直接鏡檢法和培養(yǎng)法用于人皮膚癬菌病的應(yīng)用價值分析

麥 梅 珍

(佛山市高明區(qū)慢性病防治站 佛山 528500)

人皮膚癬菌病是一種常見的淺部真菌感染性皮膚病，雖然不會造成致命性損害，但是對人們正常生活卻有著嚴(yán)重影響。本病在健康人群和免疫缺陷人群中均可發(fā)生，文獻(xiàn)資料顯示，每個人在其一生中感染皮膚癬菌的幾率在10%～20%之間。在缺乏真菌檢查室的地區(qū)常根據(jù)患者臨床表現(xiàn)作出診斷，一些患者雖然沒有被真菌感染，但是由于診斷資料不全卻經(jīng)過長達(dá)數(shù)月之久的抗真菌治療，由此可見，科學(xué)、及時的臨床診斷對強化臨床規(guī)范治療具有重要價值[1～2]。直接鏡檢法和培養(yǎng)法都是臨床常用診斷方法，我站選擇2014年7月～2016年8月皮膚科門診收治的86例皮膚癬菌病患者，通過對標(biāo)本的進(jìn)一步檢驗對比兩種方法的檢驗精準(zhǔn)性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年7月～2016年8月我站皮膚科門診收治的86例皮膚癬菌病患者，經(jīng)臨床表現(xiàn)、皮損形態(tài)及實驗室檢查確診，符合皮膚癬菌病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。按照雙盲、隨機法將納入研究的86例患者分為直接鏡檢組與培養(yǎng)組，各組43例。直接鏡檢組男性24例，女性19例，年齡18～63歲，平均年齡(38.47±3.19)歲；培養(yǎng)組男性22例，女性21例，年齡20～61歲，平均年齡(39.10±3.56)歲。兩組患者的性別、年齡、病情等一般資料對比，不存在統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，有可比性。

1.2 方法

1.2.1直接鏡檢組

采集患者病變部位的皮屑、甲屑、毛發(fā)等樣本，皮屑、甲屑樣本可以在皮損邊緣或變色松脆的指甲邊緣用鈍刀輕輕刮取，毛發(fā)樣本可用拔毛鑷拔取病變部位的毛發(fā)，置于玻片上，滴1滴10%～20%的KOH，覆蓋玻片后在酒精上微微加溫，待標(biāo)本溶解后輕輕加壓蓋玻片使標(biāo)本透明，先用低倍鏡觀察再換高倍鏡觀察真菌形態(tài)。

1.2.2培養(yǎng)組

采集患者病變部位的皮屑、甲屑、毛發(fā)等樣本，樣本采集方法與直接鏡檢法相同，制作培養(yǎng)馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，在無菌條件下將樣本接種于制作好的培養(yǎng)基上，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h，菌落出現(xiàn)后需定期觀察其生長情況。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計兩組患者檢查的陽性率，直接鏡檢法陽性標(biāo)準(zhǔn)：可見菌絲或孢子，每個部位的真菌形態(tài)有所不同，皮屑部位真菌形態(tài)為分隔菌絲，孢子成串；甲屑部位真菌形態(tài)為鏈狀菌絲，小孢子成串；毛發(fā)部位真菌形態(tài)為鏈狀小孢子。培養(yǎng)法陽性標(biāo)準(zhǔn)：培養(yǎng)24h后可見絨毛樣菌絲，48h后可見白色菌落，72h后菌落轉(zhuǎn)變?yōu)榧~扣狀，并自中心向外周顏色逐漸加深。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

對本次研究的實驗數(shù)據(jù)采用Epidate3.0錄入、核對數(shù)據(jù)庫，采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組均數(shù)比較采用t檢驗；計數(shù)資料用構(gòu)成比或率表示，兩組或多組率的比較采用χ2檢驗或校正的χ2檢驗。

2 結(jié)果

兩組患者臨床檢驗陽性率對比，培養(yǎng)組的檢驗陽性率明顯高于直接鏡檢組，P<0.05，差異存在顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 兩組患者臨床檢驗陽性率對比[n(%)]

組別例數(shù)陽性陰性陽性率直接鏡檢組43222151．2培養(yǎng)組4335881．4χ28．256P<0．05

3 討論

皮膚癬菌是造成淺部真菌感染的最主要致病菌，主要侵及人體角蛋白組織，包括人體皮膚、指甲、毛發(fā)等，可引起皮膚癬菌病。臨床將皮膚癬菌分為3種，每一種致病菌均在人體皮膚、毛發(fā)等部位找到，可通過接觸、食入等多種方式傳播引起直接或間接感染[3]。在西方發(fā)達(dá)國家，指(趾)甲感染率在3%～22%之間，我國目前尚無明確報道。雖然本病不足以造成致命性危險，但是會對患者正常生活產(chǎn)生影響，因此需要積極治療以控制病情進(jìn)展，避免感染擴散[4]。

