鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠模型的建立

健康雄性SD大鼠50只，隨機分為兩組，正常對照組（Ⅰ）8只，造模組42只；常規(guī)飼料喂養(yǎng)，自由飲食攝水，適應性飼養(yǎng)3 d后，禁食不禁水過夜（約16 h）。將造模組大鼠按55 mg/kg劑量腹腔注射鏈脲佐菌素，注射72 h后，將全部大鼠禁食過夜，眼眶靜脈叢采血，測定空腹血糖值。認為空腹血糖值高于11.0 mmol/L，且出現(xiàn)“三多一少”癥狀者為造模成功，本實驗有32只大鼠符合Ⅰ型糖尿病模型條件。

1.4.5 分組灌胃給藥

將糖尿病模型大鼠隨機分為4組，每組8只，分別為：糖尿病模型對照組（Ⅱ）、百合多糖低劑量組（Ⅲ）、百合多糖高劑量組（Ⅳ）和藥物治療對照組（Ⅴ）。正常對照組（Ⅰ）和糖尿病模型對照組（Ⅱ）每天灌服等容積生理鹽水，百合多糖低劑量組（Ⅲ）與百合多糖高劑量組（Ⅳ）組分別給予百合多糖Ⅲ 100、200 mg/（kg·d）（以體質(zhì)量計，下同），藥物治療對照組（Ⅴ）灌服150 mg/（kg·d）的鹽酸苯乙雙胍。灌胃給藥時間固定在每天上午9：00，實驗為期4周。同時，每隔一段時間對大鼠體質(zhì)量，飲水攝食量進行稱量，并做好記錄。

1.4.6 指標測定

末次灌胃結(jié)束禁食12 h后，大鼠以2%戊巴比妥鈉麻醉，股動脈取全血分離血清，取肝組織用生理鹽水制成10%的勻漿，分別用于各相應指標的檢測。分別在灌胃15、30 d后禁食12 h，測量體質(zhì)量、空腹血糖；測定第30天的血清中INS以及血清和肝臟中MDA、總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性；測定肝臟中HK、SDH活性。

1.4.7 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果與分析

2.1 百合多糖Ⅲ的分離純化及平均分子質(zhì)量測定

本實驗通過水提醇沉的方法從新鮮百合中提取得到灰白色的百合粗多糖，上DEAE52-纖維素柱洗脫分離純化，得到的洗脫曲線如圖1所示。

圖1 百合多糖的DEAE52-纖維素柱洗脫曲線Fig. 1 DEAE52-cellulose elution profile of lily polysaccharides

由圖1可知，百合多糖經(jīng)水、0.04 mol/L NaCl、0.1 mol/L NaOH階段洗脫后得到3個峰，依次為百合多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3個組分，并分別收集各洗脫峰主峰位置的洗脫液濃縮、醇沉、真空干燥。百合多糖Ⅲ經(jīng)葡聚糖Sephadex G-100凝膠柱層析進一步純化的洗脫曲線見圖2，該洗脫曲線為單一峰形，表明百合多糖Ⅲ已經(jīng)純化。收集主峰位置的洗脫液濃縮、真空干燥得百合多糖Ⅲ。

圖2 百合多糖Ⅲ的葡聚糖Sephadex G-100洗脫曲線Fig. 2 Sephadex G-100 elution profile of lily polysaccharide Ⅲ

百合多糖Ⅲ的液相圖譜見圖3，百合多糖Ⅲ有2個峰，其保留時間依次為10.557、11.223 min，其中第1個峰的峰面積較小，糖含量較低，故忽略不計；以11.223 min為該多糖的保留時間計算，帶入標準曲線中可得百合多糖Ⅲ的分子質(zhì)量為94 321 kD。

圖3 百合多糖Ⅲ的高效液相色譜圖Fig.3 Elution profile of lily polysaccharide Ⅲ by HPLC

2.2 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠體質(zhì)量和飲水攝食量的影響

表1 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠體質(zhì)量的Table 1 Effect of lily polysaccharide on body weight intype Ⅰ diabetic rat

表1 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠體質(zhì)量的Table 1 Effect of lily polysaccharide on body weight intype Ⅰ diabetic rat

注：*. 與正常對照組比較，有顯著差異（P＜0.05），**. 與正常對照組比較，有極顯著差異（P＜0.01）；#. 與糖尿病模型對照組比較，有顯著差異（P＜0.05），##. 與糖尿病模型對照組比較，有極顯著差異（P＜0.01）。下同。

組別體質(zhì)量/g 1d15d30dⅠ198.10±9.81282.80±9.97357.50±15.21Ⅱ197.50±9.32176.40±9.67**172.20±8.65**Ⅲ191.40±9.74181.80±9.66**190.10±8.01**##Ⅳ199.00±9.61202.10±8.62**##206.80±15.14**##Ⅴ191.70±10.40192.10±11.32**##198.70±14.82**##

由表1可見，在持續(xù)灌胃的30d中，Ⅰ組大鼠體質(zhì)量顯著增加；Ⅱ組大鼠體質(zhì)量由（197.5±9.32）g降至（172.2±8.65）g，表明模型組體質(zhì)量出現(xiàn)負增長；Ⅲ組大鼠體質(zhì)量由（191.4±9.74）g減少至（190.1±8.01）g，大鼠體質(zhì)量無明顯改變，但較模型組相比體質(zhì)量負增長趨勢減緩；Ⅳ組大鼠體質(zhì)量由（199.0±9.61）g增加至（206.8±15.14）g，表明大鼠治療30 d后體質(zhì)量較造模時有所增加，但1～30 d自身變化無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），表明高劑量百合多糖能減緩體質(zhì)量負增長趨勢且出現(xiàn)正增長；Ⅴ組大鼠體質(zhì)量由（191.7±10.40）g增加至（198.7±14.82）g，大鼠體質(zhì)量有一定的增加，但變化無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），表明鹽酸苯乙雙胍能減緩體質(zhì)量負增長趨勢，且較造模時體質(zhì)量有所增加。Ⅲ、Ⅳ組與Ⅴ組體質(zhì)量比較無顯著性差異（P＞0.05），表明低、高劑量百合多糖對糖尿病大鼠體質(zhì)量的影響與鹽酸苯乙雙胍沒顯著性差別。

由圖4可知，Ⅱ組大鼠第3周比第1周平均飲水量顯著增多，平均攝食量也增加；與正常對照組相比有極顯著性差異（P＜0.01）。灌胃給藥治療后，Ⅲ、Ⅳ組每周平均飲水量、平均攝食量都較Ⅱ組有所減少，差異有顯著性（P＜0.01或P＜0.05），與Ⅴ組相比無顯著性差異（P＞0.05），表明低、高劑量百合多糖對糖尿病大鼠飲水攝食量的影響與鹽酸苯乙雙胍沒顯著性差別。治療第3周和治療第1周相比，各給藥治療組大鼠飲水量和攝食量都有所減少；大鼠的“三多一少”癥狀出現(xiàn)好轉(zhuǎn)。

圖4 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的平均飲水量和平均進食量的影響（n=8=8）Fig.4 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on average intake of water and food in type Ⅰ diabetic rats (n = 8)

2.3 百合多糖對I型糖尿病FBG及INS水平的影響

表2 百合多糖對大鼠空腹血糖和胰島素的Table 2 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on FBG and INS in type Ⅰdiabetic r

表2 百合多糖對大鼠空腹血糖和胰島素的Table 2 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on FBG and INS in type Ⅰdiabetic r

組別空腹血糖含量/（mmol/L）30 d INS活力/（μIU/mL）1 d15 d30 dⅠ3.29±0.633.18±0.303.44±0.6113.25±0.77Ⅱ14.66±2.43**15.23±2.99**17.30±2.78**7.70±0.77**Ⅲ14.24±1.21**13.15±1.86**#11.47±1.50**##8.62±0.68**#Ⅳ14.53±1.14**11.17±1.98**##10.14±1.93**##9.55±0.78**##Ⅴ14.38±1.27**11.58±1.57**##10.47±1.92**##7.85±0.79**