直接鏡檢法與培養(yǎng)法是目前最常采用的檢驗方法，其中直接鏡檢法是一種簡單、方便的真菌檢測方法，適用于各種淺部、深部真菌疾病檢測，陽性結(jié)果能夠明確真菌是否存在，結(jié)合患者臨床癥狀一般可確診，但是不能確定致病菌類型，陰性也不能完全排除真菌感染可能。一些條件有限的基層醫(yī)院或偏遠(yuǎn)地區(qū)，由于缺少真菌檢查室，無法完成真菌檢驗，傳統(tǒng)檢查的敏感性較差且等待時間長，導(dǎo)致一些患者在確診前得不到規(guī)范治療[5～7]。本組資料顯示直接鏡檢法的陽性率為51.2%，而培養(yǎng)法的陽性率為81.4%，與直接鏡檢法相比顯著提高，組間對比存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。有研究對兩種檢驗方法聯(lián)合應(yīng)用的陽性率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)陽性率并沒有提高，表明聯(lián)合檢驗并不會提高臨床檢驗準(zhǔn)確性。臨床標(biāo)本采集對檢驗結(jié)果有至關(guān)重要的影響，可使用鑷子等采集患者頭屑、毛發(fā)標(biāo)本，如果是皮膚癬癥可采用小刀刮剝皮損部位，采集前需先用消毒劑擦洗以保證標(biāo)本無菌。本次研究發(fā)現(xiàn)直接鏡檢組的陽性率較低，可能與患者自行用藥或清洗等患者自身因素有一定關(guān)系，雖然聯(lián)合檢測的陽性率與單一方法檢測的陽性率差異性不明顯，但是我們?nèi)匀恍枰匾暵?lián)合檢測在重復(fù)檢測中的應(yīng)用價值，通過聯(lián)合檢測能夠減少某一種檢測方法的失誤，從而對診斷起到一定診斷幫助。為保證檢測結(jié)果的可靠性，應(yīng)當(dāng)注意直接鏡檢法與培養(yǎng)法操作中的注意事項，在直接鏡檢法操作中，采集樣本所使用的拔毛鑷或鈍刀使用前應(yīng)當(dāng)在火焰上消毒，冷卻后使用，在拔取毛發(fā)樣本時，直接肉眼觀察很難準(zhǔn)確拔取，因此可在放大鏡或紫外線燈下觀察并選擇病發(fā)，標(biāo)本留取后應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格保質(zhì)保量謹(jǐn)防污染。鏡檢過程中應(yīng)當(dāng)注意區(qū)分菌絲、孢子與纖維、表皮細(xì)胞、氣泡等，以免造成誤診。在培養(yǎng)法中應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作制度，避免污染，而且建議多點、多次培養(yǎng)，從而保證結(jié)果的可信度，對于培養(yǎng)分離得到的真菌，應(yīng)當(dāng)結(jié)合菌落及顯微鏡下形態(tài)學(xué)特點作出診斷。在實際操作中應(yīng)當(dāng)綜合分析直接鏡檢法與培養(yǎng)法的結(jié)果，從而作出準(zhǔn)確判斷。

皮膚癬菌致病菌種類繁多，分布特點與敏感藥物也明顯不同，完善臨床診斷對提高本病治療水平具有重要意義。對皮膚癬菌應(yīng)當(dāng)做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，一旦確診首先應(yīng)當(dāng)做好消毒隔離工作，同時采取綜合治療方案，加強自身衛(wèi)生管理，衣物鞋襪、毛巾等應(yīng)當(dāng)做到用后清洗或消毒，減少自身傳染機會。需要注意的是，患有皮膚癬菌的患者不建議游泳，尤其是禁止到公共泳池游泳，國家也出臺條例明文禁止皮膚癬菌患者進(jìn)入人工泳池游泳，此舉不僅能夠避免患者在接觸水后繼發(fā)細(xì)菌感染，也能防止傳染給他人，因為泳池內(nèi)的環(huán)境非常適合細(xì)菌與真菌生長，因此病菌繁殖與傳染速度更快。

綜上，培養(yǎng)法與直接鏡檢法是目前應(yīng)用最廣的兩種檢驗方法，培養(yǎng)法在皮膚癬菌病中的檢驗準(zhǔn)確率更高，可作為臨床檢驗的首選方法，真菌培養(yǎng)的目的在于提高致病菌檢出的陽性率并確定致病菌種類，一旦發(fā)現(xiàn)診斷即可確立，單獨靠一次培養(yǎng)往往不能確定，還需多次培養(yǎng)或結(jié)合其他檢測結(jié)果確定，因此強調(diào)直接鏡檢與培養(yǎng)法相結(jié)合的重要性。

參 考 文 獻(xiàn)

1 王有為,羅才會,李紅霞,等.47766例擬診皮膚真菌病患者病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果分析.中國真菌學(xué)雜志,2016,11(1):37～40.

2 楊虹,李民,高志琴,等.33例兒童甲真菌病的臨床特征和病原菌種類分析.臨床皮膚科雜志,2014,43(2):74～76.

3 費實,李振潔,高愛莉,等.5739例皮膚科門診老年性淺部真菌病鏡檢結(jié)果分析.中國醫(yī)藥指南,2010,8(34):179～181.

4 徐建平,Heather Yoell.甲真菌病概述及其診斷最新進(jìn)展.實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2012,30(2):111～118.

5 張華麗,廉翠紅,張書嶺,等.兩種培養(yǎng)基在甲真菌病診斷中的對比研究.中國熱帶醫(yī)學(xué),2012,12(3):340～341.

6 張寶鳳,江廣春,陳鳳英.不同微生物檢驗方法用于婦科炎癥感染檢驗效果對比研究.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2015,28(6):850～851.

7 黃志雄.特比萘芬用于皮膚癬菌病臨床治療的觀察研究.中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)),2012,14(5):79～82.