如表2所示，治療組持續(xù)給藥30d后，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的血糖水平較Ⅱ組明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），且Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ各組間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；表明低、高劑量百合多糖及鹽酸苯乙雙胍均能降低Ⅰ型糖尿病大鼠空腹血糖，且三者之間無顯著差別。INS活性結(jié)果顯示，Ⅳ組INS與Ⅱ組比較明顯增加，統(tǒng)計學分析有極顯著性差異（P＜0.01），說明高劑量百合多糖對提高Ⅰ型糖尿病INS有明顯的作用；Ⅲ組INS與Ⅱ組比較有增加，統(tǒng)計學分析有顯著性差異（P＜0.05），表明低劑量百合多糖對提高Ⅰ型糖尿病INS有一定的作用；Ⅴ組INS與糖尿病模型組比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），表明鹽酸苯乙雙胍不能促進INS的分泌，這與臨床研究結(jié)果：雙胍類藥物不刺激胰島素分泌，主要作用于胰腺外組織相符。綜上所述，低、高劑量百合多糖均能降低Ⅰ型糖尿病大鼠空腹血糖，且與鹽酸苯乙雙胍無顯著差別；低、高劑量百合多糖能顯著提高Ⅰ型糖尿病大鼠INS，而鹽酸苯乙雙胍不能促進糖尿病大鼠分泌INS。

2.4 百合多糖對I型糖尿病大鼠肝組織HK、SDH活性的影響

由表3可知，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的HK較較Ⅱ組均有顯著增加，有極顯著性差異（P＜0.01）。說明低、高劑量百合多糖及鹽酸苯乙雙胍均能提高Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織中HK活性。與Ⅱ組比較，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組SDH均有明顯增加，有極顯著性差異（P＜0.01），表明低、高劑量百合多糖及鹽酸苯乙雙胍均能提高Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織中SDH活性。

表3 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織HK 和SDH 活性的影響Table 3 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on the activities of HK and SDH in type Ⅰ diabetic）

表3 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織HK 和SDH 活性的影響Table 3 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on the activities of HK and SDH in type Ⅰ diabetic）

組別HK活力/（U/g pro）SDH活力/（U/mg pro）Ⅰ23.61±2.3011.30±0.81Ⅱ5.74±0.99**5. 63±0.62**Ⅲ8.58±0.69**##6.61±0.56**##14.59±1.51**##8.85±0.76**##Ⅴ18.46±1.35**##9.71±0.65**##Ⅳ

2.5 百合多糖對I型糖尿病大鼠MDA含量和T-SOD活性的影響

表4 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠血清MDA和T-SOD 活性的影響Table 4 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on serum MDA and T-SOD in type Ⅰ diabetic

表4 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠血清MDA和T-SOD 活性的影響Table 4 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on serum MDA and T-SOD in type Ⅰ diabetic

組別MDA含量/（nmol/mL）T-SOD活力/（U/mL）Ⅰ5.72±0.55292.17±7.35Ⅱ9.63±0.80**243.55±7.43**Ⅲ7.81±0.63**##259.50±6.16**##7.30±0.58**##275.83±8.47**##Ⅴ8.99±0.65**251.43±9.79**Ⅳ

表5 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織MDA 和T-SOD 活性的影響Table 5 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on MDA and T-SOD in liver tissues of type Ⅰ diabeti)

表5 百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠肝組織MDA 和T-SOD 活性的影響Table 5 Effect of lily polysaccharide Ⅲ on MDA and T-SOD in liver tissues of type Ⅰ diabeti)

組別MDA含量/（nmol/mg pro）T-SOD活力/（U/mg pro）Ⅰ4.72±0.67153.83±9.62Ⅱ7.98±0.59**102.19±8.87**Ⅲ7.18±0.77**#115.39±9.51**##Ⅳ6.13±0.67**##140.27±6.83**##Ⅴ7.64±0.61**108.06±8.68**

由表4和表5可知，與Ⅰ組相比，造模后大鼠血清和肝臟中MDA含量明顯增高，T-SOD活性明顯降低，差異有極顯著性（P＜0.01）。與Ⅱ組相比，Ⅲ、Ⅳ組血清和肝臟中MDA含量均下降，T-SOD活性均升高，尤以Ⅳ組的變化比較明顯；進行統(tǒng)計學分析，百合多糖治療組與Ⅱ組相比均具有極顯著性差異（P＜0.01），表明低、高劑量百合多糖均能降低Ⅰ型糖尿病大鼠MDA含量和提高T-SOD活性。Ⅴ組血清和肝臟中MDA含量、T-SOD活性與Ⅱ組比較均無顯著差別，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），表明鹽酸苯乙雙胍對Ⅰ型糖尿病大鼠MDA 含量和T-SOD活性無顯著性作用。Ⅳ組血清和肝臟中MDA含量、T-SOD活性與藥物治療對照組相比均具有極顯著性差異（P＜0.01），表明高劑量百合多糖能降低Ⅰ型糖尿病大鼠MDA含量和提高T-SOD活性且與鹽酸苯乙雙胍有顯著性差別。

3 討 論

本實驗從新鮮百合中分離純化得到3種百合多糖，通過3種百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖預實驗得到堿洗百合多糖的降血糖效果最好，故對其降糖機制進行初步探討。鏈脲佐菌素是自由基激活劑，能夠選擇性的破壞胰島細胞，引起糖代謝紊亂；又能夠使HK缺乏，使葡萄糖不能磷酸化，從而葡萄糖穿過細胞膜逸出，造成高血糖及糖尿病癥狀[15]。HK是葡萄糖進入細胞后，催化其磷酸化為6-磷酸葡萄糖的第一步酶促反應，是葡萄糖代謝過程中的關(guān)鍵酶之一，也是葡萄糖以糖原形式貯存通路中的第一個限速酶[16]。研究表明，正?；虻吞菨舛认?，葡萄糖轉(zhuǎn)運是細胞對葡萄糖攝取的限速步驟，但高糖條件下，HK對葡萄糖的磷酸化則成為限速步驟[17]。本實驗結(jié)果顯示，HK活性大小順序為：正常對照組＞鹽酸苯乙雙胍組＞百合多糖高劑量組＞百合多糖低劑量組＞糖尿病模型對照組。提示百合多糖可能通過增強糖尿病大鼠肝組織中HK活性促進肝糖原的合成貯存，減少血液中游離的葡萄糖。

SDH是線粒體的標志酶，在三羧酸循環(huán)中是唯一滲入線粒體內(nèi)膜的酶，為三羧酸循環(huán)的關(guān)鍵酶，其活性高低可作為評價三羧酸循環(huán)運行程度的指標，在糖代謝過程中起著重要作用[18]。本實驗結(jié)果顯示，糖尿病大鼠治療30 d后，各藥物治療組的SDH活性均高于模型組，尤以百合多糖高劑量組和鹽酸苯乙雙胍組為著。提示百合多糖可能通過提高三羧酸循環(huán)中SDH的活性，增加糖的利用，從而改善糖代謝。本實驗研究結(jié)果與有關(guān)報道一致[19]。因此初步認為，百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用機制之一可能是百合多糖直接或間接地提高了糖代謝酶的活性，促進周圍組織對葡萄糖攝取和利用，抑制肝糖異生及糖原分解，減少肝糖輸出，使血糖下降。

自由基清除劑是一種能夠干擾自由基連鎖反應的引發(fā)及擴散過程，并抑制自由基反應過程的物質(zhì)[20]。SOD是機體清除氧自由基的重要酶，SOD的活性直接反映機體抗氧化水平；MDA是自由基引起的脂質(zhì)過氧化的主要產(chǎn)物之一，其含量可間接體現(xiàn)機體抗氧化能力及清除氧化產(chǎn)物的能力[21]。本實驗結(jié)果，模型組糖尿病大鼠體內(nèi)的T-SOD活性低于正常對照組，而MDA含量高于正常對照組，表明糖尿病大鼠體內(nèi)的自由基清除出現(xiàn)障礙。藥物治療對照組大鼠血糖明顯下降，但INS無明顯變化，其血清和肝臟中T-SOD活性和MDA含量也無顯著性變化；而百合多糖高劑量組INS明顯增加，其血清和肝臟中T-SOD活性有所提高，MDA含量有所減少。表明大鼠INS的分泌與其T-SOD活性和MDA含量存在一定聯(lián)系，即可能是糖尿病大鼠的抗氧化水平對其胰島素的分泌有一定的影響，這與國內(nèi)外學者研究關(guān)于運用抗氧化劑治療糖尿病患者能最大限度地保護殘存的胰島功能相符[22-23]。故初步認為，百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用的另一機制可能是百合多糖能提高機體抗氧化功能，抑制氧自由基對胰島β細胞的損傷，使胰腺中殘留的部分胰島β細胞代償增生，增加胰島素分泌。

綜合分析，百合多糖對Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用一方面通過提高機體糖代謝酶的活性，促進葡萄糖的攝取和利用，從而達到調(diào)節(jié)糖代謝、降低血糖、改善糖尿病癥狀的作用；另一方面通過提高機體抗氧化功能，抑制氧自由基對胰島β細胞的損傷，增加胰島素分泌。

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Hypoglycemic Effect of Lily Polysaccharides in Type Ⅰ Diabetic Rats

XIAO Xia, WU Xiong, HE Chun-lian*
(Medical College, Hunan Normal University, Changsha 410006, China)

Objective: To explore the hypoglycemic effect of lily polysaccharides in type Ⅰ diabetic rats. Methods: Lily polysaccharide was extracted from fresh lily bulbs and purified through ion-exchange chromatography on a DEAE52 cellulose column. An alkaline-soluble fraction was obtained from the eluates from the DEAE52 cellulose column and proved to be a single component by gel filtration chromatography. The purified polysaccharide was used to treat rat models of t ypeⅠ diabetes induced b y streptozotocin. The changes in body weight, fasting blood gluco se (FBG), insulin (INS), hexokinase (HK), succinic dehydrogenase (SDH), total superoxide dismutase (T-SOD) and malondialdehyde (MDA) were determined in diabetic rats before and after the treatment. Results: The lily polysaccharide could significantly slow down the negative growth of body weights in diabetic rats, reduce the contents of FBG (P ＜ 0.01) and MDA (P ＜ 0.05), and significantly increase INS, HK, SDH and T-SOD (P ＜ 0.01). Conclusion: Lily polysaccharide exerts hypoglycemic effect in type Ⅰdiabetic rats through enhancing the activities of antioxidant enzymes, improving antioxidant function, inhibiting oxygen free radical damage to pan creatic β cells and increasing insulin secretion.

lily polysaccharide; type I diabetic rats; insulin (INS); superoxide dismutase (SOD)

R587.1

A

1002-6630(2014)01-0209-05

10.7506/spkx1002-6630-201401041

2013-01-19

國家自然科學基金項目（21176063）；湖南省長沙市科技局科技計劃項目（K1303022-31）；湖南省教育廳重點項目（12A085）；湖南省科技廳科技計劃項目（2013SK3134）

肖遐（1971—），女，講師，碩士，主要從事藥物化學與藥物合成研究。E-mail：344685809@qq.com

*通信作者：何純蓮（1969—），女，教授，博士，主要從事天然產(chǎn)物功能活性成分研究與開發(fā)。E-mail：chunlianhe68@163.